补肾温阳化瘀方对子宫内膜异位症肾阳虚血瘀证模型大鼠HIF-1α、PHD2、VHL表达的影响 被引量：14

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作者 贾云波 杜惠兰 +4 位作者 高星 边文会 林晓华 班光国 田茜华 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1210-1217,共8页

目的观察补肾温阳化瘀方对子宫内膜异位症(endometriosis,EM)肾阳虚血瘀证模型大鼠缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1,HIF-1α)、脯氨酸羟化酶2(proline hydroxylase2,PHD2)、希佩尔-林道抑癌基因(von Hippel Lindau disease... 目的观察补肾温阳化瘀方对子宫内膜异位症(endometriosis,EM)肾阳虚血瘀证模型大鼠缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1,HIF-1α)、脯氨酸羟化酶2(proline hydroxylase2,PHD2)、希佩尔-林道抑癌基因(von Hippel Lindau disease,VHL)表达的影响,探讨EM发病机制及补肾温阳化瘀方治疗EM的作用机制。方法将50只SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、中药组、西药组,每组10只。其中正常组、假手术组常规饲养,模型组、中药组、西药组采用"延长冰箱冷冻加冰水浸泡"30天,再结合"自体移植法"创建EM肾阳虚血瘀证模型。术后中药组给予补肾温阳化瘀方(3.33 g/mL)1mL灌胃,西药组予以孕三烯酮0.5 mg/(kg·d)灌胃,模型组、正常组、假手术组灌服等体积的生理盐水,共给药4周。观察大鼠异位灶大小及形态,放免法检测血清CA125、血浆环磷酸腺苷(cAMP)、血浆环磷酸鸟苷(cGMP)的表达,HE染色光镜观察子宫在位内膜及异位组织形态学的变化,免疫组化SABC法、Western blot法检测HIF-1α、PHD2、VHL蛋白表达及含量,RT-PCR方法检测HIF-1α、PHD2、VHL mRNA表达。结果模型组大鼠异位灶生长明显,中药组、西药组治疗后,异位灶体积明显缩小。与正常组及假手术组比较,模型组CA125及cGMP水平明显升高,cAMP水平明显降低(P<0.05);HIF-1αmRNA、蛋白表达及含量均升高(P<0.05),PHD2、VHL mRNA、蛋白表达及含量均降低(P<0.05)。与模型组比较,中药组及西药组CA125及cGMP水平明显降低,cAMP水平明显升高,HIF-1αmRNA、蛋白表达及含量均降低,PHD2、VHL mRNA、蛋白表达及含量均升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与中药组比较,西药组PHD2蛋白含量更高(P<0.05)。HIF-1α与PHD2呈负相关(r=-0.799,P=0.00),HIF-1α与VHL呈负相关(r=-0.625,P=0.003)。结论补肾温阳化瘀方可有效治疗EM,其作用机制可能与降低HIF-1α、CA125、cGMP含量,上调PHD2、VHL、cAMP表达有关。 展开更多

关键词 子宫内膜异位症 肾阳虚血瘀证 缺氧诱导因子-1Α 脯氨酸羟化酶2 希佩尔-林道抑癌基因 补肾温阳化瘀方

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六味地黄汤对慢性肾衰模型大鼠PHD2和HIF-1α表达的影响 被引量：8

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作者 唐群 吴华 +3 位作者 张熙 雷久士 蓝文蕖 刘春燕 《北京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期290-296,共7页

目的观察六味地黄汤对慢性肾衰模型大鼠肾组织中脯氨酸羟化酶2(PHD2)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响,探讨慢性肾衰的发病机制以及六味地黄汤防治慢性肾脏病的分子机制。方法 60只SD大鼠随机分为假手术组,模型组,六味地黄汤低剂... 目的观察六味地黄汤对慢性肾衰模型大鼠肾组织中脯氨酸羟化酶2(PHD2)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响,探讨慢性肾衰的发病机制以及六味地黄汤防治慢性肾脏病的分子机制。方法 60只SD大鼠随机分为假手术组,模型组,六味地黄汤低剂量、中剂量和高剂量组。5/6肾切除法复制慢性肾衰模型。六味地黄汤低剂量、中剂量和高剂量组分别给予3.38 g/(kg·d)、6.75 g/(kg·d)、13.5 g/(kg·d)六味地黄汤灌胃。假手术组和模型组给予10 mL/(kg·d)生理盐水灌胃,每天1次,连续灌胃12周。造模12周后,检测各组大鼠24 h尿蛋白、血尿素氮和血肌酐,HE染色观察各组大鼠肾组织形态学变化,免疫组化法和RT-PCR法分别检测各组大鼠肾组织中PHD2、HIF-1α蛋白水平和基因表达。结果模型组大鼠24 h尿蛋白、血尿素氮和血肌酐较假手术组明显升高(P<0.05),六味地黄汤低剂量、中剂量和高剂量组较模型组明显降低(P<0.05)。HE染色假手术组大鼠肾组织肾间质纤维化不明显,模型组肾间质纤维化明显,六味地黄汤低剂量、中剂量和高剂量组较模型组肾间质纤维化程度明显减轻。与假手术组比较,模型组大鼠肾组织PHD2蛋白水平和mRNA表达均明显降低(P<0.05),HIF-1α蛋白水平和mRNA表达均明显升高(P<0.05)。与模型组比较,六味地黄汤低剂量、中剂量和高剂量组大鼠肾组织中PHD2蛋白水平和mRNA表达均明显升高(P<0.05),HIF-1α蛋白水平和mRNA表达均明显降低(P<0.05),且PHD2与HIF-1αmRNA的表达呈负相关(r=-0.653,P=0.00)。结论 PHD2/HIF-1α信号途径参与肾间质纤维化,六味地黄汤可有效防治慢性肾脏病,其作用机制可能与上调PHD2、降低HIF-1α表达有关。 展开更多

关键词 六味地黄汤 慢性肾脏病 肾间质纤维化 脯氨酸羟化酶2 缺氧诱导因子-1Α 大鼠

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缺氧诱导因子1α介导的信号通路在血管紧张素Ⅱ诱导肾间质纤维化中的作用 被引量：7

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作者 唐琳 郭青 +2 位作者 张翠翠 刘章锁 张晓雪 《中华肾脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期194-197,共4页

