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题名PTC-209诱导体外螺旋神经元损伤作用及机制
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作者
朱国霞
罗家胜
张霞婧
吴永翔
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机构
西安市人民医院·西安市第四医院耳鼻咽喉头颈外科
西北工业大学医学研究院
新疆军区总医院耳鼻咽喉头颈外科
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出处
《西部医学》
2024年第2期186-190,197,共6页
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基金
国家自然科学基金项目(81903261)
西安市人民医院(西安市第四医院)科学孵化基金联合资助项目(ZD-3)。
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文摘
目的 探讨Bmi1特异性抑制剂PTC-209诱导体外培养耳蜗器官螺旋神经元(SGNs)、听觉神经纤维(ANFs)的损伤作用,并分析其可能的调控机制。方法 选用P3新生SD仔鼠进行耳蜗器官培养,首先与不同浓度PTC-209进行培养,确定损伤模型(PTC-209组),即10μM PTC-209与耳蜗器官共培养48 h。随后将10μM PTC-209与5 mM GSH共培养,确定最佳保护模型(GSH+PTC-209组),即Pre6h 5 mM GSH对10μM PTC-209培养48 h。最后将实验分为Ctrl组、GSH组、PTC-209组及GSH+PTC-209组,培养结束后予MitoSOXRed进行组织染色,激光共聚焦显微镜观察。结果 PTC-209诱导耳蜗SGNs和ANFs损伤随浓度增高和作用时间延长而加重,其损伤作用呈时间和浓度依赖性。不同时间预处理GSH对PTC-209诱导SGNs和ANFs损伤存在差异保护作用,将各组的ANFs进行统计分析发现Pre 6 h GSH 5 mM+PTC-209 10μM组与其余各组ANFs差异均有统计学意义(P<0.01),提示Pre 6 h 5 mM GSH对10μM PTC-209培养48 h诱导SGNs和ANFs的损伤有显著保护作用。MitoSOX Red染色显示Ctrl组、GSH组及GSH+PTC-209组均未见红色荧光标记的ROS在SGNs、支持细胞(SCs)和ANFS蓄积;PTC-209组红色荧光标记的ROS在SGNs、SCs和ANFS大量蓄积。统计分析显示PTC-209组和Ctrl组、GSH+PTC-209组ROS的红色荧光光密度值差异均有统计学意义(q分别为343.5、349.3,P<0.01)。结论 PTC-209可诱导SGNs处细胞内的自由基和线粒体中ROS大量蓄积,进而导致氧化还原失衡,促进SGNs死亡,但是调控机制尚需要进一步探讨。
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关键词
PTC-209
BMI1
ROS蓄积
耳蜗器官培养
螺旋神经元细胞
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Keywords
PTC-209
Bmi1
ROS accumulation
Cochlear organotypic culture
Spiral ganglion neurons
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分类号
R764.35
[医药卫生—耳鼻咽喉科]
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题名心钠素在原代培养大鼠耳蜗螺旋神经元细胞中的表达
被引量：3
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作者
周柯
孙菲
邱建华
米文娟
刘顺利
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机构
第四军医大学西京医院耳鼻咽喉-头颈外科
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出处
《中华耳科学杂志》
CSCD
2010年第2期225-230,共6页
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基金
国家自然科学基金重点项目(30930098)
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文摘
目的观察心钠素(atrial natriuretic peptide,ANP)在原代培养大鼠耳蜗螺旋神经元细胞(spiralgan-glion neurons,SGN)中是否表达。方法应用细胞培养技术原代培养SGN,并进行鉴定、纯化,应用免疫细胞化学方法和逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)检测原代培养的SGN中ANP的表达情况。结果原代培养的SGN经免疫细胞化学检测,证实其神经元特异性核蛋白(neuron-specific nuclear protein,NeuN)表达阳性,并且发现近胞核周围的胞质存在ANP免疫反应阳性颗粒,免疫荧光染色检测证实了ANP、NeuN的共同表达,RT-PCR方法检测到ANP-mRNA的存在。结论本实验表明原代培养的SGN具有表达与合成ANP的能力,提示ANP可能作为内耳SGN神经调节的一种递质或调质,参与其生理活动和突触传递功能的调节。
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关键词
心钠素
神经元特异性核蛋白
神经调节
螺旋神经元细胞
原代培养
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Keywords
Atrial natriuretic peptide
Neuronal-specific nuclear protein
Neuromodulation
Spiral ganglion neurons
Primary culture
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分类号
R339.16
[医药卫生—人体生理学]
R329-33
[医药卫生—基础医学]
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