激流灌注式生物反应器培养猪瘟活疫苗工艺的研究 被引量：3

1

作者 郑朝朝 柳珊 +3 位作者 邹立宏 刘云涛 刘涛 郁宏伟 《中国动物保健》 2016年第2期62-64,共3页

为建立规模化培养猪瘟活疫苗的生产工艺,本研究利用工作体积为10L的激流灌注式生物反应器培养猪睾丸细胞（swine testis,ST）,接种猪瘟病毒（classical swine fever virus,CSFV）进行培养研究。研究结果显示,培养4 d细胞数可增长5~7倍,... 为建立规模化培养猪瘟活疫苗的生产工艺,本研究利用工作体积为10L的激流灌注式生物反应器培养猪睾丸细胞（swine testis,ST）,接种猪瘟病毒（classical swine fever virus,CSFV）进行培养研究。研究结果显示,培养4 d细胞数可增长5~7倍,接种病毒后15 d可收获毒液6次,收获量至少与200个10 L转瓶单次收获量相当,产品各项检测均合格。本工艺极大地缩短了培养时间,为规模化培养工艺的推广与使用提供了技术参数。 展开更多

关键词 猪瘟 脾毒 细胞毒 激流灌注式生物反应器

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脾毒保存期对猪瘟病毒增殖的影响 被引量：1

2

作者 梁武 郑朝朝 +1 位作者 刘云涛 邹立宏 《养猪》 2015年第5期111-112,共2页

为确定脾毒保存期对猪睾丸细胞(Swine Testis,ST)繁殖猪瘟病毒的影响,选用不同保存期的脾毒接种ST细胞,培养猪瘟病毒,从感染率、产毒时间、病毒液效价、合格收次4个方面进行对比。结果显示,随着脾毒保存期延长,病毒对细胞感染率明显降低... 为确定脾毒保存期对猪睾丸细胞(Swine Testis,ST)繁殖猪瘟病毒的影响,选用不同保存期的脾毒接种ST细胞,培养猪瘟病毒,从感染率、产毒时间、病毒液效价、合格收次4个方面进行对比。结果显示,随着脾毒保存期延长,病毒对细胞感染率明显降低,产毒时间延后,所产病毒液效价下降,合格收次减少。提示保存期对ST细胞产毒有很大影响,在生产中应严格控制脾毒种毒的保存期。 展开更多

关键词 脾毒 猪瘟 保存期 感染率 效价

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脾毒的不同处理方法对细胞生长及产毒影响的比较试验

3

作者 曹纯冰 《畜牧兽医杂志》 1994年第4期21-22,共2页

猪瘟兔化弱毒细胞培养冻干疫苗生产中，要在细胞形成单层后接入脾毒，常规的做法是将新鲜脾毒磨成乳剂，加双抗置４℃两小时抑菌后按一定比例加入。按这一方法生产，常伴有污染，收液毒价不高及翻细卷边脱落等。为了克服这些现象，我们... 猪瘟兔化弱毒细胞培养冻干疫苗生产中，要在细胞形成单层后接入脾毒，常规的做法是将新鲜脾毒磨成乳剂，加双抗置４℃两小时抑菌后按一定比例加入。按这一方法生产，常伴有污染，收液毒价不高及翻细卷边脱落等。为了克服这些现象，我们在脾毒的制备上做了些探索。开始是在常规方法上增加滤过除菌，后来又改成常规抑菌加冻融处理。经过多批试验比较，脾毒的以上三种不同处理方法对减少污染，提高细胞水平及收液毒价均有明显影响。 展开更多

关键词 脾毒 细胞生长 疫苗 常规抑菌 滤过除菌 冻融

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猪瘟牛睾丸细胞苗的优化试验

4

作者 刘艳 《山东畜牧兽医》 2009年第6期7-8,共2页

本实验研究共生产猪瘟兔化弱毒细胞疫苗3批,以传统生产为基础,在原代细胞制备、病毒感染和收获3方面做了改进。试验证明,混合消化法、适当比例的脾毒与细胞毒混合接毒以及新维持液在带毒传代中的应用,能大大提高猪瘟细胞苗半成品的合格率。

