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重症肌无力AChRAb与培养神经元nAChR免疫结合反应研究 被引量：18
1
作者 刘睿 李柱一 +1 位作者 许汉鹏 王者晋 《中国神经免疫学和神经病学杂志》 CAS 2002年第2期91-94,共4页
目的　从离体细胞水平对重症肌无力 ( MG)患者伴有中枢神经系统 ( CNS)受损的机制进行探讨。方法　从 MG患者和正常人血中提取 Ig G。体外培养新生 SD大鼠皮层、脑干、海马神经元 ,同时培养 TE-6 71细胞株作阳性对照 ,然后其与神经元特... 目的　从离体细胞水平对重症肌无力 ( MG)患者伴有中枢神经系统 ( CNS)受损的机制进行探讨。方法　从 MG患者和正常人血中提取 Ig G。体外培养新生 SD大鼠皮层、脑干、海马神经元 ,同时培养 TE-6 71细胞株作阳性对照 ,然后其与神经元特异性抗体及胆碱能神经元特异性抗体进行间接免疫荧光双标记 ,观察其免疫结合反应。结果　MG患者 Ig G可与离体培养的皮层、脑干、海马神经元及 TE6 71免疫结合 ,而正常人血中提取的Ig G则否。结论　 MG患者外周 Ig G( ACh RAb)可与离体培养的神经 -烟碱型乙酰胆碱受体 ( n ACh R)结合 ,是MG患者 CNS受损的可能机制。 展开更多
关键词 重症肌无力 神经细胞 细胞培养 神经-烟碱型乙酰胆碱受体 乙酰胆碱受体抗体 荧光双标记
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“合谷”“内关”“扶突”穴与甲状腺的初级传入神经联系:荧光双标记法 被引量：10
2
作者 张璐 蒋瑾 +1 位作者 晋志高 刘俊岭 《针刺研究》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期438-442,447,共6页
目的:观察"合谷""内关""扶突"穴区与甲状腺区之间的传入神经联系途径,为针刺该3穴区行甲状腺针麻手术机制提供形态学依据。方法:30只Wistar雄性大鼠分为合谷-扶突穴组、内关-扶突穴组、甲状腺-扶突穴组... 目的:观察"合谷""内关""扶突"穴区与甲状腺区之间的传入神经联系途径,为针刺该3穴区行甲状腺针麻手术机制提供形态学依据。方法:30只Wistar雄性大鼠分为合谷-扶突穴组、内关-扶突穴组、甲状腺-扶突穴组、合谷-甲状腺组、内关-甲状腺组,每组6只。分别采用荧光素碘化丙啶(PI)及双苯甲亚胺(Bb)从上述穴区皮下和甲状腺周围微量注射。PI注射后60 h、Bb注射后12 h将动物以常规方法灌流固定,剥取颈节段脊神经节及脊髓,荧光显微镜下观察PI、Bb单双标记细胞。结果:所有组中PI及Bb单标记细胞在C1-T1脊神经节均可见到,其中"合谷"穴与"内关"穴PI单标记细胞集中分布在C4-C8脊神经节,"扶突"穴与甲状腺Bb单标记细胞集中分布在C1-C6脊神经节。合谷-扶突穴组、内关-扶突穴组、合谷-甲状腺组、内关-甲状腺组双标记细胞主要分布于C3-C7脊神经节,甲状腺-扶突穴组双标记细胞分布于C1-C4脊神经节。在脊髓前角也可见少量单标记细胞,约占同一节段脊神经节全部标记细胞数的8%左右,并可见散在的双标记细胞。结论:"合谷""内关""扶突"之间及3穴位与甲状腺之间均存在双标记细胞,即上述穴位之间及穴位与甲状腺之间存在由外周到脊髓的联系途径,为这些穴位组方配伍使用在甲状腺手术针麻过程中发挥镇痛作用的机制提供了形态学依据。 展开更多
关键词 荧光双标记 甲状腺 合谷 内关 扶突 颈脊神经节
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大鼠胃的神经支配——荧光双标记法研究 被引量：7
3
作者 罗政良 董新文 单红英 《解剖学报》 CAS 1987年第4期379-386,455,共9页
采用荧光双标记法,研究大鼠胃体与幽门的神经支配。延髓迷走神经背核(DmnX)、疑核(nA)和孤束核(nTs)均有标记神经元,部分标本脊髓胸段(T_(6-9))灰质后角V层、脊神经节(T_(6-9))和胸交感链中亦有标记神经元。结合观察结果,对胃的神经支... 采用荧光双标记法,研究大鼠胃体与幽门的神经支配。延髓迷走神经背核(DmnX)、疑核(nA)和孤束核(nTs)均有标记神经元,部分标本脊髓胸段(T_(6-9))灰质后角V层、脊神经节(T_(6-9))和胸交感链中亦有标记神经元。结合观察结果,对胃的神经支配和外周神经标记的荧光染料选择等问题,进行了讨论。根据DmnX标记细胞的情况分析,表明胃体与幽门分别有迷走神经分支支配,部分神经纤维既有末梢分布于胃体,亦有末梢分布于幽门。支配胃体的神经纤维密度远较幽门部为大。根据胸交感链中存在标记神经元的情况,提出支配胃的节前交感纤维有部分是在交感链中换神经元。 展开更多
