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虚寒状态大鼠cAMP变化机制的实验研究 被引量:15
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作者 李敏 张冰 +3 位作者 刘小青 金勇男 赖永金 倪莉 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2010年第2期33-34,共2页
目的观察虚寒状态下大鼠血浆第二信使环磷酸腺苷(cAMP)含量变化,探讨其可能机制。方法将大鼠随机分为正常组和虚寒模型组,虚寒组每日肌肉注射氢化可的松注射液,正常组每日肌肉注射等量生理盐水,持续14d;处死动物,检测甲状腺激素三碘甲... 目的观察虚寒状态下大鼠血浆第二信使环磷酸腺苷(cAMP)含量变化,探讨其可能机制。方法将大鼠随机分为正常组和虚寒模型组,虚寒组每日肌肉注射氢化可的松注射液,正常组每日肌肉注射等量生理盐水,持续14d;处死动物,检测甲状腺激素三碘甲腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)、反三碘甲腺原氨酸(rT3)、肾上腺皮质激素皮质醇(COR)、环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)、腺苷酸环化酶(AC)、三磷酸腺苷(ATP)。结果虚寒状态内分泌激素T3、T4、rT3、COR水平降低,cAMP水平、AC活性降低,ATP含量升高。结论虚寒状态下甲状腺、肾上腺皮质功能降低,内分泌激素作用于AC,对AC活化降低,第二信使cAMP生成减少,其介导的生物学效应相应降低,故虚寒机体表现出抑制的状态。 展开更多
关键词 虚寒状态 环磷酸腺苷 腺苷酸环化酶 三磷酸腺苷 内分泌激素 大鼠
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常态虚寒状态小鼠CYP3A活性P-gp水平比较研究 被引量:7
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作者 白梅荣 张冰 +2 位作者 刘小青 倪莉 高新颜 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2008年第3期460-462,共3页
目的:比较虚寒状态与常态小鼠肝和小肠细胞色素P4503A(CYP3A)活性和P-糖蛋白(P-gp)水平情况。方法:肌注氢化可的松复制小鼠虚寒状态模型,采用聚乙二醇法制备肝和小肠微粒体,测定肝和小肠细胞色素CYP 3A活性;以免疫组化法检测肝和小肠组... 目的:比较虚寒状态与常态小鼠肝和小肠细胞色素P4503A(CYP3A)活性和P-糖蛋白(P-gp)水平情况。方法:肌注氢化可的松复制小鼠虚寒状态模型,采用聚乙二醇法制备肝和小肠微粒体,测定肝和小肠细胞色素CYP 3A活性;以免疫组化法检测肝和小肠组织P-gp水平。结果:虚寒状态组和正常状态组肝和小肠微粒体内CYP3A活性和P-gp水平存在差异,即正常状态CYP3A活性、P-gp水平高于虚寒状态,且差异显著(P<0.05)。结论:初步发现,CYP3A活性和P-gp水平存在机体状态差异。 展开更多
关键词 虚寒状态 小肠 CYP3A P-GP
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辛热药仙茅作用于药物代谢酶CYP3A的药性表达研究 被引量:7
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作者 李敏 张冰 +2 位作者 刘小青 刘欣 李连珍 《北京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期745-748,757,794,共6页
