茎瘤固氮根瘤菌（Azorhizobium　caulinodans）ORS　571产生的植物激素 被引量：10

1

作者 潘佩平 周鸿宾 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第1期10-13,共4页

茎瘤固氮根瘤菌（Ａｚｏｒｈｉｚｏｂｉｕｍｃａｕｌｉｎｏｄａｎｓ）ＯＲＳ５７１菌株在离体培养条件下，能利用色氨酸合成吲哚乙酸（ＩＡＡ）。随着菌龄的老化，合成的ＩＡＡ量也增加。除ＩＡＡ外，该菌株还产生类ＧＡ物质。本研究未... 茎瘤固氮根瘤菌（Ａｚｏｒｈｉｚｏｂｉｕｍｃａｕｌｉｎｏｄａｎｓ）ＯＲＳ５７１菌株在离体培养条件下，能利用色氨酸合成吲哚乙酸（ＩＡＡ）。随着菌龄的老化，合成的ＩＡＡ量也增加。除ＩＡＡ外，该菌株还产生类ＧＡ物质。本研究未检出细胞分裂素（Ｃｙｔｏｋｉｎｉｎ）类物质。 展开更多

关键词 茎瘤固氮根瘤菌 植物激素 ORS571菌株 根瘤菌

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茎瘤固氮根瘤菌Azorhizobium caulinodans ORS571基因组分泌蛋白的生物信息学分析 被引量：7

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作者 王新新 吴亮 +5 位作者 朱生凤 李广茹 赵林 吕妍 李飞雪 陈宇 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期394-400,共7页

为了获取茎瘤固氮根瘤菌(Azorhizobium caulinodans ORS571)的分泌蛋白,以便更深入地了解该菌的共生固氮作用,本研究采用SignalP、TMHMM、PSORTb、TargetP、LipoP、TatP和SecretomeP软件对该菌全部4717个蛋白序列进行分析预测。结果共... 为了获取茎瘤固氮根瘤菌(Azorhizobium caulinodans ORS571)的分泌蛋白,以便更深入地了解该菌的共生固氮作用,本研究采用SignalP、TMHMM、PSORTb、TargetP、LipoP、TatP和SecretomeP软件对该菌全部4717个蛋白序列进行分析预测。结果共识别了653个分泌蛋白,其中具有分泌型信号肽的蛋白54个,具有RR-motif型信号肽的蛋白1个,具有脂蛋白信号肽的蛋白2个和非经典分泌蛋白596个。该菌含信号肽分泌蛋白仅占全部蛋白的1.2%,低于其它固氮菌。在分泌蛋白中识别了核酸内切酶和核糖核酸酶等6个核酸酶。它们可能参与宿主植物遗传物质的降解,干扰宿主遗传代谢,进一步在宿主植物侵染过程中起到重要作用。此外还识别了超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽S-转移酶等4个抗氧化酶。它们可能参与活性氧的清除以保护固氮酶,是该菌固氮过程的重要参与者。 展开更多

关键词 茎瘤固氮根瘤菌 ORS571 基因组 分泌蛋白 核酸酶 抗氧化酶

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茎瘤固氮根瘤菌趋化系统基因的比较基因组学分析及相关蛋白序列分析（英文） 被引量：3

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作者 姜南 刘卫 +1 位作者 李岩 解志红 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1256-1265,共10页

【目的】茎瘤固氮根瘤菌既可以与毛萼田菁共生固氮,又可以自生或作为内生菌在其他植物体内固氮。由于其具有3种生活状态及固氮能力,其感受外界信号的趋化系统应当更为复杂多样。目前对茎瘤固氮根瘤菌的趋化通路研究很少,因此我们将茎瘤... 【目的】茎瘤固氮根瘤菌既可以与毛萼田菁共生固氮,又可以自生或作为内生菌在其他植物体内固氮。由于其具有3种生活状态及固氮能力,其感受外界信号的趋化系统应当更为复杂多样。目前对茎瘤固氮根瘤菌的趋化通路研究很少,因此我们将茎瘤固氮根瘤菌的趋化系统与其他已有研究的菌株相比较。【方法】基于NCBI蛋白数据库,利用BLAST程序对菌株ORS571及已公布全基因组序列的α变形菌门的其他菌种进行趋化基因簇的比较分析;基于Pfam蛋白数据库,利用HMMER3程序对甲基化受体蛋白序列进行比较分析。【结果】分析结果表明茎瘤固氮根瘤菌中有1条主要的趋化基因簇,其中所编码的甲基化酶Che R为非五肽依赖型;此外,该菌还具有43个甲基化受体蛋白基因,所编码的受体蛋白保守区段均由38个七肽单位组成。【结论】通过比较基因组学的分析可知茎瘤固氮根瘤菌与其他菌属相比趋化系统具有高度同源性,但同时存在自身的独特性,这一结论能够使我们更好的了解茎瘤固氮根瘤菌利用趋化系统适应环境的过程。 展开更多

