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一种安全制备活化琼脂糖树脂的方法 被引量:3
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作者 伍学勤 吴岑 +2 位作者 凌晓红 陈建文 赫荣乔 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第2期328-331,共4页
溴化氰是常用载体 (树脂 )活化剂 ,但其毒性很强 ,具有挥发性 ,活化后树脂带较强的电荷而导致非特异性吸附 .羰基二咪唑 (1,1′ carboxyl diimidazole,CDI)近年来被用于树脂的活化 ,具有毒性低、相对安全、方便、活化效率高、活化后树... 溴化氰是常用载体 (树脂 )活化剂 ,但其毒性很强 ,具有挥发性 ,活化后树脂带较强的电荷而导致非特异性吸附 .羰基二咪唑 (1,1′ carboxyl diimidazole,CDI)近年来被用于树脂的活化 ,具有毒性低、相对安全、方便、活化效率高、活化后树脂所带电荷相对较少等优点 .由于国内同行很少采用CDI活化树脂制备亲和层析柱或固定化酶 。 展开更多
关键词 制备 活化琼脂糖树脂 亲和层析 固定化 羰基二咪唑 溴化氰 3-磷酸甘油醛脱氢 蚯蚓蛋白酶
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酶促反应的“诱导契合-锁钥”模式 被引量:12
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作者 张子剑 潘荣 +1 位作者 周园 赫荣乔 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2011年第5期418-426,共9页
在酶学理论中,阐释酶识别底物专一性的代表性学说有"锁钥"和"诱导契合"模型等.作者此前研究了蚯蚓蛋白酶Ⅰ(Eisenia fetida proteaseⅠ,EfP-Ⅰ)的底物专一性,提出了"诱导契合-锁钥"反应模式.然而,采用EfP... 在酶学理论中,阐释酶识别底物专一性的代表性学说有"锁钥"和"诱导契合"模型等.作者此前研究了蚯蚓蛋白酶Ⅰ(Eisenia fetida proteaseⅠ,EfP-Ⅰ)的底物专一性,提出了"诱导契合-锁钥"反应模式.然而,采用EfP-Ⅰ建立的模式是否具有普遍的酶学意义需要进一步论证.以蚯蚓蛋白酶Ⅱ(Eisenia fetida proteaseⅡ,EfP-Ⅱ)、枯草杆菌蛋白酶(subtilisin,Sub)以及乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)为材料,分别研究了底物反应后酶与其他底物的相互作用.结果显示,经过凝血酶底物chromozym TH(CTH)反应后,蚯蚓蛋白酶Ⅱ和枯草杆菌蛋白酶与尿激酶底物(chromozym U,CU)的反应活性显著降低(P<0.05),表现出符合"诱导契合-锁钥"反应的模式.蚯蚓蛋白酶Ⅱ和枯草杆菌蛋白酶先与CU反应后,却仍能与CTH反应,但后续不能与CU发生反应,仍然表现为"诱导契合-锁钥"模式.另外,丙酮酸反应后的LDH,对乳酸的反应活力显著降低(P<0.05),而乳酸反应后的LDH对丙酮酸的活性却无显著变化.这可能是丙酮酸诱导的LDH构象具有相对的刚性,而乳酸诱导的酶构象具有相对柔性所致. 展开更多
关键词 蚯蚓蛋白酶 枯草杆菌蛋白酶 乳酸脱氢 锁钥模型 诱导契合模型 诱导契合-锁钥模型 底物专一性
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