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熊果酸对糖尿病肾病大鼠足细胞损伤的保护作用 被引量:20
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作者 尹江宁 汪华君 +3 位作者 卢国元 徐特立 次仁措姆 蒋俊 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第17期132-138,共7页
目的:通过复制糖尿病肾病大鼠模型,探讨熊果酸(ursolic acid,UA)对糖尿病肾病大鼠足细胞损伤的保护作用及其机制。方法:SPF级大鼠采用链脲霉素(streptozocin,STZ)及高糖高脂饲料联合复制糖尿病肾病大鼠模型,实验分为正常组,... 目的:通过复制糖尿病肾病大鼠模型,探讨熊果酸(ursolic acid,UA)对糖尿病肾病大鼠足细胞损伤的保护作用及其机制。方法:SPF级大鼠采用链脲霉素(streptozocin,STZ)及高糖高脂饲料联合复制糖尿病肾病大鼠模型,实验分为正常组,模型组,阳性药组(厄贝沙坦,15mg·kg^-1),UA高剂量组(UA—H,60mg·kg^-1)和UA低剂量组(UA-L,30mg-kg^-1);观察大鼠血糖、尿蛋白量、肾指数的变化,苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色法和过碘酸-希夫(periodicacid-sehiff,PAS)染色法观察肾脏病理变化,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清和肾脏中的肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-a),白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6),白细胞介索-1/3(interleukin-1α,IL-1β)含量,试剂盒检测肾脏组织超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)活性和丙二醛(malonaldehyde,MDA)含量,蛋白免疫印迹法(Westernblot)检测大鼠肾组织足细胞裂孔膜CD2相关蛋白(CD2-associatedprotein,CD2AP)和podocin蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠的血糖,24h尿蛋白量,血清和肾脏IL-1/3,IL-6及TNF-α含量,肾脏组织中MDA含量,肾指数均显著增加,体质量,肾脏组织SOD活性,肾脏中podocin,CD2AP蛋白表达量均显著降低(P〈0.01);与模型组比较,UA明显降低血糖值和尿蛋白量,肾指数,肾脏MDA含量,血清和肾脏IL-1β,IL-6及TNF-α水平,能够升高模型组大鼠体质量,肾脏SOD活性,肾脏中podocin,CD2AP蛋白的表达(P〈0.05,P〈0.01),逆转糖尿病所致大鼠肾小球病变。结论:UA可通过保护肾脏足细胞作用及调节裂孔膜蛋白CD2AP和podocin表达而抑制高血糖对肾脏的病理损害、降低尿蛋白和保护肾功能。 展开更多
关键词 熊果酸 糖尿病肾病 肾损伤 足细胞 裂孔膜蛋白
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肾络通对糖尿病肾病大鼠裂孔膜蛋白的影响 被引量:6
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作者 王月华 潘利敏 +4 位作者 方超 张江华 陈志强 李英 赵玉庸 《中国中医基础医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1496-1498,共3页
目的:探讨肾络通(益气养阴消癥通络为法)对糖尿病肾病大鼠24 h尿白蛋白定量(UAlb)及裂孔膜蛋白(nephrin)的影响。方法:将SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组、模型组、厄贝沙坦组、中药组4组,按各组相应药物剂量灌胃。于第24周末检测... 目的:探讨肾络通(益气养阴消癥通络为法)对糖尿病肾病大鼠24 h尿白蛋白定量(UAlb)及裂孔膜蛋白(nephrin)的影响。方法:将SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组、模型组、厄贝沙坦组、中药组4组,按各组相应药物剂量灌胃。于第24周末检测各组大鼠24 h UAlb定量,western-blot法测肾组织nephrin蛋白表达。结果:各治疗组与模型组比较24 h UAlb明显减少(P<0.01),nephrin蛋白表达显著增加(P<0.01)。结论:益气养阴消癥通络中药对链脲佐菌素(STZ)诱导的DN大鼠肾脏具有一定的保护作用。 展开更多
关键词 肾络通 糖尿病大鼠 24 h尿白蛋白定量 裂孔膜蛋白
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裂孔膜蛋白Nephrin和Podocin与后天获得性肾脏疾病关系研究进展 被引量:6
