期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到272篇文章
< 1 2 … 14 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
单条线虫DNA提取方法 被引量：90
1
作者 王江岭 张建成 顾建锋 《植物检疫》 北大核心 2011年第2期32-35,共4页
大量线虫DNA的提取可能因线虫不纯而受到污染,溶液多次转移造成DNA损失,并且在提取过程中加入过多的溶质离子也可能对PCR扩增有干扰,从而影响下一步的研究。本研究用液氮快速冷冻单条线虫,继以85℃快速变温,用温度的剧烈变化使线虫裂解... 大量线虫DNA的提取可能因线虫不纯而受到污染,溶液多次转移造成DNA损失,并且在提取过程中加入过多的溶质离子也可能对PCR扩增有干扰,从而影响下一步的研究。本研究用液氮快速冷冻单条线虫,继以85℃快速变温,用温度的剧烈变化使线虫裂解,再以蛋白酶K降解蛋白质,提高了获得的DNA的纯度和数量。通过多种线虫的验证试验表明,该方法高效、快速、稳定。该试验方法有如下优点:(1)使用Taq酶附带的PCR Buffer代替WLB裂解液和SDS裂解液,减少了配置的不确定性和外来离子的影响。(2)整个提取过程在一个PCR管中完成,并可直接用于PCR扩增,没有溶液的转移和过多的溶质添加,减少污染和对后续PCR的影响。(3)使用变温处理代替其他手工破碎方法,减少了外界污染物的掺入,不需要手工操作技巧。与另外2种提取线虫DNA的蛋白酶K方法相比,本研究提取单条线虫DNA的时间短,效率高,PCR扩增结果稳定可靠,符合快速检测的需求;此外,本研究所使用的方法降解单条线虫蛋白质彻底,提取DNA数量多,稀释32倍仍能扩增出明显的条带,可进行多次分子试验研究。 展开更多
关键词 线虫 DNA提取 方法优化 蛋白酶k 温度
原文传递
4种硅藻检验方法的比较研究 被引量：19
2
作者 王恩银 孟祥志 《中国法医学杂志》 CSCD 2005年第5期274-277,I0004,共5页
目的比较硝酸乙醇法、酶消化法、“破机罐”法和Soluene-350法在检验硅藻中各自的优缺点,为法医实际办案提供理论依据。方法取家兔肝、肾和骨髓3种组织各2g,分别用上述4种方法消化,比较4种不同方法分别将组织这些完全消化所需要的时间... 目的比较硝酸乙醇法、酶消化法、“破机罐”法和Soluene-350法在检验硅藻中各自的优缺点,为法医实际办案提供理论依据。方法取家兔肝、肾和骨髓3种组织各2g,分别用上述4种方法消化,比较4种不同方法分别将组织这些完全消化所需要的时间、消化能力、对硅藻的检出率以及对硅藻的破坏程度。结果消化时间以Solu-ene-350法耗时最长,其次是酶消化法,硝酸乙醇法和破机罐法耗时最短。4种方法消化能力的强弱依次是“破机罐”法、硝酸乙醇法、酶消化法、Soluene-350法。对梅尼小环藻(淡水)和桥弯藻(淡水),酶消化法的检出率最高,硝酸乙醇法其次,“破机罐”法和Soluene-350法最低。对舟形藻(海水),酶消化法的检出率高,其余3种方法几乎没检测到。扫描电镜观察:酶消化法对硅藻结构几乎没有破坏。其余3种方法对硅藻均有不同程度的破坏。结论从降低成本、提高检测效率角度,应选择“破机罐”法和硝酸乙醇法;从安全性和环保角度,或可疑水样为海水及硅藻密度较小时,应选择酶消化法;Soluene-350法因耗时长、成本高且硅藻检出率低,不适于在基层法医中推广。 展开更多
关键词 法医病理学 溺死 硅藻 蛋白酶k 扫描电镜 检验方法 硅藻 酶消化法 扫描电镜观察 消化能力 消化时间 降低成本 乙醇法 检出率
下载PDF
RAPD技术在龙须菜遗传多样性研究中的应用 Ⅰ总DNA的提取及RAPD反应条件的优化 被引量：9
3