目的探讨缺氧诱导因子1α（HIF-1α）介导的信号通路在血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导肾间质纤维化（RIF）中的作用。方法体外培养肾小管上皮细胞，以不同浓度（10^-9～10^-6mol／L）的AngⅡ分别处理24h、48h时，用实时荧光定量PCR和Wester... 目的探讨缺氧诱导因子1α（HIF-1α）介导的信号通路在血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导肾间质纤维化（RIF）中的作用。方法体外培养肾小管上皮细胞，以不同浓度（10^-9～10^-6mol／L）的AngⅡ分别处理24h、48h时，用实时荧光定量PCR和Western印迹法分别检测肾小管上皮细胞中HIF-1α、脯氨酸羟化酶2（PHD2）及基质金属蛋白酶1组织抑制剂（TIMP-1）mRNA和蛋白的表达变化情况。结果随AngⅡ刺激浓度的增加，HIF。letmRNA的表达水平也增加，呈浓度依赖性。当AngⅡ浓度在10^-7mol／L，并且干预时间为24h时，HIF-1αmRNA的表达水平增加了166％。实时荧光定量PCR和Western印迹分析显示，相对于空白对照组，在AngⅡ干预的肾小管上皮细胞中HIF-1α、TIMP-1的mRNA和蛋白表达水平均升高（P〈0．05），而PHD2的mRNA和蛋白表达水平均下降（P〈0．05）。结论AngⅡ可能通过下调PHD2的表达而减少肾小管上皮细胞中HIF-1α的降解，从而上调HIF-1α及TIMP-1的表达，参与RIF。 展开更多

关键词 血管紧张素Ⅱ 纤维化 缺氧诱导因子1α亚基 肾小管上皮细胞 脯氨酸羟化酶2 基质金属蛋白酶1组织抑制剂

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红景天苷对类风湿关节炎患者血清脯氨酸羟化酶2及蛋白磷酸酯酶2A和丝裂原活化蛋白激酶表达水平的影响

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作者 李琴 朱光昭 +3 位作者 庄志毅 星媛 严婕 方璐 《中国医药》 2024年第7期1061-1065,共5页

目的分析红景天苷对类风湿关节炎(RA)患者血清脯氨酸羟化酶2(PHD2)及蛋白磷酸酯酶2A(PP2A)和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)表达水平的影响。方法选取青海省中医院2022年12月至2023年7月收治的RA患者96例。采用随机数字表法分为对照组和观察... 目的分析红景天苷对类风湿关节炎(RA)患者血清脯氨酸羟化酶2(PHD2)及蛋白磷酸酯酶2A(PP2A)和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)表达水平的影响。方法选取青海省中医院2022年12月至2023年7月收治的RA患者96例。采用随机数字表法分为对照组和观察组,各48例。对照组采用常规西医治疗,观察组在常规西医治疗的同时予以红景天苷治疗,2组均治疗3个月。比较治疗前后2组中医证候评分、临床症状与体征、实验室检查指标[包括红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)、类风湿因子(RF)、抗环瓜氨酸肽抗体(anti-CCP)]、临床疗效,健康状况评定量表(HAQ)与28个关节疾病活动度评估(DAS28)评分,血清PHD2、PP2A、MAPK水平与基因表达,不良反应。结果治疗后2组主症、次症评分均低于治疗前且观察组均低于对照组(均P<0.05)。治疗后观察组临床症状与体征均轻于对照组,ESR、CRP、RF和anti-CCP水平均低于对照组(均P<0.05)。观察组总有效率高于对照组[95.8%(46/48)比80.4%(37/46)](P=0.020)。治疗后观察组HAQ与DAS28评分均低于对照组[(5.0±1.0)分比(7.2±1.2)分、(3.1±0.5)分比(4.1±0.7)分](t=9.528、7.444,均P<0.001)。治疗后观察组PHD2、MAPK水平及基因表达均低于对照组,PP2A水平及基因表达均高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。2组不良反应发生率差异无统计学意义(P=0.528)。结论红景天苷治疗RA可增强临床效果、减轻患者症状、改善实验室指标且安全。推测与降低PHD2和MAPK表达、增加PP2A表达有关。 展开更多

关键词 类风湿关节炎 红景天苷 脯氨酸羟化酶2 蛋白磷酸酯酶2A 丝裂原活化蛋白激酶

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砭贴预处理对急性低压低氧环境大鼠血清PHD2/HIF-1α水平和脑组织损伤的影响 被引量：4

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作者 李晓雅 吴春花 +3 位作者 闫颖洁 王登辉 王梦杰 侯中伟 《中国针灸》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期1278-1284,共7页

目的:观察砭贴预处理对急性低压低氧脑损伤模型大鼠血清脯氨酸羟化酶2(PHD2)、低氧诱导因子1α(HIF-1α)含量的影响,探究砭贴预防高原脑损伤的可能作用机制。方法:将45只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、砭贴组、药物组、砭贴抑制剂... 目的:观察砭贴预处理对急性低压低氧脑损伤模型大鼠血清脯氨酸羟化酶2(PHD2)、低氧诱导因子1α(HIF-1α)含量的影响,探究砭贴预防高原脑损伤的可能作用机制。方法:将45只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、砭贴组、药物组、砭贴抑制剂组,每组9只。砭贴组和砭贴抑制剂组大鼠予砭贴预处理,穴取“太渊”“内关”和“人迎”,每次2 h,每日1次;药物组大鼠每日按280 mg/kg剂量灌胃大株红景天胶囊药液,均干预14 d。砭贴抑制剂组于造模前24 h按40 mg/kg剂量腹腔注射PHD抑制剂二甲基乙二酰氨基乙酸(DMOG)。干预结束后,除空白组外,其余4组大鼠均采用氧舱模拟高原环境建立急性低压低氧脑损伤模型。检测各组大鼠动脉血血气分析指标[血氧饱和度(SaO_(2))、乳酸(Lac)、血钠(Na^(+))、血钾(K^(+))水平]和脑组织含水量;HE染色法观察大鼠脑皮质组织形态学;ELISA法检测血清PHD2、HIF-1α和血管内皮生长因子(VEGF)含量;Western blot法检测脑组织VEGF蛋白表达,实时荧光定量PCR法检测脑组织VEGFmRNA表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠SaO_(2)和Na^(+)水平降低(P<0.05),Lac、K^(+)水平及脑组织含水量升高(P<0.05)。与模型组比较,砭贴组和药物组SaO_(2)水平升高(P<0.05),Lac、K^(+)水平及脑组织含水量降低(P<0.05);砭贴组Na+水平升高(P<0.05)。与砭贴组比较,砭贴抑制剂组SaO_(2)水平降低(P<0.05),Lac水平及脑组织含水量升高(P<0.05)。模型组大鼠脑皮质组织细胞疏松紊乱,皮质血管扩张,细胞明显肿胀;砭贴组和药物组缺氧损伤表现较轻,砭贴抑制剂组缺氧损伤较砭贴组明显。与空白组比较,模型组大鼠血清PHD2含量降低、HIF-1α含量升高(P<0.05),血清VEGF含量及脑组织VEGF蛋白和m RNA表达增加(P<0.05);与模型组比较,砭贴组和药物组血清PHD2含量升高、HIF-1α含量降低(P<0.05),血清VEGF含量及脑组织VEGF蛋白和mRNA表达降低(P<0.05);与 展开更多

