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评价三种筛选方法检测超广谱β-内酰胺酶及其临床应用 被引量：158
1
作者 孙长贵 陈汉美 +1 位作者 颜秉兴 杨琳 《中华医学检验杂志》 CSCD 1999年第4期228-231,共4页
目的　评价３ 种超广谱β内酰胺酶（ Ｅ Ｓ Ｂ Ｌｓ） 筛选方法检测产 Ｅ Ｓ Ｂ Ｌｓ 大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的可靠性与临床应用。方法　以头孢三嗪、头孢噻肟、头孢他啶和氨曲南为指示底物，用双纸片协同试验、三维试验和双纸片... 目的　评价３ 种超广谱β内酰胺酶（ Ｅ Ｓ Ｂ Ｌｓ） 筛选方法检测产 Ｅ Ｓ Ｂ Ｌｓ 大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的可靠性与临床应用。方法　以头孢三嗪、头孢噻肟、头孢他啶和氨曲南为指示底物，用双纸片协同试验、三维试验和双纸片增效试验３ 种方法检测４５ 株 Ｅ Ｓ Ｂ Ｌｓ 阳性和６４ 株 Ｅ Ｓ Ｂ Ｌｓ 阴性大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌及临床分离的７４ 株大肠埃希菌和３１ 株肺炎克雷伯菌 Ｅ Ｓ Ｂ Ｌｓ 产生情况。结果　３ 种方法的敏感性分别为８６ ．７ ％ 、９５ ．６ ％ 和８４ ．４ ％ ，特异性分别为１００ ％ 、９８ ．５ ％ 和１００ ％ ，检测效率分别为９４ ．５ ％ 、９７ ．３ ％ 和９３ ．６ ％ 。临床分离大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌 Ｅ Ｓ Ｂ Ｌｓ 检出率分别为３２ ．４ ％ 和２５ ．８ ％ 。头孢三嗪和头孢噻肟为本院检测 Ｅ Ｓ Ｂ Ｌｓ 最适指示底物。结论　三维试验是一种敏感、可靠的 Ｅ Ｓ Ｂ Ｌｓ 筛选方法，但操作繁琐，仅适用于标本量较少的医院；双纸片协同试验和双纸片增效试验操作简便、结果可靠，适合于各级医院常规应用。 展开更多
关键词 Β-内酰胺酶 大肠杆菌 克雷伯氏菌 药物筛选
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抗氧化剂抗氧化实验研究进展 被引量：92
2
作者 郑晶泉 《国外医学（卫生学分册）》 北大核心 2000年第1期37-40,共4页
本文总结了抗氧化剂体内外抗氧化实验的研究状况，重点介绍了体外抗氧化实验的研究进展，说明体外抗氧化实验在抗氧化剂初筛中起着重要的作用。
关键词 抗氧化剂 抗氧化 实验研究 药物筛选
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中药提取物中α-葡萄糖苷酶抑制剂的筛选 被引量：94
3
作者 高小平 张蔚瑜 +3 位作者 邹文俊 苏芝 及元乔 刘忠荣 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2003年第6期536-538,共3页
目的 :从中药中筛选α 葡萄糖苷酶抑制剂。方法 :采用α 葡萄糖苷酶、淀粉酶以及蔗糖酶活性测定方法 ,对 12 6种经水煮醇沉提取的常用中药进行α 葡萄糖苷酶抑制活性筛选。结果 :在 0 2 8mg/ml反应体系下 ,2 4种中药提取物显著抑制α ... 目的 :从中药中筛选α 葡萄糖苷酶抑制剂。方法 :采用α 葡萄糖苷酶、淀粉酶以及蔗糖酶活性测定方法 ,对 12 6种经水煮醇沉提取的常用中药进行α 葡萄糖苷酶抑制活性筛选。结果 :在 0 2 8mg/ml反应体系下 ,2 4种中药提取物显著抑制α 葡萄糖苷酶活性 ;在 0 1mg/ml反应体系下 ,5种中药提取物抑制α 淀粉酶活性。大黄、山茱萸、赤芍、五倍子对α 葡萄糖苷酶、α 淀粉酶以及转化酶活性均有抑制作用 ,与阳性药物拜唐苹比较 ,这 4种中药抑制α 淀粉酶的活性较低 ,但抑制α 葡萄糖苷酶和转化酶的活性明显强于拜唐苹。结论 :某些中药提取物能显著抑制α 葡萄糖苷酶活性 ,如果对其进一步分离、纯化并提取活性部位 ,可望获得抑制活性更强的中药α 葡萄糖苷酶抑制剂。 展开更多
