期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到86篇文章
< 1 2 … 5 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
藏红花素对糖基化终产物诱导视网膜微血管内皮细胞凋亡的影响 被引量：17
1
作者 郭斌 范钦华 +2 位作者 王莉 张志强 刘晓娟 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2012年第11期1141-1145,共5页
目的糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)中糖基化终产物(advanced glycosylation end products,AGE)可引起细胞内产生过氧化物和炎症因子,导致视网膜微血管内皮细胞(retinal microvascular endothelial cell,RMEC)凋亡,视功能... 目的糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)中糖基化终产物(advanced glycosylation end products,AGE)可引起细胞内产生过氧化物和炎症因子,导致视网膜微血管内皮细胞(retinal microvascular endothelial cell,RMEC)凋亡,视功能破坏。文中观察藏红花素对在AGE作用下RMEC活性、凋亡比例、活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)产物、细胞内和上清中肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α含量的干预,探讨藏红花素对AGE引起RMEC凋亡的保护机制。方法采用免疫磁珠法分离培养RMEC,浓度为10、50和100μmol/L藏红花素培养液作用于RMEC,观察4d内细胞增生变化并记录生长曲线。不同浓度藏红花素溶液作用于AGE处理的RMEC 12 h,锥虫蓝染色计数活细胞率,流式细胞术检测凋亡细胞比例,荧光光度计测定细胞内ROS含量,采用蛋白电泳和ELISA测定RMEC内和上清中TNF-α含量。结果 RMEC在10、50μmol/L藏红花素的培养液中可以继续增生。培养至3 d和4 d时,100μmol/L藏红花素可使细胞增生受到抑制。与对照组相比,100 mg/L AGE处理12 h和24 h后RMEC活细胞比例明显下降。10、50和100μmol/L藏红花素可不同程度保护AGE处理后RMEC活细胞比例。与对照组相比,100 mg/L AGE处理12 h后凋亡细胞比例明显升高。10、50和100μmol/L藏红花素处理12h后凋亡细胞比例均有下降。AGE处理12h后RMEC内ROS水平明显升高。10、50和100μmol/L藏红花素可不同程度抑制AGE处理后RMEC内ROS水平。AGE处理后RMEC内和上清液中TNF-α水平明显升高。10、50和100μmol/L藏红花素可明显抑制AGE处理后RMEC内和上清液中TNF-α水平。结论藏红花素可能通过抑制AGE诱导RMEC中ROS产生并减少TNF-α合成途径,防止细胞凋亡。 展开更多
关键词 视网膜微血管内皮细胞 糖基化终产物 藏红花素 凋亡 活性氧簇 肿瘤坏死因子
下载PDF
牛视网膜微血管内皮细胞和周细胞的体外培养 被引量：14
2
作者 夏欣 许迅 顾青 《中华眼底病杂志》 CAS CSCD 2004年第1期23-26,共4页
目的　探讨牛视网膜微血管内皮细胞 (BREC)和周细胞 (BRP)的体外选择性培养方法。　方法　结合视网膜微血管的消化分离 ,采用含 10 %人血清、10 0 μg/ ml肝素的 Dulbecco改良 Eagle培养基(DMEM)和含 2 0 %胎牛血清的 DMEM培养基分别选... 目的　探讨牛视网膜微血管内皮细胞 (BREC)和周细胞 (BRP)的体外选择性培养方法。　方法　结合视网膜微血管的消化分离 ,采用含 10 %人血清、10 0 μg/ ml肝素的 Dulbecco改良 Eagle培养基(DMEM)和含 2 0 %胎牛血清的 DMEM培养基分别选择性培养 BREC和 BRP。通过荧光显微镜观察乙酰化低密度脂蛋白 (Dil- Ac- L DL )吞噬情况 ,应用 Von Willebrand因子抗体通过免疫组织化学方法鉴定BREC,并通过α-平滑肌肌动蛋白抗体免疫组织化学鉴定 BRP。结果　通过选择性培养获得的 BREC和BRP的纯度达到 98%以上 ,并能连续传代。BREC早期似小鲤鱼状聚集在微血管碎片周围 ,呈片状鹅卵石样单层生长 ,存在接触性抑制 ;BRP多散布在距血管碎片稍远处 ,形状不规则 ,呈无接触性抑制生长。BREC可吞噬 Dil- Ac- L DL,细胞浆内有荧光表达 ;消化传代后 ,BREC中 Von Willebrand因子表达阳性 ,而 α-平滑肌肌动蛋白表达阴性 ;BRP的α-平滑肌肌动蛋白表达阳性 ,而 Von Willebrand因子表达阴性。　结论　选择性培养基的应用和培养皿的处理可分别获得较高纯度的 BREC和 BRP,简单且具有良好的重复性 ,无需额外步骤来去除 BREC中混杂的 BRP。 展开更多
关键词 牛 视网膜微血管内皮细胞 BREC 周细胞 BRP 体外培养 细胞形态学
原文传递
苦参碱对大鼠视网膜微血管内皮细胞的增生及VEGF表达的影响 被引量：10
3
作者 蒋瑶祁 彭辉灿 +2 位作者 肖启国 李萍 杨杰 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2008年第1期48-52,共5页