关键词 高原脑损伤 砭贴 急性低压低氧 脑组织损伤 脯氨酸羟化酶2 低氧诱导因子1Α 血管内皮生长因子

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黄芩素对缺氧诱导的视网膜神经胶质细胞中脯氨酸羟化酶2表达的抑制作用 被引量：5

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作者 杨宁 路强 +2 位作者 袁梦克 张晗 崔巍 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期990-996,共7页

背景 脯氨酸羟化酶2（PHD2）是缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）降解酶，能够调控缺氧诱导的新生血管形成过程中血管内皮生长因子（VEGF）和促红细胞生成素（EPO）等多种促血管生成因子的表达。黄芩素对PHD2有抑制作用，了解其对缺氧诱导... 背景 脯氨酸羟化酶2（PHD2）是缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）降解酶，能够调控缺氧诱导的新生血管形成过程中血管内皮生长因子（VEGF）和促红细胞生成素（EPO）等多种促血管生成因子的表达。黄芩素对PHD2有抑制作用，了解其对缺氧诱导的视网膜神经胶质细胞中PHD2表达的抑制作用有助于了解相关新生血管性眼病的机制及其防治。 目的 观察PHD2在缺氧诱导的视网膜神经胶质细胞中的表达变化，探讨黄芩素对PHD2过表达的抑制作用及其意义。 方法 将出生48 h以内SPF级SD乳鼠用体积分数10%水合氯醛麻醉后以颈椎脱臼法处死，分离双侧视网膜后采用组织块培养法分离培养鼠视网膜神经胶质细胞，采用兔抗羊胶质纤维酸性蛋白（GFAP）对神经胶质细胞进行鉴定。将培养的细胞分为正常对照组、CoCl2组和CoCl2＋黄芩素组，其中正常对照组细胞进行常规培养，CoCl2组细胞培养液中添加200 μmol/L CoCl2以制备缺氧细胞模型，CoCl2＋黄芩素组细胞培养液中添加200 μmol/L CoCl2和50 μmol/L黄芩素溶液。采用细胞计数试剂盒-8（CCK-8）法检测各组细胞增生情况；采用免疫荧光染色法检测各组鼠视网膜神经胶质细胞中PHD2和VEGF的表达及其定位；采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞中PHD2和VEGF mRNA的相对表达量；采用Western blot法定量检测各组细胞中PHD2和VEGF蛋白的表达量。 结果 各组鼠视网膜神经胶质细胞增生值（吸光度，A值）总体比较差异有统计学意义（F＝132.05，P＝0.00），其中CoCl2组鼠视网膜神经胶质细胞增生值明显高于正常对照组和CoCl2＋黄芩素组，差异均有统计学意义（均P〈0.01）。免疫荧光检测显示，正常对照组细胞中PHD2和VEGF均呈弱表达，CoCl2组细胞中PHD2和VEGF均呈强阳性表达，CoCl2＋黄芩素组细胞中PHD2和VEGF表达较CoCl2组减弱。正常对照组、CoCl2组和CoCl2＋黄� 展开更多

关键词 脯氨酸羟化酶2 缺氧 视网膜神经胶质细胞 血管内皮生长因子 增生 黄芩素

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肝细胞癌缺氧微环境下PHD2的表达及其与血管生成的关系 被引量：5

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作者 王照红 王志明 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1113-1117,共5页

目的探讨脯氨酸羟化酶2(PHD2)蛋白在肝细胞癌(HCC)血管生成中的作用。方法 (1)采用免疫组织化学S-P法,检测72例肝细胞癌组织中的PHD2表达,结合肝细胞癌临床病理和MVD资料加以分析。(2)以不同浓度二氯化钴(CoCl2)诱导体外培养微血管内皮... 目的探讨脯氨酸羟化酶2(PHD2)蛋白在肝细胞癌(HCC)血管生成中的作用。方法 (1)采用免疫组织化学S-P法,检测72例肝细胞癌组织中的PHD2表达,结合肝细胞癌临床病理和MVD资料加以分析。(2)以不同浓度二氯化钴(CoCl2)诱导体外培养微血管内皮细胞(HMEC-1)缺氧。Western-blot方法检测PHD2、HIF-1α、VEGF蛋白表达水平,基质胶内皮细胞二维成管实验检测HMEC-1细胞的成管能力。结果 PHD2在72例HCC组织中的阳性表达率22.2%(16/72),低于在癌旁肝组织中阳性表达率68.1%(49/72)。HCC组织中PHD2高表达组MVD计数(52.1±4.3)显著性低于PHD2低表达组(69.2±5.5)。CoCl2处理后HMEC-1细胞PHD2蛋白表达下调,HIF-1α蛋白降解减少,VEGF表达上调,HMEC-1细胞成管能力下降,与对照组(正常肝组织)比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论缺氧微环境下,PHD2表达水平下调,内皮细胞增殖,但细胞成管能力下降,是导致HCC瘤体血管成熟度下降,促进HCC侵袭转移的重要影响因素之一。 展开更多

关键词 肝细胞癌 微环境 脯氨酸羟化酶2 血管生成 侵袭转移

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缺氧诱导因子-1α及脯氨酸羟化酶2在子宫内膜腺癌中的表达意义

