阿尔茨海默症小胶质细胞免疫相关受体研究进展 被引量：8

1

作者 徐慧琳 范震 +2 位作者 李凤 张文生 冯成强 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期1185-1188,共4页

阿尔茨海默症(Alzheimer′s disease,AD)是中老年群体发病率极高的神经退行性疾病。近年来,通过人类全基因组测序技术筛选出20余种影响AD发病率的风险基因,其中许多基因在小胶质细胞中高表达,且蛋白产物作为膜受体参与小胶质细胞的免疫... 阿尔茨海默症(Alzheimer′s disease,AD)是中老年群体发病率极高的神经退行性疾病。近年来,通过人类全基因组测序技术筛选出20余种影响AD发病率的风险基因,其中许多基因在小胶质细胞中高表达,且蛋白产物作为膜受体参与小胶质细胞的免疫功能。这也意味着由小胶质细胞调控的固有免疫可能在AD病理中扮演着重要的角色。而这些由高AD风险基因表达的免疫相关受体,如TREM2、CD33、CR1、MS4A蛋白,被视为AD潜在的免疫学药物靶点而成为国内外关注热点。本文综述了这些小胶质细胞的免疫相关受体的结构及其在AD中功能的研究进展,以期为发掘AD免疫学靶点防治AD提供新思路。 展开更多

关键词 阿尔茨海默症 小胶质细胞 髓样细胞触发受体2 髓系细胞分化抗原33 补体受体1型 跨膜蛋白4结构域亚家族A

下载PDF 职称材料

重组人补体受体1型SCR15-18片段对肠缺血再灌注损伤的保护作用 被引量：5

2

作者 汪晓艳 刘高科 +1 位作者 何莉 汪正清 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1927-1930,共4页

目的:探讨人补体受体1型功能域SCR15-18(CR1-SCR15-18)对大鼠肠缺血再灌注损伤的保护作用。方法:SD大鼠随机分为假手术组(SO)、缺血再灌注组(I/R)和CR1-SCR15-18保护组(CR1)。结扎肠系膜上动脉30 min,再灌注60 min,建立小肠缺血再灌注模... 目的:探讨人补体受体1型功能域SCR15-18(CR1-SCR15-18)对大鼠肠缺血再灌注损伤的保护作用。方法:SD大鼠随机分为假手术组(SO)、缺血再灌注组(I/R)和CR1-SCR15-18保护组(CR1)。结扎肠系膜上动脉30 min,再灌注60 min,建立小肠缺血再灌注模型,再灌注前5 min注射CR1-SCR15-18蛋白(30 mg/kg)。测定肠黏膜血管的通透性、组织髓过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;HE染色观察小肠病理改变并根据Chiu's方法评分;免疫组织化学法检测补体C3组分的沉积。结果:与SO组相比,I/R组通透性增加,MPO活性和MDA含量显著升高,而SOD活性降低,肠黏膜病理损伤严重且有大量补体C3组分沉积。与I/R组相比,CR1组肠黏膜血管通透性显著降低,MPO活性和MDA含量显著降低,而SOD活性升高,肠黏膜损伤明显减轻,只有少量补体C3组分沉积。结论:CR1-SCR15-18蛋白抑制肠缺血再灌注时补体的活化,减轻肠组织损伤。 展开更多

关键词 补体 补体受体1型 小肠 再灌注损伤

下载PDF 职称材料

缺铁性贫血患者红细胞补体受体Ⅰ型(CR1)基因组密度多态性分布的研究 被引量：4

3

作者 蒋玉红 刘华林 张忠国 《中国小儿血液》 2001年第1期10-11,共2页

研究缺铁性贫血患者红细胞补体受体 型 ( CR1)基因组密度多态性分布规律 ,采用 PCR和 Hind 酶切技术对缺铁性贫血患者进行红细胞 CR1基因组密度多态检测。结果显示 :缺铁性贫血患者红细胞 CR1基因组密度多态性分布 HH型占63 .2 % ,HL型... 研究缺铁性贫血患者红细胞补体受体 型 ( CR1)基因组密度多态性分布规律 ,采用 PCR和 Hind 酶切技术对缺铁性贫血患者进行红细胞 CR1基因组密度多态检测。结果显示 :缺铁性贫血患者红细胞 CR1基因组密度多态性分布 HH型占63 .2 % ,HL型占 2 6.3 % ,L L型占 10 .5 % ,缺铁性贫血患者红细胞免疫功能低下。结论提示 :临床该组患者免疫功能低下是红细胞 展开更多