关键词 犊牛睾丸细胞 脾毒 细胞毒 带毒传代 新改良维持液

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用细胞毒代替脾毒制造猪瘟细胞苗的试验

5

作者 刘洪斌 吴金 +4 位作者 邬立权 金宏 胡瑛瑛 宋昭 柴华 《畜牧兽医科技信息》 2009年第11期22-23,共2页

采用细胞毒和脾毒分别接种已形成良好单层的犊牛睾丸次代细胞,收获病毒液,用家兔测定病毒含量,结果每毫升病毒含量均可达到50000个家兔感染量。收获的病毒液制备疫苗40批,经质检室检验除一批染菌外,其余全合格。

关键词 猪瘟细胞苗 细胞毒 脾毒

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猪瘟淋脾毒(耐热保护剂)活疫苗的热稳定性研究 被引量：4

6

作者 刘业兵 张万林 +2 位作者 孙晔 王利永 王栋 《中国兽药杂志》 2004年第1期22-24,共3页

通过对 3种不同配方的冻干保护剂和冻干曲线与猪瘟兔化弱毒相溶性的比较研究 ,成功研制了适用于猪瘟淋脾毒活疫苗的耐热保护剂。用这种保护剂生产的该疫苗经 37℃保存1 0d的耐老化试验及在 2～ 8℃保存 1 2个月后仍然符合产品质量标准... 通过对 3种不同配方的冻干保护剂和冻干曲线与猪瘟兔化弱毒相溶性的比较研究 ,成功研制了适用于猪瘟淋脾毒活疫苗的耐热保护剂。用这种保护剂生产的该疫苗经 37℃保存1 0d的耐老化试验及在 2～ 8℃保存 1 2个月后仍然符合产品质量标准的要求。经 4770余头份疫苗的田间试验 ,证明该产品安全、有效 ,且便于运输和使用 ,显示出良好的热稳定性能。 展开更多

关键词 耐热保护剂 猪瘟兔化弱毒疫苗 田间实验 猪瘟淋脾毒活疫苗 产品质量标准

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猪瘟淋脾毒耐热保护剂活疫苗的中试生产及区域试验 被引量：1

7

作者 刘业兵 孙晔 +2 位作者 张万林 王利永 王栋 《中国兽药杂志》 2004年第7期32-33,共2页

按照拟定的猪瘟淋脾毒耐热保护剂活疫苗制造工艺在辽宁益康生物药品厂进行了 5批该疫苗的中试生产 ,计 15万头份 ,检验全部合格。在北京、河北等地选择 9个猪场进行区域试验 ,共免疫 3个品种约 3万余头猪 ,均安全、未显现任何不良反应 ... 按照拟定的猪瘟淋脾毒耐热保护剂活疫苗制造工艺在辽宁益康生物药品厂进行了 5批该疫苗的中试生产 ,计 15万头份 ,检验全部合格。在北京、河北等地选择 9个猪场进行区域试验 ,共免疫 3个品种约 3万余头猪 ,均安全、未显现任何不良反应 ,跟踪观察 ,免疫过的猪未发生猪瘟 。 展开更多

关键词 猪瘟 淋脾毒耐热保护剂 活疫苗 中试生产 区域试验

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猪瘟淋脾毒耐热保护剂活疫苗保存期的测定及免疫保护试验 被引量：1

8

作者 刘业兵 孙晔 +2 位作者 张万林 王利永 王栋 《中国兽药杂志》 2004年第3期28-29,共2页

　对添加耐热保护剂的猪瘟淋脾毒活疫苗进行保存期的测定和保存后的免疫保护试验。结果表明,研制的猪瘟淋脾毒耐热保护剂活疫苗在2～8℃条件下保存24个月后免疫猪,能100%抵抗猪瘟石门系强毒的攻击。

关键词 猪瘟淋脾毒活疫苗 耐热保护剂 保存期 免疫保护试验

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猪瘟犊牛睾丸细胞苗生产中值得注意的几个问题

9

作者 苏国华 《福建畜牧兽医》 2002年第2期40-40,共1页

关键词 细胞毒液 脾毒 化学药品 猪瘟犊牛睾丸细胞苗 生产

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一种制备猪瘟活疫苗的方法

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作者 刘涛 郑朝朝 +3 位作者 柳珊 徐倩倩 梁武 马明 《兽医导刊》 2015年第12期45-45,共1页

为稳定产品质量,建立一种快速、稳定培养猪瘟活疫苗的生产工艺,本试验通过培养猪睾丸细胞,同步接种猪瘟病毒的方式制备成猪瘟活疫苗.研究结果显示,接种病毒后可收获毒液5次以上,病毒液均可达到0.5＊106 RID/ml,产品各项检测均合格.

