NF-κB寡核苷酸诱骗剂诱导的大鼠耐受型树突状细胞及其免疫学特性观察 被引量：2

1

作者 蹇孝丽 尹向飞 +2 位作者 岳萍 胡恒贵 蒋红梅 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第2期17-19,共3页

目的用核因子κB(NF-κB)寡核苷酸诱骗剂(ODN Decoy)诱导大鼠耐受型树突状细胞(DC)并负载牛Ⅱ型胶原(BⅡC),评价其免疫学特性。方法用GM-CSF和IL-4诱导SD大鼠脾脏单个核细胞分化成DC,将其分为对照组及实验1、2组,均继续加入GM-CSF、IL-4... 目的用核因子κB(NF-κB)寡核苷酸诱骗剂(ODN Decoy)诱导大鼠耐受型树突状细胞(DC)并负载牛Ⅱ型胶原(BⅡC),评价其免疫学特性。方法用GM-CSF和IL-4诱导SD大鼠脾脏单个核细胞分化成DC,将其分为对照组及实验1、2组,均继续加入GM-CSF、IL-4,同时实验1、2组加入ODN Decoy,培养7 d实验2组加入BⅡC。流式细胞术检测细胞表面共刺激分子CD80、CD86,同种异体淋巴细胞刺激试验评价淋巴细胞增殖情况及其对BⅡC和人血清刺激的反应,检测上清液中Th1/Th2细胞因子IFN-γ/IL-10。结果与对照组相比,实验1、2组CD80、CD86表达均降低(P均<0.05);实验1组淋巴细胞增殖程度及IFN-γ明显降低(P均<0.05),IL-10无明显变化;实验2组加入BⅡC后淋巴细胞增殖程度及IFN-γ、IL-10均无明显变化(P均>0.05)。实验2组中,与加入BⅡC相比,加入健康人血清后淋巴细胞明显增殖(P<0.05),IFN-γ升高,IL-10降低(P均<0.05)。结论用NF-κB ODN Decoy成功诱导获得耐受型DC。该DC刺激同种异体淋巴细胞反应的能力较低,且抑制淋巴细胞免疫反应向Th1方向偏移;负载BⅡC后刺激的淋巴细胞对该抗原特异性耐受,而对无关抗原的免疫应答无明显影响。 展开更多

关键词 树突状细胞 核因子ΚB 寡核苷酸 诱骗剂 Ⅱ型胶原 免疫耐受 大鼠

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核因子κB诱骗剂处理的树突状细胞延长小鼠移植心脏存活时间 被引量：2

2

作者 徐东亮 刘永 +1 位作者 张炜 唐孝达 《中华器官移植杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期525-529,共5页

目的探讨核因子κB(NF-κB)诱骗剂处理供者树突状细胞(DC)对同种异体小鼠移植心脏存活时间的影响。方法在体外以NF-κB诱骗剂处理供者骨髓来源的DC,并于心脏移植术前7 d经门静脉输注2×10~6个DC给受者,术后1～7 d受者接受亚治疗量... 目的探讨核因子κB(NF-κB)诱骗剂处理供者树突状细胞(DC)对同种异体小鼠移植心脏存活时间的影响。方法在体外以NF-κB诱骗剂处理供者骨髓来源的DC,并于心脏移植术前7 d经门静脉输注2×10~6个DC给受者,术后1～7 d受者接受亚治疗量的环孢素A(10mg·kg^(-1)·d^(-1))腹腔注射(联合方案组),并设不作任何处理(对照组)、单用环孢素A(CsA组)、单纯输注未经处理DC (DC对照组)和单纯输注经处理DC(DC实验组)的对照组,另设接受来自第三方供者的对照组(第三供者组,受者的处理同联合方案组),所有受者均接受腹腔心脏移植。观察各组移植心脏的存活时间;采用酶联免疫吸附法检测术后第7天受者血清白细胞介素2(IL-2)、IL-4、IL-10和γ干扰素(IFN-γ)的含量。结果移植心脏平均存活时间(MST),对照组为7 d,CsA组为10.3 d,DC对照组为7.6 d,DC实验组为21.4 d,联合方案组为53.6 d,第三供者组为9 d,DC实验组移植心脏MST明显长于对照组和DC对照组,差异有统计学意义(P<0.01);联合方案组移植心脏MST明显长于CsA组、DC实验组及第三供者组,差异有统计学意义(P<0.01)。联合方案组IL-2和IFN-γ的含量最低,而IL-4和IL-10的含量最高,与其它各组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);与对照组、DC对照组及CsA组相比,DC实验组IL-2及IFN-γ的含量也显著降低(P<0.05),而IL-4和IL-10则升高(P<0.05)。结论术前输注经NF-κB诱骗剂处理的供者DC可延长同种小鼠移植心脏的存活时间,若术后加用短程亚治疗量CsA,则移植心脏的存活时间得到进一步延长。 展开更多