关键词 缺铁性贫血 红细胞 CR1基因组密度多态性 补体受体1型

下载PDF 职称材料

人补体受体1型活性片段SCR15-18在毕赤酵母中的表达、纯化及活性鉴定 被引量：2

4

作者 刘高科 何莉 +1 位作者 杨永涛 汪正清 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期470-473,共4页

目的实现人补体受体1型(complement receptor type 1,CR1)活性片段SCR15-18在毕赤酵母中的分泌表达。方法用PCR从原核表达质粒pET32a-sCR1-SCR15-18上扩增CR1-SCR15-18的编码基因,并克隆到毕赤酵母分泌表达质粒pPIC9,构建重组质粒pPIC9-... 目的实现人补体受体1型(complement receptor type 1,CR1)活性片段SCR15-18在毕赤酵母中的分泌表达。方法用PCR从原核表达质粒pET32a-sCR1-SCR15-18上扩增CR1-SCR15-18的编码基因,并克隆到毕赤酵母分泌表达质粒pPIC9,构建重组质粒pPIC9-CR1-SCR15-18,鉴定后测序;重组质粒电转化整合到毕赤酵母GS115基因组中,菌落PCR技术筛选阳性转化株;经摇瓶发酵和甲醇诱导,SDS-PAGE和Western blot鉴定目的蛋白的表达;Ni2+-NTA agarose亲和层析纯化目的蛋白,并用体外抑制补体溶血反应实验测定目的蛋白的生物活性。结果成功构建重组表达质粒pPIC9-CR1-SCR15-18;SDS-PAGE和Western blot证实目的基因在毕赤酵母中成功分泌表达;表达产物经镍柱快速纯化后,能够明显抑制补体的体外溶血。结论在毕赤酵母中成功实现了CR1-SCR15-18蛋白的分泌表达,该蛋白具有较高的抑制补体溶血的生物活性。 展开更多

关键词 补体受体1型 毕赤酵母 分泌表达 补体溶血

下载PDF 职称材料

兔抗人sCR1抗体制备及临床初步应用 被引量：2

5

作者 王广兰 刘亚利 +4 位作者 初霞 张长远 宫璀璀 王文丽 高天蓝星 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期131-132,共2页

目的原核表达人sCR1分子胞外区,制备多克隆抗体,建立双抗体夹心ELISA法。方法提取人总RNA进行RT-PCR扩增合成cDNA,以cDNA为模板,构建重组表达质粒pET28a-sCR1,转化大肠埃希菌,用IPTG诱导表达重组人sCR1融合蛋白,以其免疫家兔制备抗血清... 目的原核表达人sCR1分子胞外区,制备多克隆抗体,建立双抗体夹心ELISA法。方法提取人总RNA进行RT-PCR扩增合成cDNA,以cDNA为模板,构建重组表达质粒pET28a-sCR1,转化大肠埃希菌,用IPTG诱导表达重组人sCR1融合蛋白,以其免疫家兔制备抗血清。经纯化并鉴定特异性后建立双抗体夹心ELISA法检测血清中sCR1水平,探讨其对慢性病毒性肝炎及活动性SLE患者的诊断价值。结果研制的兔抗人sCR1抗体ELISA法效价为125 000,纯度和特异性较好。30例健康献血者血清中sCR1为(39.8±7.9)ng/ml;22例慢性病毒性肝炎患者为(48.5±24.7)ng/ml;9例活动性SLE患者为(36.3±17.6)ng/ml。结论制备的兔抗人sCR1抗体效价及特异性较好,用其建立的双抗体夹心ELISA法有望用于临床血清学的诊断。 展开更多

