-
题名荧光定量PCR快速检测炭疽芽孢杆菌的实验研究
被引量：13
- 1
-
-
作者
张玲
翟俊辉
周冬生
郭兆彪
王津
杨瑞馥
-
机构
军事医学科学院微生物流行病研究所
-
出处
《中国人兽共患病杂志》
CSCD
北大核心
2005年第11期976-980,共5页
-
基金
863基金(批准号2002AA215011)资助
-
文摘
目的利用LightCycler建立一种简便、特异的实时荧光定量PCR检测方法,用于炭疽芽孢杆菌的快速检测。方法采用SYBR GreenⅠ随机掺入法,利用本实验室建立的实时荧光定量PCR反应体系,根据炭疽芽孢杆菌荚膜和水肿因子设计引物,同时检测两个毒力相关质粒的存在,检测其灵敏度和特异性,并以盲测试验进行验证;在此基础上鉴定14株炭疽芽孢杆菌,并测试该法检测土壤模拟污染标本的灵敏度,实验中设置内对照以排除假阴性结果的存在。结果炭疽杆菌基因组DNA的检测灵敏度可达每反应体系0.53pg,两个克隆株提取质粒的检测限分别为每反应体系12拷贝、140拷贝;检测14株炭疽芽孢杆菌及29株非炭疽芽孢杆菌的PCR扩增结果表明,炭疽芽孢菌DNA均出现特异的扩增结果,29株对照菌的DNA均为阴性;土壤模拟污染标本检测灵敏度可达每反应体系36个芽孢;20次重复实验结果表明其平均值与标准差为14.602±0.640。结论该方法检测炭疽芽孢杆菌具有简便、快捷、灵敏度高和特异性好的特点,为临床诊断、环境监测、卫生防疫等方面,快速检出炭疽芽孢杆菌提供了有利的手段。
-
关键词
炭疽芽孢杆菌
荧光定量PCR
荚膜因子
水肿因子
LIGHTCYCLER
-
Keywords
Bacillus anthracis
real-time PCR
capsule factor
edema factor
LightCycler
-
分类号
R378.7
[医药卫生—病原生物学]
-