目的探讨苦参碱(Ma)对体外培养的大鼠视网膜微血管内皮细胞的增生抑制及对血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达的影响。方法原代培养大鼠视网膜微血管内皮细胞,噻唑蓝比色法(MTT)检测不同质量浓度的Ma对其增生的抑制作用。将培养的细胞分为... 目的探讨苦参碱(Ma)对体外培养的大鼠视网膜微血管内皮细胞的增生抑制及对血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达的影响。方法原代培养大鼠视网膜微血管内皮细胞,噻唑蓝比色法(MTT)检测不同质量浓度的Ma对其增生的抑制作用。将培养的细胞分为对照组、Ma(40mg/L)组、高糖(25mmol/L)组、Ma+高糖组4组。免疫细胞化学和Westernblot法检测细胞VEGF的表达。结果一定质量浓度范围内Ma可抑制视网膜微血管内皮细胞的增生(P<0.05),48h内呈质量浓度依赖性。与对照组和高糖组相比,Ma组48h后,VEGF表达明显下降(P<0.05),与对照组相比,高糖组VEGF的表达明显增加(P<0.05)。结论Ma可抑制视网膜微血管内皮细胞的增生,抑制主要是通过下调VEGF表达而发生作用的,Ma对高糖引起的VEGF表达上调同样也有抑制作用。 展开更多
关键词 苦参碱 视网膜微血管内皮细胞 血管内皮细胞生长因子 免疫细胞化学 免疫印迹法
下载PDF
羟基红花黄色素A对高糖作用下视网膜微血管内皮细胞增殖的影响 被引量：10
4
作者 黄沁园 黄敏丽 何纯刚 《国际眼科杂志》 CAS 2011年第8期1324-1326,共3页
目的:探讨羟基红花黄色素A(HSYA)对高糖培养下恒河猴脉络膜血管内皮细胞(RF/6A)增殖及血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达的影响。方法:取体外培养的RF/6A细胞,分为NG+H0组(含有5.5mmol/L葡萄糖,HSYA的浓度为0mg/L)及HG+H0、HG+H18、HG+H37... 目的:探讨羟基红花黄色素A(HSYA)对高糖培养下恒河猴脉络膜血管内皮细胞(RF/6A)增殖及血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达的影响。方法:取体外培养的RF/6A细胞,分为NG+H0组(含有5.5mmol/L葡萄糖,HSYA的浓度为0mg/L)及HG+H0、HG+H18、HG+H37、HG+H73组(各组中均含有22mmol/L葡萄糖,HSYA的浓度分别为0,18,37,73mg/L)。培养24,48和72h,分别使用噻唑盐比色法(MTT)检测细胞增殖的活性。采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测各组中RF/6A细胞中VEGFmRNA的表达。结果:MTT检测结果表明,HSYA作用48h,HG+H37、HG+H73组细胞吸光度值均明显低于HG+H0组(P<0.01),随着HSYA浓度的增加,各组吸光度值降低。作用72h,HG+H18、HG+H37和HG+H73组细胞吸光度值均明显低于HG+H0组(P<0.01),随着HSYA浓度的增加,各组吸光度值降低,HG+H73组抑制作用最明显,其细胞吸光度值明显低于HG+H18和HG+H37组(分别为P<0.01和P<0.05)。RT-PCR实验结果表明:与HG+H0组相比,作用48h,HG+H37、HG+H73对RF/6A细胞VEGFmRNA表达的抑制作用显著(P<0.01);而作用72h,HG+H18、HG+H37和HG+H73对高糖诱导的VEGFmRNA的表达均有抑制作用(P<0.01)。结论:HSYA能够抑制高糖诱导的RF/6A细胞的增殖并下调高糖所致的VEGFmRNA表达升高,提示其可能机制是通过VEGF途经来实现的。 展开更多
关键词 糖尿病性视网膜病变 视网膜微血管内皮细胞 细胞增殖 羟基红花黄色素A
下载PDF
视网膜微血管内皮细胞在糖尿病视网膜病变中的研究现状 被引量：9
5
作者 刘子睿 张丽琼 +3 位作者 高丽园 马海燕 周媛 金鑫 《现代生物医学进展》 CAS 2014年第13期2590-2592,共3页
糖尿病视网膜疾病是导致成年人失明的主要因素,是糖尿病的一种令人恐惧的并发症,高血糖被认为是促进其发展的主要原因。高血糖不断地破坏视网膜的微血管系统最终导致视网膜的许多代谢,结构和功能的紊乱。视网膜微血管内皮细胞在微脉管... 糖尿病视网膜疾病是导致成年人失明的主要因素,是糖尿病的一种令人恐惧的并发症,高血糖被认为是促进其发展的主要原因。高血糖不断地破坏视网膜的微血管系统最终导致视网膜的许多代谢,结构和功能的紊乱。视网膜微血管内皮细胞在微脉管系统中形成树枝状供应视网膜神经,这些内皮细胞的解剖和生理符合重要视觉保护的营养需求[1]。一方面,内皮组织务必确保氧的供应和代谢活跃的视网膜营养供应;另一方面,内皮细胞有助于血-视网膜屏障将循环产生的毒素分子,白细胞促炎性物质排出体外来保护视网膜,这种特性也可能会引起疾病,比如:视网膜血管的渗漏和新生血管,炎性物质转移,因此,视网膜内皮细胞在视网膜缺血性病变,血管炎中起到重要作用,包括糖尿病视网膜病变和视网膜炎症或感染尤其是后葡萄膜炎。使用基因表达和蛋白质组学分析等研究方法,有助于了解这些疾病的发病机制。为了进一步开展对糖尿病视网膜疾病的研究,有必要就目前有关糖尿病视网膜病变患者微血管内皮细胞的研究进展予以综述,旨在为糖尿病视网膜病变的深入研究提供参考依据。 展开更多
关键词 视网膜微血管内皮细胞 血管内皮生长因子 糖尿病视网膜病变
原文传递
玄参提取物对糖尿病视网膜病变微血管内皮细胞损伤的影响及其作用机制
6
作者 阚悦铭 张珊珊 《世界中医药》 CAS 北大核心 2024年第12期1757-1765,共9页
