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龙眼果肉发酵红茶菌饮料 被引量:11
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作者 宋清鹏 胡卓炎 +2 位作者 赵雷 周沫霖 余小林 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期216-221,共6页
以龙眼果肉和茶糖水为原料,探讨了发酵温度、初始可溶性固形物和接种量等因素对龙眼果肉红茶菌发酵的影响,并以总酸、D-葡糖糖二酸1,4-内酯和D-葡萄糖二酸为响应值,利用响应面设计进行工艺优化,得出佳的发酵条件为:温度29.6℃,初始TSS为... 以龙眼果肉和茶糖水为原料,探讨了发酵温度、初始可溶性固形物和接种量等因素对龙眼果肉红茶菌发酵的影响,并以总酸、D-葡糖糖二酸1,4-内酯和D-葡萄糖二酸为响应值,利用响应面设计进行工艺优化,得出佳的发酵条件为:温度29.6℃,初始TSS为14.7°Brix,接种量为14.1%,发酵时间6 d,所得发酵液总酸含量为26.87 g/L,D-葡糖糖二酸1,4-内酯为5.51 g/L,D-葡萄糖二酸为18.01 g/L。 展开更多
关键词 红茶菌 龙眼 D-葡1 4-内酯 D-葡萄糖
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葡萄糖二酸的生物炼制及应用研究进展 被引量:6
2
作者 余作龙 苗江月 +4 位作者 曹飞 周佳栋 朱璇 王月霞 韦萍 《化工进展》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第11期2502-2508,2535,共8页
葡萄糖二酸是含有多羟基的二元酸,广泛来源于葡萄糖基物质,可用于可降解聚合物、药物和食品等产品的制备。本文介绍了硝酸氧化、TEMPO氧化等化学法和生物法制备葡萄糖二酸的原理和方法,并综述了其在抗癌及显像剂药物、聚合物等方面的应用。
关键词 葡萄糖 葡萄糖 制备 应用
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RP-HPLC技术分析葡萄糖酸钙锌口服溶液中葡萄糖二酸含量
3
作者 吴小强 樊艳霞 +2 位作者 王斯妮 宋立权 孙婉玲 《中文科技期刊数据库(全文版)医药卫生》 2024年第10期0070-0075,共6页
建立检测复方制剂葡萄糖酸钙锌口服溶液中的葡萄糖二酸含量的液相方法。方法 采用RP-HPLC法,色谱柱为Kromasil? 100 ?-5μm-C18 (4.6mm×250 mm, 5 μm),以10 mmol?L-1磷酸氢二钾-10 mmol?L-1正四丁基硫酸氢铵溶液(用预先配制好的... 建立检测复方制剂葡萄糖酸钙锌口服溶液中的葡萄糖二酸含量的液相方法。方法 采用RP-HPLC法,色谱柱为Kromasil? 100 ?-5μm-C18 (4.6mm×250 mm, 5 μm),以10 mmol?L-1磷酸氢二钾-10 mmol?L-1正四丁基硫酸氢铵溶液(用预先配制好的氢氧化钾溶液氢氧化钾溶液(5mol?L-1)调节pH值为7.2)-乙腈(90:10)为流动相A,以纯乙腈为流动相B,采用线性梯度洗脱;方法流速为0.7ml?min-1;葡萄糖二酸检测波长为210 nm;色谱柱温度为35 ℃;进样体积50μl。结果 葡萄糖二酸在2.9927 μg?ml-1~14.9634 μg?ml-1浓度范围内与葡萄糖二酸峰面积呈良好线性关系(r≥0.9999),葡萄糖二酸的平均回收率(n=9)为98.776 %。结论 拟建立的RP-HPLC操作简便高效、结果准确可靠、良好的重复性,可用于检测复方制剂中葡萄糖酸钙锌口服溶液里的降解产物葡萄糖二酸含量。 展开更多
关键词 葡萄糖 葡萄糖钙锌口服溶液 反相高效液相色谱法 高效液相色谱法
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尿液葡萄糖二酸测定在药物性肝炎诊断中的应用 被引量:4
4
作者 赵允文 钱汶 +1 位作者 徐晶 陈瑜 《上海医学检验杂志》 1993年第1期16-18,共3页
本文根据酶竞争性抑制原理介绍了一种尿液葡萄糖二酸的测定方法。天内CV为4.5%,天间CV为5.4%。回收率为94.6%。用本法测定50例健康人,40例非药物性的肝病患者及26例药物性肝炎患者的UGA,证明在鉴别诊断上有一定价值。
关键词 葡萄糖 药物性肝炎 尿
