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补益脾胃元气方药含药脑脊液对大鼠海马神经干细胞活力与迁移的影响 被引量：11
1
作者 陈璐 第五永长 +8 位作者 温晓强 岳涛 邵怡然 屈夏夏 雷筱菁 缪峰 刘亚武 安泰 顾杰 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2018年第23期5580-5587,共8页
目的研究补益脾胃元气类方药人参、大补元煎、洗心汤对β淀粉样蛋白诱导的海马神经干细胞(neural stem/progenitor cells,NSPCs)活力与迁移能力的影响,探讨其对海马神经元修复和再生的作用。方法从孕14～16 d Wistar大鼠胎鼠分离培养NS... 目的研究补益脾胃元气类方药人参、大补元煎、洗心汤对β淀粉样蛋白诱导的海马神经干细胞(neural stem/progenitor cells,NSPCs)活力与迁移能力的影响,探讨其对海马神经元修复和再生的作用。方法从孕14～16 d Wistar大鼠胎鼠分离培养NSPCs并鉴定,并随机分为空白组、Aβ1-42处理组、正常脑脊液对照组、安理申组及补益脾胃元气方药人参、大补元煎、洗心汤保护组,共7组。以25μmol/L Aβ1-42干预NSPCs,与抽取的终体积分数为20%的不同方药含药脑脊液作用第3代神经干细胞48 h。采用CCK-8实验检测各组NSPCs的活力,Transwell实验和划痕实验检测细胞迁移,流式法检测各组细胞内活性氧(ROS)含量。结果免疫荧光染色鉴定NSPCs特异性蛋白SOX2染色为阳性;CCK-8检测结果表明,补益脾胃元气方药各组海马NSPCs活性显著增高(P<0.01);Transwell实验和划痕实验检测结果显示,补益脾胃元气方药各组NSPCs迁移能力显著增强(P<0.05、0.01);流式法检测ROS含量结果表明,补益脾胃元气方药各组NSPCs内ROS水平显著降低(P<0.01)。结论补益脾胃元气方药含药脑脊液对大鼠海马NSPCs活力与迁移能力具有促进作用。还可拮抗Aβ诱导的氧化应激,同时其有效成分易于透过血脑屏障,可能发挥更强的神经保护作用。 展开更多
关键词 补益脾胃元气方药 淀粉样蛋白 脑脊液 神经干细胞 人参 大补元煎 洗心汤
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补益脾胃元气方药对SAMP8小鼠学习记忆及海马区PKA/ERK/p-CREB信号通路的影响 被引量：10
2
作者 屈夏夏 第五永长 +3 位作者 雷筱菁 陈璐 温晓强 岳涛 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第14期3389-3395,共7页
目的观察补益脾胃元气类方药人参汤、洗心汤、大补元煎对SAMP8小鼠学习记忆能力和海马区蛋白激酶A(PKA)/细胞外调节激酶(ERK)/磷酸化cAMP反应元件结合蛋白(p-CREB)信号通路的影响,探讨其防治阿尔茨海默病(AD)的作用机制。方法将3月龄SA... 目的观察补益脾胃元气类方药人参汤、洗心汤、大补元煎对SAMP8小鼠学习记忆能力和海马区蛋白激酶A(PKA)/细胞外调节激酶(ERK)/磷酸化cAMP反应元件结合蛋白(p-CREB)信号通路的影响,探讨其防治阿尔茨海默病(AD)的作用机制。方法将3月龄SAMP8小鼠随机分为模型组、安理申组、补益脾胃元气类方药组(人参汤组、大补元煎组、洗心汤组),另以3月龄SAMR1小鼠作为对照组,共6组,连续ig给药10周后进行相关指标检测。采用Morris水迷宫实验观察各组小鼠空间学习记忆能力。免疫组化法检测PKA蛋白表达,免疫荧光法检测ERK、p-CREB蛋白表达。蛋白印迹法检测小鼠海马区PKA、p-CREB、ERK蛋白表达。