关键词 中药提取物 Α-葡萄糖苷酶抑制剂 药物筛选 降血糖药物 糖尿病
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代谢物组学在中药现代研究中的意义 被引量：72
4
作者 刘昌孝 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期601-605,共5页
代谢物组学是后基因时代出现的一门新兴“组学”学科。它能用反映整体的代谢物图直接认识生理和生化状态 ,因此能提供区别于其他“组学”而来的大量信息。代谢物组学已经用于评价实验动物模型和外源物产生的一系列代谢过程和作用机制、... 代谢物组学是后基因时代出现的一门新兴“组学”学科。它能用反映整体的代谢物图直接认识生理和生化状态 ,因此能提供区别于其他“组学”而来的大量信息。代谢物组学已经用于评价实验动物模型和外源物产生的一系列代谢过程和作用机制、靶器官的效应、组织损伤。代谢物组学是新药研究开发的必要一部分 ,其应用涵盖新生物标志物的发现、新药筛选、安全性实验和作用机制研究。因此 ,在模型识别和确证、药物筛选、作用机制研究等方面具有理论意义和应用价值。在现代中药研究中 。 展开更多
关键词 代谢物组学 新药研究开发 药物筛选 药物安全性 中药
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50种广西常用中草药、壮药抗肿瘤作用的筛选研究 被引量：76
5
作者 韦金育 李延 +2 位作者 韦涛 吕琳 曾振东 《广西中医学院学报》 2003年第4期3-7,共5页
[目的 ]筛选有抗肿瘤作用的中草药。 [方法 ]采用体外抗肿瘤药物筛选 MTT法 ,对 5 0种广西常用中草药、壮药进行抗肿瘤作用筛选试验。 [结果 ]稀释浓度 1∶ 1 0 0时对肝癌细胞呈现明显抑瘤作用的药物有白花丹 (86 .37% )、石见穿(72 .0 ... [目的 ]筛选有抗肿瘤作用的中草药。 [方法 ]采用体外抗肿瘤药物筛选 MTT法 ,对 5 0种广西常用中草药、壮药进行抗肿瘤作用筛选试验。 [结果 ]稀释浓度 1∶ 1 0 0时对肝癌细胞呈现明显抑瘤作用的药物有白花丹 (86 .37% )、石见穿(72 .0 6 % )、溪黄草 (70 .32 % )、中越猕猴桃 (6 8.1 8% )、叶下珠 (82 .1 6 % )、钻地风 (6 0 .85 % )、金刚刺 (6 0 .0 % )、穿心莲(5 4 .5 4 % )、中华猕猴桃 (5 2 .0 % )、芒果叶 (5 2 .35 % )、半枝莲 (32 .6 6 % )、六月雪 (4 8.35 % )、白花蛇舌草 (38.82 % )、火炭母(4 7.73% )、三姐妹 (39.71 % )、排钱草 (33.82 % )、凤尾草 (30 .0 % )、野菊花 (32 .2 6 % )、穿破石 (35 .81 % )、龙葵 (35 .2 % )、寻骨风 (32 .2 6 % )、七叶一枝花 (30 .1 1 % )、七星剑 (4 4 .0 % )、绣花针 (4 0 .4 4 % )、苦丁茶 (34.1 7% )、野宁木 (38.2 % )、芦荟(36 .5 5 % )、九节风 (4 5 .3% )、绞股蓝 (35 .6 % )等 2 9种。稀释度 1∶ 1 0 0 0时仍出现明显抑瘤作用的药物有中越猕猴桃(33.0 % )、白花丹 (30 .0 % )、七星剑 (4 7.31 % )、叶下珠 (32 .8% )、溪黄草 (35 .5 1 % )等 5种。 [结论 ]5 0种常用中草药、壮药中以白花丹等 2 9种有抑瘤作用 ,而其中 展开更多