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高效合成葡萄糖二酸酿酒酵母工程菌的构建 被引量:3
5
作者 李杰 赵运英 邓禹 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期705-718,共14页
葡萄糖二酸是天然存在的一种重要二元酸,其在医疗保健和化工工业等领域具有很高的实际应用价值,因此被称为“最具价值的生物炼制产品之一”。以酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)为底盘微生物,文中考察了过量表达肌醇转运蛋白Itr1、... 葡萄糖二酸是天然存在的一种重要二元酸,其在医疗保健和化工工业等领域具有很高的实际应用价值,因此被称为“最具价值的生物炼制产品之一”。以酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)为底盘微生物,文中考察了过量表达肌醇转运蛋白Itr1、融合表达肌醇加氧酶和葡萄糖醛酸脱氢酶以及弱化表达葡萄糖6-磷酸脱氢酶基因ZWF1三种策略对葡萄糖二酸产量的影响。研究结果显示,过量表达肌醇转运蛋白Itr1使葡萄糖二酸产量在摇瓶发酵条件下较出发菌株Bga-3提高了26%;MIOX4-Udh融合蛋白的表达使葡萄糖二酸的产量较Bga-3菌株提高了40%;在此基础上,弱化表达葡萄糖6-磷酸脱氢酶基因ZWF1后,葡萄糖二酸的产量达5.5 g/L,较相同发酵条件下Bga-3菌株提高了60%。在5 L发酵罐中,该菌株葡萄糖二酸的最高产量达10.85 g/L,较Bga-3菌株提高了80%。由此可见,上述代谢改造策略的应用在很大程度上提高了葡萄糖二酸的途径效率和产量,为通过代谢工程方法在酿酒酵母中合成其他化合物的研究提供了参考。 展开更多
关键词 酿酒酵母 葡萄糖 肌醇转运蛋白 融合表达 代谢改造
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代谢工程改造酿酒酵母合成葡萄糖二酸 被引量:3
6
作者 巩旭 刘叶 +2 位作者 王毳 李江华 康振 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期228-236,共9页
葡萄糖二酸是一种高附加值的有机酸,广泛用于食品、医药和化工领域。为获得生产葡萄糖二酸的微生物细胞工厂,通过共表达小鼠来源的肌醇加氧酶(MIOX)及恶臭假单胞菌来源的醛酸脱氢酶(Udh),在酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae CEN.PK2-1... 葡萄糖二酸是一种高附加值的有机酸,广泛用于食品、医药和化工领域。为获得生产葡萄糖二酸的微生物细胞工厂,通过共表达小鼠来源的肌醇加氧酶(MIOX)及恶臭假单胞菌来源的醛酸脱氢酶(Udh),在酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae CEN.PK2-1C中构建了葡萄糖二酸合成途径,产量为(28.28±3.15)mg/L。在此基础上,通过调控前体肌醇的合成途径,发现肌醇-1-磷酸合成酶(INO1)是葡萄糖二酸合成途径的限速酶,过量表达INO1,葡萄糖二酸产量达到(107.51±10.87)mg/L,提高了2.8倍。进一步弱化竞争支路中磷酸果糖激酶(PFK1)的表达,最终葡萄糖二酸的产量达到(230.22±10.75)mg/L,为进一步获得高产葡萄糖二酸细胞工厂提供基础。 展开更多
关键词 葡萄糖 肌醇-1-磷合成酶 激酶 酿酒酵母 代谢工程
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反相离子对液相色谱测定葡萄糖化学氧化过程中的6种有机酸 被引量:2
7
作者 朱璇 余作龙 +3 位作者 周佳栋 姚琴 曹飞 韦萍 《分析试验室》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期20-24,共5页