结果与模型组比较,补益脾胃元气类方药各组小鼠逃避潜伏期缩短,在目的象限游泳时间及穿越平台次数增加(P<0.05、0.01);免疫组化结果提示补益脾胃元气类方药各组小鼠海马区PKA蛋白表达量增加;免疫荧光结果提示补益脾胃元气类方药各组小鼠海马区ERK、p-CREB蛋白表达量增加;蛋白印迹实验结果与免疫组化、荧光结果一致(P<0.05、0.01)。结论补益脾胃元气类方药对SAMP8小鼠空间学习记忆有明显的改善作用,其机制可能与改善海马区PKA/ERK/p-CREB信号通路有关。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 补益脾胃元气方药 人参汤 洗心汤 大补元煎 学习记忆 PKA/ERK/p-CREB信号通路
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补益脾胃元气方药对SAMP8小鼠海马区形态功能和皮层胆碱能系统的影响 被引量：7
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作者 陈璐 第五永长 +5 位作者 温晓强 岳涛 屈夏夏 雷筱菁 周源 刘奇 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2020年第20期5187-5193,共7页
目的研究补益脾胃元气方药人参、大补元煎、洗心汤对快速老化痴呆模型(SAMP8)小鼠空间学习记忆能力、海马区形态功能和皮层胆碱能系统的影响,探讨其治疗阿尔茨海默病的可能作用机制。方法3月龄雄性SAMP8小鼠随机分为模型组、盐酸多奈哌... 目的研究补益脾胃元气方药人参、大补元煎、洗心汤对快速老化痴呆模型(SAMP8)小鼠空间学习记忆能力、海马区形态功能和皮层胆碱能系统的影响,探讨其治疗阿尔茨海默病的可能作用机制。方法3月龄雄性SAMP8小鼠随机分为模型组、盐酸多奈哌齐组、人参组、洗心汤组、大补元煎组,以雄性抗快速老化型(SAMR1)小鼠为对照组。除对照组和模型组ig蒸馏水外,其余各组ig药物(10 mL/kg),1次/d,连续3个月。实验结束后采用Morris水迷宫实验检测小鼠空间学习记忆能力,透射电镜观察小鼠海马CA3区突触超微结构,免疫组化法检测CA1区神经元密度、脑组织β淀粉样蛋白(Aβ)水平,生物化学法检测海马胆碱乙酰基转移酶(ChAT)和乙酰胆碱酯酶(AChE)的活性。结果补益脾胃元气方药各组小鼠逃避潜伏期平均值明显下降,在目的象限游泳时间、穿过平台次数显著增加(P<0.05、0.01);各组小鼠Aβ阳性细胞数目显著降低(P<0.05、0.01),神经元特异核蛋白(NueN)阳性细胞密度有上升趋势,但无显著差异;各组小鼠ChAT活性升高(P<0.05、0.01),人参、洗心汤组小鼠AChE活性降低(P<0.05)。结论补益脾胃元气方药对SAMP8小鼠空间识别和学习记忆能力有明显改善作用,其机制可能与影响小鼠海马突触结构、促进海马神经元修复、降低小鼠脑内Aβ表达、调节海马胆碱能系统有关。 展开更多
关键词 补益脾胃元气方药 快速老化痴呆模型小鼠 海马区形态功能 胆碱能系统 人参 阿尔茨海默病
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补益脾胃元气方药对海马神经干细胞增殖分化的影响 被引量：3
4
作者 岳涛 第五永长 +7 位作者 温晓强 陈璐 屈夏夏 雷筱菁 缪峰 刘亚武 安泰 顾杰 《四川中医》 2019年第5期67-72,共6页
