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内皮细胞抑制素血管内皮细胞生长抑制因子_(151)融合基因治疗胃癌的作用及其机制 被引量：2
1
作者 李喆 方国恩 +3 位作者 华积德 毕建威 潘欣 戚中田 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期1186-1189,共4页
目的探讨新型内皮细胞抑制素血管内皮细胞生长抑制因子151融合基因(hENDOVEGI151)治疗胃癌的作用机制。方法应用重复感染系数(MOI=100)的重组腺病毒AdhENDOVEGI151转染胃癌SGC7901、MKN28细胞和血管内皮ECV304细胞4h后,继续培养6d,噻唑... 目的探讨新型内皮细胞抑制素血管内皮细胞生长抑制因子151融合基因(hENDOVEGI151)治疗胃癌的作用机制。方法应用重复感染系数(MOI=100)的重组腺病毒AdhENDOVEGI151转染胃癌SGC7901、MKN28细胞和血管内皮ECV304细胞4h后,继续培养6d,噻唑蓝(MTT)比色法检测第1至6天3种细胞的存活率;流式细胞仪(FCM)丙化碘锭(PI)单染色法检测转染后48h胃癌和内皮细胞凋亡的情况;应用DNA片断化试验分析转染后12、24、36、48h时ECV304凋亡情况;应用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)和蛋白印迹法(Westernblot)检测融合基因转染对SGC7901表达促血管生成因子VEGF165的影响。结果AdhENDOVEGI151治疗强烈抑制ECV304增殖,72h抑制率为55.18%,144h抑制率89.86%;FCM检测出现明显凋亡峰,凋亡细胞约占(20.70±5.83)%,并且出现G1期阻滞(65.41±2.38)%和S期明显减少(21.81±1.52)%,与AdLacZ组和对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);转染组细胞DNA出现典型的梯形条带,尤以转染后24～36h最为明显,AdLacZ组及对照组DNA无裂解。AdhENDOVEGI151转染对胃癌细胞无直接毒性作用,但明显下调胃癌细胞VEGF165的表达水平。结论AdhENDOVEGI151治疗一方面强烈抑制内皮细胞增殖,诱导凋亡;另一方面抑制胃癌细胞表达VEGF165,多角度联合抑制肿瘤新生血管形成,使肿瘤细胞因缺血而发生大量凋亡。 展开更多
关键词 胃癌 基因治疗 血管内皮细胞生长抑制因子151 血管内皮细胞生长抑制因子 融合基因治疗 内皮细胞抑制素 胃癌细胞 ECV-304细胞 SGC-7901 肿瘤新生血管形成
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