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作者 宫琦 侯立春 马毅兵 《当代医学》 2023年第27期143-145,共3页

目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及脯氨酸羟化酶2(PHD2)在子宫内膜腺癌中的表达意义。方法选取2019年7月至2020年6月丹东市中心医院收治的40例子宫内膜腺癌患者作为子宫内膜腺癌组,选取同期40例增殖期子宫内膜患者作为增殖期内膜组,... 目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及脯氨酸羟化酶2(PHD2)在子宫内膜腺癌中的表达意义。方法选取2019年7月至2020年6月丹东市中心医院收治的40例子宫内膜腺癌患者作为子宫内膜腺癌组,选取同期40例增殖期子宫内膜患者作为增殖期内膜组,另选取同期40例不典型增生子宫内膜患者作为不典型增生组。3组均使用免疫组化链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物(SABC)法检测HIF-1α、PHD2,比较3组HIF-1α、PHD2表达,分析子宫内膜腺癌病理特征与HIF-1α、PHD2阳性表达情况。结果3组HIF-1α、PHD2阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05)。子宫内膜腺癌组HIF-1α阳性率高于不典型增生组、增殖期内膜组,且不典型增生组高于增殖期内膜组,差异有统计学意义(P<0.05);子宫内膜腺癌组PHD2阳性率低于不典型增生组、增殖期内膜组,且不典型增生组低于增殖期内膜组,差异有统计学意义(P<0.05)。子宫内膜腺癌患者HIF-1α、PHD2的组织学分级、临床分期、肌层浸润、淋巴结转移占比比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论HIF-1α和PHD2表达异常会影响子宫内膜腺癌患者的肌层侵润、组织学分级、临床分期,因此,在子宫内膜腺癌疾病检查、诊断和治疗具有重要意义,能为子宫内膜腺癌的诊治提供可靠依据。 展开更多

关键词 缺氧诱导因子-1Α 脯氨酸羟化酶2 子宫内膜腺癌 子宫内膜增生

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脯氨酸羟化酶2对氧诱导视网膜病变新生血管生成的影响 被引量：2

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作者 屈晓杰 王雨生 +1 位作者 张鹏 储昭节 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2011年第6期511-515,共5页

目的观察脯氨酸羟化酶2(proline hydroxylase2,PHD2)对氧诱导小鼠视网膜病变动物模型新生血管生成的影响。方法 40只7d龄的C57BL/6J幼鼠随机分为4组,即正常对照组、高氧组、300mg.kg-1和500mg.kg-1PHD2抑制剂处理组,每组各10只。后3组... 目的观察脯氨酸羟化酶2(proline hydroxylase2,PHD2)对氧诱导小鼠视网膜病变动物模型新生血管生成的影响。方法 40只7d龄的C57BL/6J幼鼠随机分为4组,即正常对照组、高氧组、300mg.kg-1和500mg.kg-1PHD2抑制剂处理组,每组各10只。后3组放入动物氧舱,在氧气含量为体积分数(75±2)%的高氧环境中连续饲养5d,正常对照组于正常大气环境中饲养。300mg.kg-1和500mg.kg-1PHD2抑制剂处理组在结束高浓度给氧后,腹腔注射不同剂量的PHD2抑制剂(黄芩素),高氧组和正常对照组给予腹腔注射生理盐水,每天1次,连续5d。于末次注射结束后处死小鼠,Western blotting法检测视网膜中PHD2蛋白的表达,视网膜铺片法观察视网膜血管的情况,HE染色后计数突破内界膜的内皮细胞核数,免疫组织化学法检测视网膜a-SMA和VEGF蛋白的表达。结果 Western blotting显示视网膜中存在PHD2蛋白的表达,且高氧组蛋白表达量明显高于正常对照组(P=0.002),正常对照组高于300mg.kg-1、500mg.kg-1PHD2抑制剂组(P=0.004、0.001)。视网膜铺片结果显示高氧组自视盘发出的血管扩张迂曲,中周部视网膜有大量新生血管生成,近视盘周围有明显的血管无灌注区;300mg.kg-1和500mg.kg-1PHD2抑制剂处理组较高氧组明显改善。突破视网膜内界膜的内皮细胞核数正常对照组、高氧组、300mg.kg-1和500mg.kg-1PHD2抑制剂处理组分别为(0.60±0.84)个、(39.40±5.17)个、(15.80±1.93)个和(6.30±1.57)个,4组比较差异有统计学意义(P<0.05),高氧组最多,正常对照组最少。免疫组织化学染色结果显示300mg.kg-1和500mg.kg-1PHD2抑制剂处理组a-SMA表达较高氧组明显增加;高氧组、300mg.kg-1及500mg.kg-1PHD2抑制剂处理组的VEGF表达量均较正常对照组明显升高,300mg.kg-1和500mg.kg-1PHD2抑制剂处理组与高氧组比较,VEGF表达量无明显降低。结论视网膜存在PHD2的表达,抑制其表达后能有效改善高氧所致小鼠视网膜血管的 展开更多

关键词 视网膜新生血管 脯氨酸羟化酶2 氧诱导视网膜病变 鼠

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血管紧张素Ⅱ在翻译后水平影响血管平滑肌细胞缺氧诱导因子1α表达的机制 被引量：2

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作者 夏珂 赵震宇 杨天伦 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期799-802,共4页

