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PTEN抑制人脐静脉内皮细胞ECV304的增殖和VEGF的表达 被引量：4
1
作者 颜晓燕 成志勇 +5 位作者 李琳 梁丽青 魏占惠 王亚丽 司淼 高连彬 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期508-513,共6页
目的:探讨与张力蛋白同源的10号染色体缺失的磷酸酶基因(phosphatase and tensin hemology deleted on chromo-some ten gene,PTEN)对人脐静脉内皮细胞ECV304细胞增殖、凋亡,及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VE... 目的:探讨与张力蛋白同源的10号染色体缺失的磷酸酶基因(phosphatase and tensin hemology deleted on chromo-some ten gene,PTEN)对人脐静脉内皮细胞ECV304细胞增殖、凋亡,及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及其受体1(VEGF receptor 1,VEGFR1)的影响。方法:将携带有野生型PTEN及绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因的腺病毒Ad-PTEN-GFP及空载体腺病毒Ad-GFP感染ECV304细胞,MTT实验、Hoechst3342染色法及流式细胞术检测ECV304细胞的增殖和凋亡。实时荧光定量PCR法检测Ad-PTEN-GFP感染后ECV304细胞中PTEN、VEGF和VEG-FR1 mRNA表达水平,ELISA检测ECV304细胞培养上清中VEGF的水平。鸡胚尿囊膜(chick chorioallantoic membrane,CAM)血管生长实验检测PTEN对鸡胚血管生长的影响。结果:与Ad-GFP相比,Ad-PTEN-GFP感染能明显抑制ECV304细胞的增殖,诱导细胞凋亡,5 d时增殖抑制率可达(50.38±5.42)%、细胞凋亡率达(73.3±5.3)%。当感染复数为100时,Ad-PTEN-GFP组ECV304细胞的VEGF及VEGFR1 mRNA表达水平分别为未感染组的(13.40±1.32)%及(46.12±5.20)%。同时,Ad-PTEN-GFP感染能够明显抑制CAM体内血管生长[血管指数(57.6±3.37)%vs(92.2±4.37)%,P<0.05]。结论:PTEN能显著抑制人脐静脉内皮细胞ECV304的增殖、促进其凋亡,其机制可能与抑制VEGF和VEGFR1表达,抑制血管新生有关。 展开更多
关键词 PTEN基因 血管内皮细胞生长因子(VEGF) 血管内皮细胞生长因子受体1(vegfr1) 血管新生 ECV304细胞
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人血管内皮细胞生长因子受体2小干扰RNA的设计及其表达载体的构建
2
作者 郭海霞 薛红漫 +3 位作者 黎阳 孟哲 陈环 李文益 《中华妇幼临床医学杂志（电子版）》 CAS 2007年第3期129-133,共5页
目的寻找并探讨干扰效果强的人血管内皮细胞生长因子受体2(vascular endothelialgrowth factor receptor2,VEGFR-2)小干扰RNA(small interference RNA,siRNA),以抑制白血病细胞。方法设计人VEGFR-2siRNA,并转染HL60细胞,MTT法筛选最有效... 目的寻找并探讨干扰效果强的人血管内皮细胞生长因子受体2(vascular endothelialgrowth factor receptor2,VEGFR-2)小干扰RNA(small interference RNA,siRNA),以抑制白血病细胞。方法设计人VEGFR-2siRNA,并转染HL60细胞,MTT法筛选最有效siRNA;合成VEGFR-2shRNA,并构建VEGFR-2shRNA表达载体;比较VEGFR-2shRNA表达载体转染HL60细胞后干扰的效果。结果筛选出最有效siRNA;VEGFR-2shRNA正确正向克隆入pENTR TM/U6,成功构建VEGFR-2shRNA表达载体;以其将VEGFR-2shRNA瞬时转染入HL60细胞后,细胞生长抑制率为84.9%,P<0.01;VEGFR-2蛋白表达明显减少。结论通过必要和有效的筛选机制,才能找到抑制效果相对高的siRNA靶序列;VEGFR-2shRNA表达载体可在细胞内简单、快速地克隆shRNA,VEGFR-2的表达抑制率高。 展开更多
关键词 小干扰RNA 血管内皮细胞生长因子受体2(vegfr-2) HL60细胞 表达载体
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血府逐瘀汤对冠心病心血瘀阻证模型大鼠血管新生因子的影响
3
作者 李静 郭志华 +5 位作者 刘建和 钟森杰 匡慧芳 刘祎 王明韵 张秋雁 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期822-826,共5页
目的研究血府逐瘀汤对冠心病心血瘀阻证模型大鼠血管新生因子的影响,揭示疗效机制。方法将SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、血府逐瘀汤组(14.04 g·kg^(-1))、曲美他嗪组(5.4 mg·kg^(-1)),采用冠状动脉左前降支结扎... 目的研究血府逐瘀汤对冠心病心血瘀阻证模型大鼠血管新生因子的影响,揭示疗效机制。方法将SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、血府逐瘀汤组(14.04 g·kg^(-1))、曲美他嗪组(5.4 mg·kg^(-1)),采用冠状动脉左前降支结扎法制备模型,假手术组只穿线不结扎,造模成功后进行药物干预,给药14d。给药结束后,心电图检测大鼠心率及ST段变化,心脏彩超检测大鼠心功能,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)、前列环素(PGI2)含量表达,HE和Masson染色观察心肌组织病理变化,免疫组化法(IHC)检测心肌组织中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子A(VEGF-A)、血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR-2)的蛋白表达水平。结果与正常组、假手术组比较,模型组大鼠心电图心率、ST段明显升高(P<0.01);LVEF、LVFS明显下降(P<0.01),LVIDd、LVIDs明显升高(P<0.01);血清NO、PGI2含量明显下降(P<0.01),ET-1含量明显升高(P<0.01);心肌组织病理形态学显示心肌细胞排列紊乱、炎症细胞浸润、组织细胞坏死,胶原纤维明显增多;心肌组织HIF-1α、VEGF-A、VEGFR-2蛋白表达升高(P<0.01)。与模型组比较,血府逐瘀汤组大鼠心电图心率、ST段明显下降(P<0.01);LVIDd、LVIDs明显下降(P<0.01),LVEF、LVFS明显升高(P<0.01);血清NO、PGI2含量明显上升(P<0.01),ET-1含量明显下降(P<0.01);心肌组织病理形态学显示排列较整齐,细胞炎症浸润、肿胀、坏死减少,胶原纤维明显减少;心肌组织HIF-1α、VEGF-A、VEGFR-2蛋白表达进一步升高(P<0.01)。结论血府逐瘀汤能够有效改善冠心病心血瘀阻证模型大鼠的心肌损伤,调节血管内皮功能,促进血管新生,其作用机制与促进心肌组织HIF-1α、VEGF-A、VEGFR-2蛋白表达有关。 展开更多
关键词 血府逐瘀汤 心血瘀阻证 缺氧诱导因子-1α(HIF-1α) 血管内皮生长因子A(VEGF-A) 血管内皮细胞生长因子受体2(vegfr-2) 血管新生
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