目的在观察仙茅对虚寒大鼠神经内分泌功能改善基础上,探讨辛热药仙茅对虚寒状态动物肝脏药物代谢酶的影响及在辛热药性表达中的意义。方法将SD大鼠随机分为空白对照组,虚寒模型组,仙茅大、中、小剂量组。以氢化可的松(3.75 mg/kg)肌肉... 目的在观察仙茅对虚寒大鼠神经内分泌功能改善基础上,探讨辛热药仙茅对虚寒状态动物肝脏药物代谢酶的影响及在辛热药性表达中的意义。方法将SD大鼠随机分为空白对照组,虚寒模型组,仙茅大、中、小剂量组。以氢化可的松(3.75 mg/kg)肌肉注射复制虚寒大鼠模型,辛热药仙茅以30、20、10 g/kg干预,红霉素-N脱甲基法检测动物肝脏代谢酶细胞色素P4503A(CYP3A)活性,放免法检测动物血浆环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)含量,Western blot法检测动物肝脏孕烷X受体(PXR)蛋白表达,免疫组化法检测动物肝脏蛋白激酶A(PKA)蛋白表达。结果虚寒大鼠肝脏药物代谢酶活性降低,PXR表达减少,cAMP、cGMP水平降低,PKA表达减少,仙茅各剂量组可提高CYP3A活性和cAMP含量,增强PXR、PKA表达,对cGMP影响不大。结论仙茅可能通过调节cAMP-PKA信号通路改善虚寒状态的代谢功能低下症状,从而表明辛热药的部分药性实质。 展开更多
关键词 仙茅 虚寒状态 细胞色素P4503A 环磷酸腺苷 蛋白激酶A 孕烷X受体 大鼠
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虚寒状态大鼠肝脏能量代谢变化研究 被引量:6
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作者 李连珍 薛春苗 +1 位作者 张冰 刘小青 《天津中医药》 CAS 2014年第8期484-486,共3页
[目的]探讨氢化泼尼松诱导的虚寒大鼠肝脏能量代谢变化特点。[方法]48只SD雄性大鼠随机分为正常组和虚寒组,每组24只。虚寒组肌肉注射氢化泼尼松琥珀酸钠生理盐水溶液20 mg/kg,正常组注射生理盐水0.25 mL。注射第14、第21天晚上8点,正... [目的]探讨氢化泼尼松诱导的虚寒大鼠肝脏能量代谢变化特点。[方法]48只SD雄性大鼠随机分为正常组和虚寒组,每组24只。虚寒组肌肉注射氢化泼尼松琥珀酸钠生理盐水溶液20 mg/kg,正常组注射生理盐水0.25 mL。注射第14、第21天晚上8点,正常组和虚寒组各12只,禁食不禁水12 h,次日上午8点,麻醉,腹主静脉取血,分离血清,全自动生化分析仪检测乳酸(LAC)。固定位置取一块儿肝脏,4%多聚甲醛固定,免疫组化法检测解偶联蛋白2(UCP-2)蛋白表达。其余肝脏,-80℃冻存,紫外分光光度法检测琥珀酸脱氢酶(SDH)和三磷酸腺苷酶(ATPase)。[结果]与同期正常组比较,虚寒组大鼠血清LAC含量、肝组织SDH活性在造模第14天和第21天均明显降低(P<0.05);肝组织中Na+-K+-ATP酶、Mg2+-ATP酶、Ca2+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活性,肝脏UCP-2的阳性表达面积(Area)和积分光密度值(IOD)在造模第21天均明显降低(P<0.05,P<0.01)。[结论]氢化泼尼松诱导的虚寒状态动物模型肝脏能量代谢可能存在障碍。 展开更多
关键词 虚寒状态 能量代谢 氢化泼尼松
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虚寒状态大鼠免疫系统功能变化研究 被引量:6
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作者 李连珍 张冰 刘小青 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2013年第1期199-201,共3页
目的:探讨氢化可的松诱导的虚寒大鼠免疫系统功能变化特点,为虚寒证动物模型深入研究奠定基础。方法:48只SD雄性大鼠按体重随机分成正常组和虚寒组,每组24只。虚寒组im氢化可的松琥珀酸钠生理盐水溶液20 mg·kg-1。注射第7,14,21天... 目的:探讨氢化可的松诱导的虚寒大鼠免疫系统功能变化特点,为虚寒证动物模型深入研究奠定基础。方法:48只SD雄性大鼠按体重随机分成正常组和虚寒组,每组24只。虚寒组im氢化可的松琥珀酸钠生理盐水溶液20 mg·kg-1。注射第7,14,21天下午,剪尾取10μL全血,显微镜下白细胞计数。第15,22天上午,正常组和虚寒组各12只,麻醉,腹主静脉取血,分离血清和血浆(EDTA抗凝),全自动生化分析仪检测免疫球蛋白G(IgG)和免疫球蛋白M(IgM),ELISA法检测白细胞介素4(IL-4)和干扰素-γ(IFN-γ)。摘取胸腺、脾脏电子分析天平称量后,计算脏器指数。结果:与同期正常组比较,虚寒组大鼠胸腺指数和血清IgM含量在造模第14,21天均明显降低(P<0.01,P<0.05);脾脏指数和血清IgG含量在造模第14天明显降低(P<0.05),造模第21天未见统计学差异;外周血白细胞数在造模第7,14,21天均明显降低(P<0.01,P<0.05);在造模第21天,血浆IL-4含量降低(P<0.05),IFN-γ含量升高(P<0.05),IFN-γ/IL-4升高(P<0.01)。结论:氢化可的松塑造的虚寒状态动物模型,免疫系统功能明显低下,并存在Th1/Th2细胞因子的漂移现象。 展开更多