目的观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对人脐动脉平滑肌细胞(HUASMC)缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)以及脯氨酸羟化酶2(PHD2)、缺氧诱导因子1抑制因子(FIH-1)、p-ERK表达的影响,探讨PHD2、FIH-1、p-ERK在AngⅡ作用下对HIF-1... 目的观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对人脐动脉平滑肌细胞(HUASMC)缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)以及脯氨酸羟化酶2(PHD2)、缺氧诱导因子1抑制因子(FIH-1)、p-ERK表达的影响,探讨PHD2、FIH-1、p-ERK在AngⅡ作用下对HIF-1α表达的影响机制。方法 HUASMC分为三组:(1)对照组:正常培养基培养细胞6 h;(2)AngⅡ组:含AngⅡ的培养基(终浓度为10-6mol/L)培养细胞6 h;(3)AngⅡ+PD98059组:含PD98059的培养基(终浓度为10-5mol/L)预处理细胞1 h后,加入含AngⅡ的培养基(终浓度为10-6mol/L)培养细胞6 h。RT-PCR检测细胞HIF-1α、VEGF、PHD2、FIH-1的基因表达;Western blot检测上述目的蛋白表达及p-ERK表达。结果 (1)与对照组比较,AngⅡ增加HUASMC中HIF-1α、VEGF基因和蛋白表达(P<0.05),增加pERK蛋白表达(P<0.05),降低FIH-1基因和蛋白表达(P<0.05),不影响PHD2基因和蛋白表达;(2)与AngⅡ组比较,ERK抑制剂PD98059降低HUASMC中HIF-1α、VEGF基因和蛋白的表达(P<0.05)以及p-ERK蛋白的表达(P<0.05),增加FIH-1的基因和蛋白表达(P<0.05)。结论 (1)AngⅡ增加HUASMC中HIF-1α、VEGF的表达,该作用通过激活ERK通路、抑制FIH-1表达,在翻译后水平减少HIF-1α的降解所致;(2)ERK抑制剂可削弱AngⅡ的促HIF-1α、VEGF表达作用。 展开更多

关键词 血管紧张素Ⅱ 缺氧诱导因子1Α 血管内皮生长因子 脯氨酸羟化酶2 缺氧诱导因子1抑制因子

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脯氨酸羟化酶抑制剂对缺氧环境下大鼠视网膜神经胶质细胞中脯氨酸羟化酶2表达的影响研究

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作者 李臻 畅叶叶 路强 《内蒙古师范大学学报（自然科学汉文版）》 CAS 2020年第2期148-155,共8页

观察在脯氨酸羟化酶抑制剂(PHI)干预下,脯氨酸羟化酶2(PHD 2)在缺氧环境下大鼠视网膜神经胶质细胞中的表达变化,探讨其与眼内相关增生因子表达的关系。原代培养大鼠视网膜神经胶质细胞,鉴定后传代培养,并分为3组:正常对照组(control)、... 观察在脯氨酸羟化酶抑制剂(PHI)干预下,脯氨酸羟化酶2(PHD 2)在缺氧环境下大鼠视网膜神经胶质细胞中的表达变化,探讨其与眼内相关增生因子表达的关系。原代培养大鼠视网膜神经胶质细胞,鉴定后传代培养,并分为3组:正常对照组(control)、缺氧组(hypoxia)、干预组(intervention)。正常对照组不做特殊处理;缺氧组加入200μmol/L缺氧诱导剂氯化钴(CoCl2);干预组加入500μmol/L的脯氨酸羟化酶抑制剂。免疫荧光化学染色法观察各组PHD 2和血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达,RT-PCR检测PHD 2、VEGF mRNA水平,四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT法)检测各组细胞增殖活性,Annexin V-FITC鉴定各组细胞凋亡情况。对照组视网膜神经胶质细胞中PHD 2和VEGF的表达比较弱,呈弱荧光染色;缺氧组视网膜神经胶质细胞中PHD 2及VEGF的表达明显增强,呈强红色荧光及强绿色荧光;干预组PHD 2及VEGF的表达明显低于缺氧组。RT-PCR分析结果表明:对照组视网膜神经胶质细胞中PHD 2和VEGF mRNA都呈弱表达;缺氧组视网膜神经胶质细胞中PHD 2和VEGF mRNA表达量明显增多;干预组中PHD 2、VEGF mRNA表达量较对照组轻度增多,但较缺氧组明显减少。缺氧组视网膜神经胶质细胞的增殖活性明显高于正常对照组(P<0.001);干预组视网膜神经胶质细胞的增殖活性高于正常对照组(P=0.001);但是干预组视网膜神经胶质细胞增殖活性明显低于缺氧组(P=0.001)。干预组和对照组视网膜神经胶质细胞的凋亡明显高于缺氧组(P<0.001);干预组视网膜神经胶质细胞的凋亡高于正常对照组(P<0.001)。缺氧环境可诱导视网膜神经胶质细胞中PHD 2、VEGF mRNA的表达增高,刺激神经胶质细胞的增殖,减缓细胞凋亡;脯氨酸羟化酶抑制剂可有效抑制缺氧环境下PHD 2增高引起的神经胶质细胞的增殖和VEGF mRNA的表达。 展开更多

关键词 脯氨酸羟化酶2 脯氨酸羟化酶抑制剂 神经胶质细胞 血管内皮生长因子

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六味地黄汤含药血清对HK-2细胞PHD2／HIF-1α信号途径的影响 被引量：1

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作者 唐群 吴华 +4 位作者 刘春燕 罗琳 易纯 徐文峰 庄高建 《北京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期60-64,75,共6页

目的以缺氧诱导的HK-2细胞为研究对象,探讨脯氨酸羟化酶2/缺氧诱导因子1α(PHD2/HIF-1α)信号途径对肾间质纤维化的影响,以及六味地黄汤含药血清干预作用。方法 40只SPF级雄性SD大鼠分为空白组和给药组,每组20只,空白组以10 m L/(kg... 目的以缺氧诱导的HK-2细胞为研究对象,探讨脯氨酸羟化酶2/缺氧诱导因子1α(PHD2/HIF-1α)信号途径对肾间质纤维化的影响,以及六味地黄汤含药血清干预作用。方法 40只SPF级雄性SD大鼠分为空白组和给药组,每组20只,空白组以10 m L/(kg·d)生理盐水,给药组以67.5 g/(kg·d)六味地黄汤灌胃连续1周,腹主动脉取血,离心后分离血清。体外培养HK-2细胞,将实验分为空白对照组(10%胎牛血清)、正常血清组(10%正常大鼠血清)、氯化钴(Co Cl2)处理组(150μmol/LCo Cl2+10%正常大鼠血清)和含药血清组(150μmol/LCo Cl2+10%六味地黄汤含药血清)。体外培养HK-2,分组处理24 h后,用Western Blot法和RT-PCR法分别检测六味地黄汤含药血清对缺氧诱导的HK-2细胞中PHD2、HIF-1α、结缔组织生长因子(CTGF)的蛋白水平和mRNA表达的影响。结果与正常血清组比较,Co Cl2处理组HK-2细胞中PHD2的蛋白水平和mRNA表达均降低(P<0.05),而HIF-1α、CTGF的蛋白水平和mRNA表达均升高(P<0.05);与Co Cl2处理组比较,含药血清组HK-2细胞中PHD2的蛋白水平和mRNA表达均升高(P<0.05),而HIF-1α、CTGF的蛋白水平和mRNA表达均降低(P<0.05)。结论 PHD2/HIF-1α信号途径参与肾间质纤维化,六味地黄汤可能通过上调PHD2的表达,促进HIF-1α的降解,后者下调CTGF的表达,从而抑制肾间质纤维化。 展开更多