目的:探讨玄参提取物抑制微小RNA-646(miR-646)改善微血管内皮细胞损伤缓解糖尿病视网膜水肿的影响及其作用机制。方法:根据简单随机化法将人视网膜微血管内皮细胞(HRMEC)细胞分为对照组、模型组(30 mmol/L葡萄糖)、观察组(30 mmol/L葡... 目的:探讨玄参提取物抑制微小RNA-646(miR-646)改善微血管内皮细胞损伤缓解糖尿病视网膜水肿的影响及其作用机制。方法:根据简单随机化法将人视网膜微血管内皮细胞(HRMEC)细胞分为对照组、模型组(30 mmol/L葡萄糖)、观察组(30 mmol/L葡萄糖+100μg/mL玄参提取物组)、模型+Anti-NC(转染Anti-NC+30 mmol/L葡萄糖)、模型+Anti-miR-646(转染Anti-miR-646+30 mmol/L葡萄糖)组;将30只小鼠根据简单随机化法分为对照组、模型组(60 mg/kg的链脲佐菌素)、观察组(60 mg/kg的链脲佐菌素+100 mg/kg-的玄参提取物),每组10只。比较各组细胞增殖,迁移及miR-646、血管内皮生长因子A(VEGFA)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血小板-内皮细胞黏附分子(CD31)表达;比较各组小鼠视网膜组织ICAM-1、CD31表达及视网膜组织水肿情况。结果:细胞实验结果显示,与对照组比较,模型组细胞miR-646、ICAM-1表达显著升高,VEGFA、CD31表达显著下降(均P<0.05);与模型组比较,观察组细胞miR-646、ICAM-1表达显著降低,VEGFA、CD31表达显著升高(均P<0.05);与模型+Anti-NC组比较,模型+Anti-miR-646组细胞增殖率、迁移细胞数及VEGFA表达显著增加,miR-646表达及凋亡率显著降低(均P<0.05)。动物实验结果显示,与对照组比较,模型组小鼠视网膜组织中miR-646、ICAM-1表达显著升高,VEGFA、CD31表达显著下降(均P<0.05),同时小鼠视网膜组织水肿情况加重;与模型组比较,观察组小鼠网膜组织中miR-646、ICAM-1表达显著降低,VEGFA、CD31表达显著升高(均P<0.05),同时小鼠视网膜组织水肿明显得到缓解。结论:玄参提取物可能通过miR-646/VEGFA机制调节HRMEC细胞增殖、迁移和凋亡,改善缓解糖尿病视网膜水肿。 展开更多
关键词 糖尿病视网膜病变 糖尿病视网膜水肿 玄参提取物 miR-646 视网膜微血管内皮细胞 增殖 凋亡 迁移
下载PDF
大鼠视网膜微血管内皮细胞的原代培养及鉴定改进 被引量：7
7
作者 胡健艳 吴强 +3 位作者 宋蓓雯 贾丽丽 陈永东 严良 《眼科》 CAS 2012年第4期261-263,共3页
目的探讨大鼠视网膜微血管内皮细胞原代培养改进方法,为研究视网膜新生血管疾病的病理机制奠定基础。设计实验研究。研究对象大鼠视网膜微血管内皮细胞。方法采用机械剪除大鼠视网膜血管联合酶消化分离,用含胎牛血清、内皮细胞培养特制... 目的探讨大鼠视网膜微血管内皮细胞原代培养改进方法,为研究视网膜新生血管疾病的病理机制奠定基础。设计实验研究。研究对象大鼠视网膜微血管内皮细胞。方法采用机械剪除大鼠视网膜血管联合酶消化分离,用含胎牛血清、内皮细胞培养特制添加剂等的条件培养基培养及纯化大鼠视网膜微血管内皮细胞,倒置相差显微镜下观察细胞生长状态。应用因子VIII、血小板内皮细胞黏附分子-1（CD31）免疫鉴定细胞。主要指标微血管内皮细胞形态,免疫荧光染色。结果原代培养的大鼠视网膜微血管内皮细胞贴壁后散在分布,呈单层排列,多为梭形,边界清楚,少量呈铺路石样螺旋向外生长,3-5天后融合,呈簇状单层分布。免疫荧光细胞染色显示,因子VIII抗体染色核周出现黄绿色荧光反应,CD31因子抗体染色以胞浆着色为主。细胞纯度较高,荧光染色阳性细胞率为95%。结论采用机械剪除大鼠视网膜血管、胰蛋白酶和胶原酶消化、含特制添加剂培养基的应用、明胶包被培养瓶等综合法可获得较纯的大鼠视网膜微血管内皮细胞。 展开更多
关键词 视网膜微血管内皮细胞 大鼠 细胞培养
原文传递
三七总皂苷对高糖诱导大鼠视网膜微血管内皮细胞损伤的保护作用 被引量：7
8
作者 乔园 段惠惠 +1 位作者 黄建梅 唐民科 《北京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期318-322,I0001,共6页
目的：观察三七总皂苷（ PNS）对高浓度葡萄糖致大鼠视网膜微血管内皮细胞（ RRCECs）损伤的保护作用和对细胞黏附分子－1（ICAM－1）的影响。方法体外原代培养RRCECs，并通过免疫荧光化学方法鉴定；用PNS作用于4-6代的RRCECs，实验分... 目的：观察三七总皂苷（ PNS）对高浓度葡萄糖致大鼠视网膜微血管内皮细胞（ RRCECs）损伤的保护作用和对细胞黏附分子－1（ICAM－1）的影响。方法体外原代培养RRCECs，并通过免疫荧光化学方法鉴定；用PNS作用于4-6代的RRCECs，实验分为正常组、高糖组（30 mmol／L）和高糖不同浓度PNS（20、50、100 mg／L）组，分别使用MTT比色法和台盼蓝计数法观察PNS对细胞活力及数目的影响，使用Western blotting检测药物作用前后ICAM－1的表达变化。结果 MTT比色法结果显示，PNS 50、100 mg／L作用48 h和72 h可明显减轻高糖造成的RRCECs损伤，提高RRCECs活力（P＜0．01）；台盼蓝计数结果显示，在PNS作用48 h后PNS 100 mg／L组细胞数目明显增加（P＜0．01），72 h后PNS 50、100 mg／L 组细胞数目均明显增加（ P＜0．05）。 Western blotting 检测显示，随着PNS药物浓度的增高，高糖环境下RRCECs中的ICAM－1表达量逐渐减少（ P＜0．05）。结论 PNS可以减轻高糖引起的RRCECs损伤，减少高糖环境下RRCECs中ICAM－1表达。 PNS对RRCECs的保护作用与ICAM－1表达调节之间的关系有待进一步研究。 展开更多
关键词 三七总皂苷 视网膜微血管内皮细胞 细胞间黏附分子-1 大鼠
原文传递
碳酸酐酶9对低氧诱导未足月胎儿视网膜微血管内皮细胞增殖影响的研究
9
作者 罗先琼 范弯弯 +2 位作者 王宁 陈娟 马健 《中华新生儿科杂志（中英文）》 CAS CSCD 2024年第1期38-44,共7页
