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Survivin反义寡核苷酸诱导人膀胱移行细胞癌T_(24)细胞凋亡的实验研究 被引量:6
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作者 张轶庠 杨江根 +4 位作者 章道恒 申鹏飞 齐范 陈湘 陈合群 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第13期1955-1960,共6页
目的Survivin是近年来发现的凋亡抑制蛋白家族新成员,在多数恶性肿瘤组织中丰富表达。因此,观察Survivin反义寡核苷酸(ASODN)转染对人膀胱移行细胞癌T24细胞凋亡、增殖、细胞对化疗药物敏感性的影响。方法设计合成针对SurvivnmRNA特异性... 目的Survivin是近年来发现的凋亡抑制蛋白家族新成员,在多数恶性肿瘤组织中丰富表达。因此,观察Survivin反义寡核苷酸(ASODN)转染对人膀胱移行细胞癌T24细胞凋亡、增殖、细胞对化疗药物敏感性的影响。方法设计合成针对SurvivnmRNA特异性的ASODN,透射电镜观察细胞形态变化,流式细胞术检测各组细胞增殖指数(proliferativeindex,PI)和凋亡指数(apoptoticindex,AI),RT-PCR法分析转染后Sur-vivnmRNA及Caspase-3mRNA的变化,WesternBlot法检测各组Survivn蛋白表达情况,荧光分光光度法测定Caspase-3的活性水平;MTT实验测定T24细胞对丝裂霉素(mitomycin,MMC)的敏感性。结果A-SODN转染组透射电镜下观察到凋亡的征象,而各对照组未见凋亡证据;各转染组细胞AI明显高于各对照组,PI明显低于各对照组(P<0.01),且在一定范围内呈量-效关系,各对照组间差异无显著性(P>0.05);各转染组细胞SurvivinmRNA、Survivin的表达较各对照组明显下调(P<0.01),各对照组间差异无显著性(P>0.05);Caspase-3mRNA的表达在各组细胞间差异无显著性(P>0.05);各转染组细胞Caspase-3活化水平较各对照组明显提高(P<0.01),各对照组间差异无显著性(P>0.05);MTT实验显示,转染组MMC半数抑制浓度(IC50)较对照组明显下降,ASODN可提高T24细胞对MMC的敏感性。结论SurvivinASODN转染T24细胞后可特异性封闭Survivin的表达,对Caspase-3mRNA的表达无明显作用,能激活Caspase-3无活性前体,从而诱导T24细胞凋亡,抑制细胞增殖,提高T24细胞对化疗药物MMC的敏感性。 展开更多
关键词 膀胱移行细胞T24细胞 反义寡核苷酸 SURVIVIN 细胞凋亡
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藏花素促膀胱移行细胞癌T24细胞凋亡的研究 被引量:2
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作者 赵培 罗春丽 +2 位作者 胡宏波 吕纯芳 冀慧莹 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第19期1824-1827,共4页
目的研究藏花素诱导膀胱移行细胞癌T24细胞凋亡的作用及分子机制。方法通过MTT比色法分析藏花素对T24细胞增殖的影响;应用光镜观察细胞形态学的改变;Annexin V-FITC/PI荧光双标流式细胞术检测T24细胞周期动力学和凋亡诱导率的影响,RT-PC... 目的研究藏花素诱导膀胱移行细胞癌T24细胞凋亡的作用及分子机制。方法通过MTT比色法分析藏花素对T24细胞增殖的影响;应用光镜观察细胞形态学的改变;Annexin V-FITC/PI荧光双标流式细胞术检测T24细胞周期动力学和凋亡诱导率的影响,RT-PCR和Western blot检测凋亡相关基因Bcl-2、Bax的表达变化。结果藏花素能明显抑制T24细胞的增殖,并可导致其形态学的改变;随藏花素作用时间的延长,G0/G1期细胞比例逐渐增加,S期和G2/M期细胞比例逐渐减少,早期凋亡细胞逐渐增多,同时可以上调Bax和下调Bcl-2的基因表达水平。结论藏花素可明显抑制T24细胞的生长,诱导肿瘤细胞凋亡,可能与Bcl-2和Bax等凋亡调控基因有关。 展开更多
关键词 藏花素 膀胱移行细胞T24细胞 细胞凋亡 BCL-2 BAX
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