关键词 HK-细胞 肾间质纤维化 脯氨酸羟化酶2 缺氧诱导因子1Α 结缔组织生长因子 六味地黄 汤含药血清 大鼠

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脯氨酸羟化酶2在消化系统恶性肿瘤中的研究进展 被引量：1

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作者 滕霞丽 周晶 +1 位作者 周慧玲(综述) 于鸿(审校) 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2021年第10期1112-1116,共5页

脯氨酸羟化酶2(PHD2)是脯氨酸羟化酶家族(PHDs)最重要的氧感受器,通过氧依赖性途径催化降解缺氧诱导因子(HIF),从而影响其转录活性。近年来研究发现PHD2在肿瘤发展、侵袭和转移中发挥着重要作用,因此,深入探究PHD2与肿瘤之间的关系显得... 脯氨酸羟化酶2(PHD2)是脯氨酸羟化酶家族(PHDs)最重要的氧感受器,通过氧依赖性途径催化降解缺氧诱导因子(HIF),从而影响其转录活性。近年来研究发现PHD2在肿瘤发展、侵袭和转移中发挥着重要作用,因此,深入探究PHD2与肿瘤之间的关系显得尤为重要。文章就PHD2的基本特征、与缺氧诱导因子(HIF)以及肿瘤血管生成的关系,及其在消化系统恶性肿瘤中的研究进展进行综述。 展开更多

关键词 脯氨酸羟化酶2 缺氧诱导因子 消化系统 肿瘤

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脯氨酸羟化酶2在增生性糖尿病视网膜病变增生膜中的表达 被引量：1

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作者 张晗 路强 崔巍 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期779-784,共6页

目的研究脯氨酸羟化酶2(PHD2)在增生性糖尿病视网膜病变(PDR)增生膜中的表达及其与PDR的关系.方法采用前瞻性临床对照研究设计.选取2016年6月至2017年3月于内蒙古自治区人民医院确诊为PDR的患者16例16眼,其中包括行标准三通道玻璃体切... 目的研究脯氨酸羟化酶2(PHD2)在增生性糖尿病视网膜病变(PDR)增生膜中的表达及其与PDR的关系.方法采用前瞻性临床对照研究设计.选取2016年6月至2017年3月于内蒙古自治区人民医院确诊为PDR的患者16例16眼,其中包括行标准三通道玻璃体切割手术治疗的PDR患者视网膜增生膜8例8眼和术前行雷珠单抗玻璃体腔注药的PDR患者视网膜增生膜8例8眼,另取无糖尿病患者特发性黄斑前膜8例8眼,分别作为PDR组、雷珠单抗组和对照组.苏木精-伊红染色进行组织学观察,采用免疫荧光化学染色法分别观察3个组PHD2、血管内皮生长因子(VEGF)、神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和血小板-内皮细胞黏附分子(PECAM-1/CD31)的表达情况,并比较PHD2、VEGF及GFAP免疫荧光强度值.结果PDR增生膜形态具有多样性,主要由较多的新生血管、成纤维细胞样细胞以及单核巨噬细胞、中性粒细胞和淋巴细胞等构成.特发性黄斑前膜以胶质细胞为主,伴有少量纤维细胞和巨噬细胞.雷珠单抗组可见血管萎缩,仅留少量血管,血管内皮细胞和纤维细胞减少.在PDR患者增生膜中PHD2、VEGF、GFAP和CD31均呈强阳性,且PHD2与VEGF、GFAP和CD31在增生膜中共同表达,表达部位一致;且无血管区域神经胶质细胞聚集明显,GFAP蛋白表达较有血管区域明显增强;雷球单抗组患者视网膜增生膜中PHD2、VEGF、GFAP和CD31均呈弱表达;对照组中,PHD2、VEGF和GFAP仅在有细胞区域表达,且呈弱阳性,在无胶质细胞区域表达阴性.PDR组、雷珠单抗组和对照组患者增生膜PHD2荧光强度值分别为0.082±0.003、0.031±0.002和0.028±0.001,PDR组PHD2荧光强度值较雷珠单抗组和对照组均升高,差异均有统计学意义(t=14.09、15.40,P<0.001).PDR组、雷珠单抗组和对照组患者的增生膜中VEGF荧光强度值分别为0.104±0.003、0.051±0.002和0.034±0.003,PDR组较雷珠单抗组和对照组升高,雷珠单抗组较对照组升高,� 展开更多

关键词 糖尿病视网膜病变/增生性 脯氨酸羟化酶2 血管内皮生长因子

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心肌缺血病人脯氨酸羟化酶2的表达及其干预HL-1缺氧损害的机制

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作者 骆元平 吴钟伟 曾垂旭 《中西医结合心脑血管病杂志》 2022年第12期2168-2173,共6页

目的探讨脯氨酸羟化酶2(PHD2)在心肌缺血病人中的表达及对心肌细胞HL-1缺氧损害的影响和相关机制。方法采集我院健康体检者和心血管科心肌缺血病人血清,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测PHD2水平。体外培养HL-1,将细胞培养在94%N2、5%CO_... 目的探讨脯氨酸羟化酶2(PHD2)在心肌缺血病人中的表达及对心肌细胞HL-1缺氧损害的影响和相关机制。方法采集我院健康体检者和心血管科心肌缺血病人血清,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测PHD2水平。体外培养HL-1,将细胞培养在94%N2、5%CO_(2)和1%O_(2)的培养箱中构建缺氧损伤模型。分别采用四唑盐(MTT)、Transwell和流式细胞术检测细胞存活率、迁移和侵袭能力及细胞凋亡证实缺氧损伤。采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测缺氧后PHD2表达;同时观察过表达PHD2对缺氧诱导的HL-1缺氧损伤的影响。采用Western Blot和ELISA分析过表达PHD2对HL-1核转录因子κB(NF-κB)信号通路相关蛋白的影响。结果相较于健康体检者,心肌缺血病人血清PHD2水平降低。相较于常氧,缺氧损伤模型HL-1存活率下降,迁移和侵袭能力下降,细胞凋亡增加,PHD2下调。过表达PHD2可抑制缺氧诱导的细胞损伤,同时抑制NF-κB信号通路相关蛋白表达。结论心肌缺血病人血清PHD2低表达,同时低氧诱导的HL-1中PHD2低表达,过表达的PHD2可能通过抑制NF-κB信号通路抑制因缺氧诱导的HL-1损伤。 展开更多