关键词 多克隆抗体 补体受体1型 临床检测

下载PDF 职称材料

人CR1-SCR2D对脓毒症小鼠炎症损伤的保护作用

6

作者 汪晓艳 路延之 汪正清 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期761-767,共7页

目的探讨人补体受体1型双功能域短同源重复序列(CR1-SCR2D)对脓毒症小鼠炎症损伤的保护作用。方法清洁级雄性昆明小鼠随机分为假手术组(40只)、手术组(40只))和保护组(40只)。按参考文献方法构建盲肠结扎穿刺术(CLP)脓毒症小鼠模型,假... 目的探讨人补体受体1型双功能域短同源重复序列(CR1-SCR2D)对脓毒症小鼠炎症损伤的保护作用。方法清洁级雄性昆明小鼠随机分为假手术组(40只)、手术组(40只))和保护组(40只)。按参考文献方法构建盲肠结扎穿刺术(CLP)脓毒症小鼠模型,假手术组和手术组小鼠尾静脉注射无菌PBS 0.2 ml,保护组的小鼠注射CR1-SCR2D蛋白(10 mg/kg)。各组留10只小鼠观察手术后96 h生存率。其他小鼠在手术后24 h测定血清C5a、IL-6、TNF-α含量和肺组织MPO含量;免疫组化检测肺组织C4b和C3b的沉积;HE染色观察肺组织病理改变。结果脓毒症组的小鼠48 h后全部死亡,保护组的48 h死亡率为50%,96 h死亡率为80%,生存率显著提高(P<0.05)。脓毒症组的血清C5a、IL-6、TNF-α含量和肺组织MPO含量均明显升高,保护组的显著降低(P<0.05)。脓毒症组肺组织原位C4b和C3b沉积的平均光密度(MOD)值显著升高,保护组的MOD值显著低于脓毒症组的(P<0.05)。病理学检查显示,保护组小鼠肺损伤较脓毒症组的明显减轻。结论补体系统的过度活化在脓毒症的发生和发展中起重要作用,人CR1-SCR2D能明显减轻脓毒症小鼠炎症损伤,具有很好的保护作用。 展开更多

关键词 补体 补体受体1型 双功能域短同源重复序列 脓毒症

下载PDF 职称材料

双功能域小分子补体受体1型衍生物的构建、表达、纯化及生物功能鉴定 被引量：1

7

作者 杨永涛 何莉 +2 位作者 刘高科 谭兵 汪正清 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1044-1049,共6页

目的克隆表达出能够抑制补体活化的双功能域小分子补体受体1型（complement receptor type 1，CR1）衍生物。方法从外周血提取总RNA，进行RT—PCR扩增出功能性片段I（CR1-SCR1—3）；以本室构建的pET-32a—CR1-SCR15—18为模板扩增功... 目的克隆表达出能够抑制补体活化的双功能域小分子补体受体1型（complement receptor type 1，CR1）衍生物。方法从外周血提取总RNA，进行RT—PCR扩增出功能性片段I（CR1-SCR1—3）；以本室构建的pET-32a—CR1-SCR15—18为模板扩增功能性片段Ⅱ（CRl-SCR15—17）；利用重叠延伸PCR（SOE—PCR）法扩增出包含双功能域的融合基因。将融合基因重组于pET-32a（＋）载体，转化大肠杆菌Rosetta，经酶切及DNA序列测定鉴定后，IPTG诱导表达，SDS—PAGE和Western blot对表达蛋白质进行分析鉴定。蛋白质经Ni柱亲和层析及透析复性后，采用50％补体溶血抑制试验（CH50）进行功能鉴定。结果酶切及DNA序列测定证实成功构建出了pET-32a—CR1-SCR（1-3＋15-17）重组表达载体，IPTG诱导表达后在相对分子质量（Mr）为63×10^3处有一明显的条带，经Western blot鉴定为目的蛋白，Ni柱亲和层析获得纯度约为92％的目的蛋白，功能试验证实，在0～200μg／ml的融合蛋白剂量范围内，随着浓度的增加，补体抑制活性增强。结论成功构建并在大肠杆菌内表达了具有较高生物活性的重组双功能域小分子CR1衍生物，为体内保护实验研究提供实验数据。 展开更多

