高产脂肪酶菌株的筛选及其酶学性质分析 被引量：14

1

作者 张传丽 孙会刚 +4 位作者 崔珏 陈学红 高兆建 唐兆成 李同祥 《食品科技》 CAS 北大核心 2019年第11期30-35,共6页

采用罗丹明B平板初筛和摇瓶发酵复筛法从含油脂丰富的土样中筛选出产脂肪酶活性较高的菌株,并对活性最高的菌株TZ-1进行16S rDNA鉴定和发酵产酶条件分析,发现TZ-1属约氏不动杆菌(Acinetobacter johnsonii),最佳产酶条件为温度30℃、培... 采用罗丹明B平板初筛和摇瓶发酵复筛法从含油脂丰富的土样中筛选出产脂肪酶活性较高的菌株,并对活性最高的菌株TZ-1进行16S rDNA鉴定和发酵产酶条件分析,发现TZ-1属约氏不动杆菌(Acinetobacter johnsonii),最佳产酶条件为温度30℃、培养基初始p H值为8.0、发酵时间48h,此时酶活性可达22.7 U/mL;对TZ-1菌株所产脂肪酶进行酶催化特性分析发现,该脂肪酶属中温碱性脂肪酶,其最适作用温度为50℃,最适作用p H为8.0,60℃下半衰期为3 h,70℃下的半衰期约1.5 h,p H值8~9时稳定性良好。 展开更多

关键词 脂肪酶 菌株筛选鉴定 酶学性质 约氏不动杆菌

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防治松褐天牛成虫的白僵菌菌株室内筛选和鉴定 被引量：10

2

作者 贺然 崔夏 +3 位作者 应玥 曲良建 王瑞珍 张永安 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第10期129-134,共6页

【目的】筛选对松褐天牛成虫具有高致病力的白僵菌菌株,以期用于防治松褐天牛成虫。【方法】收集被病原真菌感染的松褐天牛幼虫,25℃条件下PDA培养基培养分离纯化病原真菌。使用25℃、相对湿度60%、光周期16 L∶8D条件下羽化5~10^天的... 【目的】筛选对松褐天牛成虫具有高致病力的白僵菌菌株,以期用于防治松褐天牛成虫。【方法】收集被病原真菌感染的松褐天牛幼虫,25℃条件下PDA培养基培养分离纯化病原真菌。使用25℃、相对湿度60%、光周期16 L∶8D条件下羽化5~10^天的健壮松褐天牛成虫,生物测定病原真菌致死效果。将PDA培养基上培养获得的病原真菌孢子,分别溶于0.05%的吐温80溶液中,配制成终浓度分别为1×10^6~3×10^6或者1×10^6~3×10^7个·mL^-1的孢子悬浮液,0.05%的吐温80溶液作为空白对照。采用涂枝法和喷洒法处理松褐天牛成虫,以累计校正死亡率为指标评价菌株的致病力。折线图由R包“ggplot2”绘制。采用ITS1和ITS4扩增真菌保守序列,经连接转化后测序。采用软件muscle比对序列,MEGA软件中的最大似然法构建系统发育树。【结果】从感染的23头松褐天牛幼虫中共分离出23株白僵菌菌株,通过喷洒法初步筛选出18天累计校正死亡率在30%以上的6个菌株。选取B7和B92个产孢量大(14天,10^8·cm^-2)的菌株,涂枝法进行毒力测试结果表明,B9菌株在12天的累计校正死亡率即可达到10^0%,而B7菌株在12天时的累计校正死亡率约为50%±10^%,B9菌株的致死速率显著高于B7菌株。ITS扩增及测序结果表明与球孢白僵菌的同源性为99%。系统发育树结果也表明B9菌株与球孢白僵菌聚为同一分支上。结合形态、NCBI Blast比对结果和系统发育树共同确定B9菌株为球孢白僵菌。【结论】本研究得到对松褐天牛成虫高毒力的球孢白僵菌菌株,对于防治松褐天牛具有良好的应用前景,但实际应用价值需要进一步的田间试验进行确认。 展开更多