关键词 趋化性 甲基化受体蛋白 茎瘤固氮根瘤菌

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田菁茎瘤固氮根瘤菌对小麦种子侵染的促生作用及其在根系内的定殖 被引量：10

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作者 刘华伟 孙超 +2 位作者 杨呼 林晓军 郭蔼光 《植物营养与肥料学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期210-217,共8页

选取8个常见小麦品种,通过室内限菌试验筛选出对于田菁茎瘤固氮根瘤菌Azorhizobium caulinodans ORS571(A.caulinodans)侵染响应敏感的品种,研究了浸种侵染、菌液浓度和添加葡萄糖对接菌小麦幼苗生长的影响,并结合荧光显微镜检测绿色荧... 选取8个常见小麦品种,通过室内限菌试验筛选出对于田菁茎瘤固氮根瘤菌Azorhizobium caulinodans ORS571(A.caulinodans)侵染响应敏感的品种,研究了浸种侵染、菌液浓度和添加葡萄糖对接菌小麦幼苗生长的影响,并结合荧光显微镜检测绿色荧光蛋白(GFP)标记A.caulinodans在小麦幼苗根系内的分布与定殖规律。结果表明:小偃22为响应敏感品种;在室内限菌条件下,浸种侵染小偃22幼苗平均根长和平均株高分别较对照增加了17.04%和8.37%;最适菌液浓度为1.0×108个/mL;在菌液中添加1 g/L葡萄糖有助于A.caulinodans浸种侵染和定殖。荧光显微镜检测结果显示,GFP标记A.caulinodans从小麦幼苗根毛和侧根裂隙处进入,定殖于根维管组织等部位。田间试验结果进一步表明A.caulinodans浸种侵染对不同小麦品种均具较明显的促生作用。 展开更多

关键词 田菁茎瘤固氮根瘤菌 小麦 侵染 促生作用

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根瘤菌对茎瘤芥的促生作用研究

5

作者 毛仲玉 常黎洁 王殿东 《安徽农业科学》 CAS 2024年第12期1-6,12,共7页

[目的]研究田菁茎瘤固氮根瘤菌侵染茎瘤芥的情况以及对植株促生作用的影响。[方法]分析根瘤菌对不同品种茎瘤芥的促生作用差异、不同浓度根瘤菌对茎瘤芥栽培品种“涪杂2号”的影响、不同诱导剂对结瘤的影响。[结果]田菁茎瘤固氮根瘤菌... [目的]研究田菁茎瘤固氮根瘤菌侵染茎瘤芥的情况以及对植株促生作用的影响。[方法]分析根瘤菌对不同品种茎瘤芥的促生作用差异、不同浓度根瘤菌对茎瘤芥栽培品种“涪杂2号”的影响、不同诱导剂对结瘤的影响。[结果]田菁茎瘤固氮根瘤菌侵染的6个茎瘤芥品种中,“涪杂2号”根长和株高增加显著,促生作用明显。以不同浓度田菁茎瘤固氮根瘤菌侵染“涪杂2号”幼苗结果表明,在1.0×10^(8)个/mL浓度下,茎瘤芥的根长和株高增加最为显著,同时利用荧光显微镜观察到根瘤菌在“涪杂2号”健康幼苗根部组织的定殖情况,在处理茎瘤芥3 d后,根瘤菌可侵入茎瘤芥根部并定殖,在接菌15 d后,在茎瘤芥根系局部组织发展成很高的群体密度。横向比较3种诱导剂诱导茎瘤芥结瘤效率差异表明,使用2,4-D、氯磺隆、豆科威后,3种诱导剂均可在30 d后于茎瘤芥根部形成类根瘤,60 d后类根瘤数量明显增多,其中,2,4-D结瘤效率最好,高达93%,显著高于其他2种诱导剂结瘤效率。[结论]该研究为更好地利用根瘤菌促进茎瘤芥生长的共生体系打下基础。 展开更多