目的探讨碳酸酐酶9(carbonic anhydrase 9,CA9)对低氧诱导未足月胎儿视网膜微血管内皮细胞(retinal microvascular endothelial cell,RMEC)增殖的影响。方法获取广东省妇幼保健院自然流产未足月胎儿眼球,分离视网膜并得到RMEC,使用CD34... 目的探讨碳酸酐酶9(carbonic anhydrase 9,CA9)对低氧诱导未足月胎儿视网膜微血管内皮细胞(retinal microvascular endothelial cell,RMEC)增殖的影响。方法获取广东省妇幼保健院自然流产未足月胎儿眼球,分离视网膜并得到RMEC,使用CD34进行内皮细胞鉴定。将得到的胎儿RMEC及购买的成人RMEC置于常氧及低氧培养箱(1%O_(2)+5%CO_(2)+94%N2)培养,使用实时荧光定量聚合酶链反应及蛋白质印迹法检测CA9的差异表达。使用小干扰RNA技术敲降CA9基因后,CCK-8法检测细胞增殖情况,加入CA9抑制剂U-104后CCK-8法检测细胞活率。结果成功提取原代RMEC,第三代细胞CD34免疫荧光染色阳性细胞计数近100%。未足月胎儿及成人RMEC低氧组CA9 mRNA表达量均高于常氧组(胎儿67.80±10.31比1.00±0.04,P<0.001;成人1.72±0.22比1.00±0.02,P=0.014);蛋白质印迹法检测可见未足月胎儿RMEC低氧组CA9表达量明显升高,与CA9 mRNA表达量相对应。在未足月胎儿RMEC转染siCA920 nM时,敲降效率可达95%(P<0.001)。CCK-8法检测敲降CA9基因48 h后对未足月胎儿RMEC增殖的影响,可见siCA9组OD值低于阴性对照siNC组(0.57±0.05比0.90±0.03,P<0.001)。加入100μM CA9抑制剂U-104,低氧+100μM U-104组未足月胎儿RMEC细胞活率低于低氧组(99.16%±3.82%比119.10%±1.72%,P=0.002)。结论在低氧诱导模型中,CA9在成人及未足月胎儿的RMEC表达不同,抑制CA9可抑制未足月胎儿RMEC增殖。 展开更多
关键词 早产儿视网膜病 碳酸酐酶9 视网膜微血管内皮细胞 低氧 细胞增殖
原文传递
二十烷二酸通过结合PPARδ介导ANGPTL4表达增多对人视网膜血管内皮细胞增殖和迁移的影响
10
作者 杨宇航 祁慧 +6 位作者 董利军 范梓欣 陆小凤 王明良 余震 雷和田 张国明 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2024年第9期679-685,共7页
目的 研究二十烷二酸(C20DC)对人视网膜内皮细胞(HREC)增殖、迁移能力的影响,并探讨其作用机制。方法 寻找C20DC干预人视网膜色素上皮-19(ARPE-19)细胞与HREC的最佳工作浓度,分别为30 mg·L^(-1)与25 mg·L^(-1)。将HREC分为C2... 目的 研究二十烷二酸(C20DC)对人视网膜内皮细胞(HREC)增殖、迁移能力的影响,并探讨其作用机制。方法 寻找C20DC干预人视网膜色素上皮-19(ARPE-19)细胞与HREC的最佳工作浓度,分别为30 mg·L^(-1)与25 mg·L^(-1)。将HREC分为C20DC处理组(C20DC干预HREC)和对照组[二甲基亚砜(DMSO)干预HREC],通过细胞增殖和迁移实验观察C20DC对HREC迁移及增殖能力的影响;采用分子对接方法模拟C20DC与PPARδ的结合能力;将ARPE-19细胞设为C20DC+ARPE-19组(C20DC干预ARPE-19细胞)与DMSO+ARPE-19组(DMSO干预ARPE-19细胞),采用Western blot检测ARPE-19细胞中PPARδ和血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)蛋白,以及HREC中ANGPTL4蛋白表达水平;采用ELISA定量分析ARPE-19细胞与HREC中ANGPTL4蛋白表达水平。结果 与对照组相比,C20DC处理组细胞增殖、迁移能力均显著提高(均为P<0.05),且可与PPARδ结合稳定(结合能为-7.2 kcal·mol^(-1));Western blot检测结果提示,C20DC+ARPE-19组细胞中ANGPTL4蛋白表达量高于DMSO+ARPE-19组,差异有统计学意义(P<0.05),两组PPARδ受体蛋白表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05);C20DC处理组细胞中ANGPTL4蛋白表达量高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。ELISA定量分析检测结果显示,C20DC+ARPE-19组细胞中ANGPTL4表达量高于DMSO+ARPE-19组(P<0.001);C20DC处理组细胞中ANGPTL4的表达量高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 C20DC可结合PPARδ促进ANGPTL4蛋白的表达,导致视网膜相关细胞(HREC与ARPE-19细胞)增殖与迁移能力增强,其作用机制可能与早产儿视网膜病变新生血管生成增多有关。 展开更多
关键词 二十烷二酸(C20DC) 早产儿视网膜病变 血管生成素样蛋白4 过氧化物酶体增殖物激活受体 脂肪酸 视网膜微血管内皮细胞
下载PDF
Tumstatin肽对视网膜微血管内皮细胞迁移及P38MAPK蛋白表达的影响 被引量：6
11
作者 黄敏丽 罗国容 +2 位作者 陈维平 何少健 陈芳 《国际眼科杂志》 CAS 2008年第1期64-67,共4页