关键词 猪瘟活疫苗 同步接种 脾毒

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中国猪瘟兔化弱毒株(C-株)兔脾组织毒主要保护性抗原E2(gp55)基因序列分析 被引量：11

11

作者 韩雪清 李红卫 +11 位作者 刘湘涛 李小兵 马军武 涂长春 胡弘博 殷震 蒋帅 刘伯华 赵启祖 李健强 李忠润 谢庆阁 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期52-57,共6页

利用反转录 (RT)及套式PCR(N PCR)方法扩增了中国猪瘟兔化弱毒株 (C 株 )兔脾组织毒主要保护性抗原E2 (gp55)基因 ,成功地将其克隆并测定了核苷酸序列 ,与国内外已发表的猪瘟病毒 (HCV)E2基因序列比较的结果是 :C 株兔脾毒与C 株细胞 (S... 利用反转录 (RT)及套式PCR(N PCR)方法扩增了中国猪瘟兔化弱毒株 (C 株 )兔脾组织毒主要保护性抗原E2 (gp55)基因 ,成功地将其克隆并测定了核苷酸序列 ,与国内外已发表的猪瘟病毒 (HCV)E2基因序列比较的结果是 :C 株兔脾毒与C 株细胞 (SK6)毒、C 株疫苗 (犊牛睾丸细胞 ,HCLV C)毒、HCV SM株 (石门 )毒、Brescia株 (荷兰 )毒、Alfort株 (德国 )毒的E2核苷酸序列同源性分别为 98 87%、98 34 %、94 58%、91 0 0 %、80 78% ;氨基酸同源性分别为 98 95%、97 37%、94 2 2 %、91 60 %、89 2 3%。对C 株兔脾毒与C 株细胞毒、经典强毒及国内流行野毒E2上的A、B、C三个中和性抗原区的氨基酸组成进行了比较 ,其结果为 :C 株兔脾毒与C 株细胞毒的差异很小甚至没有差异 ,而与流行野毒及经典强毒在B、C区有较大的差异。我国经典强毒石门毒与国内80年代和 90年代流行毒之间有明显的差异 ,表明我国猪瘟流行毒株发生了变化。 展开更多

关键词 猪瘟 兔化弱毒株 兔脾组织毒E2基因 序列分析

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中国猪瘟C-株(脾淋毒)全长cDNA的分子克隆 被引量：8

12

作者 胡建和 刘湘涛 +4 位作者 张彦明 韩雪清 刘在新 张永国 谢庆阁 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期490-493,共4页

应用RT PCR、NestedPCR和Half nestedPCR技术从实验感染兔脾组织的总RNA中得到了覆盖猪瘟病毒(CSFV)C 株全基因组的7个cDNA重叠片段,分别克隆于pMD18 T或pGEM TEasy载体后进行测序。运用T A克隆和多片段一步连接法,将cDNA重叠片段F1、F2... 应用RT PCR、NestedPCR和Half nestedPCR技术从实验感染兔脾组织的总RNA中得到了覆盖猪瘟病毒(CSFV)C 株全基因组的7个cDNA重叠片段,分别克隆于pMD18 T或pGEM TEasy载体后进行测序。运用T A克隆和多片段一步连接法,将cDNA重叠片段F1、F2、F3、F4与F5、F6、F7分别克隆到pGEM 5Zf(+)载体后,得到两个半长cDNA亚克隆重组质粒pGEM 5Zf(+)/F1 4和pGEM 5Zf(+)/F5 7,再将两个半长cDNA重叠片段连接并克隆到pGEM 5Zf(+)载体,构建出了CSFVC 株全长cDNA重组质粒pGEM 5Zf(+)/F1 7。全长cDNA的成功构建为进一步研究CSFV分子生物学提供了良好的工具。 展开更多