关键词 球孢白僵菌 松褐天牛成虫 菌株筛选鉴定 生物防治

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盐碱胁迫下一株促进苜蓿生长的细菌筛选与鉴定 被引量：8

3

作者 向君亮 唐呈瑞 +3 位作者 王佳琦 刘权 张兴梅 殷奎德 《干旱地区农业研究》 CSCD 北大核心 2019年第2期266-272,共7页

为改良和利用盐碱地,本研究以大庆草原盐碱土为材料,在Na_2CO_3和NaHCO_3终浓度分别为50、100 mmol·L^(-1),pH 8.5的条件下对其中耐盐碱细菌进行分离,并在CAS铁载体检测培养基、ADF培养基、PKO无机磷培养基等功能性培养基上对菌株... 为改良和利用盐碱地,本研究以大庆草原盐碱土为材料,在Na_2CO_3和NaHCO_3终浓度分别为50、100 mmol·L^(-1),pH 8.5的条件下对其中耐盐碱细菌进行分离,并在CAS铁载体检测培养基、ADF培养基、PKO无机磷培养基等功能性培养基上对菌株的促生功能进行检测;利用16S rDNA序列分析法进行菌株的菌种鉴定,在pH 8.5,25 mmol·L^(-1) Na_2CO_3胁迫下测试菌株对苜蓿种子发芽率、发芽势及幼苗生长的影响。结果表明:筛选得到的菌株S11具有产植物激素IAA和产ACC脱氨酶功能;通过对菌株16S rDNA序列进行分析,初步鉴定菌株S11为堀越氏芽孢杆菌(Bacillus horikoshii)。盐碱胁迫条件下,浸种接菌处理苜蓿种子后,种子发芽率和发芽势分别提高了15%和10%,幼苗根长、株高、鲜重以及叶绿素含量分别增加了34.78%、12.5%、27.3%和43.30%,这证明菌株S11具有缓解盐碱胁迫促进苜蓿生长的功能。 展开更多

关键词 耐盐碱促生菌 菌株筛选鉴定 盐碱土 苜蓿

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粤北大宝山矿区土壤中抗铅菌株的筛选鉴定 被引量：3

4

作者 柯野 卢星燕 +1 位作者 曾松荣 陈韵 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期489-493,共5页

采集大宝山矿区重金属污染的土壤样品,采用稀释涂布平板法对土壤样品中抗铅菌株的筛选,进一步在含不同铅浓度的培养液中进行驯化;通过对该菌株的形态观察、一系列生理生化试验、以及16S r DNA序列的比对研究进行鉴定;利用原子荧光光度... 采集大宝山矿区重金属污染的土壤样品,采用稀释涂布平板法对土壤样品中抗铅菌株的筛选,进一步在含不同铅浓度的培养液中进行驯化;通过对该菌株的形态观察、一系列生理生化试验、以及16S r DNA序列的比对研究进行鉴定;利用原子荧光光度计测定其对发酵液中铅的吸附能力。结果表明,分离获得的抗铅菌株在铅浓度为500 mg·L-1的培养液中长势良好,鉴定为类短短芽孢杆菌(Brevibacillus parabrevis),该菌株在含铅浓度为300mg·L-1的液体培养情况下,培养20 h左右,对发酵液中铅的去除效率高,高达30.27%。 展开更多

关键词 铅 菌株筛选鉴定 类短短芽孢杆菌

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杀草丹降解菌Bacillus sp. T2的筛选、鉴定及降解特性 被引量：3

5

作者 褚翠伟 刘斌 +2 位作者 朱启黎 李娜 何健 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期921-927,共7页