关键词 抗肿瘤作用 中草药 壮药 药物筛选 中越猕猴桃 白花丹 七星剑 叶下珠 溪黄草
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MTT法在肿瘤研究中的改良及应用进展 被引量：69
6
作者 李杰 刘玉琴 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期312-313,共2页
ＭＴＴ法在肿瘤研究中的改良及应用进展李杰刘玉琴①综述孙桂芝审校中国中医研究院广安门医院肿瘤科（北京市１０００５３）１９８３年，Ｍｏｓｍａｎｎ等［１］根据细胞能量代谢水平与ＤＮＡ合成水平相平行的原理，建立了四甲基偶氮唑... ＭＴＴ法在肿瘤研究中的改良及应用进展李杰刘玉琴①综述孙桂芝审校中国中医研究院广安门医院肿瘤科（北京市１０００５３）１９８３年，Ｍｏｓｍａｎｎ等［１］根据细胞能量代谢水平与ＤＮＡ合成水平相平行的原理，建立了四甲基偶氮唑盐（ＭＴＴ３－（４，５－ｄｉｍｅｔ... 展开更多
关键词 MTT法 肿瘤研究 抗癌效应细胞 细胞毒 药物筛选
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微流控芯片实验室及其功能化 被引量：39
7
作者 林炳承 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期1-6,共6页
对微流控芯片实验室技术及其功能化的最新进展予以综述 ,着重介绍了微流控芯片实验室与毛细管电泳的关系 ,功能化微流控芯片实验室的几个要素 ,微流控芯片实验室的一般功能 ,特别是其在高通量药物筛选领域的发展前景。作为示例 。
关键词 微流控芯片实验室 功能化 毛细管电泳 药物筛选 药物设计
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微流控芯片实验室 被引量：50
8
作者 林炳承 秦建华 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期456-463,共8页
以作者所在课题组近年来的研究工作为基础,就芯片实验室平台建设及相应的以系统生物学为最终目标的功能化研究作一说明,对在分子和细胞层面,甚至是单分子、单细胞水平上实现以规模集成为特征的临床诊断和药物筛选的努力予以特别的关注。
关键词 芯片实验室 系统生物学 功能化 临床诊断 药物筛选
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药物筛选的发展与现状 被引量：32
9
作者 杜冠华 胡娟娟 +2 位作者 夏丽娟 黄家学 张均田 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第11期876-879,共4页
随着人类对自身健康的关注和对生命质量要求的不断提高，对医学和药物的要求也越来越高。我国人口众多，药物需求量大，对新药研究的要求更为强烈。新药研究可分为两个步骤：一是药物作用的发现，二是药物应用的研究。药物作用发现过程... 随着人类对自身健康的关注和对生命质量要求的不断提高，对医学和药物的要求也越来越高。我国人口众多，药物需求量大，对新药研究的要求更为强烈。新药研究可分为两个步骤：一是药物作用的发现，二是药物应用的研究。药物作用发现过程的一个重要环节就是药物筛选。国际上... 展开更多
关键词 药物筛选 高特异性 模型 检测 高通量
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中草药抗致龋菌的实验研究 被引量：42
10
作者 王少虎 樊明文 边专 《中华口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期385-387,共3页
