一种DNA染料结合聚合酶链反应检测鉴别植物病原细菌死活细胞 被引量：18

1

作者 冯建军 金志娟 +2 位作者 刘西莉 Norm W．Schaad 李健强 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2008年第5期944-948,共5页

建立了一种将DNA染料(EMA)结合PCR的新分析方法,用于有效检测区分植物病原细菌死活细胞.结果表明,当用2.0 mg/L或更高浓度的EMA渗透处理含有106cfu/mL的死细胞菌悬液后再曝光处理10 min,其PCR结果呈阴性,而未经过EMA渗透处理的对应样品... 建立了一种将DNA染料(EMA)结合PCR的新分析方法,用于有效检测区分植物病原细菌死活细胞.结果表明,当用2.0 mg/L或更高浓度的EMA渗透处理含有106cfu/mL的死细胞菌悬液后再曝光处理10 min,其PCR结果呈阴性,而未经过EMA渗透处理的对应样品PCR结果呈阳性;EMA渗透处理含有适当数量病菌活细胞的种子浸泡液后,更有助于特异性检测混合体系中靶标菌活细胞.分析认为,该方法避免了传统PCR无法区分细菌死活细胞的弊端,是一种快速、灵敏且能有效鉴别病原细菌死活细胞的新方法. 展开更多

关键词 ETHIDIUM monoazide 相互作用 西瓜细菌性果斑病 聚合酶链反应 死活细胞

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种子引发处理对无籽西瓜幼苗生长的影响和对细菌性果斑病菌消毒的效果 被引量：19

2

作者 冯建军 陈坤杰 +3 位作者 金志娟 许勇 周向阳 李健强 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期528-534,共7页

种子出苗率低和传带细菌性果斑病菌是制约三倍体无籽西瓜生产的主要原因。本试验利用KMnO4、CuSO4和ZnSO4的不同浓度溶液对无籽西瓜种子进行不同时间引发处理,通过滤纸发芽试验,观测其对种子发芽和幼苗生长的促进作用;借助平板法测定引... 种子出苗率低和传带细菌性果斑病菌是制约三倍体无籽西瓜生产的主要原因。本试验利用KMnO4、CuSO4和ZnSO4的不同浓度溶液对无籽西瓜种子进行不同时间引发处理,通过滤纸发芽试验,观测其对种子发芽和幼苗生长的促进作用;借助平板法测定引发溶液对细菌性果斑病菌FC247的抑制作用,免疫凝聚试纸条和传统PCR检测引发处理对种子人工接菌FC247的消毒效果。结果表明:0.1%CuSO4溶液引发处理4 h和0.2%ZnSO4溶液引发处理24 h,分别比未引发处理的无籽西瓜种子发芽率提高71.1%和73.3%,并能显著提高发芽整齐度和幼苗素质;同时,引发溶液对细菌性果斑病菌有显著抑制作用,并对人工接菌种子表现出一定程度的消毒效果。 展开更多

关键词 三倍体无籽西瓜 种子引发 消毒 西瓜细菌性果斑病

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巢式PCR快速检测西瓜细菌性果斑病菌 被引量：15

3

作者 王婧 毕阳 +4 位作者 朱艳 韩舜愈 祝霞 盛文军 李敏 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期284-291,共8页