作者 李向峰 隋正红 张学成 《青岛海洋大学学报（自然科学版）》 CSCD 1998年第2期293-298,共6页
比较两种从龙须菜中提取总ＤＮＡ的方法，这两种方法得到的染色体ＤＮＡ具有较好的完整性，从ＤＮＡ的产量、蛋白质含量等指标可以看出，ＣＴＡＢ法优于蛋白酶Ｋ法。实验对龙须菜ＲＡＰＤ反应条件进行了优化：在２５μＬ反应体系中，含... 比较两种从龙须菜中提取总ＤＮＡ的方法，这两种方法得到的染色体ＤＮＡ具有较好的完整性，从ＤＮＡ的产量、蛋白质含量等指标可以看出，ＣＴＡＢ法优于蛋白酶Ｋ法。实验对龙须菜ＲＡＰＤ反应条件进行了优化：在２５μＬ反应体系中，含有Ｍｇ２＋２．５ｍｍｏｌ／Ｌ，ｄＮＴＰ１００μｍｏｌ／Ｌ，总ＤＮＡ２５ｎｇ，引物０．２μｍｏｌ／Ｌ和Ｔａｑ酶１Ｕ，经９４℃变性１ｍｉｎ，３５℃退火１ｍｉｎ，７２℃延伸２ｍｉｎ，３５个循环，得到稳定的ＲＡＰＤ扩增图谱。 展开更多
关键词 龙须菜 蛋白酶k 脱氧核糖核酸 遗传多样性
下载PDF
单条线虫DNA提取方法研究 被引量：14
4
作者 容万韬 王金成 +4 位作者 刘鹏 林宇 郭京泽 黄国明 孙建华 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2014年第2期127-132,共6页
为探寻一种高效、稳定、廉价的单条线虫DNA提取方法,以6种植物寄生线虫作为试验材料,比较了4种方法,即直接裂解法、冻融裂解法、切割裂解法、切割冻融裂解法对单条线虫DNA的提取效果。结果表明,对线虫进行管内切割的切割冻融裂解法与切... 为探寻一种高效、稳定、廉价的单条线虫DNA提取方法,以6种植物寄生线虫作为试验材料,比较了4种方法,即直接裂解法、冻融裂解法、切割裂解法、切割冻融裂解法对单条线虫DNA的提取效果。结果表明,对线虫进行管内切割的切割冻融裂解法与切割裂解法高效、稳定,冻融裂解法效果较差,直接裂解法效果最差。对线虫进行管内切割的切割冻融裂解法和切割裂解法可高效、稳定地获得高质量的单条线虫总DNA,满足下一步的PCR扩增需求。 展开更多
关键词 蛋白酶k 裂解 冻融 管内切虫 DNA提取
下载PDF
蛋白酶K的研究进展 被引量：11
5
作者 吴彤 王瑞明 +1 位作者 黄磊 徐志南 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2013年第14期380-384,共5页
蛋白酶K是一种在生物科学研究和生物加工过程中具有多种应用的重要丝氨酸蛋白酶,并且在食品和饲料工业中有潜在的重要应用。本文对蛋白酶K的分子结构、催化特性、定向进化、重组表达和应用研究的最新进展进行了研究总结,并对蛋白酶K在... 蛋白酶K是一种在生物科学研究和生物加工过程中具有多种应用的重要丝氨酸蛋白酶,并且在食品和饲料工业中有潜在的重要应用。本文对蛋白酶K的分子结构、催化特性、定向进化、重组表达和应用研究的最新进展进行了研究总结,并对蛋白酶K在未来的研究方向进行了展望。 展开更多
关键词 蛋白酶k 分子结构 性质 应用
下载PDF
酶消化-ICP/MS法测定血中稀土元素的方法研究 被引量：11
6
作者 许瑛华 梁旭霞 +2 位作者 连晓文 朱杰民 杜达安 《中国卫生检验杂志》 CAS 2006年第7期769-772,共4页
目的：建立蛋白酶消化-ICP／MS法同时测定血中13种稀土元素的方法。方法：对蛋白酶K的使用浓度、消化时间、消化温度等条件及ICP／MS仪器测定条件优化，并对血样实测分析。结果：在优化的条件下，蛋白酶K可将血样消化完全，方法操作简... 目的：建立蛋白酶消化-ICP／MS法同时测定血中13种稀土元素的方法。方法：对蛋白酶K的使用浓度、消化时间、消化温度等条件及ICP／MS仪器测定条件优化，并对血样实测分析。结果：在优化的条件下，蛋白酶K可将血样消化完全，方法操作简单、省时，一次进样可同时测定13种稀土元素，各元素最低检出浓度为0．5～2ng／L，相对标准偏差均〈4．87％，加标回收率96．0％～104％；方法的线性动态范围高达9个数量级，根据血样中各稀土元素含量情况，选用0．005～0．100μg／L为工作曲线范围，相关系数均〉0．999。结论：该方法适合于大批量血液样本中13种微量稀土元素的同时检测。 展开更多