关键词 心肌缺血 脯氨酸羟化酶2 缺氧 实验研究

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携带EGLN1不同SNPs基因型对汉族人群适应青藏高原低氧环境的作用研究 被引量：5

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作者 李小薇 肖军 +4 位作者 范秀 刘娟 樊凤艳 雷慧芬 李翠莹 《中国输血杂志》 CAS 2019年第8期756-761,共6页

目的了解脯氨酸羟化酶2(EGLN1)基因突变位点在世居青藏高原内外的藏族和汉族中的差异及其与后者进入青藏高原后血液指标改变的相关性。方法随机挑选健康志愿者100名,BMI正常,无吸烟史,其中世居青藏高原藏族50名,男女各25名,年龄18—55(3... 目的了解脯氨酸羟化酶2(EGLN1)基因突变位点在世居青藏高原内外的藏族和汉族中的差异及其与后者进入青藏高原后血液指标改变的相关性。方法随机挑选健康志愿者100名,BMI正常,无吸烟史,其中世居青藏高原藏族50名,男女各25名,年龄18—55(33.9±8.3)岁,四川成都汉族50名,男性26名,女性24名,年龄13—45(33.6±9.2)岁。应用血液基因组DNA提取试剂盒参照试剂盒操作说明书提取100μL/人(份)DNA,共100份,应用聚合酶链式反应(PCR)结合测序技术进行EGLN1基因2个单核苷酸多态位点(SNPs)rs12097901, rs2790859检测。再随机挑选50名四川成都汉族男性健康志愿者作为高原低氧习服组,年龄19—23(20.9±1.0)岁,提取100μl/人(份)DNA,共50份,检测其进入高原前后的血常规,选择青藏高原前后Hb差值≥35 g/L、红细胞计数(RBC)差值≥1×1012/L和红细胞比容(Hct)差值≥0.1的20名作为低氧习服观察组,其余凡小于3项指标差值中任1项者共30名作为低氧习服对照组,分析汉族人群中携带不同SNPs基因型者的血红蛋白浓度(Hb)差异,并比较2组人群携带EGLN1基因单体型的差异。结果本组世居青藏高原内外的藏族和汉族人群比较,EGLN1基因rs12097901位点G、rs2790859位点C等位基因频率分别为85.0%(85/100)vs 46.0%(46/100)、20.0%(10/100)vs 49.0%(49/100)(P<0.01);单体型分析:C-C、G-T比例分别为11.74%(11.74/100)vs 46.81%(46.81/100)、76.74%(76.74/100)vs 41.81%(41.81/100)(P<0.01)。进入青藏高原前后汉族人群低氧习服观察组与低氧习服对照组EGLN1基因G-C单体型比例为0(0/40)vs 9.60%(5.75/60)(P<0.05)。结论 EGLN1基因rs12097901(C>G)和rs2790859(T>C)位点突变与世居青藏高原藏族适应高原低氧环境存在紧密相关性。汉族人进入高原后,携带EGLN1基因rs12097901和rs2790859位点G-C单体型,可避免自身红细胞过度增生导致高原红细胞增多症,利于青藏高原低氧习服。 展开更多

关键词 脯氨酸羟化酶2基因 单核苷酸多态性 高原低氧适应 汉族 藏族 血液学指标 青藏高原

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抑制脯氨酸羟化酶-2对胰腺癌吉西他滨化疗敏感性及肿瘤转移的影响

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作者 郭伟胜 付利然 +2 位作者 张娟 赵林 魏光亚 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第13期3180-3187,共8页

目的探究抑制脯氨酸羟化酶结构域(PHD)2对胰腺癌化疗敏感性与肿瘤转移的影响。方法将SW1990细胞随机分为对照组、sh-NC组和sh-PHD2组,分别使用shRNA-NC与shRNA-PHD2慢病毒感染sh-NC组和sh-PHD2组细胞,对照组细胞不进行处理,实时荧光定... 目的探究抑制脯氨酸羟化酶结构域(PHD)2对胰腺癌化疗敏感性与肿瘤转移的影响。方法将SW1990细胞随机分为对照组、sh-NC组和sh-PHD2组,分别使用shRNA-NC与shRNA-PHD2慢病毒感染sh-NC组和sh-PHD2组细胞,对照组细胞不进行处理,实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)和Western印迹检测转染效果;细胞划痕实验和Transwell小室实验检测细胞迁移与侵袭能力,免疫荧光染色检测细胞上皮-间质转化能力,细胞计数试剂盒(CCK)-8检测吉西他滨处理下的细胞存活率。将45只裸鼠随机分为3组,每组15只,通过接种转染后的SW1990细胞构建移植瘤模型,分组包括sh-NC组、sh-NC+吉西他滨组和sh-PHD2+吉西他滨组,治疗8 w后,计算肿瘤组织体积、重量及肝转移情况,苏木素-伊红(HE)染色观察肿瘤组织病理学改变,免疫组织化学染色检测肿瘤组织Ki-67表达,TUNEL染色检测肿瘤组织细胞凋亡。结果shRNA-PHD2慢病毒感染SW1990细胞后,与对照组比较,sh-PHD2组PHD2 mRNA与蛋白表达水平显著下降(P<0.05),细胞划痕愈合率显著减小,细胞迁移与侵袭数目显著减少(P<0.01),E-钙黏蛋白(cadherin)荧光表达强度增强,波形蛋白(Vimentin)荧光表达强度减弱,吉西他滨处理下的细胞存活率显著降低(P<0.01);与sh-NC组比较,sh-NC+吉西他滨组肿瘤体积与重量均显著减小,出现肝转移比例减小,肿瘤组织内Ki-67阳性率显著降低,TUNEL阳性细胞比例显著增加(P<0.01);而sh-PHD2+吉西他滨组的肿瘤体积与重量较sh-NC+吉西他滨组均显著减小,肝转移比例更少,同时,肿瘤组织内Ki-67阳性率显著降低而TUNEL阳性细胞比例显著增加(P<0.01)。结论抑制PHD2表达可在体内与体外降低胰腺癌肿瘤细胞的转移能力,并增强肿瘤细胞对吉他西滨的化疗敏感性。 展开更多

