-
题名草鱼肝细胞中诱导剂对EROD作用的剂量效应研究
被引量：5
- 1
-
-
作者
林茂
杨先乐
房文红
张宁
李聃
-
机构
上海高校水产养殖学E-研究院上海水产大学农业部渔业动植物病原库
-
出处
《水产学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第3期311-315,共5页
-
基金
国家自然科学基金项目(30371109)
上海市教委E-研究院建设资助项目(E03009)
上海市重点学科建设资助项目(Y1101)
-
文摘
在研究GCL细胞中EROD催化底物反应时间的基础上分别以三种数学模型拟合,分析比较了诱导剂TCDD、PCB、PB、BaP、3-MC、BNF对GCL细胞EROD酶活的剂量-效应曲线,结果表明Log-Normal模型能较好的拟合药酶诱导前升后降的钟形效应曲线,所得方程参数值p100和EC100可用于药物代谢酶的诱导研究;Gentox模型拟合度相对较低且其EC50值显著高于半效应浓度;Logistic模型只能拟合曲线诱导上升部分而且EC50和p100与Log-Normal模型相比显著偏高。进一步研究结果显示诱导剂TCDD对GCL细胞作用时间越长,EC100越大,p100越小,但在作用48h后即达到较大诱导效应,延长时间并无显著加强作用。
-
关键词
7-乙氧异吩嗯唑酮-O-脱乙基酶(EROD)
诱导
草鱼肝细胞
药物代谢酶
-
Keywords
7-ethoxyresorufin-O-deethylase（EROD）
induction
grass carp hepatocyte
drug-metabolizing enzyme
-
分类号
S965.112
[农业科学—水产养殖]
-
-
题名草鱼肝细胞中恩诺沙星脱乙基代谢的酶动力学
被引量：5
- 2
-
-
作者
林茂
杨先乐
王翔凌
房文红
喻文娟
-
机构
上海水产大学农业部渔业动植物病原库
上海高校水产养殖学E-研究院
集美大学水产学院
-
出处
《高技术通讯》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第3期314-318,共5页
-
基金
国家自然科学基金（30371109）,上海市教育委员会E-研究院建设项目（E03009）上海市重点学科建设项目（Y1101）资助.
-
文摘
用RP-HPLC法检测了草鱼肝细胞系（GCL）细胞中恩诺沙星（ENR）的代谢情况,结果显示,药物利福平（RIF）和苯巴比妥（PB）在浓度分别为（12.6±0.9）μM和（34.8±3.6）μM时对ENR脱乙基酶具有最大的诱导倍数,分别为6.0±0.4和2.3±0.3;而红霉素（ERM）对ENR脱乙基酶具有抑制作用,其抑制剂浓度EC50为（20.3±1.8）μM。RIF诱导组和对照组的GCL细胞中ENR代谢的药时曲线方程分别为Ct/Co=-0.0654Ln（t）＋0.7342和Ct/Co=-0.0280Ln（t）＋0.9300,酶动力学方程分别为1/V=72.5530×1/[S]＋1.4922和1/V=530.9800×1/[S]＋3.5274。ENR消除率和环丙沙星（CIP）转化率的研究结果表明,RIF对ENR的脱乙基代谢具有显著的促进作用,而酶动力学参数表明,RIF诱导的酶与底物的亲合力较高,酶促反应的强度较大。
-
关键词
恩诺沙星
草鱼肝细胞
酶动力学
高效液相色谱
脱乙基
-
Keywords
enrofloxacin, grass carp hepatocyte, enzymatics, HPLC, deethylation
-
分类号
TQ246.31
[化学工程—有机化工]
-
-
题名草鱼肝细胞中CYP2E1活性的诱导研究
被引量：2
- 3
-
-
作者
王翔凌
杨先乐
张宁
喻文娟
胡鲲
-
机构
上海水产大学农业部渔业动植物病原库
-
出处
《水生生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第4期469-474,共6页
-
基金
国家自然科学基金(30371109)
上海市教委E-研究院建设项目(E03009)
上海市重点学科建设项目(Y1101)资助
-
文摘
CYP2E1为代谢大部分药物及环境中毒物的关键酶。以草鱼肝细胞(Ctenopharyngodon idellushepatocyte)为反应体系,选取氯唑沙宗(CZX)为底物,采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法测定其产物6-OH-氯唑沙宗(HCZX)的量,Lowry法测定肝细胞中蛋白的浓度从而反映CYP2E1活性,并采用该酶特异性诱导剂乙醇对其进行诱导,观察其酶活变化及CZX在细胞中代谢情况。结果表明,CZX在草鱼肝细胞中的基础代谢较低,经过对CYP2E1诱导条件的优化及筛选,得到最佳诱导剂剂量为4μg/mL、诱导时间为24h、底物浓度为50μg/mL并且孵育时间为1h时,其酶活达到最高,约为0.47μg/min.mg。对照组和诱导组的草鱼肝细胞中CZX的消除半衰期(t1/2)分别为202.10h和28.75h,差异极显著,表明乙醇诱导的CYP2E1能够加快底物的代谢。酶促反应动力学参数表明乙醇诱导的CYP2E1与底物的亲和力较高,酶促反应强度较大。该结果能够为CYP2E1代谢的药物及环境毒物的研究提供理论依据。