目的　筛选出具有抗致龋菌的中草药 ,并检测其最小抑菌、杀菌浓度。方法　对各种实验用中草药分别采用水、醇两种方法提取有效成分 ,从黄连中提纯盐酸小檗碱 ,通过纸片扩散法筛选出具有抗致龋菌的中草药 ,用液体稀释方法检测最小抑菌及... 目的　筛选出具有抗致龋菌的中草药 ,并检测其最小抑菌、杀菌浓度。方法　对各种实验用中草药分别采用水、醇两种方法提取有效成分 ,从黄连中提纯盐酸小檗碱 ,通过纸片扩散法筛选出具有抗致龋菌的中草药 ,用液体稀释方法检测最小抑菌及最小杀菌浓度。结果　对变形链球菌Ingbritt株的最小杀菌浓度 ,厚朴、黄连、五倍子、大黄醇提取物、黄连水提取物和小檗碱分别是 0 4 88、1 95 0、7 80 0、3 1 2 5 0、7 80 0及 0 62 6g/L ;对茸毛链球菌 6715株的最小杀菌浓度 ,厚朴、黄连、大黄醇提取物、黄连水提取物和小檗碱分别是 0 4 88、3 90 0、3 1 2 5 0、1 95 0及 0 62 5g/L ;对粘性放线菌ATCC192 4 6株的最小杀菌浓度 ,黄连、大黄醇提取物、黄连水提取物和小檗碱分别是 3 90 0、3 1 2 5 0、3 90 0及 1 2 5 0g/L。结论　厚朴、黄连、大黄醇提取物、盐酸小檗碱、黄连及大黄水提取物对致龋菌有较强的抑菌或杀菌作用 ,厚朴醇提取物的杀菌效果最强。 展开更多
关键词 链球菌 变异 致龋物 中草药 小檗碱 药物筛选
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一种用微孔板筛选alpha-葡萄糖苷酶抑制剂的方法(英文) 被引量：41
11
作者 李婷 张小东 +1 位作者 宋聿文 刘建文 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2005年第10期1128-1134,共7页
目的：建立敏感的微孔板方法检测alpha-葡萄糖苷酶抑制活性，以进行抑制剂体外高通量筛选。方法：调整酶和底物适当配比，通过标准曲线、波长扫描、动力学分析以及最佳反应条件的研究，用阿卡波糖验证所建方法。结果：确定反应步骤，96... 目的：建立敏感的微孔板方法检测alpha-葡萄糖苷酶抑制活性，以进行抑制剂体外高通量筛选。方法：调整酶和底物适当配比，通过标准曲线、波长扫描、动力学分析以及最佳反应条件的研究，用阿卡波糖验证所建方法。结果：确定反应步骤，96孔板，160μl体系含2．5mmol·L^(-1)PNPG和0．2U·ml^(-1)alpha-葡萄糖苷酶，37℃，pH7．0反应15min，400 nm检测，此法正确、可靠。结论：本文所述用小体积样品筛选得到大量抑制剂的方法，利于从天然产物中开发改善餐后血糖的糖尿病及其并发症治疗药物。 展开更多
关键词 阿卡波糖 alpha-葡萄糖苷酶抑制剂 药物筛选 微孔板方法 餐后血糖
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新生儿感染病原菌及药敏试验12年总结 被引量：42
12
作者 余加林 吴仕孝 +2 位作者 贾慧群 母灿荣 范永萃 《中华儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期354-357,共4页