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作者 高旭光 任现国 张沛 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第14期1617-1619,共3页
自1998年发现了第一个定位于裂孔膜上的重要信号分子Nephrin;2000年发现了Podocin,裂孔膜相关蛋白与肾脏疾病的相关研究开始迅速发展。既往多认为裂孔膜蛋白Nephrin、Podocin与先天性肾脏疾病相关,但最近几年有研究发现以蛋白尿为主要... 自1998年发现了第一个定位于裂孔膜上的重要信号分子Nephrin;2000年发现了Podocin,裂孔膜相关蛋白与肾脏疾病的相关研究开始迅速发展。既往多认为裂孔膜蛋白Nephrin、Podocin与先天性肾脏疾病相关,但最近几年有研究发现以蛋白尿为主要临床表现的后天获得性肾脏疾病与裂孔膜蛋白Nephrin、Podocin也有关联,这方面的研究最近5年有较多进展。深入开展这方面的研究,将可能会为人类后天获得性肾脏疾病的诊断、治疗及预后提供新思路。 展开更多
关键词 裂孔膜蛋白 NEPHRIN PODOCIN 后天获得性肾脏疾病 进展
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化瘀通络中药不同配伍对糖尿病肾病大鼠肾脏保护作用及对肾小球P-cadherin表达的影响 被引量:3
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作者 霍贝贝 白璐 +3 位作者 张肖 陈志强 郭倩 徐晶 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期1558-1562,共5页
为观察化瘀通络中药不同配伍对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用及对肾小球足细胞裂孔膜蛋白P-cadherin表达的影响,将70只雄性SD大鼠随机分为正常组和模型组、化瘀通络组、厄贝沙坦组、化瘀组和通络组,灌胃干预16周。检测大鼠的体重、肾重... 为观察化瘀通络中药不同配伍对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用及对肾小球足细胞裂孔膜蛋白P-cadherin表达的影响,将70只雄性SD大鼠随机分为正常组和模型组、化瘀通络组、厄贝沙坦组、化瘀组和通络组,灌胃干预16周。检测大鼠的体重、肾重、肾脏指数、24 h尿蛋白定量,分别采用实时定量PCR和蛋白印迹法检测P-cadherin的表达。结果显示,与模型组比较,化瘀通络组大鼠的肾脏指数、24 h尿蛋白定量明显下降(P<0.01),体重增加、P-cadherin mRNA和蛋白表达明显上调(P<0.01)。提示化瘀通络中药可能通过上调P-cadherin mRNA和蛋白的表达,减少尿蛋白,延缓糖尿病肾病病程进展。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 化瘀通络 P-cadWm 裂孔膜蛋白
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Nephrin、podocin在V型狼疮性肾炎肾组织中的表达 被引量:3
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作者 达展云 范亚平 +2 位作者 沈良兰 施岚 王锋 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1193-1195,F0002,共4页
目的探讨肾小球足细胞相关蛋白nephrin和podocin在V型狼疮性肾炎(V-LN)发病中的作用。方法检测V-LN组11例和特发性膜性肾病(I MN)组8例患者的尿常规、24-h尿蛋白定量、尿补体C3及纤维蛋白原降解产物(FDP)、血脂、血清补体及肝肾功能,并... 目的探讨肾小球足细胞相关蛋白nephrin和podocin在V型狼疮性肾炎(V-LN)发病中的作用。方法检测V-LN组11例和特发性膜性肾病(I MN)组8例患者的尿常规、24-h尿蛋白定量、尿补体C3及纤维蛋白原降解产物(FDP)、血脂、血清补体及肝肾功能,并行肾组织活检间接免疫荧光染色,激光共聚焦显微镜观察nephrin、podocin表达的变化。结果24-h尿蛋白定量、血清白蛋白、肌酐、尿补体C3两组间无统计学差异;V-LN组血脂、血清补体C3、C4及尿FDP均低于I MN组;nephrin、podocin表达两组均减弱,但I MN组更明显。结论Nephrin、podocin表达减弱可能参与V-LN蛋白尿的发生,但V-LN表达减弱不及I MN明显,推测V-LN蛋白尿的发生可能还有其他机制参与。 展开更多
关键词 V型狼疮性肾炎 足细胞 裂孔膜蛋白 NEPHRIN PODOCIN
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肾小球性蛋白尿发生机制的新认识
6
作者 迟雁青 刘茂东 《河北医药》 CAS 2005年第2期96-97,共2页
关键词 肾小球性蛋白尿 发生机制 治疗 裂孔膜蛋白