关键词 补体受体1型 重叠延伸PCR 原核表达 蛋白纯化 生物学活性分析

原文传递

重组人sCR1多克隆抗体制备及纯化鉴定 被引量：1

8

作者 王广兰 宫璀璀 +5 位作者 刘亚利 刘珊 王文丽 王轩 邰苏豫 高天蓝星 《实用医药杂志》 2008年第10期1234-1237,共4页

目的制备原核表达人sCR1多克隆抗体并对其进行鉴定。方法提取人总RNA进行RT-PCR扩增合成cDNA,以cDNA为模板,构建重组表达质粒pET28a-sCR1。在大肠杆菌中表达人sCR1融合蛋白作为免疫原制备兔多抗。采用ELISA法检测抗体效价,免疫亲和层析... 目的制备原核表达人sCR1多克隆抗体并对其进行鉴定。方法提取人总RNA进行RT-PCR扩增合成cDNA,以cDNA为模板,构建重组表达质粒pET28a-sCR1。在大肠杆菌中表达人sCR1融合蛋白作为免疫原制备兔多抗。采用ELISA法检测抗体效价,免疫亲和层析法纯化后,进行SDS-PAGE鉴定分析。结果sCR1表达融合蛋白免疫家兔制备的兔抗人sCR1多克隆抗体,可特异地识别人sCR1融合蛋白。结论纯化复性后的sCR1融合蛋白作为抗原免疫家兔,有较好的抗原性和免疫原性,成功地制备出兔抗人sCR1多克隆抗体,并有较高的效价及特异性。为进一步大量表达纯化及临床免疫学检测方法的键立奠定了基础。 展开更多

关键词 原核表达 多克隆抗体 补体受体1型 免疫亲和层析纯化

下载PDF 职称材料

淋巴造血系统恶性肿瘤患者红细胞CR_1密度基因多态性分布变化 被引量：1

9

作者 邬伟秀 杨新潮 +2 位作者 郭峰 张俊结 赵书平 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期59-60,共2页

淋巴造血系统恶性肿瘤患者红细胞ＣＲ１密度基因多态性分布变化邬伟秀１杨新潮１郭峰２张俊结２赵书平２作者单位：１．上海市第一人民医院血液科（上海２０００８５）２．第二军医大学长海医院免疫室补体受体１型（ＣＲ１）具有调控补... 淋巴造血系统恶性肿瘤患者红细胞ＣＲ１密度基因多态性分布变化邬伟秀１杨新潮１郭峰２张俊结２赵书平２作者单位：１．上海市第一人民医院血液科（上海２０００８５）２．第二军医大学长海医院免疫室补体受体１型（ＣＲ１）具有调控补体活化、清除免疫复合物、增强调控Ｔ... 展开更多

关键词 血液淋巴系肿瘤 补体受体1型 基因多态性

下载PDF 职称材料

人sCR1克隆、真核和原核表达纯化及其多克隆抗体制备

10

作者 王广兰 宫璀璀 +4 位作者 刘亚利 张长远 刘珊 王文丽 戴启宇 《河南医学研究》 CAS 2008年第4期289-293,共5页

目的:原核表达人sCR1分子胞外区及其多克隆抗体制备。方法:提取人总RNA进行RT-PCR扩增合成cDNA,以cDNA为模板,构建重组表达质粒pET28 a-sCR1。转化大肠杆菌中,用IPTG诱导表达重组人sCR1融合蛋白,将其作为免疫原制备兔多抗。采用ELISA法... 目的:原核表达人sCR1分子胞外区及其多克隆抗体制备。方法:提取人总RNA进行RT-PCR扩增合成cDNA,以cDNA为模板,构建重组表达质粒pET28 a-sCR1。转化大肠杆菌中,用IPTG诱导表达重组人sCR1融合蛋白,将其作为免疫原制备兔多抗。采用ELISA法检测抗体效价,经免疫亲和层析法纯化后,进行SDS-PAGE鉴定分析。结果:在原核细胞中高效表达人sCR1融合蛋白,经纯化复性后作为免疫原,免疫家兔,获得了高效价及特异性的兔抗人sCR1多克隆抗体,可特异地识别人sCR1蛋白。结论:纯化复性后的sCR1融合蛋白作为抗原免疫家兔,有较好的抗原性和免疫原性,成功地制备出兔抗人sCR1多克隆抗体,为进一步大量表达纯化人sCR1融合蛋白与临床免疫学检测方法的建立,也为深入研究sCR1生物学功能奠定了基础。 展开更多

