目的观察天然冰片对体外血肿瘤屏障（blood tumor barrier,BTB）模型通透性和丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase,MAPKs）信号转导通路相关激酶表达与激活的影响。方法大鼠C6脑胶质瘤细胞与人脐静脉内皮细胞（human ...目的观察天然冰片对体外血肿瘤屏障（blood tumor barrier,BTB）模型通透性和丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase,MAPKs）信号转导通路相关激酶表达与激活的影响。方法大鼠C6脑胶质瘤细胞与人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）共培养建立BTB模型后,设空白组,冰片低、中、高剂量组（25、50、100μg/m L）,每组7个时点（0、10、30、60、120、180、240 min）,每个时点3个样本。空白组在冰片组给药同时更换空白培养基,冰片组给不同剂量冰片,给药后不同时间点收集细胞。辣根过氧化物酶（horseradish peroxidase,HRP）流量测定BTB通透性,Western blot检测细胞外信号调节激酶（extracellular signal regulated protein kinase,ERK）,磷酸化ERK（phosphorylation extracellular signal regulated protein kinase,P-ERK）,P38MAPK,磷酸化P38MAPK（phosphor-P38,P-P38MAPK）,氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinase,JNK）和磷酸化JNK（phosphorylation c-Jun N-terminal kinase,P-JNK）的表达。结果与本组0 min比较,低、中、高剂量组各时间点通透率升高（P〈0.01）,P-ERK表达先升高,在30 min达极高值,逐渐恢复初始水平（P〉0.05）。与空白组比较,低剂量组10~240 min HRP通透率升高（P〈0.01）,30、60 min PERK蛋白表达升高（P〈0.05）,低、中、高剂量组180 min P-JNK表达升高（P〈0.05）,240 min P-JNK表达降低（P〈0.05）。与低剂量组比较,中剂量组10~180 min P-ERK表达升高（P〈0.05）,30~180 min通透率升高（P〈0.05）,180 min和240 min P-JNK表达降低（P〈0.05）。与中剂量组比较,高剂量组10~180 min通透率升高（P〈0.05）,10~180 min P-ERK表达升高（P〈0.05）,180 min和240 min P-JNK表达降低（P〈0.05）。结论冰片通过激活MAPKs信号通路的ERK磷酸化进而可逆性下调相关蛋白的表达,达到调节可逆性BTB开放的效果。展开更多
目的探讨缓激肽与罂粟碱(papaverine,PA)联合应用对血肿瘤屏障通透性和紧密连接(tight junctions,TJ)相关蛋白之闭锁小带蛋白1(ZO-1)表达的影响。方法应用大鼠胶质瘤模型,伊文思蓝(Evans blue,EB)渗透性实验检测血肿瘤屏障通透性,免疫...目的探讨缓激肽与罂粟碱(papaverine,PA)联合应用对血肿瘤屏障通透性和紧密连接(tight junctions,TJ)相关蛋白之闭锁小带蛋白1(ZO-1)表达的影响。方法应用大鼠胶质瘤模型,伊文思蓝(Evans blue,EB)渗透性实验检测血肿瘤屏障通透性,免疫组织化学法测定ZO-1蛋白表达,RT-PCR法测定ZO-1 m RNA表达。结果与对照组大鼠脑肿瘤组织中EB含量[(0.182±0.026)μg/g]比较,缓激肽、罂粟碱、缓激肽+罂粟碱组(联合组)大鼠脑肿瘤组织中EB含量[分别为(0.487±0.031)、(0.503±0.029)和(0.875±0.040)μg/g]均明显升高(P<0.01);与缓激肽、罂粟碱组比较,联合组大鼠脑肿瘤组织中EB含量进一步增加(P<0.01)。与对照组(0.379±0.011)比较,缓激肽、罂粟碱、联合组大鼠脑肿瘤组织中ZO-1蛋白表达[分别为(0.259±0.008)、(0.252±0.010)和(0.135±0.015)]均明显下降(P<0.01);与缓激肽、罂粟碱组比较,联合组大鼠脑肿瘤组织中ZO-1蛋白表达进一步降低(P<0.01)。与对照组(0.876±0.062)比较,缓激肽、罂粟碱、联合组大鼠肿瘤组织中ZO-1 m RNA表达[分别为(0.735±0.036)、(0.695±0.050)和(0.420±0.047)]均明显降低(P<0.01);与缓激肽、罂粟碱组比较,联合组大鼠脑肿瘤组织中ZO-1 m RNA表达进一步降低(P<0.01)。结论缓激肽与罂粟碱联合应用对血肿瘤屏障的开放作用具有协同效应,此作用与紧密连接相关蛋白ZO-1表达水平下调有关。展开更多