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硫辛酸对2型糖尿病肾病患者氧化应激、足细胞指标和炎性因子水平的影响 被引量:13
7
作者 李敬 樊星 +3 位作者 高燕 张丽敏 杜伟轩 王倩 《疑难病杂志》 CAS 2020年第8期774-777,共4页
目的观察2型糖尿病肾病患者应用硫辛酸治疗后氧化应激和足细胞标志蛋白(PCX)、明胶酶相关载脂蛋白(NGAI)、足细胞裂孔膜蛋白(nephrin)水平的变化。方法选取2016年3月—2019年3月河北大学附属医院肾内二科诊治2型糖尿病肾病患者80例作为... 目的观察2型糖尿病肾病患者应用硫辛酸治疗后氧化应激和足细胞标志蛋白(PCX)、明胶酶相关载脂蛋白(NGAI)、足细胞裂孔膜蛋白(nephrin)水平的变化。方法选取2016年3月—2019年3月河北大学附属医院肾内二科诊治2型糖尿病肾病患者80例作为研究对象,应用奇、偶数法分为2组。对照组40例予常规药物方案治疗,观察组40例在对照组治疗方案基础上予以硫辛酸治疗,比较2组PCX、NGAI、nephrin水平以及肾功能指标、氧化应激指标、炎性因子水平差异。结果治疗后,观察组血清肌酐(SCr)和尿白蛋白排泄率(UAFR)低于对照组(t=5.583、19.738,P均=0.000);F2-异前列腺素类化合物(PGF2)、丙二醛(MDA)、硝基酪氨酸(NT)水平低于对照组(t=29.316、35.976、9.125,P均=0.000);治疗后2组PCX和nephrin均升高,NGAI均降低,且观察组升高/降低幅度大于对照组(t=4.339、8.102、13.440,P均=0.000);治疗后2组高敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)水平均降低,且观察组低于对照组(t=6.010、8.751、3.835,P均=0.000)。结论2型糖尿病肾病患者在接受常规方案治疗的同时辅以硫辛酸治疗,能够促进肾功能恢复,减轻氧化应激反应、炎性反应及足细胞损伤,效果显著。 展开更多
关键词 2型糖尿病肾病 硫辛酸 氧化应激反应 足细胞标志蛋白 明胶酶相关载脂蛋白 足细胞裂孔膜蛋白
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化瘀通络中药对糖尿病肾病代谢指标及裂孔膜蛋白nephrin的影响 被引量:7
8
作者 曹晨 郝世梦 +2 位作者 孟泽松 徐晶 陈志强 《中国中西医结合肾病杂志》 2016年第6期484-487,I0001,共5页
目的:观察化瘀通络中药对糖尿病肾病(DN)大鼠代谢指标和裂孔膜蛋白nephrin表达的影响,探讨化瘀通络中药防治DN的可能作用机制。方法:将40只大鼠随机分为空白对照组10只、造模组30只,造模组高糖高脂饲料喂养1个月,采用一次性腹腔注射链... 目的:观察化瘀通络中药对糖尿病肾病(DN)大鼠代谢指标和裂孔膜蛋白nephrin表达的影响,探讨化瘀通络中药防治DN的可能作用机制。方法:将40只大鼠随机分为空白对照组10只、造模组30只,造模组高糖高脂饲料喂养1个月,采用一次性腹腔注射链尿佐菌素的方法复制糖尿病模型,成模大鼠随机分为中药组、西药对照组(厄贝沙坦组)、模型组,中药组和厄贝沙坦组分别给予相应药物,各组于第3天、4周、8周、16周测24 h尿蛋白,16周末处死大鼠,全自动生化分析仪检测血肌酐、尿素氮、尿酸。光镜观察肾脏病理改变情况,采用免疫组织化学法检测nephrin的表达并进行半定量分析,RT-PCR法检测nephrin mRNA表达情况。结果:与模型组相比,第16周末中药组24 h尿蛋白、肌酐等各项指标均有明显改善,差异具有统计学意义(P<0.05);与厄贝沙坦组同时间点比较,第8周末中药组24 h尿蛋白明显升高(P<0.05),第16周末中药组24 h尿蛋白降低(P<0.05);第16周末nephrin半定量分析结果显示中药组较模型组表达明显增加(P<0.05);中药组nephrin mRNA的表达较模型组明显增强(P<0.05),两治疗组之间该项指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论:化瘀通络中药可以减少蛋白尿,保护肾功能的作用可能与上调足细胞裂孔膜蛋白nephrin的表达有关。 展开更多
关键词 化瘀通络法 糖尿病肾病 24H尿蛋白定量 裂孔膜蛋白nephrin
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益气活血化湿方对被动型Heymann肾炎模型大鼠足细胞裂孔膜蛋白α-actinin-4和CD2AP的调节作用 被引量:6
9
作者 雍军 凌春燕 +1 位作者 张先闻 王琳 《上海中医药杂志》 2019年第5期69-75,共7页