目的　探讨新生儿感染致病菌的流行病学及常见抗菌药物的敏感性。方法　按《全国临床检验操作规程》鉴定细菌 ,纸片扩散法进行药敏试验。结果　 12年内分离出病原菌 2 2 44株。病原菌为 :院外感染前 3位是表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌及... 目的　探讨新生儿感染致病菌的流行病学及常见抗菌药物的敏感性。方法　按《全国临床检验操作规程》鉴定细菌 ,纸片扩散法进行药敏试验。结果　 12年内分离出病原菌 2 2 44株。病原菌为 :院外感染前 3位是表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌及大肠埃希菌 ;院内感染前 3位是大肠埃希菌、克雷伯菌及绿脓杆菌。多数院内感染菌株较院外感染菌株对青霉素、氨苄青霉素等 15种常用抗生素的耐药率有不同程度的增加 ,部分差异有统计学意义。总敏感率为 :环丙沙星 95 2 %、诺氟沙星78 8% ,阿米卡星 78 2 %、亚胺培南 +西司他丁 87 7%、万古霉素 81 8%、头孢类抗生素尤其是第 3代头孢菌素 6 0 7%～ 78 1%。结论　院外感染致病菌以革兰阳性球菌为主 ,而院内感染致病菌以革兰阴性杆菌为主 ,后者对许多抗菌药物更易产生耐药性 ;环丙沙星、诺氟沙星、阿米卡星、亚胺培南 +西司他丁、万古霉素及头孢类抗生素尤其是第 展开更多
关键词 婴儿 细菌 抗生素类 药物筛选 流行病学
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26种活血化瘀中药对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响 被引量：35
13
作者 王淑美 徐晓玉 +2 位作者 陈伟海 季业伟 叶兰 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2006年第3期401-403,407,共4页
目的:采用鸡胚绒毛尿囊膜(ChickChorioallantoicMembrane,CAM)法从26种活血化瘀中药中初筛血管生成抑制剂。方法:试验组分别为26种活血化瘀中药,所用片剂、胶囊剂、丸剂、散剂溶解成饱和溶液,汤剂制成含生药2g/ml的水煎醇沉液,注射液、... 目的:采用鸡胚绒毛尿囊膜(ChickChorioallantoicMembrane,CAM)法从26种活血化瘀中药中初筛血管生成抑制剂。方法:试验组分别为26种活血化瘀中药,所用片剂、胶囊剂、丸剂、散剂溶解成饱和溶液,汤剂制成含生药2g/ml的水煎醇沉液,注射液、口服液、膏剂用原药物浓度。种鸡蛋孵化7天,建立CAM模型,按20μl胚加药液于明胶海绵载体上,每日1次,连续3天。孵化第10天,计数CAM载体周围5mm的血管分支点。结果:15种活血化瘀中药CAM的血管分支点数量降低(P<0.05)。结论:榄香烯乳剂、莪术油葡萄糖注射液、磷酸川芎嗪注射液、注射用阿魏酸钠、雷公藤多苷片、火把花根片、祖师麻片、复方斑蝥胶囊、大黄广廿灬虫虫丸、大活络丸、复方丹参滴丸、七厘散、活血通脉片、三棱丸及桃红四物汤Ⅱ号具有抑制CAM血管生成的作用。 展开更多
关键词 活血化瘀中药 抗血管生成 鸡胚绒毛尿囊膜 药物筛选
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三种中药处方对SARS相关冠状病毒体外抑制作用的初步研究 被引量：42
14
作者 朱舜亚 李晓萸 +2 位作者 魏云玲 杨佩英 秦鄂德 《生物技术通讯》 CAS 2003年第5期390-392,共3页
探讨三种中药处方对Vero-E6细胞内SARS相关冠状病毒的抑制作用。取一定量的SARS相关冠状病毒BJ01株加入培养好的Vero-E6细胞中,置37℃、5%CO2孵箱吸附2h,吸出病毒液,再分别加入不同浓度的药物稀释液,在同样条件下培养48～72h,观察细胞... 探讨三种中药处方对Vero-E6细胞内SARS相关冠状病毒的抑制作用。取一定量的SARS相关冠状病毒BJ01株加入培养好的Vero-E6细胞中,置37℃、5%CO2孵箱吸附2h,吸出病毒液,再分别加入不同浓度的药物稀释液,在同样条件下培养48～72h,观察细胞病变情况。迪康注射液、连花清瘟胶囊和复方连蒲颗粒抑制Vero-E6细胞内SARS-CoV的半数有效浓度EC50分别为0.056、0.11和0.49mg/ml,治疗指数TI分别为53.6、40.3和4.0。说明上述三种中药处方在体外对SARS-CoV有一定抑制作用, 展开更多