关键词 NF-κB 诱骗剂 树突细胞 移植物存活 心脏移植

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胶原蛋白诱导性关节炎(CIA)大鼠耐受性树突状细胞制备技术的优化 被引量：5

3

作者 谭艳 田娅玲 +1 位作者 宁丽常 蒋红梅 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1076-1081,共6页

目的改良胶原蛋白诱导性关节炎(CIA)大鼠脾脏来源耐受性树突状细胞(DC)的制备技术,以获取高质量的实验细胞。方法在提取脾脏单个核细胞过程中,对制备单细胞悬液流程以及单个核细胞铺板后孵育时间进行改进,培养初期加入核因子κB(NF-κB... 目的改良胶原蛋白诱导性关节炎(CIA)大鼠脾脏来源耐受性树突状细胞(DC)的制备技术,以获取高质量的实验细胞。方法在提取脾脏单个核细胞过程中,对制备单细胞悬液流程以及单个核细胞铺板后孵育时间进行改进,培养初期加入核因子κB(NF-κB)寡核苷酸诱骗剂诱导为耐受性DC。显微镜观察细胞形态,台盼蓝染色观察细胞活力,流式细胞术检测细胞CD103(OX62)、CD80和CD86表达,噻唑蓝(MTT)法检测该DC刺激淋巴细胞的增殖能力。结果DC的细胞活力>90%,OX62表达率>87.4%;共刺激分子低表达,DC刺激淋巴细胞增殖能力低。结论将CIA大鼠脾脏单个核细胞的制备方法进行改良,经NF-κB寡核苷酸诱骗剂诱导可获得高活力、高稳定性的耐受性DC,且细胞纯度明显提高。 展开更多

关键词 树突状细胞(DC) 胶原蛋白诱导性关节炎(CIA) 核因子κB(NF-κB) 寡核苷酸诱骗剂 免疫耐受

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核因子-κB诱骗剂处理的DC对胶原诱导性关节炎大鼠外周血IFN-γIL-10、抗Ⅱ型胶原抗体水平的影响 被引量：5

4

作者 胡恒贵 尹向飞 蒋红梅 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期870-874,共5页

目的探讨核因子-KB诱骗剂（NF-KBODNDecoy）处理的DC对Ⅱ型胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠血清IFN-1、IL-10、抗Ⅱ型胶原抗体水平的影响及作用机制。方法建立Ⅱ型胶原诱导性大鼠关节炎模型，NF．s：B诱骗剂处理并负载牛Ⅱ型胶原（BIIC）... 目的探讨核因子-KB诱骗剂（NF-KBODNDecoy）处理的DC对Ⅱ型胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠血清IFN-1、IL-10、抗Ⅱ型胶原抗体水平的影响及作用机制。方法建立Ⅱ型胶原诱导性大鼠关节炎模型，NF．s：B诱骗剂处理并负载牛Ⅱ型胶原（BIIC）的大鼠脾脏来源的DC，在初次免疫第5天经尾静脉注射到CIA大鼠体内，并设空白对照组、CIA模型组和B1IC-decoy-DC实验组。42d后观察各组关节炎指数和病理变化，采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测各组大鼠血清中IFN-y、IL-10、抗Ⅱ型胶原抗体的含量。结果与空白对照组相比，CIA模型组大鼠血清中IFN-y、抗Ⅱ型胶原抗体含量升高，而IL-10含量降低（P〈0．05），而B1／C-decoy-DC实验组经NF-KB诱骗剂处理并负载BⅡC获得的DC注射后，与CIA模型组相比，血清中IFN-1、抗Ⅱ型胶原抗体含量降低，而IL-10含量升高，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论NF-KB诱骗剂处理并负载BIIC的DC具有明显抑制CIA大鼠外周血IFN-1和抗BIIC抗体产生，促进IL-10水平的增加，对类风湿关节炎有较好的治疗作用。 展开更多

