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拟南芥AtTR1相互作用蛋白质筛选和鉴定
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作者 朱旭辉 黄奎 +4 位作者 姚润东 彭露 裴林森 刘志斌 王健美 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期419-424,共6页
本研究利用酵母双杂交系统筛选与E3连接酶AtTR1存在相互作用的靶蛋白.首先,根据AtTR1所含有的结构域,我们对其进行了不同程度的截断以及点突变处理,以验证其各个片段的自激活活性和毒性.最终我们选取AtTR1-△119为诱饵蛋白对拟南芥归一... 本研究利用酵母双杂交系统筛选与E3连接酶AtTR1存在相互作用的靶蛋白.首先,根据AtTR1所含有的结构域,我们对其进行了不同程度的截断以及点突变处理,以验证其各个片段的自激活活性和毒性.最终我们选取AtTR1-△119为诱饵蛋白对拟南芥归一化通用型cDNA文库进行筛选.结果初步获得了13个与其有潜在互作的候选蛋白.经酵母正向和反向多次验证发现转化了AtTR1与CURT1C和AtTR1与SWEET5的酵母在三缺和四缺培养基中均正常生长,而且在含有X-α-gal的培养基中出现蓝斑.双分子荧光互补技术也证明AtTR1与CURT1C或SWEET5之间也有相互作用. 展开更多
关键词 拟南芥 E3连接酶AtTR1 酵母双杂交 类囊体膜曲率相关蛋白1C 蔗糖转运蛋白5
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