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烟草脱外壁花粉人工萌发与离体授粉实验系统的建立 被引量:6
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作者 王劲 夏惠君 +1 位作者 周嫦 杨弘远 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1997年第5期405-410,共6页
通过花蕾低温处理、花药漂浮培养与花粉短时酶解程序可脱去花粉外壁,分离出烟草(Nicotianatabacum L.)的脱外壁花粉。研究了分离过程中的酶液渗透压、培养基中聚乙二醇(PEG)与蔗糖以及添加水解乳蛋白等因素对脱外壁花粉人工萌发的影响... 通过花蕾低温处理、花药漂浮培养与花粉短时酶解程序可脱去花粉外壁,分离出烟草(Nicotianatabacum L.)的脱外壁花粉。研究了分离过程中的酶液渗透压、培养基中聚乙二醇(PEG)与蔗糖以及添加水解乳蛋白等因素对脱外壁花粉人工萌发的影响。在含30%PEG-6000与0.1%水解乳蛋白的D_2培养基中,萌发率最高达57.8%;花粉管生长正常,培养24h后一半以上的花粉管中生殖细胞分裂成精子。用微滴和贴滤纸小片的方法将30~40粒脱外壁花粉授予柱头上,近一半能萌发花粉管并在花柱中生长。采取授粉后子房培养方法,获得了种子与幼苗。从而建立了脱外壁花粉离体授粉实验系统。讨论了脱外壁花粉人工萌发与离体授粉实验系统的建立对于研究外壁在花粉萌发中的生物学功能以及开拓新的转基因技术等方面的意义。 展开更多
关键词 烟草 外壁 花粉 萌发 授粉 实验系统
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马铃薯脱外壁花粉的制备与人工萌发 被引量:8
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作者 吴旺泽 王蒂 +1 位作者 王清 彭晓莉 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期39-43,共5页
将3个马铃薯普通栽培种(SolanumtuberosumL.)‘陇薯3号’、‘Favorita’和‘Shapody’ 的花粉先经低温饥饿处理,再低温水合、高温热激和渗激,分离出大量具有活力的脱外壁花粉,花粉最 高脱壁率达34.5%。脱外壁花粉在K3培养基+15%PE... 将3个马铃薯普通栽培种(SolanumtuberosumL.)‘陇薯3号’、‘Favorita’和‘Shapody’ 的花粉先经低温饥饿处理,再低温水合、高温热激和渗激,分离出大量具有活力的脱外壁花粉,花粉最 高脱壁率达34.5%。脱外壁花粉在K3培养基+15%PEG+5%蔗糖+0.01%H3BO3+0.01%LH+100 mg/LPVP的萌发液中萌发率高达38.3%。试验建立了三步冲击法制备马铃薯脱外壁花粉的方法,并讨 论了外壁在花粉萌发与受粉中的生物学意义。 展开更多
关键词 马铃薯 花粉 外壁花粉 人工萌发
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用基因枪法将GUS基因导入烟草脱外壁花粉及其瞬间表达 被引量:3
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作者 王劲 施华中 +3 位作者 周嫦 杨弘远 张献龙 章荣德 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期422-427,共6页
以β—葡糖苷酸酶(β—glucuronidase,GUS)基因作为报告基因,用基因枪法将其导入烟草(NicotianatabacumL.)脱外壁花粉和作为对照系统的完整花粉,探讨了启动子及不同轰击条件对外源基因瞬间表... 以β—葡糖苷酸酶(β—glucuronidase,GUS)基因作为报告基因,用基因枪法将其导入烟草(NicotianatabacumL.)脱外壁花粉和作为对照系统的完整花粉,探讨了启动子及不同轰击条件对外源基因瞬间表达的影响,比较了二者的转化频率。结果表明:玉米花粉特异启动子能启动GUS基因在脱外壁花粉和完整花粉中表达,而CaMV35S启动子则不能。靶距离越近,着弹率越高,GUS基因瞬间表达频率越高;当进气压力为900psi(poundspersq.in.)、靶距为6cm时,脱外壁花粉的瞬间表达频率达最高,为0.45%,约为完整花粉的6倍。表达的蓝色反应花粉经DAPI荧光染色后细胞学观察表明,金粉粒能够打入营养核和生殖核。 展开更多
关键词 外壁花粉 基因枪 GUS基因 瞬间表达 烟草
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烟草脱外壁花粉的电激基因转移 被引量:1
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作者 施华中 王劲 +2 位作者 杨弘远 周嫦 陈正华 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1996年第8期626-630,共5页
