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多重荧光PCR同时检测转基因成分35S和Nos方法的建立
被引量：
33
1
作者
刘光明
李庆阁
+4 位作者
王群力
梁基选
陈伟铃
栾国彦
苏文金
《厦门大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第4期493-497,共5页
根据商品化转基因作物中常用的花椰菜花叶病毒启动子 (CaMV 35S)和根癌农杆菌终止子 (Nos)的序列特点 ,设计并合成了两对引物和相对应的荧光双链探针 ,建立一种应用荧光双链探针的多重荧光PCR同时检测转基因成分 35S启动子和Nos终止子...
根据商品化转基因作物中常用的花椰菜花叶病毒启动子 (CaMV 35S)和根癌农杆菌终止子 (Nos)的序列特点 ,设计并合成了两对引物和相对应的荧光双链探针 ,建立一种应用荧光双链探针的多重荧光PCR同时检测转基因成分 35S启动子和Nos终止子的方法 .并利用该方法对马铃薯、大豆、玉米、甜椒、番茄等 11份实物样品进行了检测 ,其中有 5份样品结果阳性 .结果表明所建立的多重荧光PCR方法能同时检测出 35S和Nos双组分 ,较常规PCR技术更为简便、快速、准确 ,有很好的应用前景 .
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关键词
多重荧光PCR
35S
NOS
转基因作物
荧光双链探针
花椰菜
花叶病毒
启动子
极癌农杆菌终止
子
检测方法
下载PDF
职称材料
荧光PCR同时检测转基因成分35S和NOS
被引量：
10
2
作者
刘光明
王群力
+3 位作者
陈伟玲
栾国彦
苏文金
梁基选
《检验检疫科学》
2001年第6期6-8,共3页
根据转基因作物中常用的花椰菜花叶病毒启动子 (CaMV 35S)和根癌农杆菌终止子 (NOS)基因序列 ,设计并合成了两对不同的引物和相对应的两种荧光双链探针 ,建立一种应用荧光双链探针的实时PCR定量检测转基因成分 35S启动子和NOS终止子的...
根据转基因作物中常用的花椰菜花叶病毒启动子 (CaMV 35S)和根癌农杆菌终止子 (NOS)基因序列 ,设计并合成了两对不同的引物和相对应的两种荧光双链探针 ,建立一种应用荧光双链探针的实时PCR定量检测转基因成分 35S启动子和NOS终止子的方法。并利用该方法对马铃薯、大豆、玉米、甜椒、番茄等实物样品进行了检测 ,发现 11份样品中有 5份检出 35S和NOS基因成分 ,其余 6份样品结果为阴性。结果表明本文建立的荧光PCR方法能有效检测出 35S和NOS两种转基因成分 ,较常规PCR技术更为简便、快速、准确 ,有很好的应用前景和研究价值。
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关键词
荧光PCR
检测
35S
NOS
根癌农杆菌终止
子
花椰菜
花叶病毒
启动子
聚合酶链反应
转基因作物
下载PDF
职称材料
高灵敏度电化学发光PCR方法检测花椰菜花叶病毒35 S启动子
被引量：
1
3
作者
朱德斌
邢达
刘晋峰
《激光生物学报》
CAS
CSCD
2007年第4期485-489,共5页
大多数转基因植物中使用花椰菜花叶病毒(cauliflower mosaic virus,CaMV)35 S作为启动子,因此可通过检测该启动子来判断植物样品中是否含有转基因成分。实验将高灵敏度电化学发光PCR方法用于检测转基因烟草中的CaMV35 S启动子,将该启动...
大多数转基因植物中使用花椰菜花叶病毒(cauliflower mosaic virus,CaMV)35 S作为启动子,因此可通过检测该启动子来判断植物样品中是否含有转基因成分。实验将高灵敏度电化学发光PCR方法用于检测转基因烟草中的CaMV35 S启动子,将该启动子的PCR产物与生物素标记的探针杂交,可以起到特异性筛选产物的作用;与发光标记物——三联吡啶钌标记的探针杂交,从而实现电化学发光检测。两种探针同时与待测样品的PCR产物进行杂交,进一步对样品进行特异性筛选,从而提高了检测的准确性,避免了假阳性结果的产生。实验结果表明:该法可以准确的区分待测样品中是否含有35 S启动子,从而区别转基因烟草和非转基因烟草。电化学发光PCR方法灵敏度高,可靠性强,操作简便,结果准确,有望成为一种高效的转基因植物检测方法。
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关键词
电化学发光-PCR
花椰菜
花叶病毒
35S
启动子
探针杂交
下载PDF
职称材料
电化学DNA传感器制备及用于花椰菜花叶病毒35S启动子快速检测
4
作者
刘亚倩
刘克勤
+2 位作者
高娇娜
操小栋
叶永康
《安徽农业科学》
CAS
2018年第17期183-186,共4页
[目的]构建一种新型DNA电化学传感器,并用于花椰菜花叶病毒35S启动子片段检测。[方法]通过使用氨基化多壁碳纳米管对玻碳电极进行修饰,利用氨基化多壁碳纳米管对硫堇-金纳米粒子-DNA纳米复合物的吸附固定得到用于识别目标DNA的捕获界面...