关键词 中国 猪瘟 C-株 脾淋毒 CDNA 分子克隆 兔脾组织 RNA 克隆 多片段一步连接法

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刘铁军教授“扶正固本消积”学说的构建与应用

13

作者 苏博扬 熊壮 +5 位作者 王松 冷炎 王汉 黄旭鹏 桑子淇 刘铁军 《中西医结合肝病杂志》 CAS 2024年第7期577-581,共5页

刘铁军教授在精研中医经典理论的基础上,基于脏毒腑秽学说,针对“脏毒”这一危重阶段,针对性提出了“扶正固本消积”学说。刘铁军教授以扶正气、固本源、消积毒为主要思想指导,指出消化系统疾病的致病因素包括食、痰、瘀、秽、浊等均可... 刘铁军教授在精研中医经典理论的基础上,基于脏毒腑秽学说,针对“脏毒”这一危重阶段,针对性提出了“扶正固本消积”学说。刘铁军教授以扶正气、固本源、消积毒为主要思想指导,指出消化系统疾病的致病因素包括食、痰、瘀、秽、浊等均可概括为积,在消积过程中注重对机体本源及正气的固护,以达到“扶正以助消积,消积以复正气”的目的。刘铁军教授总结出扶正补虚、运脾托毒、化癥消积3种治法,针对疾病的前中后期予以治疗,包括预防与预后的过程中均有不同偏重,以指导治疗消化系统疾病。 展开更多

关键词 脏毒腑秽学说 扶正固本消积学说 扶正补虚 运脾托毒 化癥消积

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猪瘟兔化弱毒免疫猪淋巴细胞亚类及转化水平、IFN-γ的变化与分析 被引量：3

14

作者 徐磊 卢培成 +10 位作者 牛更智 曾亮明 林映升 林伯全 傅光华 施少华 程龙飞 陈先进 黄瑜 邓衔柏 张渊魁 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期185-189,共5页

为研究免疫猪瘟兔化弱毒(HCLV)对猪细胞免疫应答的影响,本研究分别采用HCLV脾淋毒单独(A组)、HCLV细胞毒与兔脾淋组织液联合(B组)、HCLV细胞毒单独(C组)及生理盐水(对照组)免疫仔猪,应用流式细胞术、淋巴细胞增殖试验及ELISA方法测定免... 为研究免疫猪瘟兔化弱毒(HCLV)对猪细胞免疫应答的影响,本研究分别采用HCLV脾淋毒单独(A组)、HCLV细胞毒与兔脾淋组织液联合(B组)、HCLV细胞毒单独(C组)及生理盐水(对照组)免疫仔猪,应用流式细胞术、淋巴细胞增殖试验及ELISA方法测定免疫前后外周血淋巴细胞(PBL)亚类比值、PBL非特异性(NSI)及特异性(SSI)刺激指数、IFN-γ浓度。结果显示免疫后各组CD3+/PBL与CD3+CD8+/PBL差异不显著;CD3+CD4+/PBL于第7 d时A、B和对照组显著高于C组(p<0.05);CD3+CD4+/CD3+CD8+于第7 d、14 d时A、B和对照组显著高于C组(p<0.05),并且C组CD3+CD4+/CD3+CD8+显著降低(p<0.05);NSI于第3 d、7 d时A与B组显著高于C组(p<0.05),而C组显著高于对照组(p<0.05);SSI于第3 d、7 d时A组显著高于B与C组(p<0.05),而B与C组显著高于对照组(p<0.05);IFN-γ含量由高至低依次为:A、B、C和对照组,并且于第3 d、7 d时差异显著(p<0.05)。研究结果表明,HCLV细胞毒引起机体CD3+CD8+相对更快速增殖,而HCLV脾淋毒引起机体CD3+CD4+相对更快速增殖及NSI、SSI、IFN-γ浓度更高,脾淋毒与细胞毒可能侧重不同的免疫分子途径发挥免疫保护效力;兔脾淋组织液对NSI和IFN-γ浓度具有增强作用。 展开更多

关键词 猪瘟兔化弱毒脾淋毒 猪瘟兔化弱毒细胞毒 淋巴细胞亚类 淋巴细胞转化水平 IFN-Γ

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刘铁军教授运脾托毒法辨治气虚型功能性便秘经验 被引量：3