目的:观察tumstatin肽对体外培养的视网膜微血管内皮细胞迁移及P38MAPK蛋白表达的影响,初步探讨tumstatin肽抗视网膜内皮细胞迁移的机制。方法:采用细胞划痕实验测定tumstatin肽(T8肽)对血管内皮生长因子(VEGF)诱导下RF/6A细胞(恒河猴... 目的:观察tumstatin肽对体外培养的视网膜微血管内皮细胞迁移及P38MAPK蛋白表达的影响,初步探讨tumstatin肽抗视网膜内皮细胞迁移的机制。方法:采用细胞划痕实验测定tumstatin肽(T8肽)对血管内皮生长因子(VEGF)诱导下RF/6A细胞(恒河猴视网膜微血管内皮细胞)迁移的影响;Western blotting检测T8肽对VEGF刺激后15,30,45,60min的RF/6A细胞P38MAPK蛋白水平的变化。结果:Tumstatin肽对RF/6A细胞迁移具有抑制作用,且可抑制VEGF对RF/6A细胞的促迁移作用,呈剂量依赖性。正常情况下,RF/6A细胞无P38MAPK蛋白的表达,但VEGF可诱导其表达P38MAPK蛋白,而tumstatin可抑制VEGF诱导的RF/6A细胞P38MAPK蛋白的表达(加入20mg/LT8肽30,45,60min时蛋白表达受到显著抑制,差异有显著性意义,P<0.01)。结论:Tumstatin抑制视网膜微血管内皮细胞的迁移,其作用可能与P38MAPK通路有关。 展开更多
关键词 TUMSTATIN 视网膜微血管内皮细胞 迁移 P38MAPK
下载PDF
静态压力对大鼠视网膜微血管内皮细胞内皮素-1和NO表达的影响 被引量：6
12
作者 郭斌 王应利 +2 位作者 牛超 惠延年 范钦华 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2010年第2期140-144,共5页
目的观察静态压力变化对大鼠视网膜微血管内皮细胞(RMECs)形态、增生活性及分泌血管活性物质内皮素-1(ET-1)和一氧化氮合酶(NOS)的影响。方法体外培养并鉴定大鼠RMECs,分为A(1.33kPa)、B(2.67kPa)、C(5.33kPa)和D(10.67kPa)组和未加压... 目的观察静态压力变化对大鼠视网膜微血管内皮细胞(RMECs)形态、增生活性及分泌血管活性物质内皮素-1(ET-1)和一氧化氮合酶(NOS)的影响。方法体外培养并鉴定大鼠RMECs,分为A(1.33kPa)、B(2.67kPa)、C(5.33kPa)和D(10.67kPa)组和未加压对照组。用倒置相差显微镜观察细胞形态的变化,常规方法进行细胞计数,锥虫蓝染色检测活细胞比例。用Griess硝酸还原酶法检测NO代谢产物NO2-/NO3-的含量,放射免疫法检测培养细胞的ET-1蛋白表达;用RT-PCR法半定量研究RMECs中ET-1、eNOS、iNOSmRNA的表达。结果B、C、D组RMECs细胞核膨大,胞体拉长,可见少量悬浮细胞;静态压力促进RMECs增生(F=12.205,P<0.01),C组和D组细胞数量高于对照组、A组和B组(P<0.01);静态压力升高造成各组细胞损伤,拒染率降低(F=11.180,P<0.01),B、C、D组细胞拒染率低于对照组(P<0.05)。B、C、D组ET-1浓度较对照组增加(P<0.01)。C组和D组RMECs培养液中NO2-/NO3-浓度高于对照组(P<0.01)。B、C、D组RMECs中ET-1mRNA表达较对照组升高,差异有统计学意义(P<0.01);C组和D组RMECs中eNOSmRNA和iNOSmRNA表达较对照组升高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论高静态压力可直接导致RMECs的结构损伤,高静态压力下RMECs合成ET-1、NO增多可能是高眼压眼底病变的机制之一。 展开更多
关键词 视网膜微血管内皮细胞 内皮素-1 一氧化氮 静态压力 青光眼
下载PDF
基于腺苷酸活化蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白通路探讨柚皮素对视网膜微血管内皮细胞的损伤机制研究
13
作者 王海潼 刘建亮 《实用临床医药杂志》 CAS 2024年第3期23-28,共6页
目的 基于腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路探讨柚皮素(NAR)对人视网膜微血管内皮细胞(HRMECs)的损伤机制。方法 将HRMECs随机分为对照组、高糖(HG)组、HG+NAR组(3 mg/L NAR)、HG+激活剂(AICAR)组(1 mmol/L A... 目的 基于腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路探讨柚皮素(NAR)对人视网膜微血管内皮细胞(HRMECs)的损伤机制。方法 将HRMECs随机分为对照组、高糖(HG)组、HG+NAR组(3 mg/L NAR)、HG+激活剂(AICAR)组(1 mmol/L AICAR)、HG+NAR+AICAR组(3 mg/L NAR+1 mmol/L AICAR);除对照组向培养基中加入5 mmol/L的D-葡萄糖处理外,其他各组均向培养基中加入30 mmol/L的D-葡萄糖处理。采用CCK-8及Transwell分别检测细胞增殖及迁移情况;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上清液中白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测自噬因子LC3 mRNA、p62 mRNA表达水平;采用蛋白质免疫印迹(Western blot)检测AMPK/mTOR通路及自噬相关蛋白表达水平。