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用于质谱分析的细胞总蛋白三种酶切方法比较 被引量:1
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作者 胡家 杨颖 +2 位作者 李蕾 殷爱红 李慎涛 《山西医科大学学报》 CAS 2019年第6期848-853,共6页
目的比较无去污剂的细胞总蛋白三种酶切样品制备方法。方法采用细胞吸入胶内酶切法、蛋白吸入胶内酶切法及超滤管辅助溶液酶切法对细胞总蛋白进行酶切,再用液质联用技术对三种酶切方法制备的多肽样品进行蛋白鉴定。结果通过液质联用技... 目的比较无去污剂的细胞总蛋白三种酶切样品制备方法。方法采用细胞吸入胶内酶切法、蛋白吸入胶内酶切法及超滤管辅助溶液酶切法对细胞总蛋白进行酶切,再用液质联用技术对三种酶切方法制备的多肽样品进行蛋白鉴定。结果通过液质联用技术鉴定,细胞吸入胶内酶切法制备的样品获得3835个蛋白,蛋白吸入胶内酶切法制备的样品获得2340个蛋白,超滤管辅助溶液酶切法制备的样品获得4248个蛋白。韦恩图分析显示,不同酶切方法得到的蛋白种类存在差异。对细胞吸入胶内酶切法和超滤管辅助溶液酶切法所获得的蛋白进行基因本体(geneontology,GO)分析发现,细胞吸入胶内酶切法能获得更多膜结合蛋白。结论三种无去污剂酶切方法,避免了去污剂的种种弊端,其中超滤管辅助溶液酶切法和细胞吸入胶内酶切法更优。 展开更多
关键词 细胞吸入酶切 蛋白吸入酶切 超滤管辅助溶液酶切 质谱分析
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