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东北林蛙基因组DNA不同提取方法的比较 被引量：3
1
作者 陶久臣 于淼 +3 位作者 邢波建 李倩 刘鹏 赵文阁 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第17期179-181,共3页
为了研究不同方法提取东北林蛙基因组DNA的纯度差异,试验以东北林蛙为研究对象,采用高盐浓度抽提法、苯酚/氯仿抽提法、十六烷基三甲基溴化铵法（CTAB法）、十二烷基磺酸钠法（SDS法）提取基因组DNA,进行PCR验证。结果表明：4种提取方... 为了研究不同方法提取东北林蛙基因组DNA的纯度差异,试验以东北林蛙为研究对象,采用高盐浓度抽提法、苯酚/氯仿抽提法、十六烷基三甲基溴化铵法（CTAB法）、十二烷基磺酸钠法（SDS法）提取基因组DNA,进行PCR验证。结果表明：4种提取方法均能获得完整的基因组DNA,可以用于PCR扩增。高盐浓度抽提法提取的DNA纯度和制得率最高,成本低,安全系数高,操作简单,能够满足提取大量DNA的需求;其他3种方法需使用有毒、有害的有机试剂且时间较长。 展开更多
关键词 东北林蛙 基因组DNA 高盐浓度抽提法 苯酚/氯仿抽提法 十六烷基三甲基溴化铵法 十二烷基磺酸钠法
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甜菜DNA提取新方法初探 被引量：2
2
作者 张福顺 王凤山 +2 位作者 李红侠 郭爱华 张文彬 《中国糖料》 2001年第1期18-19,共2页
本文报道了一个全新的甜菜DNA提取方法，该方法较以往的甜菜DNA提取方法有所不同。它是利用鲜嫩的花蕾为试材，以略有改进的苯酚／氯仿抽提法提取DNA 。利用冷冻研磨或者用玻璃棒直接捣碎试材，来提取DNA。该方法简单，易操作，DNA纯度... 本文报道了一个全新的甜菜DNA提取方法，该方法较以往的甜菜DNA提取方法有所不同。它是利用鲜嫩的花蕾为试材，以略有改进的苯酚／氯仿抽提法提取DNA 。利用冷冻研磨或者用玻璃棒直接捣碎试材，来提取DNA。该方法简单，易操作，DNA纯度较高，可以直接用于RAPD分析，实验效果较好。 展开更多
关键词 甜菜 嫩花蕾 DNA 提取方法 苯酚/氯仿抽提法 遗传多样性
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苯酚/氯仿抽提法提取牛血与鸡血DNA部分条件的比较研究 被引量：1
3
作者 母童 陈佳萍 +6 位作者 赵平 顾亚玲 冯小芳 陈亚飞 刘丽元 蒋秋斐 张娟 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第15期214-216,共3页
为了探讨苯酚/氯仿抽提法中加入血液和红细胞裂解液（PBS）的量对DNA提取效果的影响以及找到针对牛血和鸡血最合适的DNA提取条件,试验以安格斯牛和静原鸡为研究对象,采用苯酚/氯仿抽提法提取血液基因组DNA。结果表明：在试验第1步加入20... 为了探讨苯酚/氯仿抽提法中加入血液和红细胞裂解液（PBS）的量对DNA提取效果的影响以及找到针对牛血和鸡血最合适的DNA提取条件,试验以安格斯牛和静原鸡为研究对象,采用苯酚/氯仿抽提法提取血液基因组DNA。结果表明：在试验第1步加入200μL鸡血1次,用1 500μL PBS重复裂解2次,可以得到高质量鸡的基因组DNA。当加入鸡血的量过大时,提取的DNA浓度过高且不纯,蛋白质等外源核酸的污染较严重。在试验第1步加入500μL牛血1次,用1 500μL PBS裂解,重复2次,可以得到高质量牛的基因组DNA。苯酚/氯仿抽提法可以节省时间,还可以避免血液的浪费。 展开更多
关键词 牛 鸡 苯酚/氯仿抽提法 条件 DNA
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饱和苯酚-氯仿抽提法与Chelex-100树脂法提取DNA在研究犬STR基因座多态性中的应用比较 被引量：4
4
作者 王海生 张文平 +5 位作者 王祥 李孟华 康远方 刘榜 李奎 陈家琳 《湖北农业科学》 北大核心 2002年第6期107-110,共4页
在研究犬STR基因座多态性中,比较使用了饱和苯酚-氯仿抽提法和Chelex-100树脂法,两种方法提取的DNA在扩增后的检测结果均能准确地反映实验结果。尽管从平均峰面积和平均峰高值等指标上,利用Chelex-100树脂法提取的DNA质量和扩增后的检... 在研究犬STR基因座多态性中,比较使用了饱和苯酚-氯仿抽提法和Chelex-100树脂法,两种方法提取的DNA在扩增后的检测结果均能准确地反映实验结果。尽管从平均峰面积和平均峰高值等指标上,利用Chelex-100树脂法提取的DNA质量和扩增后的检测效果较饱和苯酚-氯仿抽提法差,但Chelex-100树脂提取法更为简单快捷,适合在建立警犬STR基因座等位基因数据库中和犬亲缘关系鉴定中广泛使用。 展开更多
关键词 饱和苯酚-氯仿抽提法 Chelex-100树脂法 提取 DNA 犬 STR基因座多态性 应用 比较
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以植物miR-2911为外参检测循环miRNA的荧光定量PCR方法评价 被引量：1
5
作者 张乃键 伍华东 +1 位作者 刘秋红 赵亚萍 《临床血液学杂志（输血与检验）》 CAS 2019年第3期456-460,共5页
目的:探讨和优化循环miRNA检测方法,建立稳定可靠的用于研究血浆miRNA的检测平台。方法:提取4例健康体检者的血浆,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)对miR-21进行检测。比较苯酚氯仿抽提法和试剂盒法的提取效率;针对miR-2911成熟体,建立标... 目的:探讨和优化循环miRNA检测方法,建立稳定可靠的用于研究血浆miRNA的检测平台。方法:提取4例健康体检者的血浆,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)对miR-21进行检测。比较苯酚氯仿抽提法和试剂盒法的提取效率;针对miR-2911成熟体,建立标准曲线;通过qRT-PCR对外参照miR-2911及血浆miR-21进行检测,评估循环检测方法的重复性。结果:苯酚氯仿抽提法循环miRNA的提取效率是试剂盒法的8倍;miR-2911拷贝数log值与循环阈值(Ct)的标准曲线方程为Y=-3.242X+35.28,R^2=0.991,呈良好的线性关系。血浆miR-21批内批间重复性实验的标准差(SD)在0.144～0.793、变异系数(CV)在0.52%～2.76%,说明该方法有较好的重复性。以miR-2911作为外参照,同一血浆标本miR-21的4次检测结果中ΔCt值的SD为0.1445,CV为1.225%,提示miR-2911可作为血浆miRNAs qRT-PCR检测的稳定外参。结论:利用外源miR-2911能有效监测qRT-PCR检测方法的稳定性,为循环miRNA的研究提供了较好的实验基础。 展开更多
关键词 循环miRNA 苯酚氯仿抽提法 QRT-PCR 外参miR-2911
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