【目的】建立nested-PCR方法,快速检测西瓜种子中的燕麦嗜酸菌西瓜亚种(Acidovorax avenae subsp.citrulli,Aac),为西瓜细菌性果斑病(bacterial fruit blotch of watermelon,WFB)的防控提供技术支持。【方法】根据Aac BOX短重复序列的PC... 【目的】建立nested-PCR方法,快速检测西瓜种子中的燕麦嗜酸菌西瓜亚种(Acidovorax avenae subsp.citrulli,Aac),为西瓜细菌性果斑病(bacterial fruit blotch of watermelon,WFB)的防控提供技术支持。【方法】根据Aac BOX短重复序列的PCR产物设计两对引物BX-L1/BX-R5和BX-L1/BX-S-R2,建立以BX-L1/BX-R5为外侧引物,BX-L1/BX-S-R2为内侧引物的nested-PCR,以5μL样品处理液于99℃高温裂解10 min,再放置冰上冷却5 min,以所释放病原DNA为模板进行PCR扩增,采用50μL反应体系:5μL 10×PCR buffer(25 mmol·L-1MgCl2),4μL dNTP(D4030RA,2.5 mmol·L-1),引物(5μmol·L-1)各3μL,0.4μL Taq DNA酶(DR001B,5 U·μL-1),通过退火温度优化,反应条件为:引物BX-L1/BX-R5各3μL进行第一轮扩增,95℃,2 min;95℃,30 s;65℃,45s;72℃,1 min;35个循环;72℃,延伸7 min;取扩增后的产物1μL为模板,以引物BX-L1/BX-S-R2各3μL进行第二轮扩增,95℃,2 min;95℃,30 s,66℃,45 s,72℃,1 min,30个循环,72℃,7 min。在此条件下对梯度Aac菌悬液、模拟带菌种子提取液进行特异性、灵敏性及重复性检验,对不同带菌率的西瓜种子提取液进行检测。【结果】引物BX-L1/BX-R5和BX-L1/BX-S-R2在检测不同来源的Aac菌株时都产生了预期大小的片段,并且对其近源种燕麦嗜酸菌卡特莱兰亚种(A.avenae subsp.cattleyae)、魔芋假单胞菌(A.avenae subsp.konjaci)及其不相关菌株未扩增出目标片段。以BX-L1/BX-R5为外侧引物,BX-L1/BX-S-R2为内侧引物的nested-PCR,对Aac纯菌液和模拟带菌种子提取液的最低检测限4.7×101cfu/mL,比direct-PCR灵敏度高出1 000倍。当西瓜种子带菌率在0.1%—0.5%时,nested-PCR阳性检测率为66.7%;当种子带菌率为1%—10%时,nested-PCR的阳性检测率为83%—100%。【结论】以BX-L1/BX-R5为外侧引物,BX-L1/BX-S-R2为内侧引物的nested-PCR方法,能够快速、高效检测携带微量Aac的西瓜种子,检测结果重现性高。 展开更多

关键词 西瓜细菌性果斑病 西瓜种子 PCR 检测

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西瓜细菌性果斑病菌快速免疫PCR检测 被引量：13

4

作者 宋蕤 刘箐 +5 位作者 刘雅莉 文朝慧 王军平 张丽萍 侯建雄 刘志杰 《植物检疫》 北大核心 2009年第2期4-6,共3页

对种子携带的西瓜细菌性果斑病菌(Acidovorax avenaesubsp.citrulli)进行简单抽提和纯化,不经过DNA提取而以病原菌为模板进行PCR检测。结果显示,对带菌种子提取液采用直接PCR法最低检出限为3600个细菌/mL,而免疫PCR最低检出限可达到600... 对种子携带的西瓜细菌性果斑病菌(Acidovorax avenaesubsp.citrulli)进行简单抽提和纯化,不经过DNA提取而以病原菌为模板进行PCR检测。结果显示,对带菌种子提取液采用直接PCR法最低检出限为3600个细菌/mL,而免疫PCR最低检出限可达到600个细菌/mL。免疫PCR法可以有效富集病原后再扩增,方便快速,成本低,灵敏度高,适用于种子携带微量的西瓜细菌性果斑病菌的快速鉴定。 展开更多

关键词 西瓜细菌性果斑病 免疫PCR 快速检测

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西瓜细菌性果斑病菌在不同场所存活期的检测 被引量：12

5

作者 李艳嫦 孔静月 +3 位作者 吴九玲 王琳 任小平 刘琼光 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期332-336,共5页

选择西瓜细菌性果斑病菌(Acidovorax avenae subsp.citrulli,Aac)的抗利福平菌株RifAac,通过人工模拟接种试验,采用选择性平板分离、菌落PCR(Bio-PCR)和常规PCR方法,观察该病原细菌在西瓜种子、土壤、病残体和田水中的存活期。结果表明... 选择西瓜细菌性果斑病菌(Acidovorax avenae subsp.citrulli,Aac)的抗利福平菌株RifAac,通过人工模拟接种试验,采用选择性平板分离、菌落PCR(Bio-PCR)和常规PCR方法,观察该病原细菌在西瓜种子、土壤、病残体和田水中的存活期。结果表明,果斑病细菌在种子表面可存活4～5个月,在田水中可存活2个月,在不含植物残体的土壤中可存活8个月,在含西瓜残体的土壤中可以存活12个月以上。 展开更多

关键词 西瓜细菌性果斑病 燕麦嗜酸菌西瓜亚种 存活期 菌落PCR 检测

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西瓜细菌性果斑病拮抗内生细菌的分离和筛选 被引量：8

6

作者 蔡学清 鄢凤娇 +1 位作者 林玉 胡方平 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2009年第5期465-470,共6页