关键词 原核表达 多克隆抗体 补体受体1型 免疫亲和层析纯化

下载PDF 职称材料

病毒性心肌炎患儿氧自由基改变和红细胞CR1分子表达 被引量：11

11

作者 陈志军 杨文东 《山西医药杂志》 CAS 2006年第7期626-628,共3页

关键词 红细胞CR1 病毒性心肌炎 氧自由基 红细胞膜补体受体1型分子 患儿 分子表达 大剂量维生素C 分子数量表达 红细胞免疫黏附 静脉注射

下载PDF 职称材料

sCR1在原核中表达、纯化、复性及活性鉴定 被引量：6

12

作者 王广兰 宫璀璀 +5 位作者 王文丽 刘亚利 王轩 高天蓝星 刘珊 陈雷 《实用医药杂志》 2008年第8期970-973,977,共5页

目的采用原核表达载体pET28a在E.coli BL21(DE3)中获得高表达、高活性的重组人sCR1融合蛋白。方法从人外周血中提取总RNA,应用RT-PCR获得人sCR1全长cDNA,将其克隆入原核表达载体pET28a中,构建含人sCR1的重组质粒(pET28a-sCR1),经测序鉴... 目的采用原核表达载体pET28a在E.coli BL21(DE3)中获得高表达、高活性的重组人sCR1融合蛋白。方法从人外周血中提取总RNA,应用RT-PCR获得人sCR1全长cDNA,将其克隆入原核表达载体pET28a中,构建含人sCR1的重组质粒(pET28a-sCR1),经测序鉴定正确,转化入E.coli BL21(DE3)中,经IPTG诱导,表达产物经SDS-PAGE分析和Western blot鉴定,通过Ni2+-NTA agarose亲和层析纯化后进行复性及生物学活性鉴定。结果获得原核表达载体pET28a-sCR1,经PCR鉴定及测序鉴定,得到重组E.coli BL21(DE3)克隆菌株,经IPTG诱导含有pET28a-sCR1的E.coli BL21(DE3)克隆菌,表达出重组人sCR1融合蛋白。此蛋白在SDS-PAGE上表现为Mr大于29000的蛋白区带,在Western blot分析中可被sCR1的CD35单克隆单抗体(mAb)识别。经Ni2+-NTA agarose亲和层析纯化、复性后得到高纯度的sCR1融合蛋白表达及较高的生物学活性。结论人sCR1融合蛋白在E.coli BL21(DE3)表达系统中的高水平表达,并且有与人体天然蛋白相同的抗原性及其生物学活性。 展开更多

关键词 可溶性补体受体1型 原核表达载体 包涵体 纯化 复性 生物学活性

下载PDF 职称材料

红细胞膜补体受体1型分子在慢性肾炎患者的表达及其价值 被引量：4

13

作者 韩景银 杨文东 《江西医学检验》 2005年第2期117-118,126,共3页

目的观察慢性肾炎患者红细胞膜补体受体1型分子表达(CR1)特点以及治疗对其表达的影响,并探讨其临床价值。方法采用酶联免疫法(ELISA)定量测定CR1分子的数量。结果治疗前患者外周血红细胞CR1分子数量表达显著降低(P<0.001);治疗后患... 目的观察慢性肾炎患者红细胞膜补体受体1型分子表达(CR1)特点以及治疗对其表达的影响,并探讨其临床价值。方法采用酶联免疫法(ELISA)定量测定CR1分子的数量。结果治疗前患者外周血红细胞CR1分子数量表达显著降低(P<0.001);治疗后患者外周血红细胞CR1分子数量表达显著高于治疗前(P<0.01),但仍显著低于对照组(P<0.01)。结论慢性肾炎患者存在红细胞CR1分子活性继发性降低,致红细胞免疫粘附(RCIA)功能降低,使整个机体的免疫功能不足。临床治疗后能够提高红细胞CR1分子活性,改善RCIA功能及整个免疫系统功能状态。动态定量检测慢性肾炎患者红细胞CR1分子数量表达,对临床的治疗及预后具有实用的参考价值。 展开更多

关键词 红细胞膜补体受体1型分子 慢性肾炎 患者 表达及 分子数量表达 红细胞CR1 红细胞CRl 红细胞免疫粘附 动态定量检测 分子活性 酶联免疫法 分子表达 临床价值 定量测定 免疫功能 功能状态 免疫系统 RCIA 参考价值 治疗前

下载PDF 职称材料

sCR1-SCR15-18蛋白减轻补体介导的大鼠脑缺血/再灌注损伤 被引量：4

14

作者 何莉 杨永涛 +2 位作者 郭光金 刘高科 汪正清 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期2436-2440,共5页