目的探讨益气活血化湿方及其拆方对被动型Heymann肾炎(PHN)模型大鼠足细胞裂孔膜蛋白α-actinin-4和CD2AP的调节作用。方法取雄性Wistar大鼠,制备经典的PHN模型。将造模成功的大鼠随机分为模型组、环孢素组、益气活血化湿方全方组、益... 目的探讨益气活血化湿方及其拆方对被动型Heymann肾炎(PHN)模型大鼠足细胞裂孔膜蛋白α-actinin-4和CD2AP的调节作用。方法取雄性Wistar大鼠,制备经典的PHN模型。将造模成功的大鼠随机分为模型组、环孢素组、益气活血化湿方全方组、益气方组、活血方组和化湿方组,另取正常大鼠为对照组。各药物组分别灌胃给予相应药液,对照组和模型组大鼠灌胃给予等量0.9%NaCl溶液,连续6周。分别于第0、2、4、6周对各只大鼠眼眶静脉丛采血,代谢笼收集24 h尿液。全自动生化分析仪检测血清样本白蛋白(Alb)、肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)水平以及尿液样本24 h尿蛋白定量(UPRO)。干预结束后,取双侧肾脏。HE染色后光镜下观察肾组织形态学变化,透射电镜下观察肾小球基底膜、足细胞及足突的形态学变化。PCR和Western blot检测肾组织中α-actinin-4和CD2AP的mRNA及蛋白表达水平。结果①与对照组相比,模型组大鼠在各时间点UPRO和SCr水平均明显升高(P<0.05),Alb水平明显下降(P<0.05)。与模型组相比,环孢素组第4、6周UPRO水平明显下降(P<0.05),第2、4、6周Alb水平明显下降(P<0.05),但第2、4、6周SCr和BUN水平明显升高(P<0.05)。与模型组相比,全方组仅第6周UPRO水平明显下降(P<0.05)。与环孢素组相比,全方组第2、4、6周SCr和BUN水平明显降低(P<0.05)。②与对照组相比,模型组光镜下观察可见肾小球明显肿大,肾小球基底膜弥漫性增厚,毛细血管襻受压,部分肾小管上皮细胞肿胀;电镜下显示上皮细胞下大量电子致密物沉积,足突广泛融合或消失。与模型组相比,各药物干预组的肾小球病变程度均有减轻。③与对照组相比,模型组α-actinin-4 mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.05),CD2AP mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。与模型组相比,环孢素组α-actinin-4 mRNA和蛋白表达水平显著下调(P<0.05),CD2AP mRNA和蛋白表达水平显著上调(P<0.05 展开更多
关键词 益气活血化湿方 被动型HEYMANN肾炎 特发性性肾病 足细胞裂孔膜蛋白 Α-ACTININ-4 CD2AP
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儿童原发性肾病综合征尿足细胞标志蛋白、足细胞裂孔膜蛋白与尿蛋白关系的研究 被引量:3
10
作者 苏敏 才绍江 +2 位作者 李真真 宁芳 丁美娇 《中华妇幼临床医学杂志(电子版)》 CAS 2015年第4期511-515,共5页
目的探索儿童原发性肾病综合征(NS)蛋白尿与足突损伤间的关系。方法选择2013年9月至2014年3月于哈尔滨市儿童医院泌尿内科住院的20例原发性NS患儿为研究对象,并纳入肾病组(n=20)。选择同期于该院门诊体检的10例健康儿童为正常对照组(n=... 目的探索儿童原发性肾病综合征(NS)蛋白尿与足突损伤间的关系。方法选择2013年9月至2014年3月于哈尔滨市儿童医院泌尿内科住院的20例原发性NS患儿为研究对象,并纳入肾病组(n=20)。选择同期于该院门诊体检的10例健康儿童为正常对照组(n=10)。研究组患儿均接受肾上腺糖皮质激素治疗。应用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测肾病组患儿不同观察时刻及正常对照组儿童随机尿足细胞标志蛋白(PCX)、足细胞裂孔膜蛋白(nephrin)水平,采用免疫比浊法及比色法测定患儿尿蛋白及尿肌酐水平,并计算尿蛋白、尿肌酐比值。结果 1肾病组患儿尿PCX、nephrin水平和尿蛋白、尿肌酐比值均显著高于正常对照组,且差异有统计学意义(t=2.612,2.843,2.972;P<0.01)。2肾病组患儿激素治疗期间尿PCX、nephrin水平和尿蛋白/尿肌酐比值总体均呈下降趋势。相邻观察时刻的尿PCX与nephrin水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗第8天尿PCX和nephrin水平较治疗前显著下降,且差异有统计学意义(t=1.934,2.093;P<0.05)。治疗第6天尿蛋白、尿肌酐比值较第4天和治疗前显著下降,且差异也有统计学意义(t=2.042,2.120;P<0.05)。3尿PCX、nephrin水平分别与尿蛋白、尿肌酐比值呈正相关关系(r=0.91,0.92;P<0.01)。结论尿PCX、nephrin水平随NS的恢复而逐渐下降,与尿蛋白指标有良好的相关性,对其进行监测可动态观察足细胞变化,对判断肾小球的损伤及恢复情况有一定的临床意义。 展开更多
关键词 肾病 蛋白尿 足细胞 足细胞标志蛋白 足细胞裂孔膜蛋白
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硫辛酸对老年2型糖尿病肾病患者PCX、NGAL、Nephrin表达的影响 被引量:3
11
作者 刘唯 苏韦娟 +3 位作者 王丽英 王顺花 严芳芳 匡锋 《中外医学研究》 2019年第32期12-14,共3页