从葫芦科作物及空心菜的叶片、茎及花上共分离到95个菌株,采用抑菌圈法共筛选到对西瓜细菌性果斑病病原菌具有不同程度拮抗作用的菌株46株,占分离菌株总数的48.4%;从拮抗菌株中筛选出5株对西瓜细菌性果斑病菌具有较好拮抗效果的菌株,其... 从葫芦科作物及空心菜的叶片、茎及花上共分离到95个菌株,采用抑菌圈法共筛选到对西瓜细菌性果斑病病原菌具有不同程度拮抗作用的菌株46株,占分离菌株总数的48.4%;从拮抗菌株中筛选出5株对西瓜细菌性果斑病菌具有较好拮抗效果的菌株,其对西瓜细菌性果斑病的防治效果为68.75%-93.24%.内生性测定结果表明这5株菌株均能在西瓜体内定殖,5株菌株经过革兰氏染色、鞭毛染色、芽孢染色和一些生理生化测定,初步被确定为芽孢杆菌属(Bacillus spp.). 展开更多

关键词 西瓜细菌性果斑病 拮抗 内生细菌 芽孢杆菌

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甘肃省西瓜细菌性果斑病的诊断 被引量：10

7

作者 薛莉 杨成德 +2 位作者 陈秀蓉 贾迎春 雒东林 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期53-57,共5页

对从甘肃采集到的疑似西瓜果斑病的病瓜及种子中分离获得的菌株,通过形态学特征、革兰氏染色、致病性测定以及利用美国Agdia公司的专化型免疫凝聚试剂条测定和16S rDNA分子生物学方法进行了诊断鉴定,结果表明,该菌株符合燕麦噬酸菌西瓜... 对从甘肃采集到的疑似西瓜果斑病的病瓜及种子中分离获得的菌株,通过形态学特征、革兰氏染色、致病性测定以及利用美国Agdia公司的专化型免疫凝聚试剂条测定和16S rDNA分子生物学方法进行了诊断鉴定,结果表明,该菌株符合燕麦噬酸菌西瓜亚种(Acidovorax avenaesub sp.citrulli)的特性,因此,确定甘肃省已发生西瓜果斑病,结果为甘肃省有效控制此病提供了依据。 展开更多

关键词 西瓜细菌性果斑病 致病性测定 形态特征 16S rDNA鉴定

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生物农药“蔬得康”对西瓜细菌性果斑病的温室防效评估 被引量：7

8

作者 武芳 李可 +1 位作者 王云鹏 郭坚华 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2014年第2期266-270,共5页

通过温室试验的防效、促生、叶片中叶绿素含量和N、P、K含量的影响,多方面评估生物农药"蔬得康"(由两株芽孢杆菌和一株沙雷氏菌株组成)对西瓜细菌性果斑病的生防潜力。结果表明,生物农药"蔬得康"在温室中防效达到了... 通过温室试验的防效、促生、叶片中叶绿素含量和N、P、K含量的影响,多方面评估生物农药"蔬得康"(由两株芽孢杆菌和一株沙雷氏菌株组成)对西瓜细菌性果斑病的生防潜力。结果表明,生物农药"蔬得康"在温室中防效达到了40.8%,也使西瓜苗期的生物量增加了51.0%,叶绿素a、叶绿素b和叶绿素总量均明显高于清水对照组,分别提高了13.4%、46.2%和21.3%,同时也使叶片中N、P、K的含量分别提高了22.5%、36.4%和29.0%。 展开更多

关键词 生物农药 “蔬得康” 西瓜细菌性果斑病 防效评估

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细菌性果斑病菌源与接菌方法对西瓜致病力的影响 被引量：6

9

作者 李明明 申初成 +3 位作者 雷庆斌 周检军 简建松 谢超 《湖南农业科学》 2010年第8期80-82,共3页

采用西瓜细菌性果斑病不同越冬菌源和接菌方法对西农9号进行致病力试验,结果表明:病果浸出液、干存病叶、湿存病叶和带菌土壤越冬后的菌源,都有致病力,以带菌土壤和干存越冬病叶越冬的菌源致病力较强;浸种、淋蔸、针剌和喷雾4种接菌方... 采用西瓜细菌性果斑病不同越冬菌源和接菌方法对西农9号进行致病力试验,结果表明:病果浸出液、干存病叶、湿存病叶和带菌土壤越冬后的菌源,都有致病力,以带菌土壤和干存越冬病叶越冬的菌源致病力较强;浸种、淋蔸、针剌和喷雾4种接菌方法对不同越冬菌源的致病力有一定的影响,以针剌接菌方法的致病力最强。该试验结果为深耕翻土、清除田间带病残体、土壤消毒、减少田间操作造成伤口等防治措施的推广提供了科学的依据。 展开更多