-
关键词
反相高效液相色谱法
草鱼肝细胞
CYP2E1
氯唑沙宗
诱导
-
Keywords
RP-HPLC
Ctenopharyngodon idellus hepatocyte
CYP2E1
Chlorzoxazone
Induction
-
分类号
Q55
[生物学—生物化学]
-
-
题名草鱼肝细胞中细胞色素P450 3A的酶促动力学
被引量：1
- 4
-
-
作者
李聃
杨先乐
张书俊
胡鲲
林茂
邱军强
-
机构
上海海洋大学水产与生命学院
中国科学院上海药物研究所
上海高校水产养殖学E-研究院
集美大学渔业学院
-
出处
《高技术通讯》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第8期863-867,共5页
-
基金
国家自然科学基金(30371109)
上海市教育委员会E-研究院建设项目(E03009)
上海市重点学科建设项目(Y1101)资助
-
文摘
用分光光度计法和反相高效液相色谱法研究了草鱼肝细胞系(GCL)中 CYP3A 探针酶类红霉素-N-脱甲基酶(ERND)和6β-睾酮羟化酶(6β-TOH)的酶促反应。药物利福平(RIF)在浓度为40μM时对 GCL 细胞中 CYP3A 活性具有显著诱导作用,而苯巴比妥(PB)和地塞米松(DEX)无显著诱导作用(P<0.05)。在低浓度底物条件下,对照组和40μMRIF 诱导组 GEL 细胞中 ERND 的酶促动力学方程分别为1/V=234.08×1/[S]+2.6544和1/V=85.632×1/[S]+1.9458,6β-TOH 的酶促动力学方程分别为1/V=529.91×1/[S]+14.615和1/V=56.337×1/[S]+2.1017;酶动力学参数表明,RIF 诱导的 CYP3A 亲和力较强,催化效能较高。当底物浓度进一步增高,EYP3A 活性反而降低,致使动力学曲线偏离经典的米氏动力学曲线,该结果表明 GCL 细胞中 CYP3A 存在特殊的负协同效应,这一现象是对鱼类细胞色素 P450(CYP)酶促动力学的有利补充。
-
关键词
细胞色素P450
3A
草鱼肝细胞
酶促动力学
协同效应
利福平
-
Keywords
cytochrome P450 3A, grass carp hepatocytes, enzyme kinetics, cooperativity, rifampicin
-
分类号
Q559.9
[生物学—生物化学]
Q783
-
-
题名硒对亚硝酸钠导致的草鱼肝细胞氧化损伤的保护作用
被引量：2
- 5
-
-
作者
姚朝瑞
马聘
李大鹏
李莉
汤蓉
-
机构
华中农业大学水产学院
-
出处
《水生生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第5期986-994,共9页
-
基金
国家自然科学基金(31502140)
农业农村部现代农业产业技术体系项目(CARS-45-24)资助。
-
文摘
以草鱼(Ctenopharyngodon idella)肝细胞(L8824)为研究对象,设置对照组、亚硝酸钠暴露实验组、亚硒酸钠孵育实验组和亚硒酸钠孵育后亚硝酸钠暴露实验组,探讨亚硒酸钠对不同浓度亚硝酸钠诱导L8824细胞氧化损伤及凋亡的保护作用。结果显示,亚硝酸钠暴露能抑制L8824细胞贴壁,导致细胞凋亡率增加。亚硝酸钠暴露引致L8824细胞的谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性降低;gpx、sod和cat基因表达下调(P<0.05),DNA损伤诱导转录物3(ddit3)和bcl-2相关X蛋白(bax)基因表达上调(P<0.05)。亚硒酸钠(10μmol/L)孵育L8824对细胞形态和凋亡率无显著影响,但GPX、SOD和CAT活性上升,gpx、sod、cat、核因子E2相关因子2(Nrf2)和Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(keap1)基因表达上调(P<0.05)。亚硒酸钠孵育后亚硝酸钠暴露实验组,细胞凋亡率、GPX、SOD和CAT活性较对照组无显著变化,但B淋巴细胞瘤-2(bcl-2)基因表达显著上调(P<0.05)。研究结果表明,给草鱼肝细胞补充硒在一定程度上能缓解亚硝酸钠暴露导致的抗氧化系统失衡,抵抗亚硝酸钠暴露带来的氧化应激,降低细胞凋亡率,硒的预孵育作用能上调Nrf2/Keap1通路中的关键基因和酶,表明硒的保护作用可能是通过介导Nrf2/Keap1信号通路发挥作用。
-
关键词
草鱼肝细胞(L8824)
亚硒酸钠
亚硝酸钠
抗氧化损伤
细胞凋亡
Nrf2/Keap1
-
Keywords
Liver cells(L8824)of grass carp
Sodium selenite
Sodium nitrite
Antioxidant damage
Apoptosis
Nrf2/Keap1
-
分类号
Q256
[生物学—细胞生物学]
-