文摘目的观察天然冰片对体外血肿瘤屏障（blood tumor barrier,BTB）模型通透性和丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase,MAPKs）信号转导通路相关激酶表达与激活的影响。方法大鼠C6脑胶质瘤细胞与人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）共培养建立BTB模型后,设空白组,冰片低、中、高剂量组（25、50、100μg/m L）,每组7个时点（0、10、30、60、120、180、240 min）,每个时点3个样本。空白组在冰片组给药同时更换空白培养基,冰片组给不同剂量冰片,给药后不同时间点收集细胞。辣根过氧化物酶（horseradish peroxidase,HRP）流量测定BTB通透性,Western blot检测细胞外信号调节激酶（extracellular signal regulated protein kinase,ERK）,磷酸化ERK（phosphorylation extracellular signal regulated protein kinase,P-ERK）,P38MAPK,磷酸化P38MAPK（phosphor-P38,P-P38MAPK）,氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinase,JNK）和磷酸化JNK（phosphorylation c-Jun N-terminal kinase,P-JNK）的表达。结果与本组0 min比较,低、中、高剂量组各时间点通透率升高（P〈0.01）,P-ERK表达先升高,在30 min达极高值,逐渐恢复初始水平（P〉0.05）。与空白组比较,低剂量组10~240 min HRP通透率升高（P〈0.01）,30、60 min PERK蛋白表达升高（P〈0.05）,低、中、高剂量组180 min P-JNK表达升高（P〈0.05）,240 min P-JNK表达降低（P〈0.05）。与低剂量组比较,中剂量组10~180 min P-ERK表达升高（P〈0.05）,30~180 min通透率升高（P〈0.05）,180 min和240 min P-JNK表达降低（P〈0.05）。与中剂量组比较,高剂量组10~180 min通透率升高（P〈0.05）,10~180 min P-ERK表达升高（P〈0.05）,180 min和240 min P-JNK表达降低（P〈0.05）。结论冰片通过激活MAPKs信号通路的ERK磷酸化进而可逆性下调相关蛋白的表达,达到调节可逆性BTB开放的效果。
文摘目的探讨缓激肽与罂粟碱(papaverine,PA)联合应用对血肿瘤屏障通透性和紧密连接(tight junctions,TJ)相关蛋白之闭锁小带蛋白1(ZO-1)表达的影响。方法应用大鼠胶质瘤模型,伊文思蓝(Evans blue,EB)渗透性实验检测血肿瘤屏障通透性,免疫组织化学法测定ZO-1蛋白表达,RT-PCR法测定ZO-1 m RNA表达。结果与对照组大鼠脑肿瘤组织中EB含量[(0.182±0.026)μg/g]比较,缓激肽、罂粟碱、缓激肽+罂粟碱组(联合组)大鼠脑肿瘤组织中EB含量[分别为(0.487±0.031)、(0.503±0.029)和(0.875±0.040)μg/g]均明显升高(P<0.01);与缓激肽、罂粟碱组比较,联合组大鼠脑肿瘤组织中EB含量进一步增加(P<0.01)。与对照组(0.379±0.011)比较,缓激肽、罂粟碱、联合组大鼠脑肿瘤组织中ZO-1蛋白表达[分别为(0.259±0.008)、(0.252±0.010)和(0.135±0.015)]均明显下降(P<0.01);与缓激肽、罂粟碱组比较,联合组大鼠脑肿瘤组织中ZO-1蛋白表达进一步降低(P<0.01)。与对照组(0.876±0.062)比较,缓激肽、罂粟碱、联合组大鼠肿瘤组织中ZO-1 m RNA表达[分别为(0.735±0.036)、(0.695±0.050)和(0.420±0.047)]均明显降低(P<0.01);与缓激肽、罂粟碱组比较,联合组大鼠脑肿瘤组织中ZO-1 m RNA表达进一步降低(P<0.01)。结论缓激肽与罂粟碱联合应用对血肿瘤屏障的开放作用具有协同效应,此作用与紧密连接相关蛋白ZO-1表达水平下调有关。