关键词 西瓜细菌性果斑病 越冬菌源 接菌 致病力

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不同瓜类作物对西瓜细菌性果斑病的抗病性试验 被引量：4

10

作者 吕小云 周检军 +1 位作者 龙艳梅 徐恩林 《湖南农业科学》 2009年第11期71-72,共2页

采用针剌和喷雾2种方法分别在7种瓜类作物上接种干存病叶和病果浸出液2种菌原试验。结果表明,供试作物都能表现发病,除西瓜外,较为感病的作物为瓢瓜、南瓜和甜瓜,较为抗病的作物为黄瓜;病果浸出液较干存病叶容易发病,针接种较喷雾接种... 采用针剌和喷雾2种方法分别在7种瓜类作物上接种干存病叶和病果浸出液2种菌原试验。结果表明,供试作物都能表现发病,除西瓜外,较为感病的作物为瓢瓜、南瓜和甜瓜,较为抗病的作物为黄瓜;病果浸出液较干存病叶容易发病,针接种较喷雾接种发病较重。试验结果在指导病害综合防治上有重要的意义:防治西瓜细菌性果斑病时,要与周围的瓜类作物同时施药;瓜类作物整枝后的残枝、残叶要及时带出田间集中烧毁,并喷施药剂保护伤口;瓜类作物最好采用支架栽培,防止幼瓜接触地面。 展开更多

关键词 西瓜细菌性果斑病 接种 菌源 抗病性

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10种杀菌剂处理对西瓜细菌性果斑病的防治效果

11

作者 罗晓华 胡锦 《东南园艺》 2023年第2期118-121,共4页

【目的】西瓜细菌性果斑病是一种危害范围广、毁灭性强的种子传播病害,是西瓜生产的主要病害之一。为筛选出能够有效防治西瓜细菌性果斑病的药剂,选择生产上常用的10种杀菌剂进行了防效测定。【方法】防效测定采用室内平板抑菌试验、盆... 【目的】西瓜细菌性果斑病是一种危害范围广、毁灭性强的种子传播病害,是西瓜生产的主要病害之一。为筛选出能够有效防治西瓜细菌性果斑病的药剂,选择生产上常用的10种杀菌剂进行了防效测定。【方法】防效测定采用室内平板抑菌试验、盆栽防效测定。【结果】室内平板抑菌试验结果显示,3%中生菌素可湿性粉剂、3%噻霉酮水分散粒剂、1.5%噻霉酮水乳剂、2%春雷霉素水剂、20%噻菌铜悬浮剂和20%噻森铜悬浮剂对该病菌具有抑制作用,其中抑菌效果较好的为3%中生菌素可湿性粉剂和3%噻霉酮水分散粒剂。盆栽防效测定结果显示,在接种处理14 d后,3%中生菌素可湿性粉剂和3%噻霉酮水分散粒剂对西瓜细菌性果斑病的防治效果可达90%。【结论】3%中生菌素可湿性粉剂和3%噻霉酮水分散粒剂具有较好的抑菌效果,在生产上可推荐其用于西瓜细菌性果斑病的防治。 展开更多

关键词 西瓜细菌性果斑病 杀菌剂 药剂防治

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苋菜活性物对西瓜细菌性果斑病带菌种子萌发的影响 被引量：1

12

作者 谢燕 夏日照 +2 位作者 仇佳伟 张亚 廖晓兰 《湖南农业科学》 2015年第4期38-40,42,共4页

采用抑菌圈法测定苋菜活性物对西瓜细菌性果斑病菌的毒力,平皿培养法测定苋菜活性物对带菌西瓜种子萌发的影响。结果表明,苋菜活性物对西瓜细菌性果斑病菌的最小抑菌浓度为5 mg/m L,EC50为146.349 2 mg/m L;无菌种子、带菌种子、16.6%... 采用抑菌圈法测定苋菜活性物对西瓜细菌性果斑病菌的毒力,平皿培养法测定苋菜活性物对带菌西瓜种子萌发的影响。结果表明,苋菜活性物对西瓜细菌性果斑病菌的最小抑菌浓度为5 mg/m L,EC50为146.349 2 mg/m L;无菌种子、带菌种子、16.6%乙醇处理的带菌种子、苋菜活性物处理的带菌种子的发芽势分别为87.3%、42.7%、48.0%、60.0%,发芽率分别为93.3%、54.7%、58.7%、90.0%;经5 mg/m L的苋菜活性物处理的带菌西瓜种子的发芽势和发芽率分别为64.7%和90.7%,而经80 mg/m L的苋菜活性物处理的带菌种子的发芽势和发芽率分别为3.3%和4.7%。这表明苋菜活性物对西瓜细菌性果斑病菌有较强抑制作用,在低浓度时既有抑菌效果又可促进种子萌发,极具开发和应用前景。 展开更多

