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荧光高效液相色谱法测定三种失眠模型大鼠脑组织氨基酸类神经递质的含量 被引量：15
1
作者 涂星 郜红利 +1 位作者 卢映 吴俊洪 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2013年第5期74-77,共4页
目的测定睡眠剥夺大鼠脑组织氨基酸类神经递质的含量。方法复制药物诱导失眠动物模型、平台水环境诱导失眠动物模型、刺激诱导失眠动物模型,以Agilent 1100荧光检测器高效液相系统为检测工具,Agilent ZORBAX SB-Aq(250 mm×4.6 mm,5... 目的测定睡眠剥夺大鼠脑组织氨基酸类神经递质的含量。方法复制药物诱导失眠动物模型、平台水环境诱导失眠动物模型、刺激诱导失眠动物模型,以Agilent 1100荧光检测器高效液相系统为检测工具,Agilent ZORBAX SB-Aq(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,柱温25℃,激发波长λex=357 nm,发射波长λem=455 nm,甲醇-50 mmoL/L醋酸钠缓冲液(pH=6.5)为流动相,采取梯度洗脱,测定正常组及模型组大鼠脑组织中谷氨酸(Glu)、甘氨酸(Gly)、γ-氨基丁酸(γ-GABA)、牛磺酸(Tau)的含量。结果谷氨酸、甘氨酸、γ-氨基丁酸、牛磺酸分别在10.06～0.0503、10.13～0.0506、10.05～0.0502、10.03～0.0501μg/mL范围内,其浓度与峰面积呈良好的线性关系(r分别为0.99995、0.99995、0.99985、0.99990)。测得药物诱导失眠大鼠脑组织中Glu、Gly、Tau、γ-GABA的含量为(0.2042±0.0145)、(0.0086±0.0005)、(0.0919±0.0024)、(0.0421±0.0011)μg;平台水环境诱导失眠大鼠脑组织中Glu、Gly、Tau、γ-GABA的含量为(0.2144±0.0159)、(0.0085±0.0004)、(0.0966±0.0035)、(0.0433±0.0012)μg;刺激诱导失眠大鼠脑组织中Glu、Gly、Tau、γ-GABA的含量为(0.1818±0.0043)、(0.0084±0.0005)、(0.0824±0.0033)、(0.0414±0.0018)μg;正常大鼠脑组织中Glu、Gly、Tau、γ-GABA的含量为(0.1744±0.0038)、(0.0085±0.0004)、(0.0791±0.0022)、(0.0406±0.0012)μg。结论本实验建立的方法能满足同时测定大鼠脑组织中谷氨酸、甘氨酸、γ-氨基丁酸、牛磺酸的含量测定的需要,Glu、Tau、γ-GABA与失眠可能存在一定的量效关系,三种失眠动物模型均能较好的反映出脑内氨基酸类神经递质的变化。 展开更多
关键词 失眠动物模型 氨基酸类神经递质 含量测定 荧光高效液相色谱
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绵羊血浆阿维菌素荧光高效液相色谱检测法的建立 被引量：11
2
作者 潘保良 汪明 王玉万 《中国兽医科技》 CSCD 北大核心 2002年第11期8-11,共4页
建立了一种绵羊血浆中阿维菌素 (AVM )荧光高效液相色谱 (HPLC)检测法。用甲醇提取绵羊血浆中的AVM ,并用ODS C18固相萃取法进行纯化 ,纯化后的AVM经干燥处理后 ,用三氟乙酸酐和N 甲基咪唑对其进行荧光衍生化 ,用荧光HPLC进行检测。本... 建立了一种绵羊血浆中阿维菌素 (AVM )荧光高效液相色谱 (HPLC)检测法。用甲醇提取绵羊血浆中的AVM ,并用ODS C18固相萃取法进行纯化 ,纯化后的AVM经干燥处理后 ,用三氟乙酸酐和N 甲基咪唑对其进行荧光衍生化 ,用荧光HPLC进行检测。本方法的最低检测限为 0 .1ng/mL ,在血浆AVM含量 2 .5～ 5 0 .0ng/mL范围内 ,标准曲线方程为Y =2 72 12x -10 412 (r =0 .9995 ) ,样品的平均回收率为 92 .0 2 %± 6.3 3 %。批内变异系数 1.98%～ 6.2 2 % ,批间变异系数 2 .3 1%～ 8.94%。检测结果显示 ,本方法灵敏度高 ,干扰少 ,重复性好。 展开更多
关键词 阿维菌素 固相萃取 荧光衍生化 荧光高效液相色谱 检测 抗寄生虫药 动物 血浆 药代动力学评价