目的:探讨人参、大补元煎、洗心汤三组补益脾胃元气方药对海马神经干细胞(neural stem cells,NSCs)增殖分化的影响。方法:从新生24小时内的Wistar胎鼠脑中分离培养海马NSCs,制备不同药物含药脑脊液并与Aβ_(1-42)共同处理海马NSCs。通过... 目的:探讨人参、大补元煎、洗心汤三组补益脾胃元气方药对海马神经干细胞(neural stem cells,NSCs)增殖分化的影响。方法:从新生24小时内的Wistar胎鼠脑中分离培养海马NSCs,制备不同药物含药脑脊液并与Aβ_(1-42)共同处理海马NSCs。通过CCK8实验检测各组海马NSCs增殖率,免疫荧光法与蛋白印迹法检测海马NSCs分化为神经元与星形胶质细胞的情况。结果:含中药各实验组的海马NSCs增殖率显著高于Aβ_(1-42)处理组(P<0.05);含中药各实验组海马NSCs分化为神经元与星形胶质细胞数量明显多于Aβ_(1-42)处理组(P<0.05),各中药组之间对比,差异不具有统计学意义(P>0.05)。结论:人参、大补元煎、洗心汤能显著促进海马NSCs增殖、诱导海马NSCs分化为神经元与星形胶质细胞。 展开更多
关键词 神经干细胞 细胞培养 补益脾胃元气方药 增殖分化 免疫荧光 蛋白印迹
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补益脾胃元气方药对SAMP8小鼠海马COX活性及神经营养因子表达的影响 被引量：1
5
作者 岳涛 第五永长 +6 位作者 温晓强 陈璐 屈夏夏 雷筱菁 周源 刘奇 安泰 《辽宁中医杂志》 CAS 2020年第10期170-174,225,共6页
目的观察人参、洗心汤、大补元煎三组补益脾胃元气方药对SAMP8快速老化模型小鼠空间、学习、记忆能力、海马细胞色素C氧化酶(cytochrome coxidase,COX)活性及神经生长因子(NGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响,初步揭示补益脾胃... 目的观察人参、洗心汤、大补元煎三组补益脾胃元气方药对SAMP8快速老化模型小鼠空间、学习、记忆能力、海马细胞色素C氧化酶(cytochrome coxidase,COX)活性及神经生长因子(NGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响,初步揭示补益脾胃元气方药的益智机制。方法选用3月龄全雄性SAMP8小鼠,分为SAMP8组、盐酸多奈哌齐组(Donepezil HCI,DN)、人参组(RSD)、洗心汤组(XXD)、大补元煎组(DBYD),另以同源同性别同月龄抗快速老化小鼠(SAMR1)设立空白对照SAMR1组,每组14只。连续灌胃给药10周后进行相关指标检测。以Morris水迷宫法观察各实验组小鼠的空间、学习、记忆能力;以透射电镜观测各实验组小鼠海马CA3区超微结构;采用生化法检测各实验组小鼠海马COX活性;免疫组化法、蛋白印迹法检测各实验组小鼠海马神经营养因子NGF、BDNF表达水平。结果水迷宫结果显示,SAMP8组小鼠平均逃避潜伏期均值明显大于SAMR1组(P<0.05),且在目的象限活动时间与穿越逃生平台的次数显著降低(P<0.05)。DN组、RSD组、XXD组、DBYD组逃避潜伏期均值显著低于SAMP8组(P<0.05)。透射电镜结果显示:各实验组小鼠海马CA3区突触数量明显增加,突触结构较为清晰,脑囊泡显著减少,线粒体轮廓较清晰,其中DN组效果优于各中药组。生化法结果显示:含中药各组海马COX活性显著高于SAMP8组(P<0.05)。免疫荧光法显示:含中药各组海马神经营养因子NGF、BDNF表达水平未显著高于SAMP8组(P>0.05);蛋白印迹法显示各中药组海马神经营养因子NGF、BDNF表达水平未显著高于SAMP8组(P>0.05)。结论人参、大补元煎、洗心汤能显著改善SAMP8小鼠的空间学习记忆功能,提高海马COX活性,表现出促进SAMP8小鼠NGF、BDNF表达的趋势。 展开更多
关键词 补益脾胃元气方药 海马 线粒体COX 神经营养因子 免疫组化 蛋白印迹
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