建立了反相离子对液相色谱同时测定葡萄糖氧化产物:葡萄糖醛酸、葡萄糖酸、乙醇酸、乙酸、葡萄糖二酸及酒石酸含量的方法。采用kromasil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为10 mmol/L K2HPO4-10 mmol/L四丁基硫酸氢铵(pH 7.2)... 建立了反相离子对液相色谱同时测定葡萄糖氧化产物:葡萄糖醛酸、葡萄糖酸、乙醇酸、乙酸、葡萄糖二酸及酒石酸含量的方法。采用kromasil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为10 mmol/L K2HPO4-10 mmol/L四丁基硫酸氢铵(pH 7.2):甲醇(95:5,V/V),检测波长210 nm,流速0.7 mL/min,进样量20μL。6种有机酸在线性范围内峰面积与浓度呈良好的线性关系;回收率为92.7%~107.0%;RSD(n=5)为0.9%~6.3%。20 min内即可将6种物质分开。对葡萄糖化学氧化过程检测表明,HNO3氧化法反应剧烈,除了生成葡萄糖酸、葡萄糖醛酸和葡萄糖二酸外,还生成碳-碳键断裂的副产物如酒石酸、乙醇酸等,而TEMPO法反应较为温和,并未发生碳-碳键断裂。 展开更多
关键词 离子对液相色谱 葡萄糖氧化 有机 葡萄糖
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葡萄糖氧化工艺研究进展
8
作者 于迪 王虹 邵亚楠 《山东化工》 CAS 2022年第23期121-124,共4页
全面概述将葡萄糖氧化为葡萄糖酸、葡萄糖二酸的氧化体系。对葡萄糖氧化研究进行了总结,按照氧化方式将其分为生物发酵法、化学氧化法、光催化氧化和电催化氧化,并指出各个氧化方法的优缺点,根据催化体系存在的问题,提出了葡萄糖氧化体... 全面概述将葡萄糖氧化为葡萄糖酸、葡萄糖二酸的氧化体系。对葡萄糖氧化研究进行了总结,按照氧化方式将其分为生物发酵法、化学氧化法、光催化氧化和电催化氧化,并指出各个氧化方法的优缺点,根据催化体系存在的问题,提出了葡萄糖氧化体系的发展趋势。 展开更多
关键词 葡萄糖 氧化 葡萄糖 葡萄糖 氧化体系
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^(99m)TcN-GLA的制备及其生物分布研究 被引量:2
9
作者 张俊波 王学斌 于恺 《北京师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期230-232,共3页
将99mTcO- 4与浓HCl和NaN3在沸水浴的条件下制备99mTcNCl- 4中间体 ,然后与配体葡萄糖二酸 (GLA)发生交换反应得到放化纯度大于 90 %的99mTcN GLA配合物 .小鼠体内生物分布结果显示 :99mTcN GLA与99mTc GLA有明显不同的生物分布 ,特别是... 将99mTcO- 4与浓HCl和NaN3在沸水浴的条件下制备99mTcNCl- 4中间体 ,然后与配体葡萄糖二酸 (GLA)发生交换反应得到放化纯度大于 90 %的99mTcN GLA配合物 .小鼠体内生物分布结果显示 :99mTcN GLA与99mTc GLA有明显不同的生物分布 ,特别是99mTcN GLA的肺摄取及滞留均较好 ,有望成为一种新型的肺显像剂 . 展开更多
关键词 锝-99m 葡萄糖 锝氮核 放射性药物 生物分布 制备 肺显像剂 急性心肌梗塞
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代谢改造酿酒酵母生产葡萄糖二酸 被引量:2
10
作者 陈娜 林卢奇 +2 位作者 毛银 赵运英 邓禹 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期15-21,共7页
以酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)为底盘微生物,通过表达来源于拟南芥的肌醇加氧酶基因miox4和来源于丁香假单胞菌的糖醛酸脱氢酶基因udh,在酿酒酵母细胞中构建葡萄糖二酸的生物合成途径。通过将拟南芥miox4基因和丁香假单胞菌udh... 以酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)为底盘微生物,通过表达来源于拟南芥的肌醇加氧酶基因miox4和来源于丁香假单胞菌的糖醛酸脱氢酶基因udh,在酿酒酵母细胞中构建葡萄糖二酸的生物合成途径。通过将拟南芥miox4基因和丁香假单胞菌udh基因整合到酿酒酵母基因组中的delta位点上,葡萄糖二酸产量高达3. 80 g/L,是目前报道的酿酒酵母细胞中葡萄糖二酸的最高产量。这种方法可以广泛用于酿酒酵母细胞的代谢工程研究。 展开更多
关键词 酿酒酵母 葡萄糖 delta位点整合 代谢工程
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两种双苯并咪唑烷基醇的合成与表征 被引量:1