关键词 胃体与幽门的神经 迷走神经背核 荧光双标记
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聚合物载体对环孢素A角膜通透性的促进作用 被引量：4
4
作者 李景果 周天洋 +4 位作者 栗占荣 梁珍 夏慧芸 何继军 张俊杰 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期914-919,共6页
目的研究聚合物载体对环孢素A(CsA)角膜通透性的影响。方法利用化学方法合成接枝共聚物壳聚糖-接枝-环糊精,核磁共振波谱仪和傅里叶红外光谱分析仪表征聚合物的结构。以该聚合物作为载体材料,制备CsA滴眼液,高效液相色谱法-质谱联用系... 目的研究聚合物载体对环孢素A(CsA)角膜通透性的影响。方法利用化学方法合成接枝共聚物壳聚糖-接枝-环糊精,核磁共振波谱仪和傅里叶红外光谱分析仪表征聚合物的结构。以该聚合物作为载体材料,制备CsA滴眼液,高效液相色谱法-质谱联用系统测量滴眼液中药物含量,渗透压测定仪和粘度仪分别测定滴眼液的渗透压和黏度。取新西兰白兔3只,左眼作为实验组,右眼作为对照组,进行角膜刺激性评分。取清洁级新西兰白兔18只,按照随机数字表法分为完整角膜CsA组、去上皮CsA组和去上皮对照组,以左眼为实验眼,分别于点眼后0.5h和1h处死动物,抽取房水,剖取角膜组织,高效液相色谱法-质谱联用系统测量角膜组织和房水中的药物含量。采用荧光素香豆素6作为模型药物,Cy5标记聚合物载体,采用双荧光标记方法研究体系在小鼠角膜中的实时透过行为。结果核磁谱图和红外光谱图显示,成功合成了目标聚合物壳聚糖-接枝-环糊精。CsA滴眼液载药量为0.06%;渗透压为305mOsmol/Kg;黏度为36.5cP。该CsA载药体系具有可逆的温度敏感药物释放行为,且突击点眼后0.5、1、2、3、4和6h对新西兰兔眼无明显刺激性。给药后1h,去上皮CsA组房水中药物质量浓度为(149.19±3.93)ng/ml,高于去上皮对照组的(30.25±11.43)ng/ml,角膜组织中药物质量分数为(5.88±1.46)μg/g,高于去上皮对照组的(3.98±0.95)μg/g,差异均有统计学意义(均P<0.05)。完整角膜CsA组给药后1h房水中的药物质量浓度为(7.23±1.31)ng/ml,显著低于去上皮CsA组和去上皮对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。双光子激光扫描共焦显微镜检测显示,该给药体系均能促进药物透过角膜屏障,到达房水。结论制备的接枝共聚物可以有效负载疏水性免疫制剂CsA,该新型给药体系可以有效促进药物透过角膜屏障,增加药物的角膜通透性。 展开更多
关键词 环孢素A 免疫抑制剂 角膜屏障 荧光双标记 角膜组织分布
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三叉神经中脑核神经元支配咬肌和下颌牙周膜的实验研究 被引量：1
5
作者 王凌 张敬东 《中华口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第5期296-299,共4页
为研究三叉神经中脑核（ｍｅｓｅｎｃｅｐｈａｌｉｃｔｒｉｇｅｍｉｎａｌｎｕｃｌｅｕｓ，Ⅴｍｅ）神经元是否通过其周围突的分支来支配咬肌和下颌牙周膜，将荧光素碘化丙啶和双苯甲亚胺分别注入大鼠同一侧的下牙槽神经和咬肌神经，在... 为研究三叉神经中脑核（ｍｅｓｅｎｃｅｐｈａｌｉｃｔｒｉｇｅｍｉｎａｌｎｕｃｌｅｕｓ，Ⅴｍｅ）神经元是否通过其周围突的分支来支配咬肌和下颌牙周膜，将荧光素碘化丙啶和双苯甲亚胺分别注入大鼠同一侧的下牙槽神经和咬肌神经，在同侧的Ⅴｍｅ内出现荧光素双标记神经元。双标神经元主要分布在尾侧核区，但中、吻段也有零星双标细胞分布。 展开更多
关键词 三叉神经中脑核 牙周膜 咬肌 荧光双标记
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大鼠额前皮质向苍白球和黑质的分叉投射——荧光逆行双标记法研究
6
作者 张德兴 檀进发 柯铭华 《广西医学院学报》 1990年第4期36-38,共3页