目的:探究硫辛酸治疗老年2型糖尿病肾病(T2DN)患者的效果及其对细胞标志蛋白(PCX)、明胶酶相关载脂蛋白(NGAL)及足细胞裂孔膜蛋白(Nephrin)表达的实际影响。方法:选择2017年8月-2018年12月医院收治的68例老年T2DN患者为研究对象,随机分... 目的:探究硫辛酸治疗老年2型糖尿病肾病(T2DN)患者的效果及其对细胞标志蛋白(PCX)、明胶酶相关载脂蛋白(NGAL)及足细胞裂孔膜蛋白(Nephrin)表达的实际影响。方法:选择2017年8月-2018年12月医院收治的68例老年T2DN患者为研究对象,随机分为两组,观察组(34例)予以硫辛酸与常规治疗,对照组(34例)予以常规治疗,对比两组的各项指标变化。结果:观察组的肾功能、氧化应激指标明显优于对照组(P<0.05);观察组的足细胞相关指标明显优于对照组(P<0.05)。结论:对老年T2DN患者予以硫辛酸治疗,可有效改善其肾功能,减轻氧化应激,减少足细胞损伤,值得临床推广。 展开更多
关键词 硫辛酸 2型糖尿病肾病 细胞标志蛋白 明胶酶相关载脂蛋白 足细胞裂孔膜蛋白
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基于肾痿理论芪羽水陆地黄汤对早期糖尿病肾病临床疗效及血清PCX、nephrin水平的影响 被引量:2
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作者 王郁金 苏衍进 +9 位作者 王惠玲 赵莉 秦刚新 赵秋菊 罗俊婷 赵思阳 雷迪 李慧 赵巧巧 张苗 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2021年第24期7577-7582,共6页
目的探讨基于“肾痿”理论芪羽水陆地黄汤治疗早期糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)的临床疗效及对血清足细胞标志蛋白(podocalyxin,PCX)、足细胞裂孔膜蛋白nephrin水平,肾脏血管超声的影响。方法选取陕西中医药大学附属医院内分泌... 目的探讨基于“肾痿”理论芪羽水陆地黄汤治疗早期糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)的临床疗效及对血清足细胞标志蛋白(podocalyxin,PCX)、足细胞裂孔膜蛋白nephrin水平,肾脏血管超声的影响。方法选取陕西中医药大学附属医院内分泌一科128例III期DN患者,按照随机数字表法分为对照组(64例)及治疗组(64例)。对照组给予常规治疗,治疗组在对照组基础上给予芪羽水陆地黄汤,治疗持续3个月。检测并比较各组治疗前后尿白蛋白排泄率(urinary albumin excretion rate,UAER)、尿白蛋白肌酐比值(urinary albumin creatinine ratio,UACR)水平,血脂、空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)、餐后2 h血糖(2-hour postprandial glucose,2hPG)、糖化血红蛋白(glycated hemoglobin,HbA1C)水平及血清PCX)、nephrin水平及肾脏血管超声变化。评估并记录中医症候积分。结果治疗后,对照组和治疗组的总有效率分别为62.50%、81.25%,治疗组明显优于对照组(P<0.05)。治疗后,2组中医证候积分均较治疗前降低(P<0.05),且治疗后,治疗组中医证候积分低于对照组(P<0.05)。治疗后,2组尿UAER、UACR及血脂、FPG、2hPG、HbA1C水平较治疗前明显降低(P<0.05);PCX、nephrin水平较治疗前明显提高(P<0.05);肾脏收缩期最大峰值流速(V_(max))及肾脏血流阻力指数(resistent index,RI)较治疗前具有统计学差异(P<0.05)。治疗后,治疗组上述指标改善均优于对照组(P<0.05)。结论芪羽水陆地黄汤治疗DN临床疗效较好,不但能降低血糖、调节血脂、降低尿蛋白,而且能改善肾脏血流动力学,提高血清PCX、nephrin水平,达到延缓肾脏损伤的作用。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 芪羽水陆地黄汤 疗效评价 足细胞标志蛋白 足细胞裂孔膜蛋白 肾血管病变
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大鼠肾小球足细胞的原代培养及鉴定 被引量:1
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作者 张兆洲 戴恩来 +2 位作者 杨静 薛国忠 张杰 《甘肃中医药大学学报》 2016年第6期1-5,共5页
目的建立一种操作相对简单、重复性较好的大鼠肾小球足细胞原代培养及鉴定的方法。方法取SD乳鼠,无菌取肾,运用低浓度酶消化法、差异过筛法收集肾小球,将获得的肾小球种植于鼠尾胶原包被的25 cm2细胞培养瓶中,置于37℃、5%CO2恒温恒湿... 目的建立一种操作相对简单、重复性较好的大鼠肾小球足细胞原代培养及鉴定的方法。方法取SD乳鼠,无菌取肾,运用低浓度酶消化法、差异过筛法收集肾小球,将获得的肾小球种植于鼠尾胶原包被的25 cm2细胞培养瓶中,置于37℃、5%CO2恒温恒湿培养箱中孵育。通过倒置显微镜和扫描电镜观察足细胞形态,采用免疫组织化学法检测Wilms瘤抑癌因子-1(WT-1)和足细胞裂孔膜蛋白(Nephrin)的表达以鉴定足细胞。结果种植第4天,可见大部分肾小球已贴壁,第5天见有细胞从贴壁的肾小球中爬出,第9天见约80%的细胞呈铺路石样融合生长。将种植后第9天的细胞消化传代培养,扫描电镜观察可见扁大而平、有树枝状突出的星形细胞。免疫组化结果显示足细胞标志蛋白Nephrin和WT-1表达阳性,表明所培养的细胞为足细胞。结论本实验成功建立了一种操作简便、重复性较好的大鼠肾小球足细胞的分离、培养和鉴定方法,为进一步研究足细胞相关性肾脏疾病奠定了基础;WT-1和Nephrin可作为足细胞鉴定的标记蛋白。 展开更多