关键词 胰腺癌 脯氨酸羟化酶-2 肿瘤转移 吉西他滨 化疗敏感性

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扩张型心肌病患者外周血VEGF、PDH2、Robo4表达变化及其意义

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作者 施俊成 于怡卉 +2 位作者 王雷 王殊 赵谊 《山东医药》 CAS 2023年第33期73-76,共4页

目的观察扩张型心肌病患者外周血血管内皮生长因子(VEGF)、脯氨酸羟化酶-2(PDH2)、血管内皮细胞特异受体4(Robo4)表达变化,分析其临床意义。方法扩张型心肌病患者94例为观察组,同期健康检查者94例作为对照组,采用酶联免疫吸附法检测两... 目的观察扩张型心肌病患者外周血血管内皮生长因子(VEGF)、脯氨酸羟化酶-2(PDH2)、血管内皮细胞特异受体4(Robo4)表达变化,分析其临床意义。方法扩张型心肌病患者94例为观察组,同期健康检查者94例作为对照组,采用酶联免疫吸附法检测两组研究对象外周血VEGF、PDH2、Robo4和心衰指标B型钠尿肽前体(NTproBNP)。两组研究对象均接受经胸行多普勒超声心动图检查,测量左室功能指标,包括左室舒张末期内径(LVEDD)、左室射血分数(LVEF)。采用Pearson相关分析法分析扩张型心肌病患者外周血VEGF、PDH2、Robo4表达水平的相关性及外周血VEGF、PDH2、Robo4表达水平与NT-proBNP水平、LVEF、LVEDD的相关性。结果与对照组相比,观察组患者外周血VEGF水平、NT-proBNP水平和LVEDD升高,而Robo4水平、PDH2水平和LVEF降低。扩张型心肌病患者外周血VEGF水平与PDH2、Robo4水平负相关(r分别为-0.775、-0.774,P均<0.05)。扩张型心肌病患者外周血VEGF水平与NT-proBNP水平、LVEDD负相关(r分别为-0.885、-0.807,P均<0.05),与LVEF正相关(r=0.804,P<0.05);扩张型心肌病患者外周血PDH2水平与NT-proBNP水平、LVEDD正相关(r分别为0.664、0.772,P均<0.05),与LVEF负相关(r=-0.631,P<0.05);扩张型心肌病患者外周血Robo4水平与NT-proBNP水平、LVEDD正相关(r分别为0.670、0.587,P均<0.05),与LVEF负相关(r=-0.502,P<0.05)。结论扩张型心肌病患者外周血VEGF水平升高,Robo4、PDH2水平降低,VEGF水平与PDH2、Robo4水平呈负相关关系,且与心衰和左室功能有关。 展开更多

关键词 扩张型心肌病 血管内皮生长因子 脯氨酸羟化酶-2 血管内皮细胞特异受体4

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脯氨酸羟化酶-2对肝细胞肝癌生物学行为的影响及其机制 被引量：1

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作者 李震 王世豪 +2 位作者 姚弘虞 庞春 李捷 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期251-254,共4页

目的观察脯氨酸羟化酶-2(PHD-2)对肝细胞肝癌(HCC)生物学行为的影响并探讨机制。方法应用2006年1月至2010年12月郑州大学第一附属医院HCC患者组织建立Hep3B肝癌细胞株,建立HCC裸鼠(购自北京维通利华实验动物技术有限公司)移植瘤模型,PH... 目的观察脯氨酸羟化酶-2(PHD-2)对肝细胞肝癌(HCC)生物学行为的影响并探讨机制。方法应用2006年1月至2010年12月郑州大学第一附属医院HCC患者组织建立Hep3B肝癌细胞株,建立HCC裸鼠(购自北京维通利华实验动物技术有限公司)移植瘤模型,PHD-2沉默组利用瘤体内注射的方式将胆固醇修饰的PHD-2 RNA干扰(RNAi)注射入瘤体内,同时设立空白组(不做处理)和生理盐水对照组(注射生理盐水)进行对照研究,每4 d注射1次,观察并记录裸鼠的瘤体生长变化,开始注射药物后第16天处死裸鼠,采集瘤体标本用蛋白质印迹法(Western blot)技术检测PHD-2、p-Smad2/3及癌基因c-Myc的表达。采用免疫组织化学技术(IHC)检测220例HCC临床标本中c-Myc的表达,分析其与PHD-2以及HCC患者临床病理特征的相关性。计数资料进行χ^2检验,相关性分析采用Spearman等级相关检验。结果(1)在HCC裸鼠移植瘤模型中PHD-2沉默组裸鼠瘤体增长缓慢(F=15.607,P<0.05),差异有统计学意义。瘤体标本中PHD-2沉默组p-Smad2/3表达水平明显高于空白组和对照组(0.589±0.074比0.086±0.012、0.091±0.008,F=286.537,P<0.05),差异有统计学意义,而PHD-2沉默组c-Myc的表达水平明显低于其他两组(0.108±0.004比0.539±0.023、0.592±0.087,F=189.468,P<0.05),差异有统计学意义。(2)IHC技术检测220例HCC临床标本中PHD-2及c-Myc的表达,c-Myc的高表达与肿瘤体积较大、分化程度较低、TNM分期较晚、高水平的甲胎蛋白显著相关,与PHD-2的表达显著相关(r=0.557,P<0.01)。结论PHD-2的高表达可以促进HCC细胞在体内的增殖,PHD-2促进HCC进展的作用有可能是通过抑制TGF-β1-Smad信号通路中的p-Smad2/3表达,进而上调癌基因c-Myc的表达来实现的。 展开更多

关键词 癌 肝细胞 脯氨酸羟化酶-2 P-SMAD2/3 C-MYC

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