关键词 SARS 冠状病毒 药物筛选 中药处方
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四种青蒿酸及青蒿B衍生物的体外抗癌作用 被引量：39
15
作者 孙玮辰 韩家娴 《中国药理学报》 CSCD 1992年第6期541-543,共3页
关键词 青蒿素 药物筛选 抗癌药
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药物筛选新技术与中药现代化研究 被引量：26
16
作者 杜冠华 《世界科学技术-中药现代化》 2000年第4期47-52,59,共6页
近年来，随着科学技术的进步，药物筛选技术发生了巨大变化，出现了以快速、微量、大规模为特点，应用多种先进技术手段的高通量药物筛选方法。应用现代科学技术进行中药现代化研究，是促进中药现代化研究的重要途径之一。本文通过介绍... 近年来，随着科学技术的进步，药物筛选技术发生了巨大变化，出现了以快速、微量、大规模为特点，应用多种先进技术手段的高通量药物筛选方法。应用现代科学技术进行中药现代化研究，是促进中药现代化研究的重要途径之一。本文通过介绍最新技术，讨论了药物筛选新技术在中药现代化研究中的应用，主要探讨了在中药活性成分、中药理论、中药复方、中药作用机制等方面的研究中，药物筛选新技术的应用可能性和已有的尝试，从方法学的角度为中药现代化研究提供新的思路，供研究人员参考。 展开更多
关键词 高通量药 药物筛选 中药现代化研究 生物学技术
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基因芯片在抗肿瘤血管生成中草药相关基因筛选中的研究 被引量：30
17
作者 托娅 苏秀兰 +4 位作者 路桂荣 辛学东 王文礼 柯杨 包文宇 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期273-275,共3页
目的 :利用基因芯片技术 ,从基因水平解释抗肿瘤血管生成中草药的有效组分 T3的分子机制。 方法 :( 1)采用两种细胞系 :人胃癌 BGC82 3细胞和血管内皮细胞 ( EC) ,每种细胞分两组 ,一组为对照 ,另一组为 T3药物刺激组 ;( 2 )抽提细胞总R... 目的 :利用基因芯片技术 ,从基因水平解释抗肿瘤血管生成中草药的有效组分 T3的分子机制。 方法 :( 1)采用两种细胞系 :人胃癌 BGC82 3细胞和血管内皮细胞 ( EC) ,每种细胞分两组 ,一组为对照 ,另一组为 T3药物刺激组 ;( 2 )抽提细胞总RNA ,经反转录制备 c DNA,对照组用 Cy3、药物刺激组用 Cy5荧光标记 ,获得 c DNA探针 ;( 3 ) c DNA探针与 Bio Door基因表达谱芯片杂交 ,结果由扫描仪扫描并用 Im a Gene3 .0软件进行分析统计。 结果 :( 1) BGC82 3细胞组有 2 .5 3 %基因表达谱发生明显的变化 ,其中 15 8条基因在经 T3刺激后表达量明显上升 ,4 4条明显下降 ;( 2 ) EC组有 0 .4 6%的基因表达谱发生明显的变化 ,其中 3 0条基因在经 T3刺激后表达量明显上升 ,7条基因表达量明显下降。结论 :利用基因芯片技术可从基因水平解释中药的作用机制 。 展开更多
关键词 微矩阵基因芯片 基因表达谱 中草药 药物筛选 抗肿瘤血管生成
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高通量药物筛选与中药现代化研究 被引量：23
18
作者 杜冠华 《中成药》 CAS CSCD 1999年第5期268-270,共3页