结果 与对照组相比,HG组细胞活力,迁移数,IL-1β、IL-6和TNF-α水平,p-AMPK/AMPK,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ,LC3 mRNA表达增加,p-mTOR/mTOR、p62蛋白及p62 mRNA表达下降,差异有统计学意义(P<0.05);与HG组相比,HG+NAR组细胞活力,迁移数,IL-1β、IL-6和TNF-α水平,p-AMPK/AMPK,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ,LC3 mRNA表达下降,p-mTOR/mTOR、p62蛋白及p62 mRNA表达增加,但HG+AICAR组细胞活力,迁移数,IL-1β、IL-6和TNF-α水平,p-AMPK/AMPK,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达增加,p-mTOR/mTOR、p62蛋白及p62 mRNA表达下降,差异有统计学意义(P<0.05);与HG+NAR组相比,HG+NAR+AICAR组细胞活力,迁移数,IL-1β、IL-6和TNF-α水平,p-AMPK/AMPK,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ,LC3 mRNA表达增加,p-mTOR/mTOR、p62蛋白及p62 mRNA表达下降,差异有统计学意义(P<0.05);与HG+AICAR组相比,HG+NAR+AICAR组细胞活力,迁移数,IL-1β、IL-6和TNF-α水平,p-AMPK/AMPK,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ,LC3 mRNA表达下降,p-mTOR/mTOR、p62蛋白及p62 mRNA表达增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 NAR可减轻HG诱导的HRMECs损伤,其机制可能与抑制AMPK/mTOR通路介导的自噬有关。 展开更多
关键词 柚皮素 视网膜微血管内皮细胞 腺苷酸活化蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白通路 自噬
下载PDF
缺氧条件下视网膜微血管内皮细胞中缺氧诱导因子1和血管内皮生长因子mRNA表达的研究 被引量：5
14
作者 孙旭芳 曾水清 +4 位作者 张虹 杨红 程阳 李小青 李贵刚 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期825-827,共3页
目的探讨视网膜微血管细胞在缺氧过程中缺氧诱导因子1(HIF1)和血管内皮生长因子(VEGF)基因mRNA水平表达的变化。方法视网膜微血管细胞(RECs)分别在正常氧、缺氧3h不同条件下培养后,应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法半定量测定HIF1α... 目的探讨视网膜微血管细胞在缺氧过程中缺氧诱导因子1(HIF1)和血管内皮生长因子(VEGF)基因mRNA水平表达的变化。方法视网膜微血管细胞(RECs)分别在正常氧、缺氧3h不同条件下培养后,应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法半定量测定HIF1α和VEGF基因的mRNA水平的表达。结果缺氧组RECsHIF1基因的mRNA水平表达为对照组的4.6倍。同时缺氧组RECs细胞的VEGF基因的mRNA水平表达为对照组的3倍。结论缺氧能引起视网膜微血管细胞的HIF-1及VEGF基因mRNA水平高表达,提示缺氧可能通过HIF1基因的转录途径来诱发VEGF基因的高表达导致视网膜新生血管形成。 展开更多
关键词 缺氧 缺氧诱导因子1 血管内皮生长因子 视网膜微血管内皮细胞
下载PDF
共培养系统中视网膜微血管周细胞经KDR/Flk-1途径对内皮细胞增生的影响(英文) 被引量：5
15
作者 王应利 惠延年 +3 位作者 郭斌 张晓光 侯旭 马吉献 《国际眼科杂志》 CAS 2006年第2期255-263,共9页
目的:采用细胞共培养模型研究缺氧诱导视网膜新生血管生成过程中周细胞对微血管内皮细胞增生的作用及其相关血管内皮细胞生长因子受体2(KDR/Flk-1)调节机制。方法:免疫磁珠法原代分离培养大鼠视网膜微血管内皮细胞和周细胞,分别采用抗V... 目的:采用细胞共培养模型研究缺氧诱导视网膜新生血管生成过程中周细胞对微血管内皮细胞增生的作用及其相关血管内皮细胞生长因子受体2(KDR/Flk-1)调节机制。方法:免疫磁珠法原代分离培养大鼠视网膜微血管内皮细胞和周细胞,分别采用抗VIII因子、CD31抗体以及抗血小板源性生长因子受体β、结蛋白抗体免疫细胞化学法鉴定内皮细胞和周细胞。通过Millicell小室建立周细胞和内皮细胞共培养模型,使用MTT法和流式细胞仪检测内皮细胞增殖数量及周期,观察缺氧和常氧下周细胞对血管内皮细胞增生的影响,并采用RT-PCR法检测内皮细胞KDR/Flk-1的mRNA水平变化,探讨相关调节机制。结果:经免疫细胞化学法鉴定,免疫磁珠法可获得高纯度的视网膜微血管内皮细胞和周细胞。MTT法显示,缺氧3～9d内皮细胞增生明显,6d增生达高峰(24.9%,P<0.01);共培养时内皮细胞的增生可被周细胞抑制。流式细胞仪检测发现,缺氧6dS期内皮细胞数量明显增加(43.9%,P<0.01);常氧(3.6%,P<0.05)或缺氧(15.1%,P<0.01)共培养时,周细胞均可抑制内皮细胞增生。缺氧下内皮细胞KDR/Flk-1的mRNA水平是常氧下的1.3倍;常氧(45.1%,P<0.05)和缺氧(27.7%,P<0.05)共培养下,周细胞均可下调内皮细胞KDR/Flk-1的mRNA表达。结论:缺氧和常氧共培养时周细胞均可抑制微血管内皮细胞增生,此抑制作用部分是通过下调内皮细胞KDR/Flk-1mRNA表达实现。 展开更多
关键词 周细胞 视网膜微血管内皮细胞 共培养 增生 KDR/FLK-1 血管生成 缺氧
下载PDF
银杏内酯B对高糖低氧诱导视网膜内皮细胞损伤的保护作用及其机制 被引量：5
16
作者 陈泰弘 李荣 《临床与病理杂志》 2018年第2期251-256,共6页
