茯砖茶“金花”菌—谢瓦氏曲霉间型变种的孢子产生条件 被引量：66

1

作者 刘作易 秦京 李乃亮 《西南农业学报》 CSCD 1991年第1期73-77,共5页

研究探讨了不同浓度的蔗糖和氯化物、不同温度及不同培养基对茯砖茶“金花”菌——谢瓦氏曲霉间型变种有性孢子和无性孢子产生的影响.结果表明:渗透压在该菌有性孢子和无性孢子产生过程中起主导作用.在低渗透压下,该菌只产生子囊孢子,... 研究探讨了不同浓度的蔗糖和氯化物、不同温度及不同培养基对茯砖茶“金花”菌——谢瓦氏曲霉间型变种有性孢子和无性孢子产生的影响.结果表明:渗透压在该菌有性孢子和无性孢子产生过程中起主导作用.在低渗透压下,该菌只产生子囊孢子,不产分生孢子;渗透压增大到一定程度时,该菌既产生子囊孢子,又产生分生孢子;随渗透压再继续增大,子囊孢子产量相对减少,最终不产生子囊孢子,而分生孢子产量则愈来愈大,最终只产分生孢子.30～37℃下培养,利于分生孢子产生,在30℃以下,利于子囊孢子产生.在营养丰富的培养基上易产生分生孢子,在营养贫瘠的培养基上不易产生分生孢子. 展开更多

关键词 茯砖茶金花菌 谢瓦氏曲霉 孢子

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三株散囊菌发酵茶叶的初步研究 被引量：7

2

作者 陈皓睿 孙强 +4 位作者 闻东明 刘鸿 邹克兴 申佩弘 龙章德 《工业微生物》 CAS 2019年第1期21-25,共5页

散囊菌属真菌(Eurotium spp.)能赋予发酵茶独特的口感和香味。本研究利用前期从广西某六堡茶中筛选并鉴定的三株散囊菌属真菌Aspergillus chevalieri E2、Aspergillus chevalieri E3与Aspergillus cristatus E6,探讨在不同温度下以优化... 散囊菌属真菌(Eurotium spp.)能赋予发酵茶独特的口感和香味。本研究利用前期从广西某六堡茶中筛选并鉴定的三株散囊菌属真菌Aspergillus chevalieri E2、Aspergillus chevalieri E3与Aspergillus cristatus E6,探讨在不同温度下以优化察氏液体培养基培养的生长状况,发酵前不同灭菌条件下的茶叶品质,以及所得茶汤中茶多酚含量、总抗氧化能力和DPPH·自由基清除能力。结果显示:三株真菌在优化的察氏液体培养基中31℃～34℃下都能良好生长。茶叶发酵温度为28℃,三株真菌在发酵初始含水量为20%以上生长良好,其中E3和混合发酵组的生长速度最快。E2在茶叶表面生长出大量金黄色子囊果以及大量浅绿色分生孢子梗; E3几乎只有浅绿色分生孢子梗; E6几乎只有金黄色子囊果。发酵茶叶制作的茶汤内茶多酚含量比未发酵低,抗氧化性指标也有所下降,说明本实验真菌发酵促进了茶内抗氧化物质的氧化。本研究对源于六堡茶不同散囊菌属真菌的茶叶发酵有重要参考价值。 展开更多