关键词 大鼠 肾小球 足细胞 原代培养 足细胞裂孔膜蛋白 Wilms瘤抑癌因子-1
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子痫前期患者尿液中足细胞裂孔膜蛋白和标记蛋白的检测及意义 被引量:1
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作者 曾红卫 李小叶 覃林芳 《现代生物医学进展》 CAS 2013年第28期5577-5581,共5页
目的:检测子痫前期患者尿液中足细胞裂孔膜蛋白和足细胞标记蛋白的浓度并探讨其临床意义。方法:本实验以62例妊娠期妇女为研究对象,分为三组,其中正常妊娠期妇女25例为正常对照组,慢性高血压的妊娠期妇女17例为高血压组,子痫前期患者20... 目的:检测子痫前期患者尿液中足细胞裂孔膜蛋白和足细胞标记蛋白的浓度并探讨其临床意义。方法:本实验以62例妊娠期妇女为研究对象,分为三组,其中正常妊娠期妇女25例为正常对照组,慢性高血压的妊娠期妇女17例为高血压组,子痫前期患者20例为子痫前期组。ELISA检测各组妊娠期妇女的尿液中足细胞裂孔膜蛋白和足细胞标记蛋白的表达;Bradford法检测各组妊娠期妇女的尿蛋白。结果:足细胞裂孔膜蛋白和足细胞标记蛋白在正常对照组尿液中含量极少,在高血压组中分泌增加,而子痫前期组患者中明显升高(P<0.01),且在子痫前期组尿液中足细胞裂孔膜蛋白和标记蛋白的分泌含量均成正相关(r2=0.79,P<0.05)。子痫前期组患者中足细胞裂孔膜蛋白和足细胞标记蛋白与尿蛋白浓度成正相关(r2=0.58,P<0.05;r2=0.79,P<0.05)。结论:足细胞蛋白脱落主要发生于子痫前期患者,且足细胞蛋白脱落量与尿蛋白成正相关,能直接反映妊娠期患者的肾损伤程度,可作为预测罹患妊娠期高血压的指标。 展开更多
关键词 子痫前期 妊娠高血压 足细胞裂孔膜蛋白 足细胞标记蛋白
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肾衰饮对糖尿病肾病大鼠足细胞标志蛋白、足细胞裂孔膜蛋白影响 被引量:1
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作者 宫成军 文晓晨 马晓燕 《辽宁中医药大学学报》 CAS 2022年第10期6-10,共5页
目的研究肾衰饮对糖尿病肾病(DKD)大鼠足细胞标志蛋白(PCX)、足细胞裂孔膜蛋白(Nephrin)的影响。方法选取SPF级雄性SD大鼠72只随机分为空白组、DKD组、厄贝沙坦组、肾衰饮低剂量组、肾衰饮中剂量组、肾衰饮高剂量组。采用高脂高糖饲料... 目的研究肾衰饮对糖尿病肾病(DKD)大鼠足细胞标志蛋白(PCX)、足细胞裂孔膜蛋白(Nephrin)的影响。方法选取SPF级雄性SD大鼠72只随机分为空白组、DKD组、厄贝沙坦组、肾衰饮低剂量组、肾衰饮中剂量组、肾衰饮高剂量组。采用高脂高糖饲料喂养联合链脲佐菌素腹腔注射建立DKD大鼠模型。厄贝沙坦组采用厄贝沙坦2.7 mg/mL灌胃;肾衰饮低、中、高剂量组分别采用肾衰饮2.79、5.58、11.16 g/mL灌胃;空白组、DKD组采用等体积生理盐水灌胃。连续给药8周后检测各组大鼠尿蛋白(PRO)、总胆固醇(TC)、血肌酐(Scr)、甘油三酯(TG)、血尿素氮(BUN)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、葡萄糖(GLU)、谷丙转氨酶(ALT)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、谷草转氨酶(AST)含量;苏木素-伊红(HE)染色观察肾脏组织病理形态学变化;酶联免疫吸附试验检测血清碱性纤维母细胞生长因子(bFGF)、胰岛素样生长因子(IGF)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达水平;蛋白免疫印迹法检测肾脏组织PCX、Nephrin蛋白表达水平。结果与空白组比较,DKD组大鼠GLU、ALT、AST、PRO、Scr、BUN、TC、TG、LDL-C水平显著升高,HDL-C水平显著下降(P<0.01);肾小球发生硬化性改变、上皮细胞颗粒样变性、囊腔明显变窄,肾小管周围大量炎性细胞浸润;血清bFGF、IGF、MCP-1表达水平显著升高(P<0.01);PCX、Nephrin水平显著降低(P<0.01)。与DKD组比较,厄贝沙坦组和肾衰饮各剂量组大鼠GLU、ALT、AST、PRO、Scr、BUN、TC、TG、LDL-C水平显著降低,HDL-C水平显著上升(P<0.05,P<0.01);肾脏病理损害不同程度减轻;厄贝沙坦组、肾衰饮高剂量组大鼠血清bFGF、IGF、MCP-1表达水平均有不同程度下降(P<0.01);厄贝沙坦组、肾衰饮高剂量组大鼠PCX、Nephrin水平均有不同程度上升(P<0.05,P<0.01)。结论肾衰饮能够有效降低DKD大鼠血糖、血脂、肝功能、肾功能、蛋白尿水平,抑制血清bFGF、IGF、MCP-1表达, 展开更多