应用荧光逆行双标记技术,分别将荧光素二盐酸4′,6-双脒基-2-苯吲哚(4′,6-diamidino-2-pbenylindol·2HCI,DAPI)和碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)注射到大白鼠同侧的苍白球和黑质,在注射区同侧的额前皮质内,可观察到数量较多的DAPl... 应用荧光逆行双标记技术,分别将荧光素二盐酸4′,6-双脒基-2-苯吲哚(4′,6-diamidino-2-pbenylindol·2HCI,DAPI)和碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)注射到大白鼠同侧的苍白球和黑质,在注射区同侧的额前皮质内,可观察到数量较多的DAPl和PI单标记细胞和少量的DAPI/PI双标记细胞。表明额前皮质内存在着向同侧苍白球和黑质发出分叉投射的神经元。 展开更多
关键词 额前皮质 苍白球 黑质 荧光双标记
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胃俞募穴与胃特异性联系通路的荧光双标法研究 被引量：30
7
作者 童晨光 谷世喆 +3 位作者 衣华强 郭长青 项晓人 徐斌 《上海针灸杂志》 2003年第5期16-19,共4页
目的　探求胃与其俞募穴之间的神经联系通路。方法　应用荧光双标记法进行研究。结果　胃俞 -胃组、中脘 -胃组、胃俞 -中脘组分别在 T9-T1 3、T8-T1 2 、T9-T1 2 脊神经节内出现双标细胞。结论　脊神经节中存在可双重支配胃和体表的神... 目的　探求胃与其俞募穴之间的神经联系通路。方法　应用荧光双标记法进行研究。结果　胃俞 -胃组、中脘 -胃组、胃俞 -中脘组分别在 T9-T1 3、T8-T1 2 、T9-T1 2 脊神经节内出现双标细胞。结论　脊神经节中存在可双重支配胃和体表的神经元。实验表明了针刺穴位的感觉冲动是通过分支的传入轴突影响到内脏的功能和感觉或对某些脏器的活动产生影响 ;进而揭示中医经络学中气街可能的现代生物学本质 。 展开更多
关键词 胃 俞募穴 神经联系通路 荧光双标记法 气街
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寻常性银屑病患者外周血T淋巴细胞CD25和CD69的表达 被引量：11
8
作者 朱可建 商惠英 +1 位作者 劳力民 郑敏 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期142-144,共3页
目的探讨寻常性银屑病患者外周血T淋巴细胞激活状态在发病中的作用。方法采用免疫荧光双标记流式细胞术检测32例寻常性银屑病患者外周血CD4+T细胞和CD8+T细胞CD25和CD69的表达,分析其表达水平与疾病严重程度的关系。并对比6例患者进行... 目的探讨寻常性银屑病患者外周血T淋巴细胞激活状态在发病中的作用。方法采用免疫荧光双标记流式细胞术检测32例寻常性银屑病患者外周血CD4+T细胞和CD8+T细胞CD25和CD69的表达,分析其表达水平与疾病严重程度的关系。并对比6例患者进行期和消退期时CD8+T细胞CD25和CD69的表达。结果银屑病患者外周血CD4+T细胞上CD25和CD69的表达水平与正常人对照组差异无显著性(P >0.05);患者组CD8+T细胞表达CD25和CD69的水平(16.30%±5.97%和32.61%±6.36%)明显高于正常人对照组(9.21%±2.14%和10.03%±2.35%),差异有显著性(P<0.01);且与疾病严重程度呈正相关(r值分别为0.75和0.76;P<0.01);进行期与消退期比较CD4+T细胞表达CD25和CD69的水平差异无显著性(P>0.05),但CD8+T细胞CD25和CD69的表达在进行期时(17.37%±4.01%和35.48%±7.72%)明显高于消退期(6.32%±1.29%和8.10%±1.52%),差异有显著性(P<0.01)。结论银屑病患者T细胞的激活以CD8+T细胞为主,其激活状态可作为疾病严重程度的一个指标。 展开更多
关键词 银屑病 T淋巴细胞 CD25 CD69 发病学 免疫荧光双标记流式细胞术
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实验性慢性肾缺血模型肾小管-间质细胞a-平滑肌肌动蛋白的表达和意义 被引量：13
9
作者 陈威 杨守京 +2 位作者 刘彦仿 贺巍 王川 《肾脏病与透析肾移植杂志》 CAS CSCD 2004年第1期30-34,共5页