11
作者 何耀纲 蒋福华 《广西师范学院学报(自然科学版)》 2010年第2期48-53,共6页
分别采用酒石酸、葡萄糖二酸和邻苯二胺为起始原料,在一定浓度盐酸催化下,加热回流,反应物间通过发生分子间缩合反应,直接关环分别得到:1,2-双苯并咪唑-1,2-乙二醇(1,2-Bis-(1H-benzoimidazol-2-yl)-ethane-1,2-diol,H2bzimed)、1,4-双... 分别采用酒石酸、葡萄糖二酸和邻苯二胺为起始原料,在一定浓度盐酸催化下,加热回流,反应物间通过发生分子间缩合反应,直接关环分别得到:1,2-双苯并咪唑-1,2-乙二醇(1,2-Bis-(1H-benzoimidazol-2-yl)-ethane-1,2-diol,H2bzimed)、1,4-双苯并咪唑-1,2,3,4-丁四醇(1,4-Bis-(1H-benzoimidazol-2-yl)-butane-1,2,3,4-tetra-ol,H2bzimbd).利用熔点、红外光谱、元素分析以及核磁共振氢谱表征手段确定了上述两种产物的结构;并尝试了不同的反应温度、时间及盐酸浓度对目标物产率的影响,从而确定了此类物质分子间缩合反应生成双苯并咪唑类化合物的最佳条件. 展开更多
关键词 酒石 葡萄糖 邻苯 双苯并咪唑 合成 表征
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葡萄糖二酸研究进展 被引量:2
12
作者 仇钰莹 方芳 +1 位作者 堵国成 陈坚 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期481-490,共10页
葡萄糖二酸是一种葡萄糖衍生物,可作为原料制备多种聚合物和生物质新能源,在化工领域具有广泛的应用价值,被认为是"最具价值的生物炼制产品"之一。葡萄糖二酸也具有调控体内激素、提高机体免疫功能、减少癌症病发的作用,它在... 葡萄糖二酸是一种葡萄糖衍生物,可作为原料制备多种聚合物和生物质新能源,在化工领域具有广泛的应用价值,被认为是"最具价值的生物炼制产品"之一。葡萄糖二酸也具有调控体内激素、提高机体免疫功能、减少癌症病发的作用,它在食品和医药领域的关注度和市场需求逐年增加。目前葡萄糖二酸的制备主要依靠化学氧化法生产,用微生物法合成的研究还处于初级探索阶段。本文综述了葡萄糖二酸的在医药、化工等领域的应用前景,阐述了其生产方法及测定手段,并对微生物法生产葡萄糖二酸进行了展望。 展开更多
关键词 葡萄糖 生物合成 测定 大肠杆菌
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代谢工程改造毕赤酵母生产葡萄糖二酸 被引量:2
13
作者 刘叶 巩旭 +3 位作者 康振 堵国成 陈坚 华兆哲 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期955-961,共7页
葡萄糖二酸是一种具有重要生物功能的有机酸,为了实现微生物合成葡萄糖二酸的高效生产,异源表达来源于小鼠基因组的MIOX基因及Pseudomonas putida KT2440的udh基因,在毕赤酵母中构建葡萄糖二酸合成途径,实现了葡萄糖二酸的生成。通过在... 葡萄糖二酸是一种具有重要生物功能的有机酸,为了实现微生物合成葡萄糖二酸的高效生产,异源表达来源于小鼠基因组的MIOX基因及Pseudomonas putida KT2440的udh基因,在毕赤酵母中构建葡萄糖二酸合成途径,实现了葡萄糖二酸的生成。通过在摇瓶水平进行优化,确定了最适碳源为葡萄糖(初始质量浓度60 g/L最优),最适初始pH为5.5,最优接种龄为24 h,最适接种体积分数为25%,重组毕赤酵母生成的葡萄糖二酸产量从最初的(566.36±16.98) mg/L提高至(967.60±3.90) mg/L。在此基础上,重组毕赤酵母在3 L发酵罐中放大培养,葡萄糖二酸的产量达到了(2.60±0.04) g/L。 展开更多
关键词 葡萄糖 毕赤酵母 代谢工程 发酵优化
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Structural sensitivity of heterogeneous catalysts for sustainable chemical synthesis of gluconic acid from glucose 被引量:1
14