目的:探讨补体在大鼠大脑缺血/再灌注(ischemia-reperfusion,I/R)损伤中的作用及重组人可溶性补体受体Ⅰ型SCR15-18蛋白(sCR1-SCR15-18)的保护作用。方法:75只雄性SD大鼠,随机分为假手术组、I/R组和sCR1-SCR15-18保护组。采用线栓法建... 目的:探讨补体在大鼠大脑缺血/再灌注(ischemia-reperfusion,I/R)损伤中的作用及重组人可溶性补体受体Ⅰ型SCR15-18蛋白(sCR1-SCR15-18)的保护作用。方法:75只雄性SD大鼠,随机分为假手术组、I/R组和sCR1-SCR15-18保护组。采用线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞模型(middle cerebral artery occlusion MCAO),缺血2h,再灌注24h后,进行神经功能学评分,测定脑梗死体积、大脑皮质髓过氧化物酶(myeloperoxi-dase,MPO)活性,观察大脑皮质区补体C3b沉积和病理改变。结果:缺血/再灌注24h后,sCR1-SCR15-18保护组神经功能学评分,脑梗死体积及脑皮质MPO活性明显低于I/R组(P<0.05);sCR1-SCR15-18保护组缺血脑组织补体C3b沉积明显减少,病理损伤减轻。结论:补体在脑I/R损伤中起一定作用,sCR1-SCR15-18蛋白对大鼠I/R损伤脑具有保护作用。 展开更多

关键词 补体 可溶性补体受体1型SCR15-18 脑缺血 再灌注损伤 炎症

下载PDF 职称材料

人sCR1转化克隆菌的快速筛选和鉴定 被引量：3

15

作者 周明武 李琛琪 +4 位作者 徐立博 罗彦平 张威 方盼盼 王广兰 《生物医学工程与临床》 CAS 2013年第5期487-492,共6页

目的用G418快速筛选及鉴定重组人可溶性补体受体1型(sCR1)高拷贝转化克隆菌。方法采用的sCR1重组质粒,经电转化将其克隆入酵母SMD1168细胞株中,利用G418的抗性,快速筛选转化克隆菌,并对克隆菌株提取基因组DNA进行聚合酶链反应(PCR)鉴定... 目的用G418快速筛选及鉴定重组人可溶性补体受体1型(sCR1)高拷贝转化克隆菌。方法采用的sCR1重组质粒,经电转化将其克隆入酵母SMD1168细胞株中,利用G418的抗性,快速筛选转化克隆菌,并对克隆菌株提取基因组DNA进行聚合酶链反应(PCR)鉴定;该克隆菌经甲醇诱导培养后,对其表达产物进行十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及Western blot鉴定分析。结果从G418快速筛选的毕赤酵母克隆菌株中提取的基因组DNA进行PCR鉴定,获得了高拷贝整合的重组毕赤酵母克隆菌株,经诱导培养后,对其表达产物进行SDS-PAGE及Western blot鉴定分析,该表达蛋白在SDS-PAGE上表现为相对分子质量大于30 000的蛋白区带,在Western blot分析中可被sCR1的CD35单克隆抗体(mAb)识别,成功获得高拷贝整合的重组毕赤酵母细胞株,可表达出重组人sCR1融合蛋白。结论经高浓度G418药物快速筛选的高拷贝毕赤酵母SMD1168细胞株,用于表达人sCR1融合蛋白。 展开更多

关键词 可溶性补体受体1型 毕赤酵母菌 克隆菌 G418 筛选和鉴定

下载PDF 职称材料

人CR1-SCR1-3蛋白对急性大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用 被引量：2

16

作者 杨绍俊 张璇 +1 位作者 路延之 汪正清 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第13期1323-1326,共4页

目的探讨补体活化在大鼠急性脑缺血再灌注中的作用及人补体受体1型SCR1-3蛋白(CR1-SCR1-3)的保护作用。方法健康雄性SD大鼠75只,采用完全随机设计分组法分为假手术组(n=15)、CI/R组(n=30)及CI/R+CR1-SCR1-3组(n=30)。线栓法建立大鼠大... 目的探讨补体活化在大鼠急性脑缺血再灌注中的作用及人补体受体1型SCR1-3蛋白(CR1-SCR1-3)的保护作用。方法健康雄性SD大鼠75只,采用完全随机设计分组法分为假手术组(n=15)、CI/R组(n=30)及CI/R+CR1-SCR1-3组(n=30)。线栓法建立大鼠大脑中动脉栓塞模型,缺血1 h,再灌注24 h,对大鼠进行行为学检测,记录神经功能缺陷评分;TTC染色法测定脑梗死体积;制作脑匀浆测定大脑皮层髓过氧化物酶(MPO)活性、丙二醇(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性;制备切片观察大脑皮质区补体C4b沉积及病理改变。结果缺血再灌注24 h后,CR1-SCR1-3蛋白可明显改善CI/R+CR1-SCR1-3组大鼠神经功能(P<0.05);脑梗死体积亦明显减少(P<0.01);与CI/R组比较,CI/R+CR1-SCR1-3组MPO活力、MDA含量显著降低(P<0.01),而SOD活性显著增高(P<0.01);缺血脑组织皮质区原位补体C4b沉积显著减少(P<0.01),病理损伤亦明显减轻。结论补体活化参与了脑缺血再灌注损伤过程,CR1-SCR1-3蛋白对大鼠急性CI/R损伤具有保护作用。 展开更多