目的:观察单侧肾动脉狭窄(RAS)大鼠模型慢性肾缺血组织中肾小管-间质a-平滑肌肌动蛋白(a-SMA)的表达和意义。 方法:建立Goldblatt单侧RAS大鼠模型,观察大鼠慢性缺血肾脏在90天内不同阶段的病理改变;应用免疫组化法检测肾小管-间质a-SM... 目的:观察单侧肾动脉狭窄(RAS)大鼠模型慢性肾缺血组织中肾小管-间质a-平滑肌肌动蛋白(a-SMA)的表达和意义。 方法:建立Goldblatt单侧RAS大鼠模型,观察大鼠慢性缺血肾脏在90天内不同阶段的病理改变;应用免疫组化法检测肾小管-间质a-SMA及波形蛋白(vimentin)在不同时间点的表达;应用免疫荧光双标记激光共聚焦显微镜观察细胞角蛋白(cytokeratin,CK)与a-SMA在肾小管上皮细胞中的共定位情况。 结果:RAS术后第5天首先出现肾小管vimentin阳性,术后第7天肾间质可见少量的a-SMA阳性细胞并随时间递增。通过连续切片观察到,vimentin阳性的肾小管周围肾间质细胞a-SMA表达增强,并与肾小管间质纤维化程度基本一致。当慢性缺血状态持续存在时,后期(术后第45天至90天)少数损伤的肾小管上皮细胞表达a-SMA。应用免疫荧光双标记激光共聚焦显微镜观察发现,部分a-SMA阳性的肾小管上皮细胞同时表达CK,并且个别细胞还有向间质游走的趋势。 结论:在慢性肾缺血早期Vimentin阳性的肾小管上皮细胞本身可能诱导了肾间质固有细胞发生肌成纤维细胞转分化,参与肾间质纤维化的发生和发展;在慢性肾缺血后期,肾小管上皮细胞转分化可能是导致肾纤维化进行性发展的关键环节。 展开更多
关键词 慢性肾缺血 动物模型 肾小管 间质细胞 Α-平滑肌肌动蛋白 免疫荧光双标记 肾纤维化
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大鼠“肾俞”穴区与肾上腺神经支配的相关性研究 被引量：16
10
作者 张知云 徐东升 +4 位作者 王慧 佘琛 王佳 崔晶晶 白万柱 《针刺研究》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期414-418,共5页
目的:探索"肾俞"穴与肾上腺相关感觉、交感和运动神经元的分布特征,揭示"肾俞"穴与肾上腺之间的神经解剖学联系。方法:以6只正常SD大鼠作为实验对象,将Alexa荧光素488结合霍乱毒素亚单位B(AF 488-CTB)注射在大鼠第... 目的:探索"肾俞"穴与肾上腺相关感觉、交感和运动神经元的分布特征,揭示"肾俞"穴与肾上腺之间的神经解剖学联系。方法:以6只正常SD大鼠作为实验对象,将Alexa荧光素488结合霍乱毒素亚单位B(AF 488-CTB)注射在大鼠第2腰椎(L)左侧相当于人体肾俞穴的位置,将Alexa荧光素594结合霍乱毒素亚单位B(AF 594-CTB)注入肾上腺实质。3d后灌流固定,用荧光显微镜和激光共聚焦显微镜对脊神经节、交感神经链和脊髓标记到的神经元进行观察。结果:被AF 488-CTB和AF 594-CTB标记的神经元均出现在相应神经组织的左侧,与大鼠"肾俞"穴区和肾上腺相关的感觉神经元主要分布于胸(T)10至L 2节段脊神经节,并分别集中在T 12—T 13和T 11—T 12脊神经节中,T 12—L 1脊神经节中分布有少量的AF 488/594-CTB双标记神经元。在腰部交感神经链仅观察到由AF 488-CTB和AF 594-CTB各自标记的交感节后神经元,而在T 11—T 13节段脊髓侧角中只有AF 594-CTB标记的交感节前神经元。在颈(C)7—C 8以及T 11—L 1节段脊髓前角观察到AF 488-CTB标记的运动神经元。结论:大鼠"肾俞"穴区和肾上腺在感觉和交感神经支配方面存在节段性联系,这种联系可能是针刺"肾俞"穴调节肾上腺功能的神经解剖学途径。 展开更多
关键词 肾上腺 肾俞 荧光双标记神经示踪技术 感觉神经元 交感节前神经元 交感节后神经元 运动神经元
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脐血间充质干细胞移植对大鼠局灶性脑缺血的影响 被引量：10
11
作者 刘海英 张庆俊 +3 位作者 赵宗茂 李洪钧 孙国柱 韩忠朝 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期456-459,i002,共5页
目的　从人脐血中分离纯化间充质干细胞(MSC) ,观察其移植对大鼠大脑中动脉栓塞后神经功能恢复的影响及细胞的存活、迁移向神经细胞分化的情况。方法　雄性SD大鼠45只,用线栓法建立大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,大鼠随机分为3组:MSC移... 目的　从人脐血中分离纯化间充质干细胞(MSC) ,观察其移植对大鼠大脑中动脉栓塞后神经功能恢复的影响及细胞的存活、迁移向神经细胞分化的情况。方法　雄性SD大鼠45只,用线栓法建立大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,大鼠随机分为3组:MSC移植组、单核细胞组和生理盐水组。