关键词 谢瓦氏曲霉 冠突曲霉 六堡茶 茶叶发酵 茶多酚 抗氧化活性

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三株散囊菌属真菌的茶叶液态发酵与其成分分析 被引量：5

3

作者 苏赞 陈皓睿 +6 位作者 薛云 邹克兴 孙建生 农李政 李季刚 龙章德 申佩弘 《工业微生物》 CAS 2020年第1期14-19,共6页

散囊菌属真菌(Eurotium spp.)又称“金花菌”,能在六堡茶表面生长出金黄色的子囊果而得名,是一类对发酵茶叶的品质有积极影响的真菌。本研究前期从广西梧州六堡茶中筛选到的三株散囊菌属真菌Aspergillus chevalieri E2(简称E2),Aspergil... 散囊菌属真菌(Eurotium spp.)又称“金花菌”,能在六堡茶表面生长出金黄色的子囊果而得名,是一类对发酵茶叶的品质有积极影响的真菌。本研究前期从广西梧州六堡茶中筛选到的三株散囊菌属真菌Aspergillus chevalieri E2(简称E2),Aspergillus chevalieri E3(简称E3)与Aspergillus cristatus E6(简称E6),将菌株接种于自制液体茶粉培养基中培养,检测发酵液中产生的色素物质;测定发酵液中纤维素酶、果胶酶、淀粉酶的酶活力、总糖和还原糖糖含量、氨基酸含量、总抗氧化能力、自由基清除能力和茶多酚含量。结果表明:三株真菌在液体茶粉培养基中生长良好,E3生长尤其迅速。在8 d的培养期限内,E2、E3和E6的最高果胶酶活力分别为2.52、3.44和5.15 U/mL;最高纤维素酶活力分别为0.57、0.82和1.10 U/mL;最高淀粉酶活力分别为0.31、0.35和0.49 U/mL。三株真菌的发酵后培养液中还原糖含量大幅增加,增幅分别达到131.70%、627.02%和459.12%;总糖含量同样呈上升趋势,增幅分别达到6.84%、35.25%和2.07%;E2与E3的氨基酸含量分别下降了17.43%与32.68%,E6则上升了0.52%;E3的总抗氧化活性提升最大,达65.87%;DPPH·自由基清除能力提升最大的是E2,达128.33%;茶多酚含量都显著提升,增幅分别为50.85%、51.58%和53.06%。本研究对改善六堡茶的品质及茶叶的发酵的研究有一定意义和参考价值。 展开更多

关键词 谢瓦氏曲霉 冠突曲霉 六堡茶 茶叶发酵 茶多酚 抗氧化活性

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谢瓦氏曲霉间型变种flbA基因cDNA的全长克隆及序列分析 被引量：10

4

作者 王玉臣 谭玉梅 +1 位作者 刘永翔 刘作易 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2013年第1期358-362,共5页

为进一步研究谢瓦氏曲霉间型变种中flbA基因的结构及其与有性发育的关系,根据FlbA氨基酸的保守序列设计简并引物,利用RT-PCR、RACE方法从谢瓦氏曲霉间型变种的总RNA中扩增出flbA基因的cDNA序列。该序列全长3060 bp,包含2295bp的开放阅读... 为进一步研究谢瓦氏曲霉间型变种中flbA基因的结构及其与有性发育的关系,根据FlbA氨基酸的保守序列设计简并引物,利用RT-PCR、RACE方法从谢瓦氏曲霉间型变种的总RNA中扩增出flbA基因的cDNA序列。该序列全长3060 bp,包含2295bp的开放阅读框(Open reading frame,ORF),预测编码一个由764个氨基酸组成的蛋白,该蛋白分子量为83 181.19,理论等电点为6.31,为不稳定的亲水蛋白。序列同源性为:该基因与烟曲霉(Aspergillus fumigatus)的发育调控子flbA相似度,最高为77%,其编码的氨基酸含有一个RGS(Regulator of G protein Singaling)和两个DEP(dishevelled,Egl-10,pleckstrin)保守域,与Aspergillus其他种的FlbA蛋白保守域一致。 展开更多

关键词 谢瓦氏曲霉间型变种 FlbA基因 基因克隆

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利用抑制性差减杂交技术鉴定谢瓦氏曲霉间型变种产孢相关的基因 被引量：9

5

作者 谭玉梅 王海 +1 位作者 刘永翔 刘作易 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期56-63,共8页

谢瓦氏曲霉间型变种Aspergillus chevalieri var.intermedius俗称"金花菌",是茯砖茶发酵中的优势菌种,该菌在不同的渗透压胁迫下产生不同类型的孢子。采用抑制性差减杂交技术(suppression subtractive hybridization,SSH),以... 谢瓦氏曲霉间型变种Aspergillus chevalieri var.intermedius俗称"金花菌",是茯砖茶发酵中的优势菌种,该菌在不同的渗透压胁迫下产生不同类型的孢子。采用抑制性差减杂交技术(suppression subtractive hybridization,SSH),以低渗条件下产生的子囊孢子和高渗条件下产生的分生孢子为材料分别与营养菌丝体构建两个正反向文库。每个库随机挑选400个阳性克隆进行测序。然后将所得到的基因片段在GenBank进行BLASTx和BLASTn同源比对,筛选出的差异表达的基因涉及蛋白质代谢、细胞代谢、转录调控等多个方面,其中可能参与有性产孢调控的基因有13条,可能参与无性产孢调控的基因有10条。 展开更多

关键词 茯砖茶 谢瓦氏曲霉间型变种 渗透压 分生孢子 子囊孢子

原文传递

谢瓦氏曲霉间型变种(Aspergillus chevalieri var.intermedius)esdC基因全长cDNA克隆与序列分析 被引量：8

6

作者 刘荣 谭玉梅 +1 位作者 刘永翔 刘作易 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期36-40,共5页