关键词 补体 人补体受体1型 短同源重复1—3 大脑中动脉栓塞 脑缺血再灌注损伤 炎症

下载PDF 职称材料

人CR1-SCR1-3对补体介导的脓毒症小鼠炎症损伤的保护作用 被引量：2

17

作者 张璇 杨绍俊 +1 位作者 路延之 汪正清 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期9-13,共5页

目的观察人补体受体1型功能域SCR1-3(CR1-SCR1-3)对补体介导的脓毒症小鼠炎症损伤的保护作用。方法昆明小鼠150只,随机分为对照组(50只),脓毒症组(50只),CR1-SCR1-3保护组(50只)。采用内毒素腹腔注射致脓毒症模型,各组分别于实验前1 h... 目的观察人补体受体1型功能域SCR1-3(CR1-SCR1-3)对补体介导的脓毒症小鼠炎症损伤的保护作用。方法昆明小鼠150只,随机分为对照组(50只),脓毒症组(50只),CR1-SCR1-3保护组(50只)。采用内毒素腹腔注射致脓毒症模型,各组分别于实验前1 h腹腔注射D-氨基半乳糖600 mg/kg增敏。对照组腹腔注射等体积PBS;脓毒症腔注射LPS(50μg/kg)+等体积PBS;CR1-SCR1-3保护组注射LPS(50μg/kg)+CR1-SCR1-3(15 mg/kg)。各组留10只小鼠,观察实验后72 h生存率。其他小鼠在实验后8 h测定血清IL-1β含量,12 h后取肺组织标本检测髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)水平、免疫组织化学检测C4b沉积及观察肺病理学改变。结果脓毒症组的脓毒症反应最强烈,16 h后全部死亡,保护组的脓毒症症状减轻,16 h后生存率达40%,显著提高(P<0.05)。脓毒症组的血清促炎症介质IL-1β和肺组织MPO水平均明显升高,保护组的显著降低(P<0.001)。脓毒症组的肺组织原位C4b沉积明显增多,保护组的明显减少。病理学检查显示,保护组小鼠肺损伤较脓毒症组的明显减轻。结论补体在脓毒症的发生和发展中起重要作用,人CR1-SCR1-3对脓毒症小鼠炎症损伤具有一定的保护作用。 展开更多

关键词 脓毒症 内毒素 人补体受体1型 补体 肺损伤

下载PDF 职称材料

人补体受体1型SCR1-3功能域基因的克隆表达及生物活性鉴定 被引量：2

18

作者 杨绍俊 张璇 汪正清 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期64-68,共5页

目的实现人补体受体1型功能域SCR1-3基因的克隆、表达及生物学活性鉴定。方法从人外周血中提取总RNA,通过逆转录获得cDNA,PCR扩增获得编码CR1-SCR1-3基因序列;克隆到毕赤酵母分泌表达质粒pPIC9K,构建重组质粒pPIC9K-CR1-SCR1-3,菌落PCR... 目的实现人补体受体1型功能域SCR1-3基因的克隆、表达及生物学活性鉴定。方法从人外周血中提取总RNA,通过逆转录获得cDNA,PCR扩增获得编码CR1-SCR1-3基因序列;克隆到毕赤酵母分泌表达质粒pPIC9K,构建重组质粒pPIC9K-CR1-SCR1-3,菌落PCR、双酶切鉴定后测序;线性化重组质粒电转化毕赤酵母KM71基因组中,经菌落PCR技术筛选在G418平板上生长的多拷贝阳性转化子;摇瓶发酵和甲醇诱导,SDS-PAGE和Western-blot鉴定目的蛋白表达;镍柱亲和层析纯化目的蛋白;用体外抑制补体溶血反应实验测定目的蛋白的生物活性。结果获得了人CR1-SCR1-3编码区序列,测序结果与与GenBank中的相应序列一致;SDS-PAGE和Western-blot表明目的基因在毕赤酵母中实现了分泌表达;体外实验证实经纯化后的CR1-SCR1-3能够明显抑制补体溶血。结论成功构建重组表达质粒pPIC9K-CR1-SCR1-3,在毕赤酵母中实现了CR1-SCR1-3的分泌表达,该蛋白具有较高的抑制补体生物活性。 展开更多