移植后1、7、14、2 1、2 8d采用改良神经功能损害评分(mNSS)观察大鼠神经功能恢复情况,应用免疫组织化学和免疫荧光双标记技术检测5溴 2脱氧尿核苷(BrdU )标记的MSC细胞的存活、迁移及其胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和神经元特异性核蛋白(NeuN)的表达。结果　人脐血MSC细胞移植可显著提高大鼠局灶性脑缺血后神经功能的恢复(P <0 .0 5 )。移植的MSC细胞可在大鼠脑组织中存活,并向缺血区域迁移,11.67%MSC细胞表达GFAP ,3 .72 %MSC细胞表达NeuN。结论　人脐血中含有MSC细胞并可促进局灶性脑缺血大鼠的神经功能恢复,移植细胞可在大鼠脑缺血区域中存活。 展开更多
关键词 大鼠局灶性脑缺血 间充质干细胞移植 胶质纤维酸性蛋白 神经功能恢复 MSC细胞 大脑中动脉栓塞 免疫荧光双标记 神经细胞分化 神经功能损害 免疫组织化学 神经元特异性 星形胶质细胞 缺血区域 细胞表达 生理盐水组 大鼠脑组织 神经元分化 人脐血 分离纯化 SD大鼠
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天麻素通过蛋白激酶B/p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路抑制H9c2心肌细胞凋亡 被引量：12
12
作者 张玲 杨萍 +4 位作者 姜永良 普俞维 谢立秋 孙林 陆地 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期40-48,共9页
目的采用血清剥夺/复灌的大鼠H9c2心肌细胞模拟心肌缺血/再灌注损伤(I/R),从细胞层面探讨天麻素(gastrodin)抗H9c2心肌细胞凋亡的作用及其机制。方法体外培养H9c2心肌细胞随机分为对照组、血清剥夺(0.5~6 h)处理组、血清剥夺/复灌(2/4 h... 目的采用血清剥夺/复灌的大鼠H9c2心肌细胞模拟心肌缺血/再灌注损伤(I/R),从细胞层面探讨天麻素(gastrodin)抗H9c2心肌细胞凋亡的作用及其机制。方法体外培养H9c2心肌细胞随机分为对照组、血清剥夺(0.5~6 h)处理组、血清剥夺/复灌(2/4 h)处理组、天麻素(10、20和40μmol/L)处理组、天麻素(20μmol/L)+渥曼青霉素(wortmannin)(1μmol/L)处理组、wortmannin (1μmol/L)处理组。采用免疫印迹法检测p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)、蛋白激酶B(Akt)、p-Akt以及凋亡相关蛋白cleaved Caspase-3、Bcl-2和Bax的表达变化;采用流式细胞术检测细胞凋亡;通过实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测Caspase-3、Bcl-2和Bax的mRNA表达变化;采用免疫荧光双标记法检测细胞内p-Akt蛋白水平表达的变化。结果血清剥夺(0.5~6 h)和血清剥夺/复灌(2/4 h)处理诱导细胞凋亡水平增加;加入不同浓度天麻素处理,与血清剥夺(0.5~6 h)和血清剥夺/复灌(2/4 h)处理组比较,凋亡相关蛋白cleaved Caspase-3表达降低,Bcl-2/Bax蛋白表达的比值上调(P<0.05),基因转录水平检测的Caspase-3和Bax表达量降低,Bcl-2表达量上调((P<0.05),流式细胞术凋亡检测结果也同样显示,天麻素能抑制血清剥夺/复灌(2/4 h)诱导的细胞凋亡(P<0.05);同时,血清剥夺(0.5~6 h)和血清剥夺/复灌(2/4 h)处理能抑制Akt/p38MAPK信号通路;加入不同浓度的天麻素(10、20和40μmol/L)处理后,p-Akt的表达水平增多,p-p38MAPK蛋白表达减少(P <0.05)。加入Akt的特异性抑制剂wortmannin(1μmol/L)处理后,天麻素对上述因子的调控作用被反转(P<0.05)。结论在H9c2心肌细胞中,天麻素通过激活Akt/p38MAPK信号通路,抑制血清剥夺/复灌诱导的细胞凋亡,从而发挥抗心肌I/R损伤的保护作用。 展开更多
关键词 天麻素 心肌缺血/再灌注损伤 P38丝裂原活化蛋白激酶 免疫印迹法 免疫荧光双标记法 流式细胞术 大鼠
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结缔组织生长因子在增生性玻璃体视网膜病变增生膜中的表达 被引量：7
13
作者 郭长梅 惠延年 +4 位作者 王雨生 阎峰 韩泉洪 崔志利 马吉献 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2005年第2期128-131,共4页