关键词 稀土元素 蛋白酶k 电感耦合等离子体质谱 血液
下载PDF
寄生疫霉parA1基因的克隆及在大肠杆菌中的表达 被引量：9
7
作者 梁元存 刘爱新 +2 位作者 董汉松 王金生 张天宇 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期202-205,共4页
根据已报道的寄生疫霉 (Phytophthoraparasitica)parA1基因的序列设计引物 ,从 4株寄生疫霉中国菌株 (3株来自烟草 ,1株来自刺槐 )中克隆到此基因并进行了重组表达。序列分析表明 4株寄生疫霉parA1基因序列高度保守。对表达载体pET 30a... 根据已报道的寄生疫霉 (Phytophthoraparasitica)parA1基因的序列设计引物 ,从 4株寄生疫霉中国菌株 (3株来自烟草 ,1株来自刺槐 )中克隆到此基因并进行了重组表达。序列分析表明 4株寄生疫霉parA1基因序列高度保守。对表达载体pET 30a(+)双酶切 ,构建表达Parasiticein蛋白的表达载体pET eli,用CaCl2 法转化大肠杆菌(Escherichiacoli)BL2 1,通过诱导在大肠杆菌中进行非融合表达 ,表达产物在烟草上引起过敏性反应。性质测定表明 ,表达产物有一定的耐热性 ,并对蛋白酶K敏感。 展开更多
关键词 寄生疫霉 parA1基因 克隆 大肠杆菌 表达 耐热性 蛋白酶k 序列分析 烟草 黑胫病
下载PDF
蛋白酶K对盐析法提取全血DNA的影响 被引量：10
8
作者 贾二娟 朱伟锋 余乐涵 《实验与检验医学》 CAS 2011年第3期263-264,共2页
盐析法是目前血液基因组DNA常用的提取方法之一,具有简便、快速、得到DNA的质量高的特点[1]。但有的研究中使用了蛋白酶K[2,3],有的研究中未使用蛋白酶K[1,4],均得到了高质量的DNA。为了了解蛋白酶K在盐析法提取全血DNA中的作用,
关键词 DNA提取 盐析 蛋白酶k
下载PDF
PLA在受控堆肥条件下的生物降解行为研究 被引量：9
9
作者 扈蓉 陈丽琼 +1 位作者 黄开胜 李思源 《塑料科技》 CAS 北大核心 2012年第8期68-71,共4页
依据ISO 14855的检测方法,研究了聚乳酸(PLA)在受控堆肥条件下的生物降解性能,结果表明:PLA具有良好的生物降解性。在培养土提取液中,以蛋白酶K对PLA膜进行降解,显微镜观察发现,PLA膜表面逐渐被蛋白酶侵蚀;红外光谱研究表明,PLA膜在降... 依据ISO 14855的检测方法,研究了聚乳酸(PLA)在受控堆肥条件下的生物降解性能,结果表明:PLA具有良好的生物降解性。在培养土提取液中,以蛋白酶K对PLA膜进行降解,显微镜观察发现,PLA膜表面逐渐被蛋白酶侵蚀;红外光谱研究表明,PLA膜在降解前后的分子结构没有发生很大变化。 展开更多
关键词 聚乳酸 堆肥 生物降解 蛋白酶k
原文传递
单条固定线虫基因组DNA提取及18S rRNA基因PCR扩增 被引量：8
10
作者 沈锡权 杨官品 廖梅杰 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期33-36,共4页