关键词 类风湿关节炎 胶原诱导关节炎 核因子-KB诱骗剂 IFN-1 IL-10

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核因子-κB寡聚脱氧核苷酸诱骗剂处理树突状细胞对大鼠胶原诱导性关节炎治疗作用研究 被引量：4

5

作者 胡恒贵 尹向飞 蒋红梅 《蚌埠医学院学报》 CAS 2012年第6期633-635,638,共4页

目的:探讨核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)寡聚脱氧核苷酸(ODN)诱骗剂处理的树突状细胞(dendritic cells,DC)对Ⅱ型胶原诱导关节炎(collagen induced arthritis,CIA)大鼠的治疗作用及机制。方法:建立Ⅱ型胶原诱导大鼠关节炎模型,... 目的:探讨核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)寡聚脱氧核苷酸(ODN)诱骗剂处理的树突状细胞(dendritic cells,DC)对Ⅱ型胶原诱导关节炎(collagen induced arthritis,CIA)大鼠的治疗作用及机制。方法:建立Ⅱ型胶原诱导大鼠关节炎模型,NF-κB诱骗剂处理SD大鼠脾脏来源的DC,在初次免疫第5天经尾静脉注射到CIA大鼠体内,并设空白对照组、CIA模型组和Decoy-DC组。42 d后观察各组关节肿胀程度、关节炎指数和病理指标。结果:经rr GM-CSF和rr IL-4刺激后诱导的各组DC表面OX62的表达在70%以上,差异无统计学意义(P>0.05);Decoy-DC组与LPS-DC组的CD80阳性细胞百分率差异有统计学意义(P<0.05),在Decoy-DC组的CD80荧光强度明显低于LPS-DC组(P<0.01);Decoy-DC组的CD86荧光强度亦均明显低于LPS-DC组(P<0.01),初次免疫第7天后,Decoy-DC组和CIA模型组的关节炎指数开始增高;从第21天后开始,Decoy-DC组的关节指数均明显低于CIA模型组(P<0.01)。结论:NF-κB诱骗剂处理的DC有效地减轻CIA大鼠关节炎症状及组织病理损害,对类风湿性关节炎有较好的治疗作用。 展开更多

关键词 关节炎 类风湿性 胶原诱导关节炎 核因子-κB诱骗剂 大鼠

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NF-κB哑铃形诱骗剂ODN对骨髓瘤细胞生长及IL-6表达的抑制作用 被引量：3

6

作者 蒋红利 薛武军 +1 位作者 刘华 陈葳 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期47-50,共4页

目的设计合成靶向NF-κB的哑铃形诱骗剂ODN,分析靶向NF-κB的哑铃形诱骗剂对NF-κB转录活性、多发性骨髓瘤细胞8266的生长及其分泌的IL-6的抑制效应。方法采用电泳迁移率变动分析(EMSA)体外检测诱骗剂ODN对NF-κB转录活性的抑制效应。将... 目的设计合成靶向NF-κB的哑铃形诱骗剂ODN,分析靶向NF-κB的哑铃形诱骗剂对NF-κB转录活性、多发性骨髓瘤细胞8266的生长及其分泌的IL-6的抑制效应。方法采用电泳迁移率变动分析(EMSA)体外检测诱骗剂ODN对NF-κB转录活性的抑制效应。将8266细胞随机分为传代培养的8266细胞组;诱骗剂ODN处理组及脂质体处理组。通过阳离子脂质体以2mg/L、4mg/L、8mg/L不同剂量诱骗剂ODN转染8266细胞。转染后8、12、18h,ELISA法检测8266细胞培养上清中IL-6的表达。用MTT比色检查诱骗剂ODN对IL-6刺激的8266细胞生长的影响。结果硫代磷酸的诱骗剂ODN在体外能有效地抑制NF-κB与其顺式元件的结合;2mg/L、4mg/L、8mg/L等不同浓度的脂质体-ODN复合物对8266细胞表达IL-6的抑制程度不同。脂质体-ODN复合物对8266细胞的生长及IL-6的活性均有抑制作用。结论靶向NF-κB的诱骗剂ODN在体外可抑制NF-κB的转录活性,从而抑制8266细胞的生长,降低瘤细胞中IL-6的表达。 展开更多