作者 Wenjuan Yan Dongpei Zhang +8 位作者 Yu Sun Ziqi Zhou Yihang Du Yiyao Du Yushan Li Mengyuan Liu Yuming Zhang Jian Shen Xin Jin 《Chinese Journal of Catalysis》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2020年第9期1320-1336,共17页
Gluconic acid and its derivatives have been widely used in the food and pharmaceutical industries. Conventional processes that involve the conversion of glucose into gluconic acid via fermentation present several tech... Gluconic acid and its derivatives have been widely used in the food and pharmaceutical industries. Conventional processes that involve the conversion of glucose into gluconic acid via fermentation present several technological shortcomings as they involve energy-intensive wastewater treatment and complex enzyme separation. Greener oxidation processes over heterogeneous metal catalysts have attracted increasing attention worldwide. Au-, Pt-and Pd-based heterogeneous catalysts have been extensively used for the chemical oxidation of glucose to gluconic acid. Bimetallic catalysts synthesized by adding either noble or inexpensive metals have also presented excellent performance for the oxidations of glucose. In particular, particle size, which has been recognized as the most important factor that affect catalytic performances, could be rationally tuned by changing the types of support and ligand as well as the synthesis conditions. In this perspective review, we summarize and critically discuss the recent advances in the structural design of mono-and bimetallic catalysts for the oxidation of glucose in aqueous media. Furthermore, the challenges of developing catalysts for the green synthesis of gluconic acid have been highlighted. This review provides alternative insights for designing effective catalytic materials for the catalytic oxidation of bio-derived oxygenates over heterogeneous catalysts. 展开更多
关键词 GLUCOSE Gluconic acid Noble metal OXIDATION Heterogeneous catalyst
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血清葡萄糖含量为零一例