以 β-葡糖苷酸酶 GUS 基因作为报告基因 ,通过瞬间表达的检测 ,比较了烟草 Nicotianatabacum L . 脱外壁花粉、未萌发与萌发花粉的电激导入效果 ,探讨了不同电激条件及启动子对外源基因瞬间表达的影响 .结果表明 :当脉冲时间常数为... 以 β-葡糖苷酸酶 GUS 基因作为报告基因 ,通过瞬间表达的检测 ,比较了烟草 Nicotianatabacum L . 脱外壁花粉、未萌发与萌发花粉的电激导入效果 ,探讨了不同电激条件及启动子对外源基因瞬间表达的影响 .结果表明 :当脉冲时间常数为 13 ms时 ,导致脱外壁花粉和萌发花粉生活力下降约50 %的电场强度分别为 750 V/ cm和 12 50 V/ cm,在此条件下电激 ,二者的导入效果最好 .脱外壁花粉的GUS基因表达水平约为萌发花粉的 5倍、花粉粒的 30倍 .玉米花粉特异启动子 Zm13- 2 60 能启动 GUS基因在脱外壁花粉和萌发花粉中高效表达 ,而 Ca MV 展开更多
关键词 烟草 基因转移 外壁花粉 电激
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BRASSICA DE-EXINED POLLEN AS A NEW EXPERIMENTAL SYSTEM FOR STUDYING POLLEN GERMINATION 被引量:1
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作者 徐秉芳 梁世平 +1 位作者 周嫦 杨弘远 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1997年第6期489-493,共5页
Exine deprived pollen only coated with inline has been isolated and artificially germinated in Brassica L. In view of the lack of exine and germ furrows, the de-exined pollen is an interesting experimental system for ... Exine deprived pollen only coated with inline has been isolated and artificially germinated in Brassica L. In view of the lack of exine and germ furrows, the de-exined pollen is an interesting experimental system for studying pollen germination. This report focuses on the microscopic and ultrastructural changes in the aspects of polarization, predetermination of the germination site and new wall synthesis during the course of isolation and germination of the de-exined pollen. It was shown that the de-exined pollen was already in an active state and had established its polarity and germination sites prior to exine detachment. The germination sites were still localized at the region of the previous germ furrows even after exine detachment. The new wall deposited at the germination sites appeared to have an important morphogenetic role in setting a limit to the size of pollen tube diameter . These results support our assumption that the de-exined pollen may have an extensive application in the research of pollen biology. 展开更多
关键词 De-exined pollen Pollen activation Pollen germination BRASSICA
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芸苔属脱外壁花粉的分离与人工萌发 被引量:1
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作者 徐秉芳 梁世平 +1 位作者 周嫦 杨弘远 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1996年第12期963-968,共6页