关键词 NF—κB 诱骗剂ODN IL-6 多发性骨髓瘤

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NF-κB寡核苷酸诱骗策略构建胶原诱导性关节炎大鼠耐受性DC 被引量：2

7

作者 田娅玲 宁丽常 +1 位作者 岳萍 蒋红梅 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期906-911,共6页

目的:探讨NF-κB寡核苷酸诱骗剂(NF-κB ODN Decoy)策略构建胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠脾脏来源的稳定的耐受性树突状细胞(DC),并对其成熟状态进行评估。方法:取CIA大鼠脾脏细胞,运用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素(I... 目的:探讨NF-κB寡核苷酸诱骗剂(NF-κB ODN Decoy)策略构建胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠脾脏来源的稳定的耐受性树突状细胞(DC),并对其成熟状态进行评估。方法:取CIA大鼠脾脏细胞,运用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素(IL)-4两种细胞因子诱导培养DC,并分为4组:单纯DC组、Decoy-DC组、LPS刺激DC组、LPS刺激Decoy-DC组。对4组细胞进行形态学观察、活力评价、表型鉴定及耐受性评估。结果:各组DC活力均>90%。OX-62表达率>55%。Decoy-DC组表面共刺激分子CD80和CD86阳性率和平均荧光强度、刺激淋巴细胞增殖能力及IFN-γ分泌能力均显著低于Control-DC组(P<0. 05),而IL-10分泌能力显著高于Control-DC组(P<0. 05)。LPS刺激Decoy-DC组CD80和CD86阳性率和平均荧光强度、刺激淋巴细胞增殖能力及IFN-γ分泌能力均显著低于LPS-DC组(P<0. 05),而IL-10分泌能力显著高于LPS-DC组(P<0. 05)。LPS-Decoy-DC组CD80和CD86阳性率和平均荧光强度、刺激淋巴细胞增殖能力与Decoy-DC组比,无显著性差异(P>0. 05)。结论:CIA大鼠脾脏细胞经NF-κB ODN Decoy策略成功构建出形态、表型及功能稳定的耐受性DC。 展开更多

关键词 树突状细胞 寡核苷酸诱骗剂 CIA大鼠 免疫耐受

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NF-κB寡核苷酸对CIA大鼠Th17/Treg平衡及细胞因子表达影响的研究 被引量：1

8

作者 秦淑国 胡恒贵 +3 位作者 黄峰 管世鹤 王凤超 欧雁冰 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期289-294,共6页

