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三个不同亚型HIV-1调节/辅助基因DNA疫苗的构建和免疫原性研究 被引量：2
1
作者 解晓燕 万延民 +5 位作者 李斌 史继静 仇超 刘朝奇 徐建青 张焕相 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期157-161,共5页
目的 构建表达中国主要流行亚型HIV-1 tat-rev-integrase（c-half）-vif-nef（TRIVN）融合基因的DNA疫苗,并比较其免疫原性.方法 按人源密码子使用频率对HIV-1 CN54（B＇/C重组亚型）与RL42（B＇亚型）的tat、rev、integrase（C端144个... 目的 构建表达中国主要流行亚型HIV-1 tat-rev-integrase（c-half）-vif-nef（TRIVN）融合基因的DNA疫苗,并比较其免疫原性.方法 按人源密码子使用频率对HIV-1 CN54（B＇/C重组亚型）与RL42（B＇亚型）的tat、rev、integrase（C端144个氨基酸）、vif和nef基因序列进行优化,构建DNA疫苗.通过Western blot测定上述DNA疫苗与HIV-1 AE2f株来源的tat-rev-integrase（c-half）-vifnef融合基因DNA疫苗的体外表达效率 利用小鼠模型比较3个DNA疫苗单独免疫与混合免疫的免疫原性特征.结果 限制性酶切及DNA测序结果表明两个融合基因重组质粒构建正确 Western blot 检测结果显示：3个DNA疫苗的体外表达效率基本相当.小鼠免疫后ELISPOT检测结果显示：在总T细胞反应强度方面AE2f-TRIVN最强[（948.0±330.0）SFCs/10^6脾细胞],次之为混合DNA免疫组（500.0±155.0 SFCs/10^6脾细胞）,再者为RL42-TRIVN[（195.1±44.0）SFCs/106脾细胞],CN54-TRIVN最弱[（89.5±17.0）SFCs/106脾细胞].T细胞反应分布情况显示：3个DNA疫苗单独免疫时,T细胞反应主要集中在Integrase和Vif蛋白上 而混合免疫可以部分改善针对Nef蛋白的免疫识别.结论 3个亚型TRIVN DNA疫苗中以AE2f-TRIVN的免疫原性最强 DNA疫苗混合免疫倾向于促进特异性T细胞反应在TRIVN融合抗原上的均匀分布. 展开更多
关键词 艾滋病病毒 疫苗 T细胞 调节/辅助蛋白 亚优势表位
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不同基因融合方式对HIV-1 AE2f Tat、Rev和Nef蛋白免疫原性的影响
2
作者 吕国才 郑临 杨益大 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期225-228,共4页
目的 构建表达HIV-1 AE2f gp145-tat-rev-nef融合基因的DNA疫苗,并比较gp145-tat-rev-nef（AE-Gp145TRN）和tat-rev-integrase（c-half）（AE-TRIVN）两种不同基因融合方式对Tat、Rev和Nef蛋白免疫原性的影响.方法 按人源密码子使用频率... 目的 构建表达HIV-1 AE2f gp145-tat-rev-nef融合基因的DNA疫苗,并比较gp145-tat-rev-nef（AE-Gp145TRN）和tat-rev-integrase（c-half）（AE-TRIVN）两种不同基因融合方式对Tat、Rev和Nef蛋白免疫原性的影响.方法 按人源密码子使用频率对HIV-1 AE2f的gp145、tat、rev和nef基因序列进行优化并构建DNA疫苗.经Western blot进行体外表达检测后,利用小鼠模型比较AE-Gp145TRN与AE-TRIVN的免疫原性.结果 限制性酶切及DNA测序结果表明AE-Gp145TRN融合基因表达重组质粒构建正确;Western blot结果显示其能够在体外表达相应的融合蛋白.小鼠免疫后IFN-γ ELISPOT检测结果显示：AE-TRIVN所活化的针对Tat、Rev和Nef蛋白的总T细胞反应强度[（148±91）SFCs/106脾细胞]显著高于Gp145TRN[（55±28）SFCs/106脾细胞,P=0.017].T细胞反应分布情况显示：AE-TRIVN所活化的T细胞反应主要集中在Rev蛋白上;而Gp145TRN则可以显著提高对Nef蛋白的免疫识别.结论 AE-TRIVN与Gp145TRN在小鼠体内所活化的T细胞反应特征有明显区别,提示不同的抗原融合方式可能影响融合基因DNA疫苗的免疫结果. 展开更多
关键词 艾滋病病毒 疫苗 T细胞 调节/辅助蛋白 融合抗原
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