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题名盐芥miRNAs耐盐表达研究
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作者
刘冉
周立敬
周宜君
高飞
马亭亭
隋欣
刘楠
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机构
中央民族大学生命与环境科学学院
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出处
《西北植物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第4期665-669,共5页
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基金
国家自然科学基金(31070361)
中央高校基本科研业务费专项(0910KYZY43
+2 种基金
1112KYQN31)
中央民族大学"985工程"项目(MUC98504-14)
国家民委科研项目(10ZY01)
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文摘
以盐生植物盐芥为实验材料,选择经过Solexa测序筛选的盐芥tsa-miR172a和tsa-miR398b为目标基因,采用茎环的反转录PCR(stem-loop RT-PCR)方法分析其在盐芥根中的耐盐表达模式,以探讨盐芥miRNAs的stem-loop RT-PCR验证体系。结果显示,经过300mmol.L-1 NaCl处理72h后,与对照相比,盐芥根中的tsa-miR172a上调表达,tsa-miR398b下调表达。用stem-loop RT-PCR方法进行tsa-miR172a和tsa-miR398b扩增,对其电泳图进行光密度分析结果显示,盐胁迫处理与对照的比值分别为1.8和0.55,Solexa测序结果分别为2.00和0.44,说明两种方法所得结果基本一致。表明该研究建立了盐芥miRNAs的stem-loop RT-PCR验证体系:每个miRNA设计3个引物(miRNA stem-loop引物、miRNA正向引物和miRNA通用反向引物);扩增条件为94℃2min,94℃15s,55℃45s,23个循环。
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关键词
盐芥
MIRNAS
茎环的反转录pcr
盐胁迫
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Keywords
Thellungiella
microRNAs
stem-loop RT-pcr
salt stress
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分类号
Q789
[生物学—分子生物学]
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