2种豆类植物病原细菌的红外光谱检测与鉴定 被引量：5

1

作者 徐晓鸥 吴志毅 +2 位作者 陈曦 王有杰 夏拯 《浙江农业科学》 2014年第2期233-235,共3页

菜豆细菌性晕疫病与豌豆细菌性疫病是由丁香假单胞杆菌属（Pseudomonas sp.）细菌引起的2种重要豆科作物细菌性病害.传统检测方法不仅周期长,且鉴定步骤繁琐.本研究首次使用红外光谱技术进行检测和鉴定,发现2种病原菌在3000～4000cm-1... 菜豆细菌性晕疫病与豌豆细菌性疫病是由丁香假单胞杆菌属（Pseudomonas sp.）细菌引起的2种重要豆科作物细菌性病害.传统检测方法不仅周期长,且鉴定步骤繁琐.本研究首次使用红外光谱技术进行检测和鉴定,发现2种病原菌在3000～4000cm-1内具有特异性峰位,显示该方法可行. 展开更多

关键词 菜豆晕疫病 豌豆细菌性疫病 红外光谱技术

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菜豆晕疫病检测技术研究进展 被引量：5

2

作者 陈曦 张明哲 +3 位作者 林晓佳 夏拯 陈吴健 吴志毅 《安徽农业科学》 CAS 2013年第10期4365-4365,4367,共2页

介绍了生理生化检测技术、经典血清学检测技术、现代分子检测技术3种常用的菜豆晕疫病传统检验技术,并讨论了免疫磁性-实时荧光PCR技术、环介导等温扩增技术和红外光谱检测技术3种植物病原细菌最新检测技术应用于菜豆晕疫病的可能性。

关键词 菜豆晕疫病 检测技术 研究进展

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蔬菜三大类病害的田间诊断与防治技术(一)

3

作者 刘余林 《蔬菜》 北大核心 1993年第6期32-33,共2页

掌握准确的病害诊断分类技术,是正确选用药剂、对症下药、控制病害的关键。在大面积蔬菜病害防治工作中,由于缺乏对多种病害识别技术,常把不同病原的病害混为一谈,造成用药不对路而影响防效,延误时机,既浪费了成本,又增加了污染。1987... 掌握准确的病害诊断分类技术,是正确选用药剂、对症下药、控制病害的关键。在大面积蔬菜病害防治工作中,由于缺乏对多种病害识别技术,常把不同病原的病害混为一谈,造成用药不对路而影响防效,延误时机,既浪费了成本,又增加了污染。1987年以来,通过对田间病害的调查观察、分析整理。 展开更多

关键词 分类技术 细菌性角斑病 卷叶 软腐病 叶缘 水浸状 植株矮化 马铃薯青枯病 菜豆晕疫病 出叶

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菜豆晕疫病菌的检测技术研究 被引量：7

4

作者 崔汝强 胡学难 +2 位作者 冯黎霞 赵立荣 钟国强 《植物检疫》 北大核心 2010年第4期25-27,共3页

通过选择性培养基的筛选,利用菜豆萎蔫毒素基因序列扩增引物和菜豆萎蔫毒素基因缺失菌株独有的ORF6序列的扩增引物,采用双重PCR技术实现了菜豆晕疫病菌的快速检测。

关键词 菜豆晕疫病菌 选择性培养基 双重PCR 检测

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基于锁式探针技术的菜豆晕疫病菌检测技术研究 被引量：4

5

作者 李志锋 王忠文 +4 位作者 冯建军 郑耘 王颖 李一农 章桂明 《植物检疫》 北大核心 2016年第2期63-68,共6页

根据菜豆晕疫病菌的一段特异促旋酶亚组B（gyr B）基因序列,设计锁式探针和扩增引物,优化体系反应条件,建立了基于锁式探针菜豆晕疫病菌滚环扩增特异性检测体系。试验结果表明该检测体系能够从供试菌株中特异性检测出菜豆晕疫病菌。该... 根据菜豆晕疫病菌的一段特异促旋酶亚组B（gyr B）基因序列,设计锁式探针和扩增引物,优化体系反应条件,建立了基于锁式探针菜豆晕疫病菌滚环扩增特异性检测体系。试验结果表明该检测体系能够从供试菌株中特异性检测出菜豆晕疫病菌。该体系检测DNA的阈值为600 fg/μL,与传统PCR相当;检测菌悬液检测阈值1.3×10~3 cfu/m L,比传统PCR高10倍,在模拟样品检测中也显示了更适合于样品的检测。 展开更多

关键词 菜豆晕疫病菌 锁式探针 滚环扩增 检测

原文传递

双重PCR法同步检测菜豆晕疫病菌和萎蔫病菌 被引量：3

6

作者 杨万风 刘艳 +3 位作者 刘翔 邵沛泽 谌运清 赵文军 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2015年第9期1612-1618,共7页