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牛奶中埃谱利诺菌素(eprinom ectin)荧光高效液相色谱检测方法的建立 被引量：10
3
作者 潘保良 汪明 +4 位作者 王玉万 潘贞德 戴晓曦 高凌云 那顺 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期174-176,共3页
建立了以多拉菌素 (doramectin,DOR)作为内标检测牛奶中埃谱利诺菌素 (eprinomectin,EPR)的荧光高效液相色谱 (HPL C)检测法。用乙腈作为牛奶中蛋白质的沉淀剂和 EPR的提取剂。用 ODS- C1 8固相萃取法对提取的 EPR进行纯化。用真空干燥... 建立了以多拉菌素 (doramectin,DOR)作为内标检测牛奶中埃谱利诺菌素 (eprinomectin,EPR)的荧光高效液相色谱 (HPL C)检测法。用乙腈作为牛奶中蛋白质的沉淀剂和 EPR的提取剂。用 ODS- C1 8固相萃取法对提取的 EPR进行纯化。用真空干燥箱对提取和纯化后的 EPR进行干燥。在无水条件下 ,用三氟乙酸酐和 N-甲基咪唑作荧光衍生化剂 ,加入冰醋酸 ,在加热条件下对干燥后的 EPR进行荧光衍生化。用荧光 HPL C进行检测 ,检测条件 :流动相为 A液(为乙腈与无水甲醇按 1∶ 2的比例配制而成 )与水之比为 98∶ 2 ,流速为 1.0 m L/ m in,激发波长为 36 6 nm,发射波长为 4 6 5 nm,进样量为 10 0 μL,柱温为室温。本方法的检测限为 0 .1μg/ L,在 1～ 4 0 μg/ L 血浆的浓度范围内 ,标准曲线方程为 Y=0 .1787x- 0 .117,R2 =0 .997;样品的回收率为 83.4 0 %～ 10 5 .6 5 % ;变异系数为 6 .32 %～ 9.0 5 %。结果显示 :本方法灵敏度高 ,干扰少 ,重复性好。 展开更多
关键词 埃谱利诺菌素 DOR 内标法 固相萃取 荧光高效液相色谱 牛奶
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高效液相色谱-荧光检测法测定发酵红肉制品中Neu5Gc 被引量：4
4
作者 晏印雪 朱秋劲 +6 位作者 梁美莲 周樱子 常瑞 李洪英 徐阿奇 刘春丽 曾雪峰 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期66-72,共7页
基于高效液相色谱-荧光检测(HPLC-FLD)技术,建立红肉发酵及制品中N-羟乙酰神经氨酸(N-glycolylneuraminic acid,Neu5Gc)的定量分析方法。成功搭建了以酸水解释放试样中的Neu5Gc,4,5-亚甲二氧基-1,2-邻苯二胺盐(4,5-methylenedioxy-1,2-p... 基于高效液相色谱-荧光检测(HPLC-FLD)技术,建立红肉发酵及制品中N-羟乙酰神经氨酸(N-glycolylneuraminic acid,Neu5Gc)的定量分析方法。成功搭建了以酸水解释放试样中的Neu5Gc,4,5-亚甲二氧基-1,2-邻苯二胺盐(4,5-methylenedioxy-1,2-phenylenediamine dihydrochloride,DMB)为衍生化试剂,并采用安捷伦ZORBAX Eclipse XDB-C18色谱柱等系列条件的HPLC-FLD分析检测方法。该方法经验证:Neu5Gc在25~400μmol/L范围内与Neu5Gc峰面积的线性关系良好,R^2=0.999 41;样品加标平均回收率在96.4%~99.07%之间;RSD为1.2%,重复性的RSD为1.5%;仪器检出限为0.001μmol/L,定量限为0.003μmol/L。检测发酵红肉样品中Neu5Gc的质量分数在9.59~20.08μg/g之间,不同的发酵红肉制品Neu5Gc的含量之间均存在显著性差异(p<0.05)。本方法能有效分离Neu5Gc目标峰(分离度R>1.5)、操作简单、重复性好、灵敏度和精密度高,可广泛用于发酵红肉制品中Neu5Gc的定量测定。 展开更多
关键词 N-羟乙酰神经氨酸 红肉 发酵肉制品 荧光高效液相色谱 食品安全
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荧光高效液相色谱法测定血清中总唾液酸含量的分析 被引量：3
5
作者 柏丹丹 李红卫 +2 位作者 潘莉莉 王冰 古桂雄 《中国儿童保健杂志》 CAS 北大核心 2012年第11期1022-1025,共4页