目的:探讨银杏内酯B(Ginkgolide B,GKB)对高糖低氧所致人视网膜内皮细胞(human retinal endothelial cel ls,HREC)损伤的保护作用。方法:建立高糖低氧诱导HREC损伤模型,然后经CCK-8法筛选GKB的最佳作用时间与浓度。ELISA检测TNF-α,ICAM... 目的:探讨银杏内酯B(Ginkgolide B,GKB)对高糖低氧所致人视网膜内皮细胞(human retinal endothelial cel ls,HREC)损伤的保护作用。方法:建立高糖低氧诱导HREC损伤模型,然后经CCK-8法筛选GKB的最佳作用时间与浓度。ELISA检测TNF-α,ICAM-1,IL-6的水平来评估炎症反应;流式细胞术检测细胞的凋亡情况;Western印迹检测PI3K/AKT/mTOR信号通路的活性。结果:与正常对照组相比,高糖低氧模型组细胞活力显著降低,GKB处理可逆转高糖低氧所致的内皮细胞活力降低。高糖低氧模型组细胞的凋亡率显著增加,且细胞内炎症因子TNF-α,ICAM-1,IL-6的表达明显升高;而给予GKB处理后,细胞的凋亡率降低,TNF-α,ICAM-1,IL-6的水平部分回落。此外,高糖低氧模型组细胞中p-AKT,p-PI3K和p-mTOR表达降低;经GKB处理后细胞中p-PI3K,p-AKT和p-mTOR表达升高与蛋白的表达部分下降;给予AKT信号通路激动剂胰岛素样生长因子(insulin-like growth factor-1,IGF-1)可促进GKB的保护作用,并增加细胞活力。结论:GKB可显著对抗高糖低氧所致的视网膜内皮细胞凋亡损伤与炎症反应,其损伤保护作用可能与活化PI3K/AKT/mTOR信号通路有关。 展开更多
关键词 银杏内酯B 视网膜微血管内皮细胞 凋亡 炎症反应 PI3K/AKT/mTOR信号通路
下载PDF
补阳还五汤对高糖环境下miR-21介导的人视网膜微血管内皮细胞自噬的影响 被引量：4
17
作者 石颖 陈子扬 +3 位作者 陈凯铭 胡艳红 胡俊 陈胜 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2022年第11期858-862,共5页
目的观察补阳还五汤对高糖环境下miR-21介导的人视网膜微血管内皮细胞(HRCECs)自噬的影响,以期为DR自噬调控机制及药物治疗提供依据。方法HRCECs随机分5组,即正常对照组、高糖组、补阳还五汤组、miR-21 mimic组、miR-21 mimic+补阳还五... 目的观察补阳还五汤对高糖环境下miR-21介导的人视网膜微血管内皮细胞(HRCECs)自噬的影响,以期为DR自噬调控机制及药物治疗提供依据。方法HRCECs随机分5组,即正常对照组、高糖组、补阳还五汤组、miR-21 mimic组、miR-21 mimic+补阳还五汤组。除正常对照组外,其余各组细胞于25.0 g·L^(-1)葡萄糖环境中培养,建立高糖损伤模型,补阳还五汤组加用5 g·L^(-1)补阳还五汤水提液干预;miR-21 mimic组孵育转染miR-21 mimic的HRCECs;miR-21 mimic+补阳还五汤组用5 g·L^(-1)补阳还五汤水提液干预转染miR-21 mimic的HRCECs。荧光显微镜下观察转染效率,实时荧光定量PCR检测各组细胞中miR-21的表达,Western blot检测各组细胞中LC3蛋白表达。结果经转染miR-21 mimic后,大部分HRCECs呈绿色荧光,荧光强度为32.708±1.001。实时荧光定量PCR检测结果显示,miR-21 mimic组HRCECs的miR-21相对表达量为106.677±5.787,明显高于高糖组(5.892±0.341)和正常对照组(0.993±0.015),差异均有统计学意义(均为P<0.05)。高糖组和miR-21 mimic组HRCECs中LC3蛋白相对表达量均较正常对照组升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05),且miR-21 mimic组HRCECs中LC3蛋白相对表达量高于高糖组(P=0.001)。补阳还五汤组HRCECs中LC3蛋白相对表达量低于高糖组和miR-21 mimic组(均为P<0.05),与正常对照组比较差异无统计学意义(P=0.197)。miR-21 mimic+补阳还五汤组HRCECs中LC3蛋白相对表达量低于miR-21 mimic组,但高于补阳还五汤组,差异均有统计学意义(均为P<0.05),与高糖组比较差异无统计学意义(P=0.930)。结论高糖环境下,miR-21介导HRCECs的自噬,补阳还五汤可以下调HRCECs的miR-21表达,进而减少细胞自噬。 展开更多
关键词 补阳还五汤 MIR-21 自噬 高糖 视网膜微血管内皮细胞
下载PDF
miR-155/PTEN轴在高糖诱导HRCEC凋亡中的作用及机制 被引量：3
18
作者 蔡文丽 谢红波 《中国中医眼科杂志》 2022年第5期337-342,363,共7页
目的研究微小RNA-155(miR-155)/磷脂酶和张力蛋白同源物(PTEN)在高糖诱导视网膜微血管内皮细胞(HRCEC)凋亡中的作用及机制。方法培养HRCEC并分为miRNC组、miR-NC+高糖组、miR-155+高糖组、miR-NC+空白质粒组、miR-NC+空白质粒+高糖组、m... 目的研究微小RNA-155(miR-155)/磷脂酶和张力蛋白同源物(PTEN)在高糖诱导视网膜微血管内皮细胞(HRCEC)凋亡中的作用及机制。方法培养HRCEC并分为miRNC组、miR-NC+高糖组、miR-155+高糖组、miR-NC+空白质粒组、miR-NC+空白质粒+高糖组、miR-155+空白质粒组+高糖组、miR-155+PTEN质粒组+高糖组,转染阴性对照(NC)序列、miR-155模拟物、空白质粒、PTEN质粒。