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结核分枝杆菌Rv3425特异性蛋白片段与CFP10-ESAT6融合蛋白在结核抗体检测中的应用价值
被引量：
3
1
作者
吴静希
岳俊杰
+2 位作者
姜永强
郝淮杰
李艳
《生物技术通讯》
CAS
2011年第3期394-397,423,共5页
目的:对结核分枝杆菌Rv3425蛋白进行生物信息学分析及抗原表位预测,评价Rv342519-176重组蛋白与CFP10-ESAT6融合蛋白在结核抗体检测中的应用。方法:PCR扩增结核杆菌Rv3425蛋白19～176位的编码基因片段,原核表达并纯化Rv342519-176重组蛋...
目的:对结核分枝杆菌Rv3425蛋白进行生物信息学分析及抗原表位预测,评价Rv342519-176重组蛋白与CFP10-ESAT6融合蛋白在结核抗体检测中的应用。方法:PCR扩增结核杆菌Rv3425蛋白19～176位的编码基因片段,原核表达并纯化Rv342519-176重组蛋白(rRv342519-176)和CFP10-ESAT6融合蛋白(rCFP10-ESAT6),建立以重组蛋白为抗原的ELISA方法,评价2种蛋白在结核抗体检测中的联合应用价值。结果:具有抗原表位的rRv342519-176与rCFP10-ESAT6在大肠杆菌中高效表达;ELISA结果显示,rRv342519-176的敏感性为39%,特异性为97.5%;rCFP10-ESAT6的敏感性为37%,特异性为95%;2种蛋白联合检测,敏感性提高到57%,特异性为95%。结论:生物信息学预测Rv3425的优势抗原表位,表达并纯化的rRv342519-176和rCFP10-ESAT6在结核抗体检测中具有一定的抗原互补性,在保持特异性的基础上可显著提高检测敏感性。
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关键词
结核分枝杆菌
Rv3425
蛋白
融合
蛋白
cfp
10
-
esat
6
抗原性
下载PDF
职称材料
结核分枝杆菌CFP10-ESAT-6融合基因的表达及其多克隆抗体的制备
被引量：
10
2
作者
唐宇龙
刘湘新
+2 位作者
杨华
丁元生
胡忠义
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第10期811-814,共4页
以结核分枝杆菌标准株H37Rv的基因组DNA为模板,经重叠PCR扩增获得CFP10-ESAT-6融合基因片段,克隆于pET21a表达载体中,获得了重组质粒pET21a-CFP10-ESAT-6,将其转化大肠杆菌BL21细胞,经IPTG诱导表达,得到了25 ku的目的蛋白。表达产物经...
以结核分枝杆菌标准株H37Rv的基因组DNA为模板,经重叠PCR扩增获得CFP10-ESAT-6融合基因片段,克隆于pET21a表达载体中,获得了重组质粒pET21a-CFP10-ESAT-6,将其转化大肠杆菌BL21细胞,经IPTG诱导表达,得到了25 ku的目的蛋白。表达产物经纯化和定量分析后免疫新西兰大白兔,收集兔血清进行抗体ELISA检测。结果显示,成功构建了CFP10-ESAT-6融合基因的原核表达质粒,获得了CFP10-ESAT-6融合蛋白,以此蛋白免疫动物可产生高效价的抗体。
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关键词
结核分枝杆菌
融合
蛋白
cfp
10
-
esat
-
6
表达
多克隆抗体
下载PDF
职称材料
题名
结核分枝杆菌Rv3425特异性蛋白片段与CFP10-ESAT6融合蛋白在结核抗体检测中的应用价值
被引量：
3
1
作者
吴静希
岳俊杰
姜永强
郝淮杰
李艳
机构
军事医学科学院附属医院
军事医学科学院微生物流行病研究所
军事医学科学院生物工程研究所
出处
《生物技术通讯》
CAS
2011年第3期394-397,423,共5页
基金
首都特色临床医学技术发展研究课题(Z08050703080801)
文摘
目的:对结核分枝杆菌Rv3425蛋白进行生物信息学分析及抗原表位预测,评价Rv342519-176重组蛋白与CFP10-ESAT6融合蛋白在结核抗体检测中的应用。方法:PCR扩增结核杆菌Rv3425蛋白19～176位的编码基因片段,原核表达并纯化Rv342519-176重组蛋白(rRv342519-176)和CFP10-ESAT6融合蛋白(rCFP10-ESAT6),建立以重组蛋白为抗原的ELISA方法,评价2种蛋白在结核抗体检测中的联合应用价值。结果:具有抗原表位的rRv342519-176与rCFP10-ESAT6在大肠杆菌中高效表达;ELISA结果显示,rRv342519-176的敏感性为39%,特异性为97.5%;rCFP10-ESAT6的敏感性为37%,特异性为95%;2种蛋白联合检测,敏感性提高到57%,特异性为95%。结论:生物信息学预测Rv3425的优势抗原表位,表达并纯化的rRv342519-176和rCFP10-ESAT6在结核抗体检测中具有一定的抗原互补性,在保持特异性的基础上可显著提高检测敏感性。
关键词
结核分枝杆菌
Rv3425
蛋白
融合
蛋白
cfp
10
-
esat
6
抗原性
Keywords
Mycobacterium tuberculosis
Rv3425
cfp
10
-
esat
6
fusion protein
antigenicity
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
R392.1 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
结核分枝杆菌CFP10-ESAT-6融合基因的表达及其多克隆抗体的制备
被引量：
10
2
作者
唐宇龙
刘湘新
杨华
丁元生
胡忠义
机构
湖南农业大学动物医学院
上海市结核重点实验室
出处
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第10期811-814,共4页
文摘
以结核分枝杆菌标准株H37Rv的基因组DNA为模板,经重叠PCR扩增获得CFP10-ESAT-6融合基因片段,克隆于pET21a表达载体中,获得了重组质粒pET21a-CFP10-ESAT-6,将其转化大肠杆菌BL21细胞,经IPTG诱导表达,得到了25 ku的目的蛋白。表达产物经纯化和定量分析后免疫新西兰大白兔,收集兔血清进行抗体ELISA检测。结果显示,成功构建了CFP10-ESAT-6融合基因的原核表达质粒,获得了CFP10-ESAT-6融合蛋白,以此蛋白免疫动物可产生高效价的抗体。
关键词
结核分枝杆菌
融合
蛋白
cfp
10
-
esat
-
6
表达
多克隆抗体
Keywords
Mycobacterium tuberculosis
fusion protein
cfp
10
-
esat
-
6
expression
polyclonal antibody
分类号
S852.618 [农业科学—基础兽医学]
Q786 [农业科学—兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
结核分枝杆菌Rv3425特异性蛋白片段与CFP10-ESAT6融合蛋白在结核抗体检测中的应用价值
吴静希
岳俊杰
姜永强
郝淮杰
李艳
《生物技术通讯》
CAS
2011
3
下载PDF
职称材料
2
结核分枝杆菌CFP10-ESAT-6融合基因的表达及其多克隆抗体的制备
唐宇龙
刘湘新
杨华
丁元生
胡忠义
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2006
10
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职称材料
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