目的:探讨正常人血清(norm al hum an serum,NHS)补体杀伤小鼠N9小胶质细胞的机制,建立人补体攻膜复合物(sub lytic m embrane attack comp lex,sMAC)N9细胞亚溶破刺激模型。方法:用阻断补体活化途径的方法探讨N9细胞活化人补体系统的机...目的:探讨正常人血清(norm al hum an serum,NHS)补体杀伤小鼠N9小胶质细胞的机制,建立人补体攻膜复合物(sub lytic m embrane attack comp lex,sMAC)N9细胞亚溶破刺激模型。方法:用阻断补体活化途径的方法探讨N9细胞活化人补体系统的机制;采用微量补体反应性溶破法,以酵母多糖(Zymosan,Z)活化急性期病人血清制备补体优球蛋白C56,EDTA-NHS作为C7-C9的来源,组装N9细胞sMAC亚溶破模型;CCK-8比色实验确定sMAC亚溶破剂量;激光共聚焦鉴定sMAC沉积;脱落细胞计数及台盼蓝拒染法分别判定细胞黏附力变化及脱落细胞活力。结果:未致敏N9细胞可通过旁路途径直接活化人血清补体系统;当C56稀释度在1∶500以上,NHS(含1 mmol/L EDTA)稀释度为1∶20时,膜攻击复合物(m embrane attack comp lex,MAC)活性逐渐降低,细胞溶破减少,确定C56 1∶500,NHS 1∶20为N9细胞亚溶破补体量;激光共聚焦鉴定sMAC沉积于N9细胞表面;亚溶破剂量MAC刺激N9细胞后与对照组相比细胞脱落增加(P<0.05),而细胞活力正常。结论:探讨了小鼠N9细胞活化人补体的机制;通过建立N9细胞人补体sMAC亚溶破模型,证实sMAC刺激N9细胞后可降低细胞黏附力但不影响细胞活力;为sMAC对中枢神经系统小胶质细胞亚溶破刺激效应的深入研究提供了理论与实验基础。展开更多
目的探讨CD40-CD154共刺激途径在炎症性肠病患者外周循环和肠黏膜中的表达，比较炎症性肠病患者CD40-CD154表达和正常对照者的差异，分析CD40-CD154表达与内镜下疾病活动性的相关性。方法研究对象为克罗恩病患者62例、溃疡性结肠炎患者6...目的探讨CD40-CD154共刺激途径在炎症性肠病患者外周循环和肠黏膜中的表达，比较炎症性肠病患者CD40-CD154表达和正常对照者的差异，分析CD40-CD154表达与内镜下疾病活动性的相关性。方法研究对象为克罗恩病患者62例、溃疡性结肠炎患者64例和正常对照者56例。对炎症性肠病患者和正常对照者，分别应用酶联免疫吸附试验（ELISA）、SYBR—green real time PCR方法、免疫组化法，分析血浆中、外周血单个核细胞中、肠黏膜组织中CD40-CD154的表达情况。结果克罗恩病、溃疡性结肠炎患者血浆、外周血单个核细胞及肠黏膜组织中，CD40和CD154的表达均显著高于正常对照者（P均〈0．05），但外周循环和肠黏膜中CD40及CD154的表达和内镜下疾病活动性无关（P均〉0．05）。结论炎症性肠病患者血浆、外周血单个核细胞和肠黏膜中均存在CD40-CD154途径的激活，但CD40-CD154的高表达不能反映内镜下疾病活动程度。展开更多
文摘目的探讨CD40-CD154共刺激途径在炎症性肠病患者外周循环和肠黏膜中的表达，比较炎症性肠病患者CD40-CD154表达和正常对照者的差异，分析CD40-CD154表达与内镜下疾病活动性的相关性。方法研究对象为克罗恩病患者62例、溃疡性结肠炎患者64例和正常对照者56例。对炎症性肠病患者和正常对照者，分别应用酶联免疫吸附试验（ELISA）、SYBR—green real time PCR方法、免疫组化法，分析血浆中、外周血单个核细胞中、肠黏膜组织中CD40-CD154的表达情况。结果克罗恩病、溃疡性结肠炎患者血浆、外周血单个核细胞及肠黏膜组织中，CD40和CD154的表达均显著高于正常对照者（P均〈0．05），但外周循环和肠黏膜中CD40及CD154的表达和内镜下疾病活动性无关（P均〉0．05）。结论炎症性肠病患者血浆、外周血单个核细胞和肠黏膜中均存在CD40-CD154途径的激活，但CD40-CD154的高表达不能反映内镜下疾病活动程度。