为研发稻田除稗剂杀草丹污染环境的生物修复技术和探究杀草丹微生物降解代谢机制,通过微生物驯化与富集技术,从长期施用杀草丹水稻田土样中分离纯化一株能够以杀草丹为唯一碳源生长的高效降解菌株T2,在36 h内对0.4 mmol/L的杀草丹降解... 为研发稻田除稗剂杀草丹污染环境的生物修复技术和探究杀草丹微生物降解代谢机制,通过微生物驯化与富集技术,从长期施用杀草丹水稻田土样中分离纯化一株能够以杀草丹为唯一碳源生长的高效降解菌株T2,在36 h内对0.4 mmol/L的杀草丹降解率达到98.3%以上.根据其形态、生理生化特征及16S rRNA基因序列相似性分析,将其初步鉴定为芽孢杆菌属（Bacillus sp.T2）.通过GC-MS鉴定产物为对氯苄硫醇、对氯苯甲醛和对氯苯甲酸;依据产物鉴定结果推测菌株T2通过硫酯键水解的方式起始杀草丹的降解,首先将其转化为对氯苄硫醇,随后进一步被氧化为对氯苯甲醛和对氯苯甲酸,该降解途径可能是一种新的杀草丹微生物降解代谢途径.因此菌株Bacillus sp.T2对杀草丹具有非常高的降解效率,在污染环境的微生物修复方面具有很好的应用前景;本研究结果也为揭示土壤中杀草丹微生物降解代谢过程及机制提供了研究材料和理论依据. 展开更多

关键词 杀草丹 芽孢杆菌 菌株筛选鉴定 降解特性 降解机制

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高产脂肪酶菌株的筛选鉴定及酶学、转酯特性 被引量：10

6

作者 马抒晗 张玮佳 +3 位作者 吴茜 姜腾飞 乔代蓉 曹毅 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期602-608,共7页

从自然环境中筛选水解酶活高且酶学、转酯特性优良的产脂肪酶菌株,对脂肪酶工业化发酵生产及生物柴油制备的研究具有重要意义.采用罗丹明B平板初筛和摇瓶发酵复筛法,从70份含油脂丰富的样品中筛选产脂肪酶酶活较高的菌株进行16S rRNA鉴... 从自然环境中筛选水解酶活高且酶学、转酯特性优良的产脂肪酶菌株,对脂肪酶工业化发酵生产及生物柴油制备的研究具有重要意义.采用罗丹明B平板初筛和摇瓶发酵复筛法,从70份含油脂丰富的样品中筛选产脂肪酶酶活较高的菌株进行16S rRNA鉴定,研究其酶学性质;用大孔树脂固定酶,在无溶剂体系中催化橄榄油制备生物柴油,研究其转酯特性.结果筛选到一株高产脂肪酶的菌株WZ10-3,通过p-NPP法测得其初始酶活为78.68 U/mL,经16S rRNA鉴定属于伯克霍尔德氏菌(Burkholderia sp.),与B.stabilis同源性达到99%.该菌在发酵48 h时达到产酶高峰,所产脂肪酶的最适作用温度为50℃,最适作用pH为7.0,70℃下的半衰期可达1 h,pH为7-9时稳定性良好.以大孔树脂NKA-9和HPD600为载体制备的2种固定化脂肪酶,催化橄榄油生产生物柴油的转酯率均可达到97%.综合表明,菌株WZ10-3脂肪酶的初始水解酶活高于大多数野生脂肪酶,热稳定性好且转酯特性优良,有很好的后续研究价值. 展开更多