为探究esdC基因在谢瓦氏曲霉问型变种的结构特征，从己构建的抑制性差减文库（ssH）中筛选得到。sdC基因的EST序列，采用cDNA末端快速扩增（RACE）技术扩增该基因片段的5’和3’端，拼接得到全长cDNA1472bp。通过序列分析，该cDNA序列... 为探究esdC基因在谢瓦氏曲霉问型变种的结构特征，从己构建的抑制性差减文库（ssH）中筛选得到。sdC基因的EST序列，采用cDNA末端快速扩增（RACE）技术扩增该基因片段的5’和3’端，拼接得到全长cDNA1472bp。通过序列分析，该cDNA序列含有一个开放阅读框（ORF），长度为819bp，从396～1214bp，含有30个腺嘌呤尾巴。预测编码273个氨基酸，该蛋白质的等电点pI为9．51，分子量为30．26558kD，为不稳定蛋白。序列同源性分析表明：该基因与费希新萨托菌（Neosartorya fischeri NRRL181）有性发育蛋白EsdC相似度最高，为78％，其保守区序列主要集中于蛋白质的N端。本实验为进一步研究esdC基因的分子功能及可能参与的调控途径奠定基础。 展开更多

关键词 谢瓦氏曲霉间型变种 esdC基因 RACE法

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谢瓦氏曲霉间型变种nsdD基因全长克隆及序列分析 被引量：6

7

作者 余春芳 李孝霞 +2 位作者 谭玉梅 刘永翔 刘作易 《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2013年第9期33-36,共4页

为研究谢瓦氏曲霉间型变种中nsdD基因的结构及其与有性产孢的关系,根据同源克隆及染色体步移技术克隆nsdD的全基因序列,并进行生物信息学分析。结果表明:该序列基因全长为1 773bp,开放阅读框长度为1 293bp,编码430个氨基酸,分子质量为46... 为研究谢瓦氏曲霉间型变种中nsdD基因的结构及其与有性产孢的关系,根据同源克隆及染色体步移技术克隆nsdD的全基因序列,并进行生物信息学分析。结果表明:该序列基因全长为1 773bp,开放阅读框长度为1 293bp,编码430个氨基酸,分子质量为46.659 4KD,理论等电点为9.08。序列同源性分析该基因与土曲霉(Aspergillus terreus)nsdD基因相似度最高为69%,含有1个GATA型锌指保守结构域,与其他曲霉的nsdD蛋白保守域相符。 展开更多

关键词 谢瓦氏曲霉间型变种 nsdD基因 染色体步移

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G418抗性基因nptⅡ双元载体的构建及谢瓦氏曲霉间型变种的遗传转化 被引量：5

8

作者 曹旸 刘永翔 +2 位作者 谭玉梅 王海 刘作易 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2013年第6期2509-2513,共5页

为给谢瓦氏曲霉间型变种(Aspergillus chevalieri var.intermedius)多基因功能的研究提供新的选择标记,利用MYA培养基测G418敏感性后,以质粒pcDNA3.1(+)为中间载体构建nptⅡ基因表达元件,利用根癌农杆菌介导法转化至谢瓦氏曲霉间型变种... 为给谢瓦氏曲霉间型变种(Aspergillus chevalieri var.intermedius)多基因功能的研究提供新的选择标记,利用MYA培养基测G418敏感性后,以质粒pcDNA3.1(+)为中间载体构建nptⅡ基因表达元件,利用根癌农杆菌介导法转化至谢瓦氏曲霉间型变种。结果表明:用构巢曲霉PgpdA启动子、nptⅡ基因和构巢曲霉色氨酸C终止子TtrpC组成的G418抗性基因盒替换双元载体pDHt/sk-bar上的草丁膦抗性盒,成功构建双元载体pDHt/sknt,并且通过根癌农杆菌介导的转化获得的G418抗性转化子遗传稳定,nptⅡ基因主要以单拷贝形式插入谢瓦氏曲霉间型变种基因组DNA中。因此,双元载体pDHt/sknt适用于谢瓦氏曲霉间型变种的遗传转化。 展开更多

关键词 G418抗性 双元载体 谢瓦氏曲霉间型变种 遗传转化

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谢瓦氏曲霉间型变种esdC基因的功能分析 被引量：4

9

作者 刘荣 谭玉梅 +1 位作者 刘永翔 刘作易 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期227-234,共8页

