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一种用于活细胞中检测还原性谷胱甘肽的试卤灵类荧光探针 被引量：7
1
作者 赵灵芝 赵柳 李照 《分析试验室》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期7-11,共5页
设计并合成了一种试卤灵类的荧光探针R1,通过质谱,1HNM R谱及13C NM R谱等手段对探针R1进行表征。并采用荧光光谱法和紫外-可见光谱法研究了探针R1对小分子生物硫醇包括还原型谷胱甘肽（GSH）和L-半胱氨酸（Cys）的光谱响应。实验结果表... 设计并合成了一种试卤灵类的荧光探针R1,通过质谱,1HNM R谱及13C NM R谱等手段对探针R1进行表征。并采用荧光光谱法和紫外-可见光谱法研究了探针R1对小分子生物硫醇包括还原型谷胱甘肽（GSH）和L-半胱氨酸（Cys）的光谱响应。实验结果表明,探针R1在p H 7.4磷酸缓冲溶液中对小分子生物硫醇均表现出快速、灵敏的显色和荧光响应,以及较好的选择性。与GSH作用后,探针R1的溶液颜色由无色变为红色。在5~100μmol/L范围内,探针R1的荧光强度与GSH浓度呈线性关系,对GSH的检出限为0.3μmol/L。此外,探针R1可跨过细胞膜,可应用于He La细胞内源性的GSH的激光共聚焦成像,对研究各类病理状态下细胞内氧化还原状态异常有一定的辅助作用。 展开更多
关键词 试卤灵 荧光探针 L-半胱氨酸 还原型谷胱甘肽
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一种基于刃天青还原的荧光方法对β-葡萄糖苷酶活性的检测 被引量：5
2
作者 程鑫 张珩 马济美 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期360-363,共4页
建立了一种简单的荧光分析方法实现了对β-葡萄糖苷酶的定量分析检测。其原理是底物2-O-β-D-葡萄糖基-L-抗坏血酸(AA-2βG)在β-葡萄糖苷酶的水解作用下生成抗坏血酸,后者将刃天青还原生成具有强烈荧光的试卤灵,通过溶液荧光强度的变... 建立了一种简单的荧光分析方法实现了对β-葡萄糖苷酶的定量分析检测。其原理是底物2-O-β-D-葡萄糖基-L-抗坏血酸(AA-2βG)在β-葡萄糖苷酶的水解作用下生成抗坏血酸,后者将刃天青还原生成具有强烈荧光的试卤灵,通过溶液荧光强度的变化对β-葡萄糖苷酶活性进行检测。结果发现,抗坏血酸浓度在3～400μmol/L范围内与反应体系在585 nm处的荧光强度呈线性关系,相关系数r^2=0.981。并基于此实现了对β-葡萄糖苷酶活性的定量检测:β-葡萄糖苷酶的浓度在1～30 U/L范围内与溶液在585 nm处的荧光强度呈良好的线性关系,相关系数r^2=0.995,检出限为1.0 U/L。该方法操作简单,反应灵巧,检测范围较宽,可实现对β-葡萄糖苷酶活性的定量分析检测。 展开更多
关键词 β-葡萄糖苷酶活性 刃天青 试卤灵 抗坏血酸 荧光 检测
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试卤灵类光学探针的研究进展 被引量：4
3
作者 李照 马会民 《影像科学与光化学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期60-68,共9页
光学探针是指与目标物质发生反应(包括配位、包合和基团反应等)并引起光学(吸光、荧光或发光)性质的变化,基于这些变化从而可对目标物质进行分析与测定的一类特殊试剂。光学探针不仅能改善分析的灵敏度,而且能大幅度提高对样品的时空分... 光学探针是指与目标物质发生反应(包括配位、包合和基团反应等)并引起光学(吸光、荧光或发光)性质的变化,基于这些变化从而可对目标物质进行分析与测定的一类特殊试剂。光学探针不仅能改善分析的灵敏度,而且能大幅度提高对样品的时空分辨能力,因此,长期以来一直受到人们的关注。试卤灵为一性能优良的荧光体,特别是其7-羟基的取代作用通常会封闭光信号;这一特性近年引起了人们的兴趣,并被广泛用于构建具有低背景光信号的新型探针。本文将综述试卤灵类光学探针的发展及其在蛋白酶、离子、活性氧物种分析方面的应用,包括探针分子的构筑、检测机理以及生物成像等方面的研究。 展开更多
关键词 光学探针 试卤灵 蛋白酶 离子 活性氧物种 荧光成像分析
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β-葡萄糖醛酸苷酶荧光底物试卤灵葡萄糖醛酸苷的高效制备 被引量：2
4