为探讨NF-κB寡核苷酸(oligodeoxynucleotide,ODN)对CIA大鼠Th17/Treg平衡及细胞因子表达的影响,建立Ⅱ型胶原诱导大鼠关节炎模型,将NF-κB ODN注射到大鼠右后踝关节腔内,并设对照组、模型组和实验组。42d后用流式细胞仪检测各组大鼠脾... 为探讨NF-κB寡核苷酸(oligodeoxynucleotide,ODN)对CIA大鼠Th17/Treg平衡及细胞因子表达的影响,建立Ⅱ型胶原诱导大鼠关节炎模型,将NF-κB ODN注射到大鼠右后踝关节腔内,并设对照组、模型组和实验组。42d后用流式细胞仪检测各组大鼠脾脏Th17、Treg百分率、凋亡率;qRT-PCR检测IL-17、TGF-β和IL-6mRNA表达;用ELISA检测血清和关节液IL-17、TGF-β、IL-6含量。结果显示实验组大鼠脾脏Th17占CD4^+T细胞比例及IL-17和IL-6mRNA表达、血清和关节液中IL-17和IL-6的水平均低于模型组,差别有统计学意义(P<0.05);实验组大鼠脾脏Th17凋亡百分率低于模型组,差别有统计学意义(P<0.05);实验组大鼠脾脏Treg占CD4^+T细胞比例及TGF-βmRNA表达、血清和关节液中TGF-β的水平均高于模型组,差别有统计学意义(P<0.05);实验组大鼠脾脏Treg凋亡百分率与模型组相比明显降低,差别有统计学意义(P<0.05)。由此可知,NF-κB ODN调节CD4^+T细胞Th17、Treg之间细胞平衡及相关细胞因子的分泌,对CIA有较好的治疗作用。 展开更多

关键词 胶原诱导性关节炎 NF-κB诱骗剂 Th17 TREG IL-17 TGF-β

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核因子-κB诱骗剂局部应用对胶原诱导性关节炎大鼠治疗作用的研究 被引量：1

9

作者 胡恒贵 秦淑国 +2 位作者 黄峰 管世鹤 王凤超 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期487-491,共5页

探讨核因子-κB诱骗剂(NF-κB decoy)局部应用对Ⅱ型胶原诱导关节炎(CIA)大鼠的治疗作用及其对滑膜基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、IL-17、TGF-β表达的影响。建立Ⅱ型胶原诱导大鼠关节炎模型,用NF-κB诱骗剂注射到大鼠右后踝关节腔内,并设... 探讨核因子-κB诱骗剂(NF-κB decoy)局部应用对Ⅱ型胶原诱导关节炎(CIA)大鼠的治疗作用及其对滑膜基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、IL-17、TGF-β表达的影响。建立Ⅱ型胶原诱导大鼠关节炎模型,用NF-κB诱骗剂注射到大鼠右后踝关节腔内,并设对照组、CIA模型组和实验组。42d后观察各组关节炎指数、病理指标,采用ELISA法检测各组大鼠关节液中IL-17、IL-12和TGF-β的水平,免疫组织化学方法检测关节组织MMP-3、TGF-β和IL-17表达。与对照组比较,CIA模型组大鼠关节炎指数、关节液中IL-17、IL-12水平均明显升高,滑膜组织MMP-3、IL-17阳性表达的积分光密度(IOD)值明显增加;实验组经NF-κB诱骗剂注射后,与CIA模型组比较,关节炎指数、关节液中IL-17、IL-12水平均明显降低,而TGF-β的含量显著增高,滑膜组织MMP-3、IL-17阳性表达的IOD值明显降低,TGF-β阳性表达的IOD值显著增高。NF-κB诱骗明显减轻CIA大鼠的关节炎症状,延缓关节破坏的进展,对CIA有较好的治疗作用。 展开更多

关键词 胶原诱导性关节炎 核因子-κB诱骗剂 白介素-17 转化生长因子-β 基质金属蛋白酶-3

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核因子κB诱骗剂对膀胱癌中趋化因子基因表达的影响

10

作者 谢东华 唐孝达 +4 位作者 夏术阶 谭建明 鲁军 顾晓 蔡勇 《中华泌尿外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期311-314,共4页

目的　探讨核因子κB(NF κB)诱骗剂对膀胱癌中趋化因子表达的影响。　方法　电泳移动变换分析 (EMSA)检测不同处理时NF κBDNA联结活性的改变 ;RT PCR和Westernblot检测p6 5表达的变化 ;RT PCR检测趋化因子IL 8、MCP 1,RANTES表达变化... 目的　探讨核因子κB(NF κB)诱骗剂对膀胱癌中趋化因子表达的影响。　方法　电泳移动变换分析 (EMSA)检测不同处理时NF κBDNA联结活性的改变 ;RT PCR和Westernblot检测p6 5表达的变化 ;RT PCR检测趋化因子IL 8、MCP 1,RANTES表达变化。　结果　NF κB诱骗剂抑制TNF α诱导的NF κB激活 ,也抑制TNF α激活 p6 5、IL8、MCP 1和RANTES ;突变体NF κB诱骗剂对这些指标无作用。　结论　膀胱癌中可见趋化因子表达 ,并被TNF α激活 ,NF κB诱骗剂可对这种激活起抑制作用。 展开更多