关键词 茎瘤芥 田菁茎瘤固氮根瘤菌 诱导结瘤 促生作用

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田菁茎瘤固氮根瘤菌对小麦叶组织的促生作用研究 被引量：5

6

作者 陈永超 齐怀廷 +2 位作者 王小晶 李强 刘华伟 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期1383-1390,共8页

利用GFP标记的田菁茎瘤固氮根瘤菌（Azorhizobium caulinodans ORS 571）侵染露白24h的小麦种子,分别在侵染后0、6、12、24、48、72和96h采样,利用实时荧光定量PCR方法检测小麦体内6条与促生作用相关miRNAs（miR156、miR159、miR160、mi... 利用GFP标记的田菁茎瘤固氮根瘤菌（Azorhizobium caulinodans ORS 571）侵染露白24h的小麦种子,分别在侵染后0、6、12、24、48、72和96h采样,利用实时荧光定量PCR方法检测小麦体内6条与促生作用相关miRNAs（miR156、miR159、miR160、miR167、miR168和miR403）的表达模式,检测其中3条miRNAs（miR159、miR167和miR168）的靶基因表达模式;以接菌8d的小麦样品做切片,利用激光共聚焦显微镜检测小麦叶部田菁茎瘤固氮根瘤菌的分布,并测定小麦的生理指标。结果显示：（1）田菁茎瘤固氮根瘤菌侵染小麦后能够在叶片边缘部位定殖。（2）小麦叶片中与促生作用相关的6条miRNAs出现了不同程度变化,在12~24h到达其峰值,随后逐渐下降,其中miR159在峰值时的表达量为初始表达量的2.88倍。（3）3条miRNAs的靶基因表达模式与相应miRNA表达模式相对应,但并不严格。（4）生理指标测定结果显示,接种田菁茎瘤固氮根瘤菌对小麦叶片产生明显的促生作用,其中叶鲜重在96h的变化与对照差异极显著。研究表明,接种的田菁茎瘤固氮根瘤菌能够到达小麦叶组织,对小麦叶片的生长产生明显的促生作用,其中miRNAs在促生过程中发挥重要作用。 展开更多

关键词 小麦 田菁茎瘤固氮根瘤菌 促生作用 MIRNA

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田菁茎瘤固氮根瘤菌对穿心莲植株生长和有效成分含量的影响 被引量：5

7

作者 刘潇晗 杜勤 +1 位作者 石志棉 苏雨苗 《中药材》 CAS 北大核心 2019年第12期2746-2750,共5页

目的:研究田菁茎瘤固氮根瘤菌对不施肥条件下穿心莲植株生长及其有效成分含量的影响。方法:用对数期的田菁茎瘤固氮根瘤菌菌液浇灌萌发结束的穿心莲幼苗,对照组用无菌水代替;第100天,对开花株数进行计数;测量其株高、叶片数、分枝数;采... 目的:研究田菁茎瘤固氮根瘤菌对不施肥条件下穿心莲植株生长及其有效成分含量的影响。方法:用对数期的田菁茎瘤固氮根瘤菌菌液浇灌萌发结束的穿心莲幼苗,对照组用无菌水代替;第100天,对开花株数进行计数;测量其株高、叶片数、分枝数;采收穿心莲植株,测量其根长、地上部分和地下部分的鲜重和干重,每个处理组分为根、茎、叶和地上部分,测定其有效成分(穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯)含量。结果:田菁茎瘤固氮根瘤菌处理后,10~7个/mL浓度处理组对穿心莲植株生长和有效成分积累的促进效果最明显;该处理组开花株数是对照组的3.5倍;株高、分枝数、叶片数分别较对照组提高13.40%、16.75%、57.73%;地上部分鲜重、地上部分干重分别较对照组提高60.80%、67.08%;地下部分鲜重、地下部分干重分别较对照组提高24.40%、14.75%;地上部分穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的总量较对照组提高16.16%。结论:田菁茎瘤固氮根瘤菌处理可促进穿心莲植株的生长并提高穿心莲有效成分含量。 展开更多

关键词 田菁茎瘤固氮根瘤菌 穿心莲 促进生长 有效成分

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田菁茎瘤固氮根瘤菌在小麦体内的定殖及营养元素相关miRNA的表达 被引量：3