关键词 人补体受体1型 毕赤酵母 分泌表达 补体抑制活性

下载PDF 职称材料

重组人sCR1蛋白对大鼠肢体缺血再灌注损伤的保护作用 被引量：2

19

作者 李琛琪 王广兰 +3 位作者 周明武 王飞云 朱杰 罗彦平 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第14期1304-1309,共6页

[目的]探讨重组人可溶性补体受体1型(Soluble complement receptor type 1,sCR1)对大鼠肢体缺血再灌注(I/R)损伤的保护作用。[方法]采用无创血管夹夹闭左侧股动脉制作大鼠肢体缺血再灌注(Ischemiareperfusion,I/R)损伤模型,观察0、4、8 ... [目的]探讨重组人可溶性补体受体1型(Soluble complement receptor type 1,sCR1)对大鼠肢体缺血再灌注(I/R)损伤的保护作用。[方法]采用无创血管夹夹闭左侧股动脉制作大鼠肢体缺血再灌注(Ischemiareperfusion,I/R)损伤模型,观察0、4、8 h时间点sCR1蛋白干预组(B组)与生理盐水(NS)对照组(A组)I/R损伤肌组织细胞形态学变化、测定肌肉湿干重比(W/D)、髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)的表达水平。[结果]sCR1蛋白干预后的B组各时间点腓肠肌组织的W/D均低于NS对照A组,以I/R 4 h组最为显著(P<0.01);B组的MDA、MPO、LDH表达水平明显低于A组,以I/R 4 h组最为显著(P<0.01)。[结论]重组人sCR1蛋白对大鼠模型进行sCR1蛋白早期干预后,可明显减轻大鼠后肢骨骼肌I/R的损伤。 展开更多

关键词 缺血再灌注 损伤 重组 可溶性补体受体1型

原文传递

SLE患者红细胞CR1与IL-8R的表达 被引量：2

20

作者 刘慧敏 王世君 +3 位作者 高顺强 姚贵申 吴平 朱敬先 《中国麻风皮肤病杂志》 2007年第10期839-841,共3页

目的:研究红细胞CR1和IL-8R在系统性红斑狼疮患者(SLE)中的表达及两者之间的相关性。方法:分别用V型板红细胞离心洗涤免疫酶联法和酶联免疫吸附试验检测活动期SLE患者44例、稳定期SLE42例红细胞CR1及IL-8R的表达,并与健康人作对照,CR1与... 目的:研究红细胞CR1和IL-8R在系统性红斑狼疮患者(SLE)中的表达及两者之间的相关性。方法:分别用V型板红细胞离心洗涤免疫酶联法和酶联免疫吸附试验检测活动期SLE患者44例、稳定期SLE42例红细胞CR1及IL-8R的表达,并与健康人作对照,CR1与IL-8R之间的相关性采用Sperman相关分析。结果:活动期SLE患者红细胞CR1和IL-8R较健康人对照组和稳定期SLE患者的表达水平显著下降(P<0.001);稳定期SLE组与健康人对照组比较,CR1和IL-8R分子的表达差异无显著性(P>0.05);活动期SLE的CR1表达与IL-8R的结合活性呈正相关,即活动期SLE的红细胞CR1数量表达和IL-8R的结合活性都显著降低。结论:活动期SLE患者的红细胞CR1免疫识别、黏附、清除CIC能力下降,可能是SLE免疫发病机制中的一个重要环节;CR1及IL-8R在SLE发病机制中可能起重要作用;CR1和IL-8R有可能作为SLE患者病情是否活动、药物疗效判断的一个有价值的辅助指标。 展开更多

关键词 系统性红斑狼疮 红细胞补体受体1型 IL-8受体 酶联免疫吸附试验

下载PDF 职称材料