关键词 膀胱癌 核因子κB诱骗剂 趋化因子 基因表达 电泳移动变换分析检测 肿瘤坏死因子

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大鼠骨髓源性耐受性树突状细胞的诱导培养

11

作者 马贵兰 谭艳 +1 位作者 包伦敏 蒋红梅 《贵州医科大学学报》 CAS 2021年第2期143-151,共9页

目的探讨使用核因子-κB寡核苷酸诱骗剂(NF-κB ODN Decoy)诱导培养大鼠骨髓来源的耐受性树突状细胞(tol DC)的方法。方法取雄性Sprague Dawley(SD)和Wistar大鼠各10只,麻醉处死SD大鼠取胫骨制备骨髓细胞悬液、培养8 d获得树突状细胞(D... 目的探讨使用核因子-κB寡核苷酸诱骗剂(NF-κB ODN Decoy)诱导培养大鼠骨髓来源的耐受性树突状细胞(tol DC)的方法。方法取雄性Sprague Dawley(SD)和Wistar大鼠各10只,麻醉处死SD大鼠取胫骨制备骨髓细胞悬液、培养8 d获得树突状细胞(DC),分为Control-DC组[添加白细胞介素4(IL-4)和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)定向诱导分化培养]、Decoy-DC组(Control-DC组基础上加5μmol/L NF-κB ODN Decoy)、脂多糖(LPS)-DC组(培养初加GM-CSF和IL-4诱导分化培养,第7天加LPS 10μg/L刺激)及LPS-Decoy-DC组(Decoy-DC组细胞培养至第7天加10μg/L LPS),采用倒置显微镜分别观察Control-DC组和Decoy-DC组SD大鼠骨髓细胞提取当天和培养第4~8天、LPS-DC组和LPS-Decoy-DC组SD大鼠骨髓细胞培养第8天DC的细胞形状、表面突起及集落等特征,采用吉姆萨染色评价培养第8天Control-DC组和Decoy-DC组SD大鼠骨髓源性DC的形态特征,采用台盼蓝染色法检测Decoy-DC组SD大鼠骨髓细胞提取当天和培养第8天DC的活细胞比率,采用流式细胞术检测各组SD大鼠培养第8天时骨髓源性DC的免疫表型;麻醉处死Wistar大鼠后取脾脏淋巴细胞制备反应细胞,同时将培养第8天的Control-DC组、Decoy-DC组、LPS-DC组及LPS-Decoy-DC组SD大鼠骨髓源性的DC中加丝裂霉素C制备刺激细胞,调整刺激细胞与反应细胞比例为1∶5得混合淋巴细胞,分为空白对照组(单独加混合淋巴细胞)、Control-DC组、Decoy-DC组、LPS-DC组及LPS-Decoy-DC组,采用噻唑蓝(MTT)法检测各组混合淋巴细胞于490 nm处的光密度(OD490)值。结果镜下Decoy-DC组SD大鼠骨髓源性的DC集落较Control-DC组少且表面突起少见,LPS-DC组SD大鼠骨髓源性的DC形态较LPS-Decoy-DC组多样;台盼蓝染色显示提取当天和培养第8天Decoy-DC组SD大鼠骨髓源性的DC活细胞率均> 95%(P>0.05);流式细胞术显示各组SD大鼠骨髓源性DC的OX-62阳性表达率均> 95%(P>0.05),Decoy-DC组CD80、CD86的表 展开更多

关键词 大鼠 免疫耐受 骨髓 树突状细胞 核因子-κB寡核苷酸诱骗剂 诱导培养

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