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作者 李强 刘华伟 王渭玲 《植物营养与肥料学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期930-937,共8页

【目的】随着化肥过度使用引起的环境问题的出现,无公害农业的推广,以及新型肥料研究领域不断拓宽,微生物肥料,尤其是植物根际促生菌的研究成为近年来的热点。然而微生物肥料的增产机理还基本停留在作物农学性状的表观调查上,没有从分... 【目的】随着化肥过度使用引起的环境问题的出现,无公害农业的推广,以及新型肥料研究领域不断拓宽,微生物肥料,尤其是植物根际促生菌的研究成为近年来的热点。然而微生物肥料的增产机理还基本停留在作物农学性状的表观调查上,没有从分子水平进行研究。因此,本文用田菁茎瘤固氮根瘤菌(Azorhizobium caulinodans ORS571)侵染小麦,探索GFP-A.caulinodans在小麦幼苗组织中的分布与定殖规律以及营养元素相关miRNAs在小麦与A.caulinodans互作中的作用机制。【方法】使用A.caulinodans侵染小麦种子(品种为小偃22),将接菌6 d后的小麦幼苗的根和接菌12 d后的叶制作玻片,利用激光共聚焦显微镜对样品进行逐层扫描,检测GFP-A.caulinodans在幼苗不同组织中的分布与定殖情况。同时,采集接菌后0 h、6 h、12 h、24 h、48 h、72 h、96 h的小麦幼根取样,用Trizol法提取总RNA。利用试剂盒进行加尾和反转录反应,将样品总RNA中的miRNA合成为cDNA,使用β-tubulin作为内参基因,进行实时定量PCR反应,使用2-ΔΔCT方法计算相对表达量。利用psRNATarget在线软件,采用默认参数,对miRNA的靶基因进行预测。【结果】1)激光共聚焦结果显示,GFP-A.caulinodans可定殖于根的表皮细胞、细胞间隙、根尖破损处和根毛,在根维管组织和叶片气孔部位,也发现有GFP-A.caulinodans存在。2)实时定量PCR分析结果表明,6条与营养元素代谢有关的miRNA表达发生变化,其中miR164、miR167和miR827相对表达量呈现出先上调后下调的趋势,miR169和miR398相对表达量也基本呈现出这一趋势。miR164、miR167、miR169和miR398的相对表达量在接菌12 h时上调至最高点,分别为对照的4.13、2.84、2.46和3.99倍;miR827相对表达量在接菌24 h时达到最高点,为对照的2.17倍。miR399相对表达量呈现出先下调后上调的趋势,在接菌24 h时降至最低点,为对照的0.21倍。3)通过靶基因预测,6条m 展开更多

关键词 田菁茎瘤固氮根瘤菌 小麦 定殖 营养元素 MIRNA

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茎瘤固氮根瘤菌ORS571鞭毛马达基因fliN与fliM的功能分析 被引量：2

9

作者 沈日敏 刘卫 +2 位作者 孙雨 李润植 解志红 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期882-892,共11页

【目的】考察茎瘤固氮根瘤菌ORS571中鞭毛马达蛋白FliN、FliM的编码基因分别缺失的突变体表型,初步探究其功能机理。【方法】本研究采用同源重组和三亲本接合转移的方法构建突变体,测定野生型及突变株的生长曲线、趋化性、胞外多糖的分... 【目的】考察茎瘤固氮根瘤菌ORS571中鞭毛马达蛋白FliN、FliM的编码基因分别缺失的突变体表型,初步探究其功能机理。【方法】本研究采用同源重组和三亲本接合转移的方法构建突变体,测定野生型及突变株的生长曲线、趋化性、胞外多糖的分泌、生物膜的形成及细胞絮凝等表型。【结果】三种菌株的生长速率基本无差,与野生型菌株相比突变株鞭毛结构丧失,趋化能力、分泌的胞外多糖和生物膜形成能力均下降,但相同时间内细胞絮凝程度比野生型明显。【结论】实验表明,鞭毛基因fliN、fliM对茎瘤固氮根瘤菌ORS571鞭毛的形成、趋化运动、胞外多糖的分泌、生物膜的形成及细胞絮凝能力等均有调控作用。 展开更多

关键词 茎瘤固氮根瘤菌ORS571 鞭毛 fliN FLIM 胞外多糖 生物膜 絮凝

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茎瘤固氮根瘤菌甲基化受体蛋白Tlp1的功能 被引量：1

10

作者 杨金保 刘卫 +5 位作者 姜南 吴海龙 李岩 李润植 张红梅 解志红 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期648-654,共7页