为建立同步检测菜豆晕疫病菌和细菌性萎蔫病菌的双重PCR方法,根据Gen Bank上公布的菜豆晕疫病菌arg K基因特异性序列设计1对特异性引物PSPF1/PSPR2,将设计的引物与已发表的检测菜豆细菌性萎蔫病菌特异性引物Cff F1/CffR2结合,经过条件优... 为建立同步检测菜豆晕疫病菌和细菌性萎蔫病菌的双重PCR方法,根据Gen Bank上公布的菜豆晕疫病菌arg K基因特异性序列设计1对特异性引物PSPF1/PSPR2,将设计的引物与已发表的检测菜豆细菌性萎蔫病菌特异性引物Cff F1/CffR2结合,经过条件优化,建立了双重PCR反应体系,并进行特异性和灵敏度验证。结果显示,采用双重PCR体系,能从菜豆晕疫病菌和细菌性萎蔫病菌基因组DNA以及人工模拟带菌大豆种子样品中扩增到特异性条带,表明本研究所建立的双重PCR检测方法能同时检测出菜豆晕疫病菌和细菌性萎蔫病菌,可用于口岸进口大豆中2种检疫性细菌的检测。 展开更多

关键词 菜豆晕疫病菌 菜豆细菌性萎蔫病菌 双重PCR 检测方法

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进口大豆中菜豆晕疫病菌巢式PCR检测方法的建立 被引量：3

7

作者 杨万风 刘艳 +3 位作者 刘翔 邵沛泽 谌运清 赵文军 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期113-118,共6页

为实现对进口大豆样品中菜豆晕疫病菌的快速检测,本研究根据菜豆晕疫病菌的argK特异性序列设计引物52B/8F和24B/24F,建立了巢式PCR检测方法,并进行特异性和灵敏度验证。试验结果表明,利用此检测方法对多种参试菌株进行检测时,只有菜豆... 为实现对进口大豆样品中菜豆晕疫病菌的快速检测,本研究根据菜豆晕疫病菌的argK特异性序列设计引物52B/8F和24B/24F,建立了巢式PCR检测方法,并进行特异性和灵敏度验证。试验结果表明,利用此检测方法对多种参试菌株进行检测时,只有菜豆晕疫病菌呈阳性反应,而其他病菌不产生扩增反应;巢式PCR检测方法对菜豆晕疫病菌基因组DNA和菌悬液检测时,其灵敏度分别达到0.916×10-4ng/μL和2.4×103CFU/m L,比常规PCR灵敏度高1 000倍。在对100份进口大豆样品检测时,3份样品扩增到了特异性条带,测序分析结果证明3份大豆样品中携带的病菌确实为菜豆晕疫病菌。本研究所建立的巢式PCR检测方法具有特异性强、灵敏度高、检测时间短并且检测准确率高等特点,可用于口岸菜豆晕疫病菌的检测。 展开更多

关键词 菜豆晕疫病菌 巢式PCR 检测方法

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日本菜豆种子中菜豆晕疫病菌的检疫鉴定 被引量：1

8

作者 周密密 刘晓宇 +5 位作者 杨静 钱茱希 许剑涛 王振华 吴翠萍 李彬 《植物检疫》 2022年第2期45-50,共6页

利用MT选择性培养基从来自日本的菜豆种子样品上分离到1株细菌分离物(编号1160),对该分离物进行培养性状观察、特异引物PCR检测、多位点序列分析、烟草过敏性反应和致病性测试。结果表明:该分离物菌落在MT上呈白色、略扁平、无水解圈,... 利用MT选择性培养基从来自日本的菜豆种子样品上分离到1株细菌分离物(编号1160),对该分离物进行培养性状观察、特异引物PCR检测、多位点序列分析、烟草过敏性反应和致病性测试。结果表明:该分离物菌落在MT上呈白色、略扁平、无水解圈,经菜豆晕疫病菌(Pseudomonas savastanoi pv. phaseolicola,Psp)特异引物PHA19/PHA95及P5.1/P3.1扩增,获到437 bp及500 bp目的条带,并与Psp菌株LMG2245及GenBank中Psp(基因登录号:AB237164、CP000058)的序列相似性均为100%。选择gap1、gltA、gyrB、rpoD 4个看家基因进行多位点序列分析(MLSA),系统发育树显示分离物1160与Psp菌株LMG2245、1448A聚在同一分支。该分离物人工接种菜豆叶片能引起典型的黄色晕疫病害症状,接种菜豆荚果引起水渍及褐变病害症状;接种烟草叶片可产生过敏性反应。根据上述试验结果,将分离物1160鉴定为菜豆晕疫病菌。这也是全国首次从进境商品中截获菜豆晕疫病菌。 展开更多