15

作者 苏博扬 熊壮 +3 位作者 王松 黄旭鹏 王俊惟 刘铁军 《中国中医药现代远程教育》 2023年第22期59-62,共4页

功能性便秘(FC)是临床常见疾病,在我国发病率可达10%~15%,且发病率会随着年龄增加而提高;长期便秘严重影响患者生活质量。受人口老龄化以及不良生活习惯的影响,气虚型FC在临床尤为多见。针对此型便秘,刘铁军教授认为糟粕秘结于内、大肠... 功能性便秘(FC)是临床常见疾病,在我国发病率可达10%~15%,且发病率会随着年龄增加而提高;长期便秘严重影响患者生活质量。受人口老龄化以及不良生活习惯的影响,气虚型FC在临床尤为多见。针对此型便秘,刘铁军教授认为糟粕秘结于内、大肠传导失司是基本病机,脾胃之气亏虚为根本,从补益正气、活血导滞出发,进一步发挥“三因学说”,以“运脾托毒”为治法、以方证为主导,临床运用黄芪类方治疗气虚型便秘效果显著。 展开更多

关键词 气虚秘 功能性便秘 运脾托毒法 黄芪类方 刘铁军

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甘露消毒丹联合苦黄散治疗手足口病肺脾湿热蕴毒证的临床效果

16

作者 钟斌 陈青 +6 位作者 李曦 李明明 廖泽辉 梁静 陈婕 唐兰 苏信镭 《临床合理用药杂志》 2024年第34期33-36,共4页

目的观察甘露消毒丹联合苦黄散治疗手足口病肺脾湿热蕴毒证的临床效果。方法选取2022年1月—2023年12月广西中医药大学附属梧州市中医医院儿科住院及门诊诊断为手足口病肺脾湿热蕴毒证患儿200例,采用随机数字表法分为研究组和对照组,各... 目的观察甘露消毒丹联合苦黄散治疗手足口病肺脾湿热蕴毒证的临床效果。方法选取2022年1月—2023年12月广西中医药大学附属梧州市中医医院儿科住院及门诊诊断为手足口病肺脾湿热蕴毒证患儿200例,采用随机数字表法分为研究组和对照组,各100例。对照组予常规西医治疗,研究组在对照组基础上予甘露消毒丹联合苦黄散治疗,2组疗程均为5~7 d。比较2组临床效果、体温恢复正常时间、皮疹消退时间,治疗前后肝功能指标[丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBil)]、肾功能指标[尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)]、空腹血糖(FPG)、心肌酶[肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、α-羟丁酸脱氢酶(α-HBD)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)]水平及血常规[白细胞计数(WBC)、淋巴细胞绝对值(LYM)、中性粒细胞绝对值(GRAN)、血小板(PLT)]。结果研究组总有效率为86.00%,高于对照组的74.00%(χ^(2)=4.500,P=0.034);研究组体温恢复正常时间及皮疹消退时间均短于对照组(P<0.01)。治疗5~7 d后,2组ALT、AST、TBil水平低于治疗前,且研究组ALT、AST水平低于对照组(P<0.05或P<0.01),2组TBil水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗前后,2组BUN、Cr、FPG水平组内、组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗5~7 d后,2组CK及WBC水平低于治疗前,且研究组低于对照组(P<0.01);2组LDH、α-HBD、CK-MB及LYM、GRAN、PLT组内、组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论甘露消毒丹联合苦黄散应用于手足口病肺脾湿热蕴毒证治疗中可提高疗效,缩短患儿体温恢复正常时间、皮疹消退时间,改善患儿肝功能。 展开更多

关键词 手足口病 肺脾湿热蕴毒证 甘露消毒丹 苦黄散 肝功能 肾功能

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猪瘟病毒C株(脾淋毒)全长cDNA分子几个突变位点的重组改造 被引量：1

17

作者 张淼涛 冯霞 +5 位作者 刘湘涛1 张彦明 田宏 胡建和 冶贵生 谢庆阁 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期166-171,共6页

采用RT PCR、Nested PCR和Half nested PCR技术从试验感染兔脾组织的总 RNA中得到了猪瘟病毒(CSFV) C株全长cDNA的3个待改造片段,分别克隆于pMD18 T载体后进行测序。用重组技术分别从前期构建的5′半长cDNA或3′半长cDNA中替换F1、F3和F... 采用RT PCR、Nested PCR和Half nested PCR技术从试验感染兔脾组织的总 RNA中得到了猪瘟病毒(CSFV) C株全长cDNA的3个待改造片段,分别克隆于pMD18 T载体后进行测序。用重组技术分别从前期构建的5′半长cDNA或3′半长cDNA中替换F1、F3和F51,构建成 2 个新的半长 cDNA,进一步连接成新的全长 cD NA,经测序证实全长cDNA中3个致死性突变位点均得到改正。初步鉴定证明该全长 cDNA具有感染性。为猪瘟病毒C株反向遗传操作系统的建立奠定了基础。 展开更多

