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甘草酸对骨髓间充质细胞诱导为多潜能干细胞重编程关键基因表达的影响 被引量：4
1
作者 张密霞 王秀云 +2 位作者 石田寅夫 李佳玮 周涛 《吉林中医药》 2012年第7期705-709,共5页
目的:观察甘草酸作用于骨髓间充质干细胞(BMSCs)后对成体细胞向诱导多潜能干细胞(inducedpluripotent stem cells,iPS)转化的关键基因Oct4、Sox2、c-Myc、Klf4、Nanog mRNA表达的影响,探索将BMSCs等成体细胞藉由中药提取物诱导为iPS的... 目的:观察甘草酸作用于骨髓间充质干细胞(BMSCs)后对成体细胞向诱导多潜能干细胞(inducedpluripotent stem cells,iPS)转化的关键基因Oct4、Sox2、c-Myc、Klf4、Nanog mRNA表达的影响,探索将BMSCs等成体细胞藉由中药提取物诱导为iPS的无病毒载体、无基因整合的方法。方法:培养BMSCs,分别加入6.25μmol/L、12.5μmol/L甘草酸,并设置空白对照组,培养15 d、30 d后检测Oct4,Sox2,c-Myc,Klf4,Nanog mRNA的表达。结果:甘草酸6.25μmol/L培养15 d,能升高BMSCs细胞Nanog、c-Myc、Oct4、Sox2mRNA表达,且Nanog与正常组比较差异有统计学意义;培养30 d,Nanog、Sox2、c-Myc,虽与正常组比较差异均无统计学意义,但仍高于正常;甘草酸12.5μmol/L培养15 d对BMSCs Klf4、Sox2、c-Myc、Nanog、Oct4 mRNA表达无明显影响,培养30 d可促进BM-SCs、c-Myc、Nanog mRNA的表达,与正常组比较差异有统计学意义。结论:甘草酸能增加对骨髓间充质细胞表达iPS诱导的关键性基因Nanog等的表达,而Nanog阳性的iPS细胞在基因表达谱上很难与胚胎干细胞区分出来,因此我们认为甘草酸可能对BMSCs向iPS转化具有促进作用。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞(BMSCs) 诱导多能干细胞(ips) 基因 胚胎干细胞
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共表达外源OCT4/SOX2可激活人胚肾细胞中内源NANOG的表达 被引量：1
2
作者 李珍珍 成德 +1 位作者 高祎 王华岩 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期833-840,共8页
自2006年诱导多能干细胞(iPS)技术诞生以来,采用病毒等载体进行的诱导方法已取得了成功.但是,其致瘤性的影响限制了病毒载体的推广与应用,而采用非病毒载体诱导iPS细胞成为研究的热点.本研究通过2个启动子的独立启动,构建了带有绿色荧... 自2006年诱导多能干细胞(iPS)技术诞生以来,采用病毒等载体进行的诱导方法已取得了成功.但是,其致瘤性的影响限制了病毒载体的推广与应用,而采用非病毒载体诱导iPS细胞成为研究的热点.本研究通过2个启动子的独立启动,构建了带有绿色荧光标记的OCT 4/SOX 2共表达诱导载体(pOct4/Sox2-EGFP).将该载体转染HEK 293FT细胞后,阳性克隆明显表达绿色荧光.并通过RT-PCR、免疫荧光等方法证明其中的转录因子OCT 4和SOX 2能在转染细胞中高效表达,同时诱导受体细胞中内源NANOG的转录表达.本研究说明,OCT 4/SOX 2共表达载体能激活NANOG基因的内源表达,暗示着非病毒不整合载体pOct4/Sox2-EGFP本身或与其它转录因子和小分子结合可用于诱导成体细胞的重编程.因此,本研究为下一步应用质粒载体诱导体细胞重编程为iPS细胞的研究奠定了工作基础. 展开更多
关键词 诱导多能干细胞(ips) NANOG基因 pOct4/Sox2-EGFP
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诱导多能干细胞的体细胞重编程方法与应用前景
3
作者 吴南 冯华 《生命的化学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期387-390,共4页
体细胞重编程(somatic reprogramming)是指已分化的体细胞在特定条件下,其生长和发育的程序重新转变,成为另一型细胞,特别是恢复到全能性状态,逆转成诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cell,iPS)的过程。多能干细胞能在体内外分... 体细胞重编程(somatic reprogramming)是指已分化的体细胞在特定条件下,其生长和发育的程序重新转变,成为另一型细胞,特别是恢复到全能性状态,逆转成诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cell,iPS)的过程。多能干细胞能在体内外分化成几乎所有类型的细胞,具有很高的理论研究价值。将已分化的人体细胞程序重排为多能状态可以产生对病人和疾病的特异性干细胞。本文介绍用转录因子的异位表达,介导产生诱导多能干细胞的方法和可能的危险性以及有较高安全性的"2A肽法"。目前,iPS技术还未进入临床应用,但已有一些有希望的尝试。 展开更多