芸苔属青菜(Brassica chinensis)与紫菜苔(B. cam pestrisvar. purpurea)的花粉经低温水合、热激、渗激三步程序,分离出大量具萌发能力的脱外壁花粉,脱外壁率可高达60% 以上。在含... 芸苔属青菜(Brassica chinensis)与紫菜苔(B. cam pestrisvar. purpurea)的花粉经低温水合、热激、渗激三步程序,分离出大量具萌发能力的脱外壁花粉,脱外壁率可高达60% 以上。在含有碳源与氮源及Roberts培养基盐成分的碱性PEG 培养基中,首次使芸苔属脱外壁花粉萌发,萌发率可达33% ~41% 。在扫描电镜下观察了花粉脱外壁与萌发的过程。讨论了不同植物花粉脱外壁的方法与花粉壁生物学特点的对应关系。 展开更多
关键词 芸苔属 外壁花粉 人工萌发 分离
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烟草脱外壁花粉的制备
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作者 夏惠君 周嫦 杨弘远 《武汉大学学报(自然科学版)》 CSCD 1995年第6期773-776,共4页
烟草脱外壁花粉的制备夏惠君,周嫦,杨弘远(武汉大学生命科学学院,武汉,430072)关键词脱外壁花粉,制备,烟草中图法分类号Q944.42花粉粒由外壁、内壁与原生质体3部分组成.有关花粉生物学的研究已有报道[‘·... 烟草脱外壁花粉的制备夏惠君,周嫦,杨弘远(武汉大学生命科学学院,武汉,430072)关键词脱外壁花粉,制备,烟草中图法分类号Q944.42花粉粒由外壁、内壁与原生质体3部分组成.有关花粉生物学的研究已有报道[‘·‘j.近年来,花粉原生质体的研究也取得... 展开更多
关键词 外壁花粉 制备 烟草 花粉
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陆地棉脱外壁花粉粒的制备和花粉粒核DNA检测 被引量:1
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作者 岳洁瑜 吴李君 +2 位作者 吴跃进 张宝龙 唐灿明 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2008年第2期94-98,共5页
以陆地棉品种苏棉22号的花粉为材料,研究棉花花粉粒脱外壁和检测花粉粒内部核DNA状态的方法。花粉粒经4%多聚甲醛固定后,通过10%次氯酸钠水溶液氧化、55℃热激30min、压片等系列程序可将花粉粒的外壁完全脱去,分离出完整的脱外壁花粉粒... 以陆地棉品种苏棉22号的花粉为材料,研究棉花花粉粒脱外壁和检测花粉粒内部核DNA状态的方法。花粉粒经4%多聚甲醛固定后,通过10%次氯酸钠水溶液氧化、55℃热激30min、压片等系列程序可将花粉粒的外壁完全脱去,分离出完整的脱外壁花粉粒。用DNA荧光染料DAPI分别对陆地棉花粉粒和脱外壁花粉粒进行染色,在荧光显微镜和激光扫描共聚焦显微镜下观察花粉粒的内部核结构。没有脱外壁的花粉粒的内部核结构难以被观察到,而脱外壁花粉粒的核DNA结构清晰可见,内壁几乎无荧光。首次发现陆地棉的成熟花粉粒为三核花粉粒。 展开更多
关键词 陆地棉 花粉粒 外壁花粉粒 DAPI
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烟草脱外壁花粉与完整花粉电激导入效果的比较研究
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作者 王劲 施华中 +1 位作者 周嫦 杨弘远 《武汉大学学报(自然科学版)》 CSCD 1998年第2期206-208,共3页
利用膜不通透的荧光染料钙黄素作为指示剂,比较了烟草脱外壁花粉与完整的未萌发花粉和萌发花粉电激导入的效果.研究了电激过程中的电场强度、脉冲持续时间、电激液的介质成分和浓度对三者的导入率及电激后花粉萌发率的影响.结果表明... 利用膜不通透的荧光染料钙黄素作为指示剂,比较了烟草脱外壁花粉与完整的未萌发花粉和萌发花粉电激导入的效果.研究了电激过程中的电场强度、脉冲持续时间、电激液的介质成分和浓度对三者的导入率及电激后花粉萌发率的影响.结果表明,从未萌发花粉、萌发花粉到脱外壁花粉,导入率逐渐升高,证实了脱外壁花粉由于摆脱了外壁的阻碍而有利于外源物质的电激导入.但电激后花粉萌发率的变化规律相反.荧光指示剂的应用便于优化选择适宜电激参数,为外源基因的导入实验提供了参考依据. 展开更多
关键词 外壁花粉 完整花粉 钙黄素 电激 烟草
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烟草花粉脱外壁过程中发现的一种特殊花粉壁结构 被引量:1
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作者 梁世平 夏惠君 +1 位作者 周嫦 杨弘远 《电子显微学报》 CAS CSCD 1996年第5期401-401,共1页
烟草花粉脱外壁过程中发现的一种特殊花粉壁结构梁世平夏惠君周嫦杨弘远(武汉大学生命科学学院植物生殖生物学研究室,武汉430072)花粉粒由外壁、内壁与原生质体三部分组成,关于花粉粒与花粉原生质体已有大量工作,而介于二者... 烟草花粉脱外壁过程中发现的一种特殊花粉壁结构梁世平夏惠君周嫦杨弘远(武汉大学生命科学学院植物生殖生物学研究室,武汉430072)花粉粒由外壁、内壁与原生质体三部分组成,关于花粉粒与花粉原生质体已有大量工作,而介于二者之间的结构单位——脱外壁花粉的研究... 展开更多
关键词 烟草 花粉 外壁外粉 细微结构
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