【目的】考察茎瘤固氮根瘤菌中趋化基因簇上游的受体蛋白Tlp1编码基因的突变表型,初步探究其功能机理。【方法】利用同源重组和三亲本接合转移的方法构建突变株,在TY培养基中测定生长情况,半固体平板法观察趋化圈,刚果红固体培养基观察... 【目的】考察茎瘤固氮根瘤菌中趋化基因簇上游的受体蛋白Tlp1编码基因的突变表型,初步探究其功能机理。【方法】利用同源重组和三亲本接合转移的方法构建突变株,在TY培养基中测定生长情况,半固体平板法观察趋化圈,刚果红固体培养基观察胞外多糖和次生代谢产物的分泌,乙炔还原法测定菌株的固氮酶活性。【结果】与野生型菌株相比,tlp1突变株的生长速率没有影响。在以甘油为碳源的L3半固体平板上突变株的趋化圈变小,其回补菌株能部分回补趋化能力。突变株的胞外多糖分泌与野生型没有区别,但其次生代谢产物黑色素出现的时间比野生型稍早。在固氮酶活性测定中,发现突变株酶活性明显比野生型降低,回补菌株能够部分回补。【结论】茎瘤固氮根瘤菌Tlp1蛋白对甘油表现出一定的趋化能力,并且影响细菌的次生代谢产物和固氮能力。 展开更多

关键词 茎瘤固氮根瘤菌ORS571 趋化 黑色素 固氮酶活性

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茎瘤固氮根瘤菌ORS571中motA基因的功能分析 被引量：1

11

作者 孙丽 王丹丹 +3 位作者 殷志秋 油勇强 刘润进 解志红 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期4048-4058,共11页

【目的】MotA是细菌的鞭毛马达蛋白,是跨膜质子通道的重要组成结构之一,在调控鞭毛运动中具有至关重要的作用。本研究探究了Azorhizobium caulinodans ORS571中鞭毛马达基因motA对菌株表型和植物互作的影响。【方法】通过同源重组原理... 【目的】MotA是细菌的鞭毛马达蛋白,是跨膜质子通道的重要组成结构之一,在调控鞭毛运动中具有至关重要的作用。本研究探究了Azorhizobium caulinodans ORS571中鞭毛马达基因motA对菌株表型和植物互作的影响。【方法】通过同源重组原理和三亲接合转移方法构建突变菌株ΔmotA,测定野生型与突变体在菌体生长、运动、固氮、胞外多糖合成、生物膜形成及根系定殖能力的差异。【结果】与野生型相比,突变体菌体生长没有明显差异,但其运动能力完全丧失,固氮、胞外多糖合成、生物膜形成及根系定殖能力减弱。【结论】MotA鞭毛马达蛋白对A.caulinodans ORS571的运动、固氮、胞外多糖合成、生物膜形成及根系定殖能力均有调控作用。 展开更多

关键词 茎瘤固氮根瘤菌ORS571 鞭毛马达蛋白 motA

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茎瘤固氮根瘤菌ORS571 GGDEF和EAL结构域蛋白的预测及功能研究（英文）

12

作者 孙雨 解志红 +1 位作者 刘卫 郭洪恩 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期2012-2012,2000-2011,共2页