根据线虫18S核糖体RNA基因PCR扩增效果比较了丙酮、乙醇、乙醇+0.05mol/LEDTA(pH8.0)和5%海水福尔马林4种固定剂,碱裂解和蛋白酶K处理2种单条线虫基因组DNA提取方法的优劣。用乙醇固定的样品最适合制备PCR模板DNA,而5%海水福尔马林固定... 根据线虫18S核糖体RNA基因PCR扩增效果比较了丙酮、乙醇、乙醇+0.05mol/LEDTA(pH8.0)和5%海水福尔马林4种固定剂,碱裂解和蛋白酶K处理2种单条线虫基因组DNA提取方法的优劣。用乙醇固定的样品最适合制备PCR模板DNA,而5%海水福尔马林固定的样品能最完整地保持样品形态。蛋白酶K处理获得的DNA较碱裂解获得的更适合PCR扩增。结果有助于分子生物学方法在海洋线虫分类、多样性和生态学研究中的应用。 展开更多
关键词 PCR扩增 基因组DNA提取 RRNA基因 18S DNA提取方法 分子生物学方法 福尔马林 蛋白酶k 模板DNA 生态学研究 效果比较 乙醇固定 海洋线虫 碱裂解 PCB M基因 核糖体 固定剂 样品 多样性 海水
下载PDF
阿胶DNA提取方法优化 被引量：8
11
作者 陈志宣 龚国利 钱云开 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2014年第21期13-16,共4页
目的:优选阿胶DNA的提取方法和效率,为其他高蛋白含量产品中DNA的提取提供参考。方法:采用十二烷基苯磺酸钠(SDS)法和十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法提取阿胶DNA,针对阿胶产品的自身特性,优选SDS法中蛋白酶K作用时间和蛋白洗脱步骤。结果... 目的:优选阿胶DNA的提取方法和效率,为其他高蛋白含量产品中DNA的提取提供参考。方法:采用十二烷基苯磺酸钠(SDS)法和十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法提取阿胶DNA,针对阿胶产品的自身特性,优选SDS法中蛋白酶K作用时间和蛋白洗脱步骤。结果:在同等条件下,SDS法较CTAB法对阿胶DNA的平均提取量高0.022 g·L-1。优化的SDS法为蛋白酶K作用时间1.5 h,使用酚-三氯甲烷-异戊醇洗脱阿胶中蛋白质,重复3次;阿胶DNA的纯度较原工艺提高了48.3%。结论:采用SDS法对阿胶中蛋白的清除作用较CTAB法效率高,优化的SDS法对阿胶DNA的提取适用性较强,为阿胶中动物来源分子生物学检测提供条件。 展开更多
关键词 阿胶 DNA提取 蛋白酶k 酚-三氯甲烷-异戊醇
原文传递
基于密码子优化的蛋白酶K在毕赤酵母中的表达及分离纯化 被引量：8
12
作者 孙风敏 韩焱 李文利 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期2198-2207,共10页
【目的】提高蛋白酶K在毕赤酵母中的表达产量,建立分离纯化方法。【方法】首先对蛋白酶K密码子进行优化,将其导入毕赤酵母GS115中实现分泌表达。然后对甲醇浓度、发酵温度和p H等表达条件进行优化,再对硫酸铵沉淀、亲和层析等纯化工艺... 【目的】提高蛋白酶K在毕赤酵母中的表达产量,建立分离纯化方法。【方法】首先对蛋白酶K密码子进行优化,将其导入毕赤酵母GS115中实现分泌表达。然后对甲醇浓度、发酵温度和p H等表达条件进行优化,再对硫酸铵沉淀、亲和层析等纯化工艺进行比对分析。【结果】蛋白酶K密码子优化后实现了在毕赤酵母中的高效表达。在甲醇量0.75%、温度25°C和p H 7.0条件下进行发酵罐培养,蛋白酶K表达量达到2.2 g/L。采用Ni-NTA亲和柱对发酵液进行纯化可以得到较好的纯化效果。【结论】密码子优化后的蛋白酶K在毕赤酵母中高效表达并可以利用Ni-NTA亲和柱进行有效分离纯化。 展开更多
关键词 蛋白酶k 密码子优化 表达条件优化 分离纯化
原文传递
蛋白酶K-Chelex100法提取肋软骨DNA技术的优化 被引量：6
13
作者 王会品 王孝力 +3 位作者 杨巍 谢云铁 王晓伟 谢波 《中国法医学杂志》 CSCD 2012年第1期54-55,共2页