【目的】探讨荧光高效液相色谱法测定血清中总唾液酸含量的最佳条件。【方法】按优化实验的原则,将人体血清分别用三氟乙酸、硫酸、盐酸80℃水解,酸化浓度分别为0.05、0.10、0.15、0.20mol/L,酸解时间分别为30、60、90、120min,经50℃... 【目的】探讨荧光高效液相色谱法测定血清中总唾液酸含量的最佳条件。【方法】按优化实验的原则,将人体血清分别用三氟乙酸、硫酸、盐酸80℃水解,酸化浓度分别为0.05、0.10、0.15、0.20mol/L,酸解时间分别为30、60、90、120min,经50℃避光衍生150min后进行色谱分析。【结果】用0.10mol/L TFA溶液80℃水解60min测定的唾液酸浓度最佳,唾液酸的最适宜浓度在0.625～80μmol/L范围内,其平均回收率为94.0%,精密度、稳定性、重复性试验的相对标准差分别为1.3%、1.1%和1.0%。Neu5Ac的最低检出限为0.02μmol/L,16～19岁健康青少年血清中唾液酸(Neu5Ac)含量的平均值为(2.12±0.15)mmol/L。【结论】荧光高效液相色谱法测定唾液酸简单、重复性好、灵敏度高,可广泛用于人体血清唾液酸含量测定。 展开更多
关键词 血清 唾液酸 荧光高效液相色谱
原文传递
荧光反相色谱法测定体液中痕量诺氟沙星和环丙沙星 被引量：1
6
作者 王泽海 傅承光 徐宏达 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第S1期264-265,共2页
关键词 诺氟沙星 反相色谱法 环丙沙星 流动相 理化分析 荧光高效液相色谱 测定条件 色谱条件 处理方法 最低检出量
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鸡血浆中乙酰氨基阿维菌素HPLC检测法的建立及口服给药后的药代动力学研究 被引量：1
7
作者 许晓琳 潘婷婷 +2 位作者 张树栋 王传文 潘保良 《中国兽药杂志》 2019年第11期66-72,共7页
旨在建立鸡血浆中乙酰氨基阿维菌素(EPR)浓度的高效液相色谱(HPLC)检测方法,并进行EPR在鸡体内的药代动力学研究。用甲醇提取血浆中的EPR,并用Sep-Pak C18固相萃取法进行纯化,纯化后的EPR经干燥处理,用三氟乙酸酐和N-甲基咪唑对其进行... 旨在建立鸡血浆中乙酰氨基阿维菌素(EPR)浓度的高效液相色谱(HPLC)检测方法,并进行EPR在鸡体内的药代动力学研究。用甲醇提取血浆中的EPR,并用Sep-Pak C18固相萃取法进行纯化,纯化后的EPR经干燥处理,用三氟乙酸酐和N-甲基咪唑对其进行衍生化,使用荧光HPLC检测。结果表明,在血浆EPR含量为0.1~100 ng/mL范围内,标准曲线线性关系良好,相关系数r=0.9999。检测限(LOD)为0.1 ng/mL,定量限(LOQ)为0.3 ng/mL。批内批间的平均回收率均大于90%,批内变异系数2.81%~8.02%,批间变异系数4.32%~5.83%。给蛋鸡口服5.0 mg/kg的EPR,EPR在鸡体内的药代动力学参数显示:给药后1.58 h可达最大血药浓度(Cmax) 354.27 ng/mL;消除半衰期(T1/2el)为5.52 h;平均滞留时间(MRT)为6.40 h。结果说明建立的检测方法灵敏度高、准确度高,干扰少,适用于鸡血浆中EPR含量的检测。药代参数提示EPR在鸡体内的吸收代谢迅速,可较快消除。 展开更多
关键词 荧光高效液相色谱 乙酰氨基阿维菌素 鸡 药代动力学
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绵羊血浆中多拉菌素的高效液相色谱检测
8
作者 石艳丽 韩彩霞 +3 位作者 张子群 李晓云 宋铭忻 李巍 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2014年第1期73-75,78,共4页
本试验建立了绵羊血浆中多拉菌素的荧光高效液相色谱（HPLC）检测法。用乙腈作为血浆中蛋白质的沉淀剂和多拉菌素的提取剂，离心后取上清液用旋转真空蒸发器挥干溶剂，用5％乙腈-水溶解残渣后用ODS—C18固相萃取法对提取的多拉菌素进行... 本试验建立了绵羊血浆中多拉菌素的荧光高效液相色谱（HPLC）检测法。用乙腈作为血浆中蛋白质的沉淀剂和多拉菌素的提取剂，离心后取上清液用旋转真空蒸发器挥干溶剂，用5％乙腈-水溶解残渣后用ODS—C18固相萃取法对提取的多拉菌素进行纯化。用氮气在60℃沙浴中对提取和纯化后的多拉菌素进行干燥。在无水条件下，用三氟乙酸酐和N-甲基咪唑作荧光衍生化试剂，在常温避光条件下对多拉菌素进行荧光衍生化。用荧光HPLC进行检测，检测条件：流动相为无水甲醇，流速1．0mL／min，激发波长365nm，发射波长475nm，进样量20乩，柱温为20℃。结果表明，本方法的检测限为0．1ng／mL，在1－100ng／mL血浆浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系；样品的回收率为89．5％～95．67％；不同浓度水平的日内变异系数和日间变异系数分别小于4％和5％。结果显示，本方法样品提取、纯化和衍生化过程准确、灵敏度高、干扰少、重复性好。 展开更多