关键词 虚寒状态 免疫系统 氢化可的松
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附子肉桂仙茅对不同状态大鼠免疫功能和能量代谢的影响 被引量:4
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作者 李连珍 柴逸飞 +1 位作者 薛春苗 张冰 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2021年第5期32-36,共5页
目的探讨辛热药附子、肉桂和仙茅对正常和虚寒状态大鼠免疫功能和能量代谢的影响。方法大鼠随机分为8组,即正常组、正常+附子组/肉桂组/仙茅组、虚寒组、虚寒+附子组/肉桂组/仙茅组,以注射氢化可的松琥珀酸钠建立虚寒状态模型,检测免疫... 目的探讨辛热药附子、肉桂和仙茅对正常和虚寒状态大鼠免疫功能和能量代谢的影响。方法大鼠随机分为8组,即正常组、正常+附子组/肉桂组/仙茅组、虚寒组、虚寒+附子组/肉桂组/仙茅组,以注射氢化可的松琥珀酸钠建立虚寒状态模型,检测免疫功能指标(外周血白细胞数、胸腺脾脏指数、IL-4和IFN-γ含量)、能量代谢指标(肝和肌肉中SDH、ATP酶活性)。结果与正常组比较,虚寒组大鼠胸腺指数明显降低(P<0.05)、外周血白细胞数明显降低(P<0.001),血清中IFN-γ含量明显升高,IL-4含量降低,IFN-γ/IL-4比值升高(P<0.05),肝组织和肌肉组织中SDH的活性明显降低(P<0.05);肝组织和肌肉组织中Na^(+)-K^(+)-ATP酶,Mg^(2+)-ATP酶,Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶活性明显降低(P<0.05)。与虚寒组比较,虚寒+附子/肉桂/仙茅组白细胞数均显著升高(P<0.05),虚寒+附子组大鼠血浆IFN-γ含量显著降低(P<0.05);虚寒+肉桂组大鼠血浆IL-4含量显著升高(P<0.05),IFN-γ/IL-4比值显著降低(P<0.05);虚寒+仙茅组大鼠血浆IL-4含量显著升高(P<0.05)。肝组织中虚寒+仙茅组SDH活性均明显升高(P<0.05),虚寒+附子组Na^(+)-K^(+)-ATP酶,Mg^(2+)-ATP酶活性升高有统计学意义(P<0.05)。肌肉组织中,虚寒+附子/肉桂/仙茅组肌肉匀浆SDH活性均明显升高(P<0.05)。虚寒+附子/肉桂组Na^(+)-K^(+)-ATP酶,Mg^(2+)-ATP酶,Ca^(2+)-ATP酶活性升高(P<0.05)。结论附子肉桂仙茅能明显改善虚寒状态免疫功能低下和能量代谢障碍,对正常状态影响不明显。 展开更多
关键词 虚寒状态 免疫功能 能量代谢
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基于cAMP-PKA信号通路的虚寒状态大鼠中枢神经递质变化机制研究 被引量:4
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作者 李敏 张冰 +2 位作者 刘小青 刘欣 李连珍 《中国中医基础医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期289-290,294,共3页