关键词 菜豆种子 菜豆晕疫病菌 检测 细菌性病害

原文传递

大豆携带菜豆晕疫病菌PCR检测技术研究 被引量：2

9

作者 杨万风 刘艳 +3 位作者 刘翔 邵沛泽 谌运清 赵文军 《植物检疫》 北大核心 2014年第6期65-68,共4页

晕疫病是豆科作物上重要的检疫性细菌病害。本研究在传统PCR检测技术的基础上,分析了细菌洗涤液、洗涤时间以及洗涤液容量对一粒带菌大豆检出率的影响,以及有效检出不同带菌率大豆的最佳检测时间。结果表明,洗涤液种类、洗涤时间以及洗... 晕疫病是豆科作物上重要的检疫性细菌病害。本研究在传统PCR检测技术的基础上,分析了细菌洗涤液、洗涤时间以及洗涤液容量对一粒带菌大豆检出率的影响,以及有效检出不同带菌率大豆的最佳检测时间。结果表明,洗涤液种类、洗涤时间以及洗涤液容量对检测结果影响不大,但对不同带菌率大豆洗涤时间的长短直接影响病菌的检出率,实验表明振荡洗涤时间8 h,可检测到的大豆种子最低带菌率为0.0625%。本研究所建立的检测方法简便易行,可有效应用于口岸检测进口大豆中的菜豆晕疫病菌。 展开更多

关键词 菜豆晕疫病菌 大豆 种子带菌

原文传递

菜豆晕疫病菌环介导等温核酸扩增检测方法的建立 被引量：1

10

作者 杨万风 刘艳 +3 位作者 刘翔 邵沛泽 谌运清 赵文军 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2014年第6期1321-1327,共7页

为了建立菜豆晕疫病菌的环介导等温扩增方法,本试验利用菜豆晕疫病菌arg K特异性序列设计环介导等温核酸扩增(LAMP)引物,进行反应条件和反应体系的优化,并进行特异性和灵敏度验证。特异性检测结果显示,5株菜豆晕疫病菌的LAMP产物呈阳性... 为了建立菜豆晕疫病菌的环介导等温扩增方法,本试验利用菜豆晕疫病菌arg K特异性序列设计环介导等温核酸扩增(LAMP)引物,进行反应条件和反应体系的优化,并进行特异性和灵敏度验证。特异性检测结果显示,5株菜豆晕疫病菌的LAMP产物呈阳性结果,而参试的其他病原菌不产生扩增反应。LAMP检测基因组DNA和菌悬液时,其灵敏度分别达到0.632×10-4ng/μl和7.3×102CFU/ml,该方法比常规PCR灵敏度高100倍。表明本研究所建立的LAMP检测方法简便、快速、准确、灵敏,可有效应用于口岸菜豆晕疫病菌的检测。 展开更多

关键词 菜豆晕疫病菌 环介导等温扩增 检测

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菜豆晕疫病原菌甘油激酶基因敲除突变体的构建与表型分析

11

作者 刘晓柱 李银凤 +2 位作者 于志海 刘晓辉 黄名正 《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期145-150,共6页

以菜豆晕疫病菌(Pseudomonas syringae pv.phaseolicola)NPS3121株系为出发材料,根据Gen Bank中登录的1448A甘油激酶(glycerol kinase,GK)氨基酸序列设计同源引物,通过PCR克隆NPS3121 GK基因,序列全长为1 506 bp,可编码1条含501个氨基... 以菜豆晕疫病菌(Pseudomonas syringae pv.phaseolicola)NPS3121株系为出发材料,根据Gen Bank中登录的1448A甘油激酶(glycerol kinase,GK)氨基酸序列设计同源引物,通过PCR克隆NPS3121 GK基因,序列全长为1 506 bp,可编码1条含501个氨基酸的多肽。生物信息学分析表明,NPS3121 GK包含469个氨基酸,相对分子质量为55 800,富含α–螺旋结构,等电点为5.44。通过整合突变的方式构建了NPS3121 GK敲除突变体,敲除突变体与野生型相比,在M9培养基中生长速率降低18%,在KBM培养基中生长速率降低16%。敲除突变体中甘油浓度较野生型提高了6倍。 展开更多

关键词 菜豆晕疫病菌 甘油激酶基因 敲除突变体 表型分析

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菜豆中两种重要检疫性细菌检测方法

12

作者 杨柳 张一 +1 位作者 王磊 陈宇飞 《吉林农业（下半月）》 2016年第4期95-95,共1页

对菜豆中两种重要检疫性细菌——菜豆萎蔫病菌和菜豆晕疫病菌检测方法进行研究。比较菜豆萎蔫病菌和菜豆晕疫病菌的检测方法,结果表明:环介导等温扩增方法应用于菜豆检疫性细菌检测,可实现快速现场检测,且特异性强,灵敏度高。对保障国... 对菜豆中两种重要检疫性细菌——菜豆萎蔫病菌和菜豆晕疫病菌检测方法进行研究。比较菜豆萎蔫病菌和菜豆晕疫病菌的检测方法,结果表明:环介导等温扩增方法应用于菜豆检疫性细菌检测,可实现快速现场检测,且特异性强,灵敏度高。对保障国家农业生产安全、保护我国农村菜豆种质资源的安全起到重要作用。 展开更多

关键词 菜豆萎蔫病菌 菜豆晕疫病菌 检测 温扩增技术

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