关键词 西瓜细菌性果斑病 抑菌作用 发芽率 发芽势

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西瓜肉质恶变原因浅析

13

作者 吴占清 霍治邦 +4 位作者 张先亮 侯晟灿 康宇静 范君龙 闫娜 《农业科技通讯》 2018年第5期301-304,共4页

本文作者详细分析了环境因素造成生理性障碍引起的西瓜肉质恶变,不当的气候条件极易造成西瓜肉质恶变,而且生理性障碍性西瓜肉质恶变,对于购买者极难判断。同时列举了两种病害性西瓜肉质恶变的情况,简单描述了其为害症状、发生原因、传... 本文作者详细分析了环境因素造成生理性障碍引起的西瓜肉质恶变,不当的气候条件极易造成西瓜肉质恶变,而且生理性障碍性西瓜肉质恶变,对于购买者极难判断。同时列举了两种病害性西瓜肉质恶变的情况,简单描述了其为害症状、发生原因、传播途径和防治方法。通过对西瓜肉质恶变原因的详细分析,以期瓜农能够趋利避害,起到对西瓜肉质恶变避免或及时预防作用。 展开更多

关键词 西瓜 肉质恶变 生理性障碍 黄瓜绿斑花叶病毒病 西瓜细菌性果斑病

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吉林省西瓜细菌性果斑病的发生与绿色防控

14

作者 张金鹏 张爽爽 +3 位作者 陈莹 尹海良 齐高扬 惠长敏 《吉林蔬菜》 2020年第3期36-38,共3页

西瓜在吉林省的种植比较广泛,是一种经济效益相对较高、促进广大农民脱贫致富的高效经济作物.西瓜细菌性果斑病的发生严重影响了吉林省西瓜的产量和品质,病害发生会造成瓜农减产减收,甚至绝收,是西瓜生产上的一种毁灭性病害.

关键词 绿色防控 西瓜生产 西瓜细菌性果斑病 病害发生 高效经济作物 农民脱贫致富 种植比较 减产减收

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西瓜细菌性果斑病病菌活细胞PMA-PCR检测方法的建立 被引量：3

15

作者 赵璟源 胡佳续 +3 位作者 张莹 刘鹏 唐芳 廖芳 《中国植保导刊》 北大核心 2015年第9期12-15,共4页

利用叠氮溴化丙锭与聚合酶链式反应结合(PMA-PCR),建立了西瓜细菌性果斑病病菌(Acidovorax avenae subsp.citrulli)活细胞检测方法。实验结果表明,当PMA浓度为0.5 mg/m L时,对活细胞DNA的PCR扩增无影响,最低检测浓度为1×104cfu/m ... 利用叠氮溴化丙锭与聚合酶链式反应结合(PMA-PCR),建立了西瓜细菌性果斑病病菌(Acidovorax avenae subsp.citrulli)活细胞检测方法。实验结果表明,当PMA浓度为0.5 mg/m L时,对活细胞DNA的PCR扩增无影响,最低检测浓度为1×104cfu/m L。当样品中死亡细胞浓度低于107 cfu/m L时,PMA可抑制死亡细胞DNA的PCR扩增;当死亡细胞浓度为1×107cfu/m L时,PMA失去效果。该方法适用于低浓度西瓜细菌性果斑病病菌活细胞的检测。 展开更多

关键词 西瓜细菌性果斑病病菌 叠氮溴化丙锭 聚合酶链式反应 活细胞检测

原文传递

开封市西瓜细菌性果腐病的发生特点及防治措施

16

作者 郭慧卿 《现代农业科技》 2010年第13期196-196,198,共2页

介绍了开封市西瓜细菌性果腐病的发生特点,分析了其发病条件,并提出防治措施,以期为该病的防治提供参考。

关键词 西瓜细菌性果腐病 发生特点 发病条件 防治措施 河南开封

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