为了研究谢瓦氏曲霉间型变种esd C基因的功能,构建该基因的敲除载体,通过农杆菌介导转化及筛选获得敲除突变体,并对突变体的形态进行了初步分析。生物学特性显示:△esd C突变子的子囊结构与野生型相似,子囊孢子均为球形或近球形,无性发... 为了研究谢瓦氏曲霉间型变种esd C基因的功能,构建该基因的敲除载体,通过农杆菌介导转化及筛选获得敲除突变体,并对突变体的形态进行了初步分析。生物学特性显示:△esd C突变子的子囊结构与野生型相似,子囊孢子均为球形或近球形,无性发育也与野生型无显著差异。但是,在MYA培养基上培养14d后,△esd C突变体菌落的渗出液相对野生型较少,且无皱褶,菌落表面干燥。这些结果表明esd C基因的缺失对孢子结构的影响不显著,为谢瓦氏曲霉间型变种有性调控机制的研究奠定了技术基础。 展开更多

关键词 谢瓦氏曲霉间型变种 ESD C基因 基因敲除 功能分析

原文传递

谢瓦氏曲霉间型变种YchF基因cDNA全长克隆及序列分析 被引量：4

10

作者 李孝霞 谭玉梅 +1 位作者 刘永翔 刘作易 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期185-189,共5页

从谢瓦氏曲霉间型变种抑制性差减杂交(SSH)文库中,筛选到一个子囊孢子时期差异表达的序列标签A0128.860,以其序列为模板设计特异性引物,利用RT-PCR及RACE技术克隆获得了该基因的全长cD-NA,命名为eYchF。生物信息学分析显示,该基因包含一... 从谢瓦氏曲霉间型变种抑制性差减杂交(SSH)文库中,筛选到一个子囊孢子时期差异表达的序列标签A0128.860,以其序列为模板设计特异性引物,利用RT-PCR及RACE技术克隆获得了该基因的全长cD-NA,命名为eYchF。生物信息学分析显示,该基因包含一个1182bp的完整开放阅读框(ORF),编码393个氨基酸,相对分子质量为43.4669kD,预测的理论等电点为6.99,包括一个保守的G domain(guanine nucleotide-binding domain)和一个TGS(ThrRS,GTPase,Spo T)domain,为疏水蛋白。序列同源性分析表明:该基因与棒曲霉(Aspergillus clavatus NRRL1)的GTP结合蛋白YchF相似度为84%,谢瓦氏曲霉间型变种YchF基因的克隆及生物信息学分析为YchF的进一步研究奠定了基础。 展开更多

关键词 谢瓦氏曲霉间型变种 YchF基因 RACE

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谢瓦氏曲霉间型变种veA基因全长克隆及序列分析 被引量：4

11

作者 马权 刘永翔 刘作易 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2012年第1期136-139,共4页

为进一步研究谢瓦氏曲霉间型变种中veA基因的结构及其与有性发育的关系,以谢瓦氏曲霉间型变种为有性发育研究材料对veA基因进行全长克隆,根据已克隆到的veA保守区片段设计基因特异性引物(GSP),使用RACE技术从总RNA克隆到了长度为2 515 b... 为进一步研究谢瓦氏曲霉间型变种中veA基因的结构及其与有性发育的关系,以谢瓦氏曲霉间型变种为有性发育研究材料对veA基因进行全长克隆,根据已克隆到的veA保守区片段设计基因特异性引物(GSP),使用RACE技术从总RNA克隆到了长度为2 515 bp的veA基因的cDNA。序列分析表明,该cDNA编码有562个氨基酸残基,其预测蛋白质序列与丝状真菌的其他种相应预测蛋白质比对结果发现,其相似性较好,保守区序列集中于蛋白质的N端。进一步研究表明,该基因开放阅读框内只含一个内含子,长度为54 bp,位于起始密码子下游149 bp处。说明,已成功地从谢瓦氏曲霉间型变种中克隆到了veA基因。 展开更多

关键词 谢瓦氏曲霉间型变种 veA基因 有性发育 全长克隆

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根癌农杆菌介导谢瓦氏曲霉间型变种的遗传转化 被引量：2

12

作者 王海 谭玉梅 +2 位作者 刘永翔 王阶平 刘作易 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2012年第3期1123-1125,共3页

利用根癌农杆菌对谢瓦氏曲霉间型变种进行了遗传转化。结果表明:遗传转化的效率为60～90个转化子/106个分生孢子,转化子的遗传性状比较稳定;谢瓦氏曲霉间型变种对潮霉素B比较敏感,20μg/mL就可以抑制真菌的生长。遗传转化体系的建立为... 利用根癌农杆菌对谢瓦氏曲霉间型变种进行了遗传转化。结果表明:遗传转化的效率为60～90个转化子/106个分生孢子,转化子的遗传性状比较稳定;谢瓦氏曲霉间型变种对潮霉素B比较敏感,20μg/mL就可以抑制真菌的生长。遗传转化体系的建立为后继基因功能的研究提供了重要工具。 展开更多

关键词 谢瓦氏曲霉间型变种 根癌农杆菌 遗传转化 潮霉素B

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