转染后,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测miR-155表达水平,四唑氮化合物(MTS)法检测细胞活力,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测细胞凋亡率,WesternBlot检测PTEN、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达水平,双荧光素酶报告基因验证miR-155靶向PTEN基因mRNA 3’UTR。结果(1)miR-155表达:与miR-NC+高糖组比较,转染miR-155模拟物显著增加高糖环境下HRCEC中miR-155的表达,差异具有统计学意义(t=4.069,P=0.004);(2)细胞活力:与miRNC+高糖组比较,转染miR-155模拟物显著提高高糖环境下HRCEC的OD_(490)水平、抑制细胞凋亡,差异均有统计学意义(t_(OD490)=2.907,P=0.020;t_(凋亡率)=5.957,P=0.000);与miR-155+空白质粒组+高糖组比较,转染miR-155模拟物及PTEN质粒显著降低高糖环境下HRCEC的OD_(490)水平、促进细胞凋亡,差异均有统计学意义(t_(OD490)=3.777,P=0.005;t_(凋亡率)=6.406,P=0.000);(3)PTEN通路:与miR-NC+高糖组比较,转染miR-155模拟物显著抑制高糖环境下HRCEC中PTEN的表达,增加p-AKT、eNOS的表达,差异均有统计学意义(t_(PTEN)=3.855,P=0.005;tp-AKT=6.450,P=0.000;t_(eNOS)=4.875,P=0.001)。结论高糖环境下HRCEC凋亡激活且miR-155表达减少、PTEN表达增加,过表达miR-155能够靶向抑制PTEN并抑制高糖诱导的HRCEC凋亡。 展开更多
关键词 糖尿病视网膜病变 视网膜微血管内皮细胞 MIR-155 凋亡 磷脂酶和张力蛋白同源物 靶基因
下载PDF
基于正交实验设计补阳还五汤水提液对高糖培养视网膜微血管内皮细胞活性影响
19
作者 曹俊昌 石颖 +2 位作者 胡艳红 胡俊 陈胜 《福建中医药》 2023年第11期55-58,共4页
目的基于正交实验筛选高糖损伤模型的最佳葡萄糖干预浓度、补阳还五汤水提液(BYHWT)保护高糖诱导视网膜微血管内皮细胞(HRCECs)损伤的最佳浓度及最佳作用时间。方法CCK8法检测4.5、5、10、15、20、25 mg/mL葡萄糖浓度和0、5、10、15.625... 目的基于正交实验筛选高糖损伤模型的最佳葡萄糖干预浓度、补阳还五汤水提液(BYHWT)保护高糖诱导视网膜微血管内皮细胞(HRCECs)损伤的最佳浓度及最佳作用时间。方法CCK8法检测4.5、5、10、15、20、25 mg/mL葡萄糖浓度和0、5、10、15.625、31.25、62.5、125、250 mg/mL BYHWT浓度对HRCECs细胞增殖的影响。采用L9(34)正交实验设计以葡萄糖浓度、BYHWT浓度及孵育时间为影响因素,以OD值为评价指标,优选出高糖损伤模型的最佳葡萄糖干预浓度、BYHWT防护高糖损伤HRCECs的最佳浓度及最佳作用时间。根据正交实验优选出的葡萄糖浓度和BYHWT浓度,将HRCECs细胞分为正常组、模型组(优选葡萄糖浓度)与干预组(优选葡萄糖浓度+优选BYHWT浓度),培养24、48、72 h,每日换液1次,CCK8法测定3组细胞不同时间的OD值。结果①与4.5 mg/mL组比较,25 mg/mL葡萄糖浓度干预HRCECs细胞24、48、72 h后OD值均明显降低(P<0.05),提示该浓度可引起细胞损伤。与0 mg/mL组比较,5 mg/mL BYHWT干预24 h,10、15.625 mg/mL BYHWT干预48、72 h后OD值均明显提高(P<0.05),提示该浓度可促进增殖。②筛选正交实验可知,影响细胞增殖活性的主次因素为孵育时间>葡萄糖浓度>BYHWT浓度,选择25 mg/mL葡萄糖浓度建立高糖损伤模型,选择5 mg/mL BYHWT浓度干预细胞,观察细胞增殖活性,筛选干预时间。③与正常组比较,模型组干预24、48、72 h后OD值明显降低(P<0.05);干预组干预24、48 h后OD值明显升高(P<0.05),干预72 h后明显降低(P<0.05)。与模型组比较,干预组干预24、48、72 h后OD值明显升高(P<0.05)。结论25 mg/mL葡萄糖培养的HRCECs细胞可以作为高糖损伤模型,5 mg/mL BYHWT干预24 h可以用于研究其对高糖诱导HRCECs损伤的保护作用。 展开更多
关键词 补阳还五汤 高糖 视网膜微血管内皮细胞 正交实验设计
下载PDF
PEDF对大鼠视网膜血管内皮细胞迁移及VEGF表达的影响 被引量：4
20
作者 张杰 杨旭东 申梅淑 《牡丹江医学院学报》 2010年第2期9-10,共2页
目的:观察PEDF对体外培养的视网膜微血管内皮细胞迁移及VEGF蛋白表达的影响,初步探讨PEDF抗视网膜内皮细胞迁移的机制。方法:采用细胞划痕实验测定PEDF对糖尿病大鼠视网膜微血管内皮细胞迁移的影响;RT-PCR检测PEDF刺激后15,30,45,60min... 目的:观察PEDF对体外培养的视网膜微血管内皮细胞迁移及VEGF蛋白表达的影响,初步探讨PEDF抗视网膜内皮细胞迁移的机制。方法:采用细胞划痕实验测定PEDF对糖尿病大鼠视网膜微血管内皮细胞迁移的影响;RT-PCR检测PEDF刺激后15,30,45,60min大鼠视网膜微血管内皮细胞的VEGF水平的变化。结果:PEDF对糖尿病大鼠视网膜微血管内皮细胞迁移具有抑制作用,且可抑制VEGF对糖尿病大鼠视网膜微血管内皮细胞促迁移作用,呈剂量依赖性。结论:PEDF抑制糖尿病大鼠视网膜微血管内皮细胞的迁移,其作用可能与VEGF水平有关。 展开更多
关键词 细胞色素上皮衍生因子 视网膜微血管内皮细胞 迁移
下载PDF
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 2 … 5 下一页 到第 页
使用帮助 返回顶部