关键词 诱导多能干细胞(ips) 体细胞重编程 转录因子异位表达 2A肽法
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巴马香猪诱导多能干细胞系的建立
4
作者 孙文采 吴璐 +3 位作者 汪进平 鲍磊 李文玲 崔春 《生命科学研究》 CAS CSCD 2018年第3期184-190,共7页
猪在农业和生物医学领域应用非常广泛,尤其是基因修饰的小型猪在器官移植和建立人类疾病模型中有重要的意义。然而,真正的猪胚胎干细胞(embryonic stem cells,ES cells)尚未建立,这极大地限制了转基因猪的产生。目前,诱导多能干细胞(ind... 猪在农业和生物医学领域应用非常广泛,尤其是基因修饰的小型猪在器官移植和建立人类疾病模型中有重要的意义。然而,真正的猪胚胎干细胞(embryonic stem cells,ES cells)尚未建立,这极大地限制了转基因猪的产生。目前,诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPS cells)技术是产生多功能干细胞的有效策略。虽然猪iPS cells建系已有数篇报道,但许多有价值的小型猪的iPS cells仍有待建系。利用可诱导基因表达慢病毒系统(Tet-on系统)在小型猪贵州巴马香猪骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)内过表达外源基因Oct4、Sox2、c-Myc和Klf4,获得两株巴马香猪iPS细胞系(biPS4-1,biPS4-2)。获得的巴马香猪iPS cells与人ES cells(hES cells)形态相似;呈碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AP)阳性;表达干细胞特异的标志物SSEA4、Tra-1-81、Nanog、Rex1和CDH1等,但不表达SSEA1;核型检测正常。进一步的研究显示,它在体外和体内均能分化为外、中、内三胚层,具有多向分化的潜力。可诱导的巴马香猪iPS细胞的建立将为建立转基因猪提供便捷的工具,而基于该细胞系建立的转基因猪也有望服务于医学基础研究和器官移植等临床研究。 展开更多
关键词 骨髓基质细胞(BMSCs) 重编程 诱导多能干细胞(ips cells) Tet-on系统 小型猪巴马香猪
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干细胞伦理之争的“终结者”——谈诺贝尔生理学与医学奖获得者山中伸弥
5
作者 姜英浩 张菊 卢兹凡 《医学争鸣》 CAS 北大核心 2013年第5期18-20,24,共4页
2012年诺贝尔生理学与医学奖得主日本学者山中伸弥在发现诱导多能干细胞(iPS)之前没有显赫的学术地位,但是他独特的思维方式,敢于挑战科学大问题的胆量,使他在最短时间内一跃成为生命领域的领跑者,开启了再生医学的全新篇章。探寻这位... 2012年诺贝尔生理学与医学奖得主日本学者山中伸弥在发现诱导多能干细胞(iPS)之前没有显赫的学术地位,但是他独特的思维方式,敢于挑战科学大问题的胆量,使他在最短时间内一跃成为生命领域的领跑者,开启了再生医学的全新篇章。探寻这位快速登上科学之巅的学者,回顾他的成长经历和伟大科学发现背后的故事,思维灵感会被点燃,创新之奥秘和乐趣也会渗透于心。 展开更多
关键词 山中伸弥 诱导多能干细胞(ips) 启示
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限定因子诱导胎猪成纤维细胞重编程为多能性细胞 被引量：3
6
作者 殷慧群 曹鸿国 +8 位作者 孙雪萍 薛奕杰 张卫琴 黄伟玲 陶勇 刘亚 李运生 张运海 章孝荣 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2010年第6期607-612,共6页
尝试运用限定因子融合蛋白建立猪的诱导多能性干细胞.试验采用Oct4、Sox2、Klf4、c-Myc四种限定因子经慢病毒表达载体系统介导感染猪胎儿成纤维细胞,对表达外源限定因子的猪胎儿成纤维细胞进行培养传代,逐步分离培养出集落边缘界限清晰... 尝试运用限定因子融合蛋白建立猪的诱导多能性干细胞.试验采用Oct4、Sox2、Klf4、c-Myc四种限定因子经慢病毒表达载体系统介导感染猪胎儿成纤维细胞,对表达外源限定因子的猪胎儿成纤维细胞进行培养传代,逐步分离培养出集落边缘界限清晰的细胞克隆,细胞集落生长状态稳定、核型正常、碱性磷酸酶检测为阳性,免疫细胞化学检测显示,Oct4、Nanog、SSEA-1蛋白表达为阳性,体内能够分化形成含有三个胚层的畸胎瘤.结果证实分离培养的细胞克隆为猪诱导多能性干细胞,为进一步完善诱导方案和深入研究应用猪诱导多能性干细胞奠定了基础. 展开更多