目的观察结缔组织生长因子(CTGF)在增生性玻璃体视网膜病变(PVR)增生膜中的表达,并鉴别增生膜中阳性细胞来源。方法采用SABC免疫组织化学方法对玻璃体切割手术获得的43例PVR增生膜进行CTGF蛋白的检测,并采用免疫荧光双标记技术在阳性表... 目的观察结缔组织生长因子(CTGF)在增生性玻璃体视网膜病变(PVR)增生膜中的表达,并鉴别增生膜中阳性细胞来源。方法采用SABC免疫组织化学方法对玻璃体切割手术获得的43例PVR增生膜进行CTGF蛋白的检测,并采用免疫荧光双标记技术在阳性表达的增生膜和正常人眼球标本中判定CTGF阳性细胞来源。结果免疫组织化学显示PVR增生膜中阳性细胞形态多是一类胞体为长圆形或多角形,胞浆丰富的上皮样细胞。17例C2-C3级膜中12例阳性,26例D1-D3级膜中19例阳性,其染色反应为阴性"-"、弱阳性"+"、阳性"2+"和强阳性"3+"的分别有5、3、6、3例和7、5、8、6例,总阳性率分别为70.6%和73.1%。统计学分析CTGF阳性表达与膜分级问无相关性(P>0.1)。免疫荧光双标记法显示PVR增生膜中有RPE、巨噬细胞、神经胶质细胞,CTGF阳性细胞来源于RPE细胞;正常眼球RPE层不表达CTGF。结论正常眼球RPE层不表达CTGF,PVR形成过程中RPE细胞在TGF-β1等生长因子的刺激下,CTGF表达上调,表明CTGF参与了PVR增生膜的形成和发展。 展开更多
关键词 增生性玻璃体视网膜病变 结缔组织生长因子 增生膜 SABC免疫组织化学方法 免疫荧光双标记法 CTGF 玻璃体切割手术 RPE细胞 细胞来源 神经胶质细胞 TGF-β1 阳性表达 PVR 双标记技术 上皮样细胞 统计学分析 眼球标本 细胞形态
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人参皂苷Rg1通过自噬抑制Raw 264.7巨噬细胞凋亡 被引量：9
14
作者 凌露 杨萍 +4 位作者 盖盛坤 刘燃 陈媛丽 陆地 孙林 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期599-606,共8页
目的探讨人参皂苷Rg1在血清剥夺诱导的Raw 264.7巨噬细胞自噬和凋亡中的作用及其机制。方法体外培养小鼠Raw 264.7巨噬细胞随机分为空白对照组、不同时间(12、24、36、48和60h)血清剥夺处理组、人参皂苷Rg1(50μmol/L)+不同时间(24、36... 目的探讨人参皂苷Rg1在血清剥夺诱导的Raw 264.7巨噬细胞自噬和凋亡中的作用及其机制。方法体外培养小鼠Raw 264.7巨噬细胞随机分为空白对照组、不同时间(12、24、36、48和60h)血清剥夺处理组、人参皂苷Rg1(50μmol/L)+不同时间(24、36和48h)血清剥夺处理组;依据最佳血清剥夺时间进一步分为空白对照组、血清剥夺(36h)处理组、人参皂苷Rg1(50μmol/L)+血清剥夺(36h)处理组、人参皂苷Rg1(50μmol/L)+血清剥夺(36h)+3-甲基腺嘌呤(3-MA)(5mmol/L,1h)处理组。采用Western blotting检测LC3、Atg 5、Beclin 1、cleaved Caspase-3、Bcl-2及Bax蛋白水平的表达变化;采用免疫荧光双标记检测细胞内LC3蛋白水平表达的变化;采用Hoechst 33342/PI荧光双染检测细胞凋亡的变化。结果不同时间(12、24、36、48和60h)血清剥夺诱导Raw264.7巨噬细胞凋亡;与血清剥夺处理组相比,人参皂苷Rg1处理组LC3、Atg 5及Beclin 1蛋白表达水平显著上调;加入3-MA抑制剂后,凋亡细胞较人参皂苷Rg1处理组明显增多,且Bcl-2蛋白表达水平明显下调的同时,cleaved Caspase-3和Bax蛋白表达水平则显著上调。结论人参皂苷Rg1通过促进血清剥夺诱导的Raw 264.7巨噬细胞自噬,发挥抗凋亡的保护作用。 展开更多
关键词 人参皂苷RG1 自噬 RAW 264.7巨噬细胞 免疫印迹法 免疫荧光双标记法 Hochest 33342/PI荧光双染 小鼠
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MMP-9/IgA和TIMP-1/IgA在IgA肾病患者肾组织中的共表达及意义 被引量：9
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作者 师锁柱 张雪光 陈香美 《军医进修学院学报》 CAS 2011年第12期1269-1270,1273,共3页