高通量药物筛选（ＨｉｇｈＴｈｒｏｕｇｈｐｕｔＳｃｒｅｅｎｉｎｇ）是近年发展起来的药物筛选新方法。这一方法集计算机控制、自动化操作、高灵敏度检测、数据结果和自动采集和处理于一体，实现了药物筛选的快速、微量、灵敏和大规... 高通量药物筛选（ＨｉｇｈＴｈｒｏｕｇｈｐｕｔＳｃｒｅｅｎｉｎｇ）是近年发展起来的药物筛选新方法。这一方法集计算机控制、自动化操作、高灵敏度检测、数据结果和自动采集和处理于一体，实现了药物筛选的快速、微量、灵敏和大规律，日筛选量达到数千甚至数万样品次... 展开更多
关键词 中药 药物筛选 高通量筛选 现代化
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四唑盐比色试验中有关条件的探讨 被引量：22
19
作者 吴军正 司徒镇强 +1 位作者 刘斌 陈建元 《第四军医大学学报》 1991年第4期304-306,共3页
用10种细胞对四唑盐比色试验(MTT assay)中波长、MTT[3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑嗅盐]作用时间、细胞数、MTT结晶物溶解后放置时间等因素与光吸收值的关系进行了研究.结果表明:在微孔培养板中当细胞生长不过度时,MTT结晶物... 用10种细胞对四唑盐比色试验(MTT assay)中波长、MTT[3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑嗅盐]作用时间、细胞数、MTT结晶物溶解后放置时间等因素与光吸收值的关系进行了研究.结果表明:在微孔培养板中当细胞生长不过度时,MTT结晶物形成的量与细胞数量成正比;MTT与细胞充分发生作用所需时间因细胞不同而有差异,其范围为2-8h;结晶物经二甲亚砜溶解后,光吸收最大值为波长490—515 nm;该溶液在室温下保持稳定至少12 h. 展开更多
关键词 四唑盐 药物筛选 细胞存活
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流感病毒神经氨酸酶抑制剂筛选模型的建立和应用 被引量：32
20
作者 曹鸿鹏 陶佩珍 杜冠华 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第12期930-933,共4页
目的　建立适用于高通量筛选的流感病毒神经氨酸酶 (neuraminidase ,NA)抑制剂筛选模型。方法　从甲型及乙型流感病毒中制备神经氨酸酶 ,以 2′ (4 methylumbelliferyl) α D N acetylneuraminicacid(MUNANA)作为底物 ,建立检测神经... 目的　建立适用于高通量筛选的流感病毒神经氨酸酶 (neuraminidase ,NA)抑制剂筛选模型。方法　从甲型及乙型流感病毒中制备神经氨酸酶 ,以 2′ (4 methylumbelliferyl) α D N acetylneuraminicacid(MUNANA)作为底物 ,建立检测神经氨酸酶活性的荧光测定法及其抑制剂体外筛选方法 ,用高通量筛选系统对 12 0 0个化合物与提取物进行初筛。结果　神经氨酸酶酶促反应以pH 3 5 ,二价阳离子浓度为 2～ 6mmol·L- 1 及 37℃孵育时酶活性最佳 ;甲、乙型流感病毒不同株神经氨酸酶的米氏常数 (Km)的范围为 (4 89～ 5 94) μmol·L- 1 ;初筛发现 12个化合物对流感病毒神经氨酸酶有可重复的抑制活性。结论　优化了神经氨酸酶反应体系 ,建立的体外模型可用于抗甲、乙型流感病毒药物的高通量筛选及酶抑制动力学的研究。 展开更多
关键词 神经氨酸酶 乙型流感病毒 筛选模型 甲型流感病毒 荧光测定法 药物筛选 流感病毒神经氨酸酶抑制剂
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