关键词 猪 诱导多能性干细胞(ips细胞) 限定因子融合蛋白
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诱导多功能干细胞的影响因素 被引量：1
7
作者 汤黎娜 张杨 +2 位作者 宋光启 施维 李子义 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2011年第4期444-448,共5页
将体细胞诱导为多功能干细胞为人类的再生医学提供了一个全新的研究手段,从而可以不用损坏胚胎就能获得可用于治疗各种特殊疾病的细胞。本文比较了近年来关于生成诱导性多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPS细胞)的诱导方法... 将体细胞诱导为多功能干细胞为人类的再生医学提供了一个全新的研究手段,从而可以不用损坏胚胎就能获得可用于治疗各种特殊疾病的细胞。本文比较了近年来关于生成诱导性多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPS细胞)的诱导方法及重编程效率,总结了这些方法的共同点;另外通过对每个不同试验过程的影响因素进行比较,归纳了影响iPS细胞重编程过程的几个因素。 展开更多
关键词 影响因素 诱导性多能干细胞(ips) 重编程 效率
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非编码RNA对干细胞命运的调控及其分子机制
8
作者 朱大海 《中国基础科学》 2015年第5期28-33,共6页
干细胞研究的发展为人类重大疾病的治疗提供了新的途径和希望。已知多种调控因子影响干细胞的功能和应用,探讨干细胞增殖分化调控机理的基础理论研究将大大推进干细胞的临床应用。近年来,研究发现非编码RNA分子能够调控干细胞的功能。为... 干细胞研究的发展为人类重大疾病的治疗提供了新的途径和希望。已知多种调控因子影响干细胞的功能和应用,探讨干细胞增殖分化调控机理的基础理论研究将大大推进干细胞的临床应用。近年来,研究发现非编码RNA分子能够调控干细胞的功能。为此,2011年国家重大科学研究计划设立重大科学问题导向项目——非编码RNA对干细胞命运调控的机制研究。在该项目的资助下,项目组在非编码RNA对干细胞命运的调控机理研究方面取得一批原创性的研究成果。本文总结了项目组取得的突破性研究进展及存在的问题和未来的发展方向。 展开更多
关键词 非编码RNA 胚胎干细胞(ESC) 成体干细胞 诱导性多能干细胞(ips)
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干细胞研究进展与血细胞治疗
9
作者 裴雪涛 《中国输血杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期756-757,共2页
关键词 胚胎干细胞(ES) 诱导性多能干细胞(ips) 细胞重编程 细胞诱导 体外扩增 造血细胞
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如何高效制备生殖系传递的嵌合体小鼠 被引量：1
10
作者 杨冠恒 施皖生 曾凡一 《生殖与避孕》 CAS CSCD 2012年第10期685-689,共5页
目前,嵌合体技术已成为胚胎干细胞(ES细胞)和诱导多能性干细胞(iPS细胞)研究不可或缺的一部分,嵌合体小鼠模型主要用于基因功能、调控机制、致病机理等各方面的研究。要安全可靠地进行ES细胞和iPS细胞的各种应用性研究,首先需要验证细... 目前,嵌合体技术已成为胚胎干细胞(ES细胞)和诱导多能性干细胞(iPS细胞)研究不可或缺的一部分,嵌合体小鼠模型主要用于基因功能、调控机制、致病机理等各方面的研究。要安全可靠地进行ES细胞和iPS细胞的各种应用性研究,首先需要验证细胞在体内向各种组织定向分化的能力,特别是生殖系传递的能力。而高效制备多能性干细胞生殖系传递的嵌合体小鼠,需要在分子水平、细胞水平、动物个体水平以及制备方法等各方面全面综合地分析考虑,才能达到实验设计的最优化。制备嵌合体小鼠主要有注射法和聚集法2种方法,各有利弊,在整个制备过程中,需要考虑不同发育阶段以及不同小鼠品系胚胎的分化潜能、选用远交系和杂交系的胚胎作为受体,同时要考虑ES细胞的遗传背景,选择低代次的远交系和杂交系的ES细胞或者iPS细胞,以及优选KSR培养体系。对于操作者,需根据实际情况,全方位地综合考虑,从而制定出合理的操作方案。 展开更多
关键词 胚胎干细胞(ES细胞) 嵌合体 生殖系传递 诱导性多能性干细胞(ips细胞)
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