15
作者 谭凌卉 周莉 《湖南师范大学学报(医学版)》 1999年第3期24-25,共2页
关键词 血清葡萄糖 山梨醇 葡萄糖氧化酶(GOD) 葡萄糖 复方氨基 过氧化物酶(POD) 空腹血 质量作用定律 葡萄糖测定 准确性和稳定性
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代谢工程改造黑曲霉生产葡萄糖二酸
16
作者 郭宇飞 闫荣媚 +2 位作者 张小茹 曹威 刘浩 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期227-237,共11页
葡萄糖二酸是葡萄糖的一种二元羧酸衍生物,是重要的平台化合物,被应用于医药、化工等领域。本研究以黑曲霉为底盘细胞,通过表达来自恶臭假单胞菌Pseudomonas putida KT2440的糖醛酸脱氢酶基因ppudh,成功在黑曲霉中实现了葡萄糖二酸的合... 葡萄糖二酸是葡萄糖的一种二元羧酸衍生物,是重要的平台化合物,被应用于医药、化工等领域。本研究以黑曲霉为底盘细胞,通过表达来自恶臭假单胞菌Pseudomonas putida KT2440的糖醛酸脱氢酶基因ppudh,成功在黑曲霉中实现了葡萄糖二酸的合成,产量为18.74 mg/L;在此基础上通过共过表达黑曲霉自身来源的肌醇加氧酶(anmioxA)和肌醇-1-磷酸合酶(aninoA)、酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae S288C来源的羧酸转运蛋白(scJEN1),强化了合成通路和外泌途径,将产量提高至102.10 mg/L;通过表达来自乳酸乳球菌Lactococcus lactis subsp.cremoris MG1363的NADH氧化酶(llnox),建立NAD~+辅因子循环系统,使产量进一步提高至115.65 mg/L;利用RNA干扰技术对竞争支路中的关键酶磷酸果糖激酶(pfkA)和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(zwf)进行弱化表达,葡萄糖二酸最终的产量达到313.65 mg/L。本研究为微生物高效生产葡萄糖二酸和下游相关产品生产奠定基础。 展开更多
关键词 葡萄糖 黑曲霉 辅因子循环系统 RNA干扰
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尿葡萄糖二酸测定及对药物性肝炎鉴别诊断的评价 被引量:1
17
作者 赵允文 杨荣伟 黄卫锋 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 1995年第5期233-235,共3页
本文根据酶竞争抑制原理,应用自动生化分析仪测定尿液中葡萄糖二酸(UGA),提高了测定效率、精密度和准确性。本法天内CV为3.1%,回收率96.5%,线性范围0~180μmol/L。48例健康人UGA为1.8~31.3... 本文根据酶竞争抑制原理,应用自动生化分析仪测定尿液中葡萄糖二酸(UGA),提高了测定效率、精密度和准确性。本法天内CV为3.1%,回收率96.5%,线性范围0~180μmol/L。48例健康人UGA为1.8~31.3μmol/g.Cr,非药物性肝炎病人为4.2~56.8μmol/g.Cr、药物性肝炎病人为19.6~553μmol/g.Cr,以50μmol/g.Cr作为切割值,其鉴别诊断效率为87.8%。同时也观察到某些药物对测定有负干扰。 展开更多
关键词 葡萄糖 肝炎 尿液 鉴别诊断
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新型炎症显像剂的初步研究 被引量:1
18
作者 楚进锋 王学斌 +5 位作者 吕恭序 赵毅 张俊波 王金城 米宏志 杨浩 《北京师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期235-239,共5页