关键词 猪瘟病毒 全长CDNA 脾淋毒 CSFV 突变位点 测序 感染性 脾组织 RT-PCR PCR技术

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运脾化毒法治疗慢性肾功能不全的探讨

18

作者 施红 《河北中医》 2003年第11期825-826,共2页

关键词 湿毒 运脾化毒 慢性肾功能衰竭

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补肾益脾祛毒汤联合改良IA方案治疗中老年白血病的疗效及毒副反应观察 被引量：1

19

作者 冀晓红 李草旎 《四川中医》 2016年第11期55-57,共3页

目的：观察补肾益脾祛毒汤联合改良IA方案治疗中老年白血病的疗效及毒副反应。方法：选取2011年5月-2015年4月我院收治的60例中老年白血病患者为研究对象,依据入院顺序将患者分为研究组和对照组各30例,对照组给予改良IA方案治疗,研究组... 目的：观察补肾益脾祛毒汤联合改良IA方案治疗中老年白血病的疗效及毒副反应。方法：选取2011年5月-2015年4月我院收治的60例中老年白血病患者为研究对象,依据入院顺序将患者分为研究组和对照组各30例,对照组给予改良IA方案治疗,研究组在对照组基础上另联合补肾益脾祛毒汤治疗,对两组治疗后临床疗效、药物毒副反应、生存时间及生存率及进行观察比较。结果：治疗后研究组临床总有效率80.00%较对照组53.33%显著高,具有一定临床疗效（χ^2=4.800,P〈0.05）;1年内研究组平均生存时间较对照组显著延长,具有统计学意义（t=13.754,P〈0.05）;1年随访观察发现研究组生存率83.33%较对照组生存率60.00%显著高（χ^2=11.915,P〈0.05）;两组治疗后较治疗前血象指标分别均显著降低,治疗后对照组RBC、Hb、WBC较研究组降低显著;治疗后两组ALT、AST分别均较治疗前显著升高,Cr、BUN显著降低,且治疗后对照组ALT、AST较研究组升高显著,Cr、BUN降低显著,均具有统计学意义（P〈0.05）。结论：补肾益脾祛毒汤联合改良IA方案对中老年白血病患者的的临床疗效显著,并有效降低药物毒副反应,延长及提高患者生存时间及生存率,值得临床推广应用。 展开更多

关键词 白血病 中老年 改良IA方案 补肾益脾祛毒汤

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猪瘟病毒C-株(脾淋毒)3′-UTR的克隆和二级结构分析

20

作者 胡建和 陈永耀 +4 位作者 魏刚才 李敬玺 刘湘涛 张彦明 谢庆阁 《甘肃畜牧兽医》 2003年第3期5-7,共3页

根据已发表的CSFVC -株序列 ,设计合成了 3′ UTR特异性PCR引物对F R及半套式上游引物F′。从兔脾组织中提取总RNA ,应用RT PCR及Half nestedPCR ,成功地扩增出了C 株 3′ UTR ,克隆到pMD - 18T载体后进行了序列测定。与ALD株、Alfort/... 根据已发表的CSFVC -株序列 ,设计合成了 3′ UTR特异性PCR引物对F R及半套式上游引物F′。从兔脾组织中提取总RNA ,应用RT PCR及Half nestedPCR ,成功地扩增出了C 株 3′ UTR ,克隆到pMD - 18T载体后进行了序列测定。与ALD株、Alfort/187株、Brescia株、F114株、Eystrup株、Riems株和Shimen株的相应区段进行了序列比较分析 ,同源性分别为 98 7%、98 2 %、98 2 %、98 7%、97 8%、97 8%和 98 7%。C 株 3′ UTR中存在一富含T的插入序列 ,可能是C -株在兔化致弱时产生的变异标记 ,对其二级结构具有较大影响。在其它疫苗株的 3′ UTR不同位置 ,亦存在相似的插入序列 。 展开更多

关键词 猪瘟病毒 脾淋毒 克隆 二级结构 序列分析

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