作者 王欣欣 吕侠 +6 位作者 葛广波 冯磊 辛红 李耀光 曹云峰 韩冠英 郭斌 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2015年第7期1321-1327,共7页
以猴肝微粒体(Cy LM)为酶源,采用生物制备法实现了荧光底物试卤灵(Resorufin)向试卤灵葡萄糖醛酸苷(Resorufinβ-D-glucuronide)的高效转化,同时借助新型色谱分离材料C18WAX及固相萃取技术实现了Resorufinβ-D-glucuronide的高效富集及... 以猴肝微粒体(Cy LM)为酶源,采用生物制备法实现了荧光底物试卤灵(Resorufin)向试卤灵葡萄糖醛酸苷(Resorufinβ-D-glucuronide)的高效转化,同时借助新型色谱分离材料C18WAX及固相萃取技术实现了Resorufinβ-D-glucuronide的高效富集及选择性洗脱,最终获得纯度大于98%的目标产物.所得产物结构经LC-MS,1H NMR和13C NMR等手段进行了表征.在此基础上,以该葡萄糖醛酸产物为探针底物建立了β-葡萄糖醛酸苷酶活性检测及抑制剂高通量筛选的方法. 展开更多
关键词 试卤灵 试卤灵葡萄糖醛酸苷 固相萃取 Β-葡萄糖醛酸苷酶 抑制剂筛选
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刃天青与试卤灵酸度响应性的光谱研究
5
作者 沈钰杰 邹金辉 +2 位作者 赵博霖 谭琴琴 张玉微 《材料研究与应用》 CAS 2022年第2期286-290,共5页
刃天青是单分子单粒子荧光显微技术中一种常用的荧光探针。然而其荧光性质随环境的变化会发生明显的变化,这导致单分子荧光信号的不稳定性。本文基于pH对荧光探针发光性质的影响,研究了缓冲溶液pH与浓度对荧光强度的影响,获得了荧光最... 刃天青是单分子单粒子荧光显微技术中一种常用的荧光探针。然而其荧光性质随环境的变化会发生明显的变化,这导致单分子荧光信号的不稳定性。本文基于pH对荧光探针发光性质的影响,研究了缓冲溶液pH与浓度对荧光强度的影响,获得了荧光最优化的条件。进一步构建了数学模型,结合理论计算,获取了其荧光强度与氢离子的依赖关系,并对pH的响应性能给出了理论解释。结果表明,随着pH的增加,荧光强度先增大后减小。理论研究表明,荧光猝灭与刃天青和间苯二酚的质子化有关。 展开更多
关键词 荧光 染料 刃天青 试卤灵 酸度
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西花蓟马对吡虫啉抗性机制的研究 被引量：22
6
作者 王圣印 刘永杰 +5 位作者 周仙红 张安盛 李丽莉 门兴元 张思聪 于毅 《应用昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期559-565,共7页
为了解大规模应用吡虫啉防治西花蓟马Frankliniella occidentalis(Pergande)的抗性风险,本文研究了吡虫啉与多杀菌素和啶虫咪的交互抗性并比较了多功能氧化酶系(mixed-function oxidases,MFO)的3个组分细胞色素P450、细胞色素b5、甲氧... 为了解大规模应用吡虫啉防治西花蓟马Frankliniella occidentalis(Pergande)的抗性风险,本文研究了吡虫啉与多杀菌素和啶虫咪的交互抗性并比较了多功能氧化酶系(mixed-function oxidases,MFO)的3个组分细胞色素P450、细胞色素b5、甲氧试卤灵O脱甲基酶(methoxyresorufin O-demethylase,MROD)在西花蓟马敏感品系(S)、抗吡虫啉品系(BK)和北京田间品系(BJ)中的含量以及活性。生物测定表明北京田间品系(BJ)对多杀菌素已经产生了较高抗性(RR50=35.38),而对啶虫咪(RR50=3.05)和吡虫啉(RR50=1.82)处于敏感,交互抗性研究结果表明西花蓟马对吡虫啉与多杀菌素(RR50=1.31)和啶虫咪(RR50=3.20)无交互抗性。生化研究表明:西花蓟马抗吡虫啉品系的3个组分含量均显著高于S品系西花蓟马的含量(P<0.05),其中细胞色素P450在是S品系WFT的4.5倍,细胞色素b5含量是S品系WFT的4.23倍,MROD活性是S品系WFT的5.99倍,表明多功能氧化酶系与西花蓟马对吡虫啉的抗药性密切相关。 展开更多
关键词 西花蓟马 抗药性 细胞色素P450 细胞色素B5 甲氧试卤灵-O-脱甲基酶
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