关键词 多拉菌素 固相萃取 荧光高效液相色谱
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高效液相色谱法测定母乳中唾液酸含量 被引量：17
9
作者 陈海娇 王萍 +1 位作者 陈越 李红卫 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第16期308-311,共4页
建立荧光高效液相色谱(fluorescence detector-high performance liquid chromatography,HPLC-FLD)测定母乳中唾液酸N-乙酰神经氨酸(N-acetylneuraminic acid,Neu5Ac)和N-羟乙酰神经氨酸(N-glycolyl neuraminic acid,Neu5Gc)含量的分析... 建立荧光高效液相色谱(fluorescence detector-high performance liquid chromatography,HPLC-FLD)测定母乳中唾液酸N-乙酰神经氨酸(N-acetylneuraminic acid,Neu5Ac)和N-羟乙酰神经氨酸(N-glycolyl neuraminic acid,Neu5Gc)含量的分析方法。利用酸水解法释放出母乳中的唾液酸,以4,5-亚甲二氧基-1,2-邻苯二胺盐(4,5-methylenedioxy-1,2-phenylenediamine dihydrochloride,DMB)为衍生化试剂,50℃避光衍生150min,采用荧光高效液相色谱仪检测。色谱条件:LiChrosorb RP-18柱(250mm×4mm,5μm),流动相为甲醇-乙腈-超纯水(7:8:85),流速0.9mL/min,进样体积10μL,柱温30℃,荧光检测器激发波长373nm,发射波长448nm。结果表明:唾液酸在50～400μmol/L范围内与唾液酸峰面积的线性关系良好,平均回收率为94.0%,精密度的相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为0.4%,稳定性RSD为1.0%,重复性RSD为0.8%,Neu5Ac的最低检出限为0.02μmol/L,Neu5Gc的最低检出限位0.03μmol/L。该方法简单、重复性好、灵敏度高,可广泛用于奶粉、牛奶及母乳中唾液酸含量测定。 展开更多
关键词 母乳 唾液酸 荧光高效液相色谱(HPLC-FLD)
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高效液相色谱法检测婴儿配方奶粉中唾液酸 被引量：7
10
作者 王蕾 李晓东 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2013年第5期52-55,共4页
建立一种用4,5-亚甲基二氧基-1,2-邻苯二胺盐(DMB)衍生的荧光高效液相色谱(HPLC-FLD)检测婴儿配方奶粉中唾液酸的方法,该方法首先酸水解,然后避光衍生后荧光高效液相色谱测定。用c18柱分离,流动相为甲醇∶乙腈∶超纯水=7∶8∶85,流速为1... 建立一种用4,5-亚甲基二氧基-1,2-邻苯二胺盐(DMB)衍生的荧光高效液相色谱(HPLC-FLD)检测婴儿配方奶粉中唾液酸的方法,该方法首先酸水解,然后避光衍生后荧光高效液相色谱测定。用c18柱分离,流动相为甲醇∶乙腈∶超纯水=7∶8∶85,流速为1 mL/min,标准曲线法定量。结果表明:唾液酸在甲酸水解作用中从糖链、糖蛋白中释放出来,达到了最大的释放量;并在50℃,150 min条件下DMB避光衍生,达到反应的最大值,并且该方法具有良好的准确度和精密度,平均回收率为95.83%:,最低检出限为0.02μmol/L。 展开更多
关键词 唾液酸 荧光高效液相色谱(HPLC-FLD) 婴儿配方奶粉 DMB
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