[目的]构建一种新型DNA电化学传感器,并用于花椰菜花叶病毒35S启动子片段检测。[方法]通过使用氨基化多壁碳纳米管对玻碳电极进行修饰,利用氨基化多壁碳纳米管对硫堇-金纳米粒子-DNA纳米复合物的吸附固定得到用于识别目标DNA的捕获界面,并将亲和素-辣根过氧化物酶修饰的金纳米粒子作为结构末端的信号分子,完成夹心结构传感器组装。试验采用循环伏安法对辣根过氧化物酶催化过氧化氢得到的还原电流进行测试。[结果]该传感器可实现对目标DNA定量检测,线性范围为1×10-18~1×10^(-11)mol/L,检测限低至6.95×10^(-20)mol/L,可特异性识别错配序列,并且表现出良好的重现性和稳定性。[结论]该传感器在转基因食品的检测方面有良好的应用前景。
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关键词
电化学DNA生物传感
花椰菜
花叶病毒
35S
启动子
多壁碳纳米管
硫堇
辣根过氧化物酶
下载PDF
职称材料
题名
多重荧光PCR同时检测转基因成分35S和Nos方法的建立
被引量：
33
1
作者
刘光明
李庆阁
王群力
梁基选
陈伟铃
栾国彦
苏文金
机构
厦门大学生命科学学院
厦门出入境检验检疫局
厦门出入境检验检疫局
出处
《厦门大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第4期493-497,共5页
基金
厦门市科技计划资助项目 (35 0 2Z2 0 0 110 9)
文摘
根据商品化转基因作物中常用的花椰菜花叶病毒启动子 (CaMV 35S)和根癌农杆菌终止子 (Nos)的序列特点 ,设计并合成了两对引物和相对应的荧光双链探针 ,建立一种应用荧光双链探针的多重荧光PCR同时检测转基因成分 35S启动子和Nos终止子的方法 .并利用该方法对马铃薯、大豆、玉米、甜椒、番茄等 11份实物样品进行了检测 ,其中有 5份样品结果阳性 .结果表明所建立的多重荧光PCR方法能同时检测出 35S和Nos双组分 ,较常规PCR技术更为简便、快速、准确 ,有很好的应用前景 .
关键词
多重荧光PCR
35S
NOS
转基因作物
荧光双链探针
花椰菜
花叶病毒
启动子
极癌农杆菌终止
子
检测方法
Keywords
genetically modified food
fluorophore double chain probe
fluorescence PCR
multiplex PCR
分类号
Q943.2 [生物学—植物学]
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职称材料
题名
荧光PCR同时检测转基因成分35S和NOS
被引量：
10
2
作者
刘光明
王群力
陈伟玲
栾国彦
苏文金
梁基选
机构
厦门检验检疫局
厦门大学生命科学学院
出处
《检验检疫科学》
2001年第6期6-8,共3页
文摘
根据转基因作物中常用的花椰菜花叶病毒启动子 (CaMV 35S)和根癌农杆菌终止子 (NOS)基因序列 ,设计并合成了两对不同的引物和相对应的两种荧光双链探针 ,建立一种应用荧光双链探针的实时PCR定量检测转基因成分 35S启动子和NOS终止子的方法。并利用该方法对马铃薯、大豆、玉米、甜椒、番茄等实物样品进行了检测 ,发现 11份样品中有 5份检出 35S和NOS基因成分 ,其余 6份样品结果为阴性。结果表明本文建立的荧光PCR方法能有效检测出 35S和NOS两种转基因成分 ,较常规PCR技术更为简便、快速、准确 ,有很好的应用前景和研究价值。
关键词
荧光PCR
检测
35S
NOS
根癌农杆菌终止
子
花椰菜
花叶病毒
启动子
聚合酶链反应
转基因作物
分类号
R155.5 [医药卫生—营养与食品卫生学]
下载PDF
职称材料
题名
高灵敏度电化学发光PCR方法检测花椰菜花叶病毒35 S启动子
被引量：
1
3
作者
朱德斌
邢达
刘晋峰
机构
华南师范大学激光生命科学研究所暨激光生命科学教育部重点实验室
出处
《激光生物学报》
CAS
CSCD
2007年第4期485-489,共5页