目的:探讨虚寒状态下单胺类神经递质的变化及机制,明确cAMP-PKA信号通路在虚寒状态中的作用。方法:氢化可的松塑造大鼠虚寒模型,HPLC法检测脑内单胺类神经递质及代谢产物含量:NE、E、DA、5-HT、5-HIAA、DOPAC,放免法测血浆cAMP、cGMP水... 目的:探讨虚寒状态下单胺类神经递质的变化及机制,明确cAMP-PKA信号通路在虚寒状态中的作用。方法:氢化可的松塑造大鼠虚寒模型,HPLC法检测脑内单胺类神经递质及代谢产物含量:NE、E、DA、5-HT、5-HIAA、DOPAC,放免法测血浆cAMP、cGMP水平,免疫组化法测肝脏PKA表达。结果:14d虚寒状态组NE、5-HIAA、5-HT含量和cAMP、cGMP水平及PKA表达显著降低;21 d虚寒状态组NE、DOPACT含量和cAMP、cGMP水平及PKA表达显著降低。结论:cAMP-PKA通路可能是介导虚寒状态脑内单胺类神经递质变化的机制之一。 展开更多
关键词 虚寒状态 单胺类神经递质 cAMP-PKA信号通路
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常态及虚寒状态小鼠体内次乌头碱的血药浓度差异研究 被引量:2
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作者 杨媛 黄建梅 +3 位作者 刘小青 白梅荣 马长华 张冰 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第15期2008-2011,共4页
目的:对比研究虚寒状态和常态小鼠血清中次乌头碱浓度差异,分析不同机体代谢环境的差异,在代谢层面说明药物毒性发生与机体的代谢环境有关。方法:复制小鼠虚寒状态模型,连续给予附子水煎液14d,用HPLC检测第1,7,14天虚寒状态及常态小鼠... 目的:对比研究虚寒状态和常态小鼠血清中次乌头碱浓度差异,分析不同机体代谢环境的差异,在代谢层面说明药物毒性发生与机体的代谢环境有关。方法:复制小鼠虚寒状态模型,连续给予附子水煎液14d,用HPLC检测第1,7,14天虚寒状态及常态小鼠血清中次乌头碱的浓度;同时观察小鼠的存活率。结果:附子水煎液对虚寒状态小鼠机体代谢起调节作用,给药14d后,其血药浓度恢复或接近正常组水平;附子水煎液对常态组小鼠的体内代谢环境存在扰动,给药7,14d的血药浓度均比第1天高;在14d的给药周期内,虚寒组血药浓度的变化范围小于正常组。附子水煎液灌胃后第7天及第14天,虚寒状态组小鼠的存活率明显高于常态组小鼠。结论:常态及虚寒状态小鼠血药浓度的差异提示常态和虚寒状态小鼠的代谢环境存在差异,代谢环境在给予附子水煎液的过程中发生改变。实验结果在一定程度上说明附子在临床上产生毒性的剂量不同与机体的代谢环境不同有关。 展开更多
关键词 次乌头碱 虚寒状态 血药浓度 代谢环境
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虚寒状态下药物代谢酶CYP3A和转运蛋白P-gp变化的体内外实验研究 被引量:1
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作者 薛春苗 张冰 +1 位作者 李连珍 林志健 《北京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期602-605,I0001,共5页
目的通过体内外实验探讨虚寒状态下药物代谢酶CYP3A和转运蛋白P-gp变化。方法连续14 d每天肌注氢化可的松粉针剂(20 mg/kg)制造虚寒大鼠模型,观察正常、虚寒大鼠肝、小肠CYP3A活性和小肠P-gp蛋白水平;选用L02细胞和Caco-2细胞作为细胞模... 目的通过体内外实验探讨虚寒状态下药物代谢酶CYP3A和转运蛋白P-gp变化。方法连续14 d每天肌注氢化可的松粉针剂(20 mg/kg)制造虚寒大鼠模型,观察正常、虚寒大鼠肝、小肠CYP3A活性和小肠P-gp蛋白水平;选用L02细胞和Caco-2细胞作为细胞模型,分别用正常和虚寒状态大鼠血清对其进行干预,分别观察L02细胞中CYP3A活性和Caco-2细胞中P-gp蛋白水平。结果虚寒模型大鼠肝和小肠微粒体CYP3A活性显著降低(P<0.05),小肠P-gp蛋白表达显著降低(P<0.05)。虚寒状态L02细胞中CYP3A活性明显降低(P<0.05),但虚寒状态Caco-2细胞中P-gp蛋白水平没有显著变化。结论体内、外实验共同验证了虚寒状态下CYP3A活性处于低下状态,至于Caco-2细胞中P-gp没变化,可能与Caco-2细胞株本身为癌细胞,P-gp高表达有关。 展开更多
关键词 虚寒状态 药物代谢酶CYP3A 转运蛋白P-gp 大鼠
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