目的观察基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其组织抑制因子-1(TIMP-1)和免疫球蛋白A(IgA)在IgA肾病不同病变肾小球内共表达情况,探讨IgA沉积在IgA肾病进展中的作用。方法采用石蜡切片免疫荧光双标记技术,对56例不同病理分级IgA肾病(Lee氏分级Ⅰ... 目的观察基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其组织抑制因子-1(TIMP-1)和免疫球蛋白A(IgA)在IgA肾病不同病变肾小球内共表达情况,探讨IgA沉积在IgA肾病进展中的作用。方法采用石蜡切片免疫荧光双标记技术,对56例不同病理分级IgA肾病(Lee氏分级Ⅰ-Ⅴ级)患者肾组织中MMP-9/IgA、TIMP-1/IgA共表达变化进行检测。结果在Lee氏分级Ⅰ-Ⅱ级肾小球中TIMP-1/IgA有少量表达,MMP-9/IgA表达最多。Lee氏分级Ⅲ级肾小球中TIMP-1/IgA表达增多,MMP-9/IgA表达减少,在Lee氏分级Ⅳ-Ⅴ级重度系膜病变肾小球内TIMP-1/IgA表达最多,MMP-9/IgA有少量表达,而在硬化肾小球内两者表达最少。结论在IgA肾病进展过程中随着肾小球内IgA沉积增多,肾小球内TIMP-1表达逐渐增高,MMP-9表达逐渐减少,提示IgA沉积引起的MMP-9/TIMP-1失衡参与了IgA肾病肾小球硬化过程。 展开更多
关键词 IGA肾病 基质金属蛋白酶-9 基质金属蛋白酶组织抑制因子-1 石蜡切片 免疫荧光双标记
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免疫荧光双标记技术检测胎盘HBsAg-抗-HBs复合物 被引量：6
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作者 王歆 徐德忠 +2 位作者 刘蓬勃 李玉松 王素萍 《第四军医大学学报》 北大核心 2001年第12期1125-1128,共4页
目的　探讨乙肝病毒 (HBV)以何种形式感染胎盘滋养层细胞 .方法　通过免疫荧光双标记技术检测 12例血清HBs Ag阳性母亲的胎盘滋养层细胞 HBs Ag-抗 - HBs复合物 .结果　血清学 HBs Ag阳性母亲胎盘滋养层细胞中存在 HB-s Ag-抗 - HBs复合... 目的　探讨乙肝病毒 (HBV)以何种形式感染胎盘滋养层细胞 .方法　通过免疫荧光双标记技术检测 12例血清HBs Ag阳性母亲的胎盘滋养层细胞 HBs Ag-抗 - HBs复合物 .结果　血清学 HBs Ag阳性母亲胎盘滋养层细胞中存在 HB-s Ag-抗 - HBs复合物 .结论　提示 HBV可能通过 HBs Ag与抗 - HBs结合成复合物的方式进入胞内 ,导致胎盘屏障的第一层细胞受到 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 胎盘 抗原抗体复合物 免疫荧光双标记 HBsAg-抗-HBs复合物
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蛋白酶的相对分子质量对其在制革过程传质的影响 被引量：9
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作者 宋映 马远 +1 位作者 曾运航 石碧 《皮革科学与工程》 CAS 北大核心 2018年第1期5-10,24,共7页
用荧光双标记技术研究了浸水、酶法脱毛、软化和鞣后酸性软化过程中蛋白酶的相对分子质量对其在皮/革内传质的影响。结果表明,浸水和脱毛过程中,由于牛皮厚度大、粒面附有表皮和毛、皮胶原纤维未分散,蛋白酶不能渗透整层牛皮,并且酶的... 用荧光双标记技术研究了浸水、酶法脱毛、软化和鞣后酸性软化过程中蛋白酶的相对分子质量对其在皮/革内传质的影响。结果表明,浸水和脱毛过程中,由于牛皮厚度大、粒面附有表皮和毛、皮胶原纤维未分散,蛋白酶不能渗透整层牛皮,并且酶的相对分子质量对其在皮内的传质影响很小。软化过程中,由于表皮和毛去除彻底、胶原纤维分散良好,蛋白酶较易渗入裸皮,且相对分子质量较小的蛋白酶的渗透速率明显更快,故选用相对分子质量较小的蛋白酶对均匀软化具有重要意义。鞣后酸性软化过程中,尽管削匀蓝湿革薄且胶原纤维分散好,蛋白酶却不能完全渗透蓝湿革,酶的相对分子质量也基本不会影响蛋白酶在革内的传质。这可能是因为酸性蛋白酶的用量少、在浴液(pH 3.5,铬含量27 mg/L)中溶解不完全,且易与蓝湿革表层的铬结合。 展开更多
关键词 制革 蛋白酶 传质 相对分子质量 荧光双标记技术
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AQP4与Kir4.1在大鼠眼内组织的共表达 被引量：6