关键词 糖尿病肾病 肾衰饮 足细胞标志蛋白 足细胞裂孔膜蛋白
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尿nephrin及α1微球蛋白与大鼠子痫前期发病相关性研究
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作者 包南丁 张越 +1 位作者 刘瑀晗 张艳宁 《沈阳医学院学报》 2019年第1期11-14,18,共5页
目的:评估检测尿足细胞裂孔膜蛋白(nephrin)及α1微球蛋白水平对子痫前期(PE)早期诊断的临床意义。方法:将30只SPF级SD雌性妊娠大鼠随机分为PE组、生理盐水组、正常妊娠组,每组10只。于妊娠第11天起,PE组通过鼠尾静脉注射血管紧张素Ⅱ-... 目的:评估检测尿足细胞裂孔膜蛋白(nephrin)及α1微球蛋白水平对子痫前期(PE)早期诊断的临床意义。方法:将30只SPF级SD雌性妊娠大鼠随机分为PE组、生理盐水组、正常妊娠组,每组10只。于妊娠第11天起,PE组通过鼠尾静脉注射血管紧张素Ⅱ-1型受体拮抗剂(AT1-AA)建立PE模型;生理盐水组注射等量生理盐水;正常妊娠组无药物干预,共注射7 d。自妊娠第10天起,用动物无创血压测试仪测量孕鼠尾动脉收缩压;分别于妊娠第12、16、20天收集3法检测尿nephrin水平。结果:与妊娠第10天比较,从妊娠第13天开始,PE组血压显著升高,且随妊娠天数增加逐渐升高(P<0.05)。在妊娠第12、16、20天,PE组尿α1微球蛋白、nephrin水平均高于生理盐水组和正常妊娠组(P<0.05),生理盐水组和正常妊娠组尿α1微球蛋白、水平比较差异均无统计学意义(P>0.05)。PE组孕鼠尿nephrin可成功建立PEα1微球蛋白共同检测对于诊断及预测PE肾损害具有重要临床意义。 展开更多
关键词 足细胞裂孔膜蛋白 Α1微球蛋白 子痫前期 大鼠
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化瘀通络中药对高糖刺激下足细胞裂孔膜蛋白的干预作用
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作者 方敬 陈志强 +2 位作者 王月华 张江华 李黎莉 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1886-1890,共5页
通过化瘀通络中药对H-2Kb-ts A58条件性永生化小鼠足细胞裂孔膜蛋白podocin、CD2AP表达的干预作用,探讨化瘀通络中药降低糖尿病肾病蛋白尿、保护肾功能的可能作用机制。实验以体外培养小鼠足细胞为研究对象,将其分为正常糖组(CG)、高糖... 通过化瘀通络中药对H-2Kb-ts A58条件性永生化小鼠足细胞裂孔膜蛋白podocin、CD2AP表达的干预作用,探讨化瘀通络中药降低糖尿病肾病蛋白尿、保护肾功能的可能作用机制。实验以体外培养小鼠足细胞为研究对象,将其分为正常糖组(CG)、高糖组(HG)、高糖加药组(HG+Z),通过免疫细胞化学(ICC)、蛋白质印迹法(Western-Blot)、实时荧光定量(Real-time PCR)方法检测不同时间点不同干预后各组podocin、CD2AP蛋白及基因的表达情况。结果显示干预足细胞48 h后,与CG组比较,其余两组podocin、CD2AP两种蛋白表达量均明显降低(P<0.05,P<0.01);与HG组比较,(HG+Z)组两种蛋白表达量均明显升高(P<0.05)。与同时间点CG组比较,其余两组podocin、CD2AP mRNA表达均显著降低(P<0.01);与同时间点HG组比较,(HG+Z)组48 h两种蛋白的基因表达量均明显升高(P<0.01),24、72 h与同时间点HG组无明显差异(P>0.05)。以上结果说明化瘀通络中药可以上调高糖刺激下足细胞裂孔膜蛋白podocin、CD2AP的表达,其可能为化瘀通络中药减少糖尿病肾病蛋白尿、保护肾功能的作用机制之一。 展开更多
关键词 化瘀通络中药 足细胞裂孔膜蛋白 PODOCIN CD2AP
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黄芪甲苷对糖尿病肾病大鼠足细胞裂孔隔膜的保护作用 被引量:22
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作者 宋志霞 饶毅峰 +3 位作者 刘阳 夏蓉 徐双双 杨林 《西部中医药》 2020年第1期13-18,共6页
