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拟南芥AtTR1相互作用蛋白质筛选和鉴定
1
作者
朱旭辉
黄奎
+4 位作者
姚润东
彭露
裴林森
刘志斌
王健美
《四川大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第2期419-424,共6页
本研究利用酵母双杂交系统筛选与E3连接酶AtTR1存在相互作用的靶蛋白.首先,根据AtTR1所含有的结构域,我们对其进行了不同程度的截断以及点突变处理,以验证其各个片段的自激活活性和毒性.最终我们选取AtTR1-△119为诱饵蛋白对拟南芥归一...
本研究利用酵母双杂交系统筛选与E3连接酶AtTR1存在相互作用的靶蛋白.首先,根据AtTR1所含有的结构域,我们对其进行了不同程度的截断以及点突变处理,以验证其各个片段的自激活活性和毒性.最终我们选取AtTR1-△119为诱饵蛋白对拟南芥归一化通用型cDNA文库进行筛选.结果初步获得了13个与其有潜在互作的候选蛋白.经酵母正向和反向多次验证发现转化了AtTR1与CURT1C和AtTR1与SWEET5的酵母在三缺和四缺培养基中均正常生长,而且在含有X-α-gal的培养基中出现蓝斑.双分子荧光互补技术也证明AtTR1与CURT1C或SWEET5之间也有相互作用.
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关键词
拟南芥
E3连接酶AtTR1
酵母双杂交
类囊体膜曲率相关
蛋白
1C
蔗糖
转运蛋白
5
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职称材料
题名
拟南芥AtTR1相互作用蛋白质筛选和鉴定
1
作者
朱旭辉
黄奎
姚润东
彭露
裴林森
刘志斌
王健美
机构
四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室
出处
《四川大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第2期419-424,共6页
基金
国家自然科学基金(31271758)
文摘
本研究利用酵母双杂交系统筛选与E3连接酶AtTR1存在相互作用的靶蛋白.首先,根据AtTR1所含有的结构域,我们对其进行了不同程度的截断以及点突变处理,以验证其各个片段的自激活活性和毒性.最终我们选取AtTR1-△119为诱饵蛋白对拟南芥归一化通用型cDNA文库进行筛选.结果初步获得了13个与其有潜在互作的候选蛋白.经酵母正向和反向多次验证发现转化了AtTR1与CURT1C和AtTR1与SWEET5的酵母在三缺和四缺培养基中均正常生长,而且在含有X-α-gal的培养基中出现蓝斑.双分子荧光互补技术也证明AtTR1与CURT1C或SWEET5之间也有相互作用.
关键词
拟南芥
E3连接酶AtTR1
酵母双杂交
类囊体膜曲率相关
蛋白
1C
蔗糖
转运蛋白
5
Keywords
Arabidopsisthaliana
E3 ligase AtTR1
Y2H
CURT1C
SWEET
5
分类号
Q945 [生物学—植物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
拟南芥AtTR1相互作用蛋白质筛选和鉴定
朱旭辉
黄奎
姚润东
彭露
裴林森
刘志斌
王健美
《四川大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2018
0
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