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作者 陈海 孙善全 +3 位作者 汪克建 陈通 谭戈 杨美 《第四军医大学学报》 北大核心 2008年第3期214-216,共3页
目的:探讨AQP4与Kir4.1在大鼠眼内的定位分布及二者的共表达.方法:用免疫组织化学及激光扫描共聚焦显微技术检测AQP4与Kir4.1在大鼠眼内的分布.结果:免疫荧光显示,AQP4与Kir4.1在大鼠视网膜和睫状体内的分布形式相似;免疫荧光双标显示,A... 目的:探讨AQP4与Kir4.1在大鼠眼内的定位分布及二者的共表达.方法:用免疫组织化学及激光扫描共聚焦显微技术检测AQP4与Kir4.1在大鼠眼内的分布.结果:免疫荧光显示,AQP4与Kir4.1在大鼠视网膜和睫状体内的分布形式相似;免疫荧光双标显示,AQP4与Kir4.1在视网膜Mller细胞及睫状突无色素上皮细胞的顶膜面及基底膜面呈重叠分布.结论:AQP4与Kir4.1在大鼠视网膜Mller细胞及睫状突无色素上皮细胞共表达,提示二者可能具有协同作用,参与房水的产生以及视网膜内水、K+运输平衡的调节. 展开更多
关键词 睫状体/细胞学 视网膜 水通道蛋白 钾通道 内向整流 免疫荧光组织化学与荧光双标记
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痰荧光双标记定量检测对诊断结核病的临床意义 被引量：5
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作者 胡海利 《上海医药》 CAS 2002年第9期411-412,共2页
目的:探讨痰荧光双标记定量检测对诊断结核病的临床意义。方法:对结核病组和非结核病组共300例住院患者的痰液运用PE5700扩增仪采用结核杆菌核酸扩增荧光检测试剂进行荧光双标记定量检测。结果:结核病组的检出阳性率为63.5%,非结核病组... 目的:探讨痰荧光双标记定量检测对诊断结核病的临床意义。方法:对结核病组和非结核病组共300例住院患者的痰液运用PE5700扩增仪采用结核杆菌核酸扩增荧光检测试剂进行荧光双标记定量检测。结果:结核病组的检出阳性率为63.5%,非结核病组的检出阳性率为3.0%;该检测方法的敏感性为63.5%,特异性为97.0%。结论:痰荧光双标记定量检测是一种诊断结核病的新手段,值得临床推广和运用。 展开更多
关键词 痰 荧光双标记定量检测 诊断 结核病 临床意义
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叶酸对胎鼠神经干细胞体外增殖的影响 被引量：4
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作者 张绪梅 黄国伟 +2 位作者 姬长珍 张文治 苏心 《营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期144-147,152,共5页
目的探讨叶酸对体外培养的胚胎大鼠神经干细胞(neural stem cells,NSCs)增殖的影响。方法本研究采用显微解剖、机械吹打、无血清悬浮培养方法分离培养鼠胚大脑NSCs,用巢蛋白(nestin)免疫荧光染色对其进行鉴定,5'-溴脱氧尿嘧啶(BrdU... 目的探讨叶酸对体外培养的胚胎大鼠神经干细胞(neural stem cells,NSCs)增殖的影响。方法本研究采用显微解剖、机械吹打、无血清悬浮培养方法分离培养鼠胚大脑NSCs,用巢蛋白(nestin)免疫荧光染色对其进行鉴定,5'-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)掺入法检测细胞增殖状态;设立正常对照组,叶酸低、高剂量(培养液中添加叶酸4.0 40 mg/L)和叶酸缺乏组(培养液中添加叶酸拮抗剂甲氨蝶呤0.4mg/L);通过nestin+BrdU免疫荧光双标记和绘制细胞生长曲线(MTT法)检测叶酸对细胞增殖状态的影响。结果无血清培养液中可形成大量呈nestin抗原阳性细胞组成的神经球,BrdU免疫标记证实培养的NSCs具有增殖能力。免疫荧光双标记和MTT结果显示,两个叶酸干预组NSCs增殖能力较对照组显著增强。结论体外培养的胚胎大鼠NSCs具有增殖和自我更新的能力;叶酸可以在一定程度上增强NSCs的增殖能力,促进神经干细胞的生长。 展开更多
关键词 叶酸 神经干细胞 NESTIN BRDU 免疫荧光双标记
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