对柠檬酸 (Cit)、酒石酸 (Tar)、DL 苹果酸 (DL Mal)、L 苹果酸 (L Mal)和D 葡萄糖二酸 (D Gca)等 5种含有羟基和羧基的小分子化合物的99mTc标记条件以及亲炎症的生物性能进行了初步研究 .根据它们的最佳标记条件 ,分别对其进行标记 .... 对柠檬酸 (Cit)、酒石酸 (Tar)、DL 苹果酸 (DL Mal)、L 苹果酸 (L Mal)和D 葡萄糖二酸 (D Gca)等 5种含有羟基和羧基的小分子化合物的99mTc标记条件以及亲炎症的生物性能进行了初步研究 .根据它们的最佳标记条件 ,分别对其进行标记 .标记率均大于 90 % .这 5种配合物和99mTcO- 4(P)在松节油致炎小鼠中的生物分布结果表明 :炎症模型脓肿与肌肉的质量活度分数之比值 (am(A) /am(M) )分别达 4 .0 2± 0 .2 1(Cit,3h) ,3.2 0± 0 .17(Tar,1h) ,4 .0 4± 0 .2 1(DL Mal,6h) ,3.50± 0 .2 3(L Mal,1h) ,4 .30± 0 .77(D Gca ,3h)和 3.2 3± 0 .4 1(P ,1h) .对99mTc D Gca在松节油致炎家兔中的生物分布进行了静态显像 ,结果较好 .据此可认为99mTc标记的 5种配合物和99mTcO- 4均有亲炎症组织的生物性质 ,其中 ,99mTc Cit国外已用于临床 ,而99mTc D Gca很可能是一种潜在的炎症显像剂 ,值得进一步研究 . 展开更多
关键词 脓肿 炎症显像剂 D-葡萄糖 构效关系
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构建葡萄糖二酸指示系统筛选肌醇加氧酶突变株 被引量:1
19
作者 王毳 刘叶 +2 位作者 巩旭 刘龙 康振 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期1772-1783,共12页
葡萄糖二酸是一种高附加值天然有机酸,已经广泛应用于疾病防治、生产聚合物材料等领域。在葡萄糖二酸的合成途径中,肌醇加氧酶MIOX所催化的肌醇转换为葡萄糖醛酸的过程是整个途径的限速步骤。通过应用将葡萄糖二酸浓度与绿色荧光蛋白荧... 葡萄糖二酸是一种高附加值天然有机酸,已经广泛应用于疾病防治、生产聚合物材料等领域。在葡萄糖二酸的合成途径中,肌醇加氧酶MIOX所催化的肌醇转换为葡萄糖醛酸的过程是整个途径的限速步骤。通过应用将葡萄糖二酸浓度与绿色荧光蛋白荧光强度相结合的筛选系统,从突变体文库中筛选出3株有潜力的肌醇加氧酶突变体(K59V/R60A、R171S和D276A),使MIOX活性得到提高。重组菌株Escherichia coli BL21(DE3)/MU-R171S的葡萄糖二酸产量相比于未突变菌株提高了36.5%。 展开更多
关键词 葡萄糖 肌醇加氧酶 生物传感器 高通量筛选
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定向进化肌醇加氧酶MIOX4提高葡萄糖二酸的产量
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作者 苏蕊芳 李诗韵 +2 位作者 毛银 赵运英 邓禹 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2022年第22期1-8,共8页
葡萄糖二酸是一种在医药、食品、服装纺织和化工均有重要作用的有机二元酸。葡萄糖二酸的生物合成途径已经在大肠杆菌、毕赤酵母和酿酒酵母细胞中成功构建。为了提高葡萄糖二酸合成关键酶-肌醇加氧酶MIOX4的活性,该研究以酿酒酵母(Sacch... 葡萄糖二酸是一种在医药、食品、服装纺织和化工均有重要作用的有机二元酸。葡萄糖二酸的生物合成途径已经在大肠杆菌、毕赤酵母和酿酒酵母细胞中成功构建。为了提高葡萄糖二酸合成关键酶-肌醇加氧酶MIOX4的活性,该研究以酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)作为底盘微生物,通过定向进化-易错PCR的方法对来自拟南芥基因组的肌醇加氧酶MIOX4的关键氨基酸序列进行随机突变。以葡萄糖二酸的产量为筛选指标,利用大肠杆菌葡萄糖二酸传感器对MIOX4的突变体进行高通量筛选。实验结果显示,从突变体文库中筛到4株有潜力的MIOX4突变体(S133R、K88R、E72V、T40P),使得葡萄糖二酸产量相较于未突变菌株分别提高了53%、30%、21%、17%。通过对突变体MIOX4(S133R)进行结构分析,发现突变位点R133增大了该位点与底物肌醇之间的空间距离,从而减少了空间位阻,提高了对底物肌醇的催化能力。该研究为后续研究MIOX的结构和功能、以及进一步提高葡萄糖二酸产量奠定了基础。 展开更多
关键词 酿酒酵母 肌醇加氧酶MIOX4 葡萄糖 易错PCR 生物传感器
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