目的:探讨黄芪甲苷对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠足细胞裂孔膈膜的保护作用及其可能机制。方法:利用腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)建立糖尿病大鼠模型。将40只雄性SD大鼠随机分为4组各10只:正常对照组(NC组)、... 目的:探讨黄芪甲苷对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠足细胞裂孔膈膜的保护作用及其可能机制。方法:利用腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)建立糖尿病大鼠模型。将40只雄性SD大鼠随机分为4组各10只:正常对照组(NC组)、黄芪甲苷组(astragaloside Ⅳ,AS-Ⅳ组)、糖尿病肾病组(DN组)和糖尿病肾病+黄芪甲苷干预组(DN+AS-Ⅳ组)。造模成功后每6、12周检测大鼠体质量及24小时尿蛋白量。造模后12周末留取大鼠血样本和肾组织标本并处死大鼠。检测大鼠肌酐(serum creatinine,SCr)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)和尿蛋白;PAS及Masson染色观察肾脏病理改变;电镜观察足细胞超微结构变化;免疫组化法及Western Blot法检测肾组织Nephrin、Podocin、Desmin表达。结果:与DN组相比黄芪甲苷可明显降低大鼠蛋白尿,改善大鼠肾脏病理损伤。DN组Nephrin、Podocin蛋白表达量均低于NC组(P<0.05),Desmin蛋白表达量高于NC组(均P<0.05),AS-Ⅳ组肾脏病理改变及各指标明显改善,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:黄芪甲苷可能通过稳定足细胞裂孔隔膜蛋白Nephrin和Podocin来抑制STZ诱导的糖尿病大鼠肾脏损伤。 展开更多
关键词 肾病 糖尿病 足细胞 裂孔膜蛋白 NEPHRIN PODOCIN 黄芪甲苷 大鼠
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芪地固肾方对膜性肾病大鼠肾组织足细胞裂孔隔膜蛋白Nephrin和Podocin表达的影响 被引量:8
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作者 王婷 冯喆 +3 位作者 吴瑾 高海娟 雷根平 董盛 《现代生物医学进展》 CAS 2022年第21期4043-4048,共6页
目的:探讨芪地固肾方治疗膜性肾病(MN)大鼠的效果及其可能的机制。方法:将40只SD雄性大鼠随机分为模型组(等剂量生理盐水尾静脉注射)、雷公藤多甙片组(10 mg/kg雷公藤多甙片)、芪地固肾方低剂量组(15.425 g/kg芪地固肾方)、芪地固肾方... 目的:探讨芪地固肾方治疗膜性肾病(MN)大鼠的效果及其可能的机制。方法:将40只SD雄性大鼠随机分为模型组(等剂量生理盐水尾静脉注射)、雷公藤多甙片组(10 mg/kg雷公藤多甙片)、芪地固肾方低剂量组(15.425 g/kg芪地固肾方)、芪地固肾方高剂量组(61.7 g/kg芪地固肾方)四组,另取10只未造模大鼠作为空白组(等剂量生理盐水尾静脉注射),连续干预28天后,检测24小时尿蛋白定量(U-TP)、血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)的变化;HE染色、透射电镜观察大鼠肾组织病理学改变;RT-PCR检测肾组织中nephrin蛋白、podocin m RNA的表达。结果:与空白组比较,模型组24 hU-TP、足细胞nephrin和podocin m RNA显著升高,血清TP和ALB显著降低(P<0.01);与模型组比较,各给药组24 hU-TP降低,血清TP和ALB显著升高(P<0.05);肾组织免疫复合物沉积减少,肾小球基底膜增厚减轻;足细胞nephrin和podocin m RNA表达升高(P<0.05)。结论:芪地固肾方能够降低MN模型大鼠的尿蛋白水平,减轻肾脏病理损伤,上调肾组织中足细胞裂孔隔膜蛋白nephrin和podocin m RNA的表达,延缓膜性肾病的进展。 展开更多
关键词 芪地固肾方 性肾病 雷公藤多甙片 足细胞 裂孔膜蛋白
原文传递
中药有效成分对糖尿病肾病足细胞裂空隔膜蛋白干预作用的研究进展 被引量:7
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作者 胡亚洁 赵晓锦 《山东中医杂志》 2016年第1期82-85,共4页
肾小球足细胞裂孔隔膜(SD)蛋白是SD的重要组成成分,其在维持SD结构和功能的完整性方面发挥着关键性作用,并且与蛋白尿的发生密切相关。从中药中提取有效成分对SD蛋白的结构、功能及其作用机制进行干预,已成为防治糖尿病肾病研究的一个... 肾小球足细胞裂孔隔膜(SD)蛋白是SD的重要组成成分,其在维持SD结构和功能的完整性方面发挥着关键性作用,并且与蛋白尿的发生密切相关。从中药中提取有效成分对SD蛋白的结构、功能及其作用机制进行干预,已成为防治糖尿病肾病研究的一个热点。本文就近年来足细胞SD蛋白的研究现状、中药有效成分对SD蛋白的干预作用及其作用机制作一综述,主要阐述了雷公藤、黄芪、积雪草、川芎、绞股蓝、三七、冬虫夏草、红参、五味子等多种中药的有效成分对SD蛋白,尤其是nephrin、podocin蛋白等的干预作用及其防治蛋白尿的作用机制,为更好地设计早期蛋白尿防治方案以及为预防肾病综合征提供新的研究策略。 展开更多
关键词 足细胞 裂孔膜蛋白 糖尿病肾病 中药
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