关键词 脂肪酶 菌株筛选与鉴定 酶学性质 转酯 伯克霍尔德氏菌 生物柴油

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脂肪酶产生菌的筛选及鉴定研究 被引量：7

7

作者 燕清丽 周斌 +3 位作者 孟晓娜 李振秀 陈芳 高剑峰 《生物技术通报》 CAS CSCD 2008年第6期170-174,共5页

为寻找合适的产脂肪酶野生菌,以期能高效的催化合成生物柴油。通过添加橄榄油作为惟一碳源进行富集培养,然后以透明圈平板筛选法从油污土壤样品中成功地筛选到了一株酶活力值为10.12U/ml产脂肪酶菌株。通过对该菌株表型、生理生化特征... 为寻找合适的产脂肪酶野生菌,以期能高效的催化合成生物柴油。通过添加橄榄油作为惟一碳源进行富集培养,然后以透明圈平板筛选法从油污土壤样品中成功地筛选到了一株酶活力值为10.12U/ml产脂肪酶菌株。通过对该菌株表型、生理生化特征分析及16S rRNA部分序列的系统进化发育分析鉴定该菌为芽胞杆菌属,定名为BacilluspumilusB2。 展开更多

关键词 脂肪酶 菌株筛选和鉴定 芽胞杆菌属

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发酵香肠乳酸菌筛选及其对产品品质的影响 被引量：3

8

作者 赵银峰 黄倩 +4 位作者 周春燕 宁家文 王蜀 聂庆 吉莉莉 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2023年第6期173-182,共10页

利用香肠模型结合主成分分析(PCA),筛出了一株对香肠风味物质有显著提升的植物乳杆菌M-25(Lactobacillus plantarum,M-25)。将其添加到香肠中,以未接菌组作为对照,在川式香肠制作的第0、1、3、7、14 d对pH、Aw、色泽、过氧化值(POV)、... 利用香肠模型结合主成分分析(PCA),筛出了一株对香肠风味物质有显著提升的植物乳杆菌M-25(Lactobacillus plantarum,M-25)。将其添加到香肠中,以未接菌组作为对照,在川式香肠制作的第0、1、3、7、14 d对pH、Aw、色泽、过氧化值(POV)、硫代巴比妥酸(TBARS)以及挥发性风味物质进行了检测。应用偏最小二乘模型(PLS-DA),以VIP(投影中的变量重要性)>1,P<0.05作为筛选条件对香肠中的特征风味物质进行评价。结果表明,随发酵时间推移对照组和接种植物乳杆菌香肠的pH均先降低后缓慢上升;Aw显著降低(P<0.05);POV和TBARS显著升高(P<0.05);而色泽却无显著性差异(P>0.05)。与对照组相比,接种植物乳杆菌香肠的pH、Aw、POV和TBARS值均明显更低,且接种植物乳杆菌香肠中醇类、酮类和酯类物质均明显高于对照组,能明显提升特征风味物质(异戊酸、3-羟基-2-丁酮、苯乙醛和苯乙醇)的含量。综上所述,利用香肠模型筛选的植物乳杆菌M-25能有效提升香肠品质和风味特性。 展开更多

关键词 香肠模型 植物乳杆菌 发酵香肠品质 菌株筛选和鉴定 风味特性

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一株高产2-苯乙醇酵母菌的筛选及鉴定 被引量：5

9

作者 黄筱萍 刘兰 +1 位作者 熊大维 黄国昌 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期531-536,共6页

从24株不同来源的酵母菌中分离筛选出一株对2-苯乙醇耐受性强、生物转化合成2-苯乙醇能力高的优良菌株SH003,该菌株能在含有4 g/L的2-苯乙醇培养基中生长,在优化的转化条件下,转化合成2-苯乙醇质量浓度达4.31 g/L,生成速率为0.18 g/(L&#... 从24株不同来源的酵母菌中分离筛选出一株对2-苯乙醇耐受性强、生物转化合成2-苯乙醇能力高的优良菌株SH003,该菌株能在含有4 g/L的2-苯乙醇培养基中生长,在优化的转化条件下,转化合成2-苯乙醇质量浓度达4.31 g/L,生成速率为0.18 g/(L·h),L-苯丙氨酸摩尔转化率为72.4%,经菌落特征、菌体形态分析、生理生化试验,结合18S r DNA序列分析,由系统发育树表明它与酿酒酵母亲缘关系最近,确定该菌株为Saccharomyces cerevisiae。 展开更多