目的优化蛋白酶K的用量和消化时间,用于提取肋软骨DNA。方法 30份肋软骨样本各取大小为0.2cm×0.3cm×0.4cm的软骨块5份,分别编为A～E组。采用不同蛋白酶K用量和消化时间的Chelex100方法,提取5组各30份软骨块DNA,进行DNA定量、... 目的优化蛋白酶K的用量和消化时间,用于提取肋软骨DNA。方法 30份肋软骨样本各取大小为0.2cm×0.3cm×0.4cm的软骨块5份,分别编为A～E组。采用不同蛋白酶K用量和消化时间的Chelex100方法,提取5组各30份软骨块DNA,进行DNA定量、采用Sinofiler试剂盒扩增后进行电泳检测,采用非参数检验法比较检验成功率。结果 A～E组样本中采用加入2μL蛋白酶K并消化30min的D组方法成功率最高(96.7%),组间差异具有统计学意义。结论采用蛋白酶K-Chelex100方法,选择加入2μL蛋白酶K,消化30min可有效提高肋软骨DNA分型检验成功率。 展开更多
关键词 法医物证学 蛋白酶k 肋软骨
原文传递
分子伴侣增强蛋白酶K在毕赤酵母中的表达及对羊毛鳞片层的作用分析
14
作者 蔡逸安 张轶群 +4 位作者 杨子璇 刘业学 刘文龙 路福平 李玉 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期307-313,共7页
【目的】通过分子伴侣共表达增强毕赤酵母中异源蛋白酶K的分泌水平,并对其的羊毛无氯剥鳞作用机制进行解析,旨在提高蛋白酶K的表达量并为高效酶法剥鳞技术的应用奠定基础。【方法】利用毕赤酵母表达系统对tprK基因进行异源表达,首次分... 【目的】通过分子伴侣共表达增强毕赤酵母中异源蛋白酶K的分泌水平,并对其的羊毛无氯剥鳞作用机制进行解析,旨在提高蛋白酶K的表达量并为高效酶法剥鳞技术的应用奠定基础。【方法】利用毕赤酵母表达系统对tprK基因进行异源表达,首次分析了影响蛋白质折叠和质量控制的分子伴侣Ssa1、Erj5、Sil1、Hac1、Kar2、Lhs1和Ydj1分别过表达对TPRK的表达量和酶活力的作用,并对TPRK处理的羊毛纤维效果进行分析。【结果】TPRK在毕赤酵母GS115中表达,其最适反应条件为65℃、pH 9.0,且具有良好的热稳定性和pH稳定性。过表达ssa1、hac1、erj5和sil1基因的重组菌株酶活分别提升了36.8%、20.0%、17.7%和14.8%。5 L发酵罐进行高密度发酵,诱导72 h后,TPRK的酶活达到77471.99 U/mL。在羊毛水解应用中TPRK可水解羊毛鳞片内层使鳞片逐渐剥落,起到剥鳞效果,并且最适水解条件为:TPRK添加量为300 U/mL、反应温度55℃、pH 9.0和反应时间2 h。【结论】过表达分子伴侣Ssa1能够有效提升TPRK的表达量,利用该TPRK处理羊毛纤维,可有效去除羊毛鳞片层,而对羊毛核心皮质层造成的损伤较小。 展开更多
关键词 蛋白酶k 分子伴侣 毕赤酵母 生物酶处理 防毡缩
下载PDF
牡蛎中诺如病毒核酸两种提取方法比较 被引量：6
15
作者 袁巧 李晖 +3 位作者 邓小玲 莫艳玲 方苓 柯昌文 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期568-572,共5页
目的寻找简便有效的更适合长期监测的牡蛎中诺如病毒核酸提取的方法。方法通过甘氨酸聚乙二醇富集后硅胶膜离心柱法(方法A)和蛋白酶K生物消化后顺磁性硅胶基法(方法B)两种核酸提取方法,采用实时RT-PCR检测自然状态的牡蛎和人工染毒状态... 目的寻找简便有效的更适合长期监测的牡蛎中诺如病毒核酸提取的方法。方法通过甘氨酸聚乙二醇富集后硅胶膜离心柱法(方法A)和蛋白酶K生物消化后顺磁性硅胶基法(方法B)两种核酸提取方法,采用实时RT-PCR检测自然状态的牡蛎和人工染毒状态的牡蛎来进行比较。结果两种方法的阳性检出率没有差异,总体比较方法B的病毒回收率高。结论方法B优于方法A,且方法B更快捷,故方法B更适合长期监测。 展开更多
