目的研究血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)NLPR3炎症小体激活与炎症因子白介素-1β(IL-1β)表达的影响。方法体外培养HUVECs,用AngⅡ的不同浓度和刺激时间刺激HUVECs,找到最适合的AngⅡ刺激浓度与时间。AngⅡ刺激HUV...目的研究血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)NLPR3炎症小体激活与炎症因子白介素-1β(IL-1β)表达的影响。方法体外培养HUVECs,用AngⅡ的不同浓度和刺激时间刺激HUVECs,找到最适合的AngⅡ刺激浓度与时间。AngⅡ刺激HUVECs前,预用AngⅡ受体阻断剂氯沙坦阻断AngⅡ作用;NAD(P)H抑制剂DPI或H2O2清除剂CAT降低胞内活性氧(ROS)含量;用caspase-1抑制剂YVAD阻断caspase-1作用;用NLRP3 si RNA沉默胞内NLRP3表达。运用蛋白印迹法(western blot)分别检测细胞内NOX4、NLRP3、caspase-1以及IL-1β含量。结果(1)HUVECs在浓度10-9M AngⅡ刺激12 h后,胞内NOX4、NLRP3、caspase-1以及IL-1β的蛋白表达显著增加;(2)氯沙坦、DPI、CAT、YVAD和NLRP3 si RNA都可减轻AngⅡ诱导的上述反应。结论 AngⅡ通过促进HUVECs活性氧生成,激活NLRP3炎症小体,促进胞内炎症介质IL-1βP17活性片段生成增加,诱导血管炎症的发生。展开更多
[目的]观察银杏叶提取物(GBE50)对脂多糖(LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)氧化低密度脂蛋白受体(lectin like oxidized low density lipoprotein receptor,LOX-1)表达的影响。[方法]应用LPS刺激体外培养的HUVECs 24h。RT-PCR方法检...[目的]观察银杏叶提取物(GBE50)对脂多糖(LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)氧化低密度脂蛋白受体(lectin like oxidized low density lipoprotein receptor,LOX-1)表达的影响。[方法]应用LPS刺激体外培养的HUVECs 24h。RT-PCR方法检测(lectin like oxidized low density lipoprotein receptor mRNA,LOX-1 mRNA)表达水平;采用蛋白质印迹分析检测LOX-1蛋白表达水平。[结果]LPS(1μg/mL)上调LOX-1 mRNA和蛋白表达水平,GBE50(40μg/mL)轻度抑制LPS介导的LOX-1 mRNA(P<0.005)和蛋白表达增加(但没有统计学意义,P>0.05),GBE50(80μg/mL)及NF-κB抑制剂CAPE(20μg/mL)明显抑制LOX-1 mRNA和蛋白表达上调(P<0.01)。[结论]GBE50可能通过抑制LOX-1表达,在防治动脉粥样硬化中发挥作用。展开更多
文摘目的研究血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)NLPR3炎症小体激活与炎症因子白介素-1β(IL-1β)表达的影响。方法体外培养HUVECs,用AngⅡ的不同浓度和刺激时间刺激HUVECs,找到最适合的AngⅡ刺激浓度与时间。AngⅡ刺激HUVECs前,预用AngⅡ受体阻断剂氯沙坦阻断AngⅡ作用;NAD(P)H抑制剂DPI或H2O2清除剂CAT降低胞内活性氧(ROS)含量;用caspase-1抑制剂YVAD阻断caspase-1作用;用NLRP3 si RNA沉默胞内NLRP3表达。运用蛋白印迹法(western blot)分别检测细胞内NOX4、NLRP3、caspase-1以及IL-1β含量。结果(1)HUVECs在浓度10-9M AngⅡ刺激12 h后,胞内NOX4、NLRP3、caspase-1以及IL-1β的蛋白表达显著增加;(2)氯沙坦、DPI、CAT、YVAD和NLRP3 si RNA都可减轻AngⅡ诱导的上述反应。结论 AngⅡ通过促进HUVECs活性氧生成,激活NLRP3炎症小体,促进胞内炎症介质IL-1βP17活性片段生成增加,诱导血管炎症的发生。
文摘[目的]观察银杏叶提取物(GBE50)对脂多糖(LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)氧化低密度脂蛋白受体(lectin like oxidized low density lipoprotein receptor,LOX-1)表达的影响。[方法]应用LPS刺激体外培养的HUVECs 24h。RT-PCR方法检测(lectin like oxidized low density lipoprotein receptor mRNA,LOX-1 mRNA)表达水平;采用蛋白质印迹分析检测LOX-1蛋白表达水平。[结果]LPS(1μg/mL)上调LOX-1 mRNA和蛋白表达水平,GBE50(40μg/mL)轻度抑制LPS介导的LOX-1 mRNA(P<0.005)和蛋白表达增加(但没有统计学意义,P>0.05),GBE50(80μg/mL)及NF-κB抑制剂CAPE(20μg/mL)明显抑制LOX-1 mRNA和蛋白表达上调(P<0.01)。[结论]GBE50可能通过抑制LOX-1表达,在防治动脉粥样硬化中发挥作用。