基金
国家自然科学基金项目(30600128
30670507)
广东省自然科学基金项目(015012)
文摘
大多数转基因植物中使用花椰菜花叶病毒(cauliflower mosaic virus,CaMV)35 S作为启动子,因此可通过检测该启动子来判断植物样品中是否含有转基因成分。实验将高灵敏度电化学发光PCR方法用于检测转基因烟草中的CaMV35 S启动子,将该启动子的PCR产物与生物素标记的探针杂交,可以起到特异性筛选产物的作用;与发光标记物——三联吡啶钌标记的探针杂交,从而实现电化学发光检测。两种探针同时与待测样品的PCR产物进行杂交,进一步对样品进行特异性筛选,从而提高了检测的准确性,避免了假阳性结果的产生。实验结果表明:该法可以准确的区分待测样品中是否含有35 S启动子,从而区别转基因烟草和非转基因烟草。电化学发光PCR方法灵敏度高,可靠性强,操作简便,结果准确,有望成为一种高效的转基因植物检测方法。
关键词
电化学发光-PCR
花椰菜
花叶病毒
35S
启动子
探针杂交
Keywords
electrochemiluminescence-PCR
cauliflower mosaic virus 35 S promoter
hybridization
分类号
Q503 [生物学—生物化学]
Q78
下载PDF
职称材料
题名
电化学DNA传感器制备及用于花椰菜花叶病毒35S启动子快速检测
4
作者
刘亚倩
刘克勤
高娇娜
操小栋
叶永康
机构
合肥工业大学食品科学与工程学院
出处
《安徽农业科学》
CAS
2018年第17期183-186,共4页
基金
国家自然科学基金项目(31772099)
安徽省自然科学基金项目(1508085MC47)
文摘
[目的]构建一种新型DNA电化学传感器,并用于花椰菜花叶病毒35S启动子片段检测。[方法]通过使用氨基化多壁碳纳米管对玻碳电极进行修饰,利用氨基化多壁碳纳米管对硫堇-金纳米粒子-DNA纳米复合物的吸附固定得到用于识别目标DNA的捕获界面,并将亲和素-辣根过氧化物酶修饰的金纳米粒子作为结构末端的信号分子,完成夹心结构传感器组装。试验采用循环伏安法对辣根过氧化物酶催化过氧化氢得到的还原电流进行测试。[结果]该传感器可实现对目标DNA定量检测,线性范围为1×10-18~1×10^(-11)mol/L,检测限低至6.95×10^(-20)mol/L,可特异性识别错配序列,并且表现出良好的重现性和稳定性。[结论]该传感器在转基因食品的检测方面有良好的应用前景。
关键词
电化学DNA生物传感
花椰菜
花叶病毒
35S
启动子
多壁碳纳米管
硫堇
辣根过氧化物酶
Keywords
Electrochemical DNA biosensor
Cauliflower Mosaic Virus 35S promoter
Multi-walled carbon nanotubes
Thionine
Horseradishperoxidase
分类号
TS207 [轻工技术与工程—食品科学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
多重荧光PCR同时检测转基因成分35S和Nos方法的建立
刘光明
李庆阁
王群力
梁基选
陈伟铃
栾国彦
苏文金
《厦门大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2002
33
下载PDF
职称材料
2
荧光PCR同时检测转基因成分35S和NOS
刘光明
王群力
陈伟玲
栾国彦
苏文金
梁基选
《检验检疫科学》
2001
10
下载PDF
职称材料
3
高灵敏度电化学发光PCR方法检测花椰菜花叶病毒35 S启动子
朱德斌
邢达
刘晋峰
《激光生物学报》
CAS
CSCD
2007
1
下载PDF
职称材料
4
电化学DNA传感器制备及用于花椰菜花叶病毒35S启动子快速检测
刘亚倩
刘克勤
高娇娜
操小栋
叶永康
《安徽农业科学》
CAS
2018
0
下载PDF
职称材料
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