关键词 牡蛎 诺如病毒 核酸 甘氨酸聚乙二醇 硅胶膜离心柱法 蛋白酶k 顺磁性硅胶基法
下载PDF
蛋白酶K消化PCR产物提高克隆效率 被引量：4
16
作者 刘建荣 赵晓瑜 静天玉 《河北大学学报（自然科学版）》 CAS 1997年第S1期36-39,共4页
利用蛋白酶K消化PCR产物人脾Ro多肽基因片段,从51个白色转化子中获得41株人脾Ro(SS-A)多肽基因阳性克隆,克隆阳性率由0提高到79％。证明该法是一种提高PCR产物克隆效率的有效方法。
关键词 蛋白酶k PCR产物 人脾Ro(SS-A)多肽基因片段 克隆效率
下载PDF
蛋白酶K对厌氧消化系统EPS产生特性及消泡潜能的影响
17
作者 邹苗苗 李蕾 +3 位作者 叶文杰 杨美茹 袁荣焕 彭绪亚 《环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期293-304,共12页
起泡是厨余垃圾厌氧消化过程中常见的操作难题,高效消泡方法的开发备受关注.先前研究表明胞外聚合物(EPS)是起泡的诱因,其中的疏水性蛋白组分更与泡沫形成直接相关.在此背景下,本研究向厌氧消化系统中添加不同剂量的蛋白酶K,以期探索其... 起泡是厨余垃圾厌氧消化过程中常见的操作难题,高效消泡方法的开发备受关注.先前研究表明胞外聚合物(EPS)是起泡的诱因,其中的疏水性蛋白组分更与泡沫形成直接相关.在此背景下,本研究向厌氧消化系统中添加不同剂量的蛋白酶K,以期探索其对厨余垃圾厌氧消化系统EPS产生特性及消泡潜能的影响.结果表明,蛋白酶K对厌氧消化微生物没有生物毒性,添加0.2 mg·g^(-1) TS蛋白酶K后系统甲烷产率反而比对照组高12.35%±3.36%.此外,蛋白酶K可以有效降低厨余垃圾厌氧消化系统的起泡趋势和泡沫稳定性,具有作为消泡剂的潜质.蛋白酶K的添加改变了EPS的产生特性,促进了溶解型EPS(S-EPS)、松散结合型EPS(LB-EPS)、疏水性S-EPS、疏水性LB-EPS的产生,降低了疏水性紧密结合型EPS(TB-EPS)的含量;从组成成分看,蛋白酶K促进了各类EPS腐殖质的生成,降低了疏水性蛋白的含量,S-EPS中β-折叠的相对含量减少是疏水性蛋白含量减少的主要原因.蛋白酶K的加入影响了微生物群落结构,相关性分析表明,起泡趋势和泡沫稳定性与疏水性TBEPS、疏水性多糖(PS)、疏水性蛋白质(PN)呈正相关,与LB-EPS呈负相关.Firmicutes门是与起泡特性参数最相关的门.蛋白酶K通过降低Firmicutes门中Syntrophomonas属、Fastidiosipila属的相对丰度,降低疏水性PS和疏水性PN的含量,增加LB-EPS的含量来达成其消泡能力. 展开更多
关键词 厌氧消化 厨余垃圾 起泡 蛋白酶k 胞外聚合物
原文传递
基于Chelex-100和蛋白酶K的蚊虫足样本DNA提取技术 被引量：6
18
作者 闫振天 司风玲 +2 位作者 鲜鹏杰 何正波 陈斌 《重庆师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期26-31,共6页
【目的】探索出一种蚊虫附肢(如单只足)微量DNA的提取方法,用于蚊虫分子鉴定和基因型研究。【方法】采用Chelex-100溶液和蛋白酶K结合的方法用于单只蚊虫足的微量DNA的提取。基于该方法,将不同方法保存的不同蚊种的足作为实验材料,从中... 【目的】探索出一种蚊虫附肢(如单只足)微量DNA的提取方法,用于蚊虫分子鉴定和基因型研究。【方法】采用Chelex-100溶液和蛋白酶K结合的方法用于单只蚊虫足的微量DNA的提取。基于该方法,将不同方法保存的不同蚊种的足作为实验材料,从中提取蚊虫基因组DNA;以之为模板,扩增核糖体DNA的D2,D3,ITS2区以及线粒体COI和COII基因,并对PCR扩增产物进行测序。【结果】提取到了高质量的基因组DNA,PCR扩增获得了高质量的DNA扩增片段,进一步测序获得了高质量的序列。【结论】该方法价格便宜,操作简单方便,减少了对蚊虫样本的依赖。单只足用于DNA提取不影响对剩下的部分开展形态学等研究,可以作为蚊虫分子生物学研究中微量DNA样本提取的重要方法,也为其他昆虫微量DNA的提取提供理论依据。 展开更多