关键词 2-苯乙醇 酿酒酵母 菌株筛选和鉴定 18S RDNA

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细菌素产生菌的分离鉴定及细菌素生物学特性的初步研究 被引量：2

10

作者 周迪 杨旭夫 彭凌 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1111-1116,共6页

为筛选产生细菌素的细菌,本研究以粪纤维单孢菌NCTC7547株作为指示菌,从韶关市某市场环境和动物体表样本筛选对指示菌具有抑制活性的细菌菌株,结果共筛选到48株菌,其中有2株菌对指示菌的抑菌圈直径为40 mm,并且均对红斑丹毒丝菌具有抑... 为筛选产生细菌素的细菌,本研究以粪纤维单孢菌NCTC7547株作为指示菌,从韶关市某市场环境和动物体表样本筛选对指示菌具有抑制活性的细菌菌株,结果共筛选到48株菌,其中有2株菌对指示菌的抑菌圈直径为40 mm,并且均对红斑丹毒丝菌具有抑制作用,其中1株菌对猪链球菌血清型9型菌株和实验中偶然污染的变形杆菌也具有抑制作用。通过对活性物质产生菌的形态观察、革兰氏染色镜检、生理生化试验和16S rDNA序列鉴定确定2株菌均为鸡葡萄球菌。2株菌产生的活性物质对链霉蛋白酶敏感的特性表明了它们的蛋白质属性,并且活性物质初提物能够抵抗65℃、80℃及100℃15 min处理,121℃处理仍未使初提物活性完全丧失;pH3.0、pH9.0和pH11.0作用后该初提物活性无明显变化。细菌素特异性结构基因的PCR检测表明2株菌产生的活性物质极有可能为鸡皮素。本研究对进一步筛选高效和可能具有临床意义的细菌素奠定了基础。 展开更多

关键词 抗菌活性物质 细菌素 菌株筛选和鉴定 生物学特性 鸡皮素

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一株不对称水解N-癸酰草铵膦生产L-草铵膦菌株的筛选及催化性质研究 被引量：2

11

作者 史泰龙 赵文卓 张朝晖 《工业微生物》 CAS 2018年第6期19-24,共6页

从活性污泥样品中分离得到一株能不对称水解(D,L)-N-癸酰草铵膦的革兰氏阴性菌。经过16S r DNA测序分子生物学鉴定,命名该菌株为Pseudomonas sp. zjut126。当(D,L)-N-癸酰草铵膦浓度为8 g/L,湿菌体(含水75%):N-癸酰草铵膦=1∶1(w/w),反... 从活性污泥样品中分离得到一株能不对称水解(D,L)-N-癸酰草铵膦的革兰氏阴性菌。经过16S r DNA测序分子生物学鉴定,命名该菌株为Pseudomonas sp. zjut126。当(D,L)-N-癸酰草铵膦浓度为8 g/L,湿菌体(含水75%):N-癸酰草铵膦=1∶1(w/w),反应24 h,产物L-草铵膦得率为16. 3%,eep> 95%。该菌体催化的最适温度为30℃,在温度40℃以下催化稳定性较好。最适p H为7,pH在6～8之间催化稳定性较好。加入异丙醇有利于N-癸酰草铵膦的溶解,但对细胞催化活性有明显的抑制作用。建立了一条利用Pseudomonas sp. zjut126细胞作催化剂拆分(D,L)-N-癸酰草铵膦制备L-草铵膦的工艺路线,第一步先将(D,L)-草铵膦化学酰化得到(D,L)-N-癸酰草铵膦,然后用菌株选择性水解(D,L)-N-癸酰草铵膦生成L-草铵膦。将未反应的(D)-N-癸酰草铵膦与L-草铵膦进行分离,终产品L-草铵膦的含量是92. 0%,ee值为95. 2%。 展开更多

关键词 生物拆分 (D L)-N-癸酰草铵膦 L-草铵膦菌株筛选与鉴定 PSEUDOMONAS

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