【目的】环二鸟苷酸c-di-GMP是细菌中广泛存在的第二信使,能够调控多种细胞功能。c-di-GMP的合成与水解分别由含有GGDEF结构域和EAL结构域的蛋白催化。本研究针对茎瘤固氮根瘤菌ORS571的GGDEF和EAL结构域相关蛋白进行基因组学分析,并对... 【目的】环二鸟苷酸c-di-GMP是细菌中广泛存在的第二信使,能够调控多种细胞功能。c-di-GMP的合成与水解分别由含有GGDEF结构域和EAL结构域的蛋白催化。本研究针对茎瘤固氮根瘤菌ORS571的GGDEF和EAL结构域相关蛋白进行基因组学分析,并对三个同时含有GGDEF和EAL结构域的蛋白(AZC3085、AZC3226和AZC4658)进行功能研究。【方法】利用SMART数据库对含有GGDEF和EAL结构域的蛋白进行结构域预测。利用CLUSTALW程序对蛋白序列进行比较分析。通过同源重组的方法构建突变株,并对突变株的细胞运动能力、胞外多糖合成、生物膜形成及与豆科宿主的结瘤等表型进行测定。【结果】茎瘤固氮根瘤菌ORS571中一共存在37个GGDEF和EAL结构域蛋白。突变株?4658的运动能力较野生型有下降,但是其胞外多糖合成能力、生物膜形成能力和竞争性结瘤能力较野生型有提高。此外,实验结果表明突变株?4658的胞内c-di-GMP水平高于野生型。突变株?3085和?3226的各种表型与野生型相比没有明显差异。【结论】茎瘤固氮根瘤菌ORS571编码如此大数量的GGDEF和EAL结构域蛋白,表明c-di-GMP可能在其信号转导过程中起到非常重要的作用。同时具有GGDEF和EAL结构域的蛋白AZC4658对茎瘤固氮根瘤菌ORS571的运动能力、胞外多糖合成、生物膜形成及与宿主的结瘤起到一定的调节作用。 展开更多

关键词 茎瘤固氮根瘤菌ORS571 环二鸟苷酸 GGDEF/EAL结构域

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茎瘤固氮根瘤菌环二鸟苷酸代谢相关基因的功能鉴定

13

作者 杨学智 沈日敏 +2 位作者 孙雨 李润植 解志红 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1500-1511,共12页

[目的]考察茎瘤固氮根瘤菌ORS571中c-di-GMP合成酶AZC-2412的编码基因缺失的突变表型,初步探究其功能机理。[方法]本实验构建基于cre-loxp重组酶系统的根瘤菌基因敲除系统,以及采用三亲接合技术构建突变株。测定野生型和突变株的生长速... [目的]考察茎瘤固氮根瘤菌ORS571中c-di-GMP合成酶AZC-2412的编码基因缺失的突变表型,初步探究其功能机理。[方法]本实验构建基于cre-loxp重组酶系统的根瘤菌基因敲除系统,以及采用三亲接合技术构建突变株。测定野生型和突变株的生长速率、趋化能力、胞外多糖产量、生物膜形成等表型。[结果]突变株与野生型生长速率几乎相同。与野生型相比突变株由于细胞内c-di-GMP水平降低,胞外多糖、生物膜产量等均有所下降。[结论]实验表明,环二鸟苷酸合成酶AZC-2412缺失,使得c-di-GMP水平降低,对胞外多糖生成、细菌的运动能力、生物膜的形成、细胞絮凝、与植物的互作等均有调控作用。 展开更多

关键词 茎瘤固氮根瘤菌ORS571 环化酶DGC 环二鸟苷酸c-di-GMP 胞外多糖 生物膜

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茎瘤固氮根瘤菌ORS571受体TlpA1对琥珀酸的感应机理

14

作者 隋傅 刘晓琳 解志红 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期77-84,共8页

趋化作用在根瘤菌与宿主建立共生关系的起始阶段起着至关重要的作用。TlpA1是茎瘤固氮根瘤菌ORS571重要的跨膜趋化受体,但其感应机理尚未清楚。考察茎瘤固氮根瘤菌ORS571跨膜趋化受体TlpA1对趋化物的感应机理及生物学功能。通过平末端... 趋化作用在根瘤菌与宿主建立共生关系的起始阶段起着至关重要的作用。TlpA1是茎瘤固氮根瘤菌ORS571重要的跨膜趋化受体,但其感应机理尚未清楚。考察茎瘤固氮根瘤菌ORS571跨膜趋化受体TlpA1对趋化物的感应机理及生物学功能。通过平末端连接的方法构建N端表达菌株进行原核表达蛋白及纯化,利用等温滴定量热法(isothermal titration calorimetry)检测蛋白与趋化物的相互作用,测定野生型与突变株的生物膜及絮凝等表型。结果显示,跨膜趋化受体TlpA1通过胞外部分第29~183位氨基酸与琥珀酸结合。固氮条件下,突变株ΔTlpA1生物膜形成量相较于野生型下降约38%。絮凝量与野生型无显著性差异。跨膜趋化受体TlpA1通过感应琥珀酸调控茎瘤固氮根瘤菌ORS571生物膜的形成,对细胞絮凝无调控作用。 展开更多

关键词 茎瘤固氮根瘤菌ORS571 TlpA1 原核表达 ITC 生物膜 絮凝

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