关键词 Chelex-100 蛋白酶k 蚊虫 足 DNA提取 PCR扩增
原文传递
蛋白酶K活性检测方法建立 被引量：5
19
作者 林霖 李淅 +3 位作者 潘兰芳 张宇 兰全学 杨国武 《食品科技》 CAS 北大核心 2013年第2期266-271,共6页
蛋白酶K常用于核酸提取实验中,其作用为去除基因组中的组蛋白以及去除核酸中的DNA酶和RNA酶。目前已有许多国家标准采用分子生物学技术检测食品中的转基因成分、动物属性、食源性致病菌、病毒等,其中核酸提取均需使用蛋白酶K。然而由于... 蛋白酶K常用于核酸提取实验中,其作用为去除基因组中的组蛋白以及去除核酸中的DNA酶和RNA酶。目前已有许多国家标准采用分子生物学技术检测食品中的转基因成分、动物属性、食源性致病菌、病毒等,其中核酸提取均需使用蛋白酶K。然而由于目前缺乏统一的蛋白酶K活性检测标准,各个厂家均有各自的活性检测方法,其采用的底物、缓冲液、pH值、温度均大不相同,这也导致了酶活性定义大不相同,这使得所购买的蛋白酶K酶活性不统一,间接也影响了核酸提取的质量导致影响了检测结果。在现有国标蛋白酶活性检测标准基础上对检测方法进行改进,使其更接近使用的条件和温度,为标准建立提供参考。 展开更多
关键词 蛋白酶k 活性检测 丝氨酸蛋白酶 紫外分光光度法
原文传递
酶消化-ICP/MS法测定广东省部分地区居民血中稀土元素含量 被引量：5
20
作者 许瑛华 马文军 +3 位作者 邓峰 梁旭霞 朱杰民 杜达安 《华南预防医学》 2006年第4期1-5,共5页
目的研究广东省部分地区居民血中稀土元素(REE)的本底值特征。方法对广东省广州市越秀区和韶关市北江区两个地区城市居民进行分层整群随机抽样,以问卷调查方式进行流行病学调查,并采用蛋白酶消化-ICP/MS法检测全血中La、Ce、Pr、Nb、Sm... 目的研究广东省部分地区居民血中稀土元素(REE)的本底值特征。方法对广东省广州市越秀区和韶关市北江区两个地区城市居民进行分层整群随机抽样,以问卷调查方式进行流行病学调查,并采用蛋白酶消化-ICP/MS法检测全血中La、Ce、Pr、Nb、Sm、Eu、Gd、Dy、Ho、Er、Tm、Yb和Lu共13种稀土元素。结果分别调查广州越秀区和韶关北江区515、735名居民,两地区居民全血中13种稀土元素在本方法检出限范围内(10-10)均可检出;其中越秀区13种REE总量均值为1.826μg/L,轻稀土含量为1.679μg/L,配分为91.9%;重稀土含量为0.147μg/L,配分为8.1%;La、Ce占稀土总量的88.8%。北江区13种REE总量均值为2.917μg/L,轻稀土含量为2.720μg/L,配分为93.2%;重稀土含量为0.197μg/L,配分为6.8%,La、Ce占稀土总量的87.6%;两地区居民血中稀土元素总量均值差异有统计学意义(P<0.05),各分量值除Ho、Er外,其他11种元素分量值差异有统计学意义(均P<0.05)。结论两个地区居民血中稀土特点以轻稀土为主,高Ce、高La,不同地区居民血中稀土元素本底值存在差异。 展开更多
关键词 稀土元素 蛋白酶k 电感耦合等离子体质谱 血液
下载PDF
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 2 … 14 下一页 到第 页
使用帮助 返回顶部