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呼吸机相关肺炎内源性感染途径的分子流行病学研究 被引量:153
1
作者 李华茵 何礼贤 +3 位作者 胡必杰 王葆青 陈雪华 马伟 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 2004年第2期121-125,共5页
目的 用分子流行病学方法研究呼吸机相关肺炎 (VAP)内源性感染途径在VAP发病机制中的作用 ,为探索和发展全新的VAP预防措施提供理论依据。方法 通过前瞻性队列研究 ,动态采集重症监护病房 (ICU)人工气道 (artificialairway ,AA)包括... 目的 用分子流行病学方法研究呼吸机相关肺炎 (VAP)内源性感染途径在VAP发病机制中的作用 ,为探索和发展全新的VAP预防措施提供理论依据。方法 通过前瞻性队列研究 ,动态采集重症监护病房 (ICU)人工气道 (artificialairway ,AA)包括气管插管或气管切开患者胃腔、口咽部、下呼吸道标本行病原菌培养和药敏试验 ;筛选VAP患者中下呼吸道、胃液和 (或 )咽拭子标本中所分病原菌生化反应结果相同并有先后定植次序者 ;通过PFGE方法分析这些病原菌是否具有同源性。结果  98例人工气道机械通气患者中 5 2例发生VAP ;表型分析 5 2例VAP患者有 13例下呼吸道病原菌呈现胃腔→口咽部→下呼吸道的逆向定植次序 ;3例出现胃腔→下呼吸道的定植次序 ;病原菌的PFGE同源性分析表明ICU中 5 2例VAP患者有 15例 (其中 14例为晚发性VAP)存在胃腔→下呼吸道逆向内源性感染途径 ,占VAP发病总数的 2 8 8% ;PFGE技术方法为分析病原菌同源性的有效方法。结论 病原菌的PFGE同源性分析表明ICU中VAP患者存在胃腔→下呼吸道逆向内源性感染途径。 展开更多
关键词 呼吸机 肺炎 分子流行病学 脉冲凝胶电泳
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脉冲场凝胶电泳技术(PFGE)在分子分型中的应用现状 被引量:129
2
作者 王丽丽 徐建国 《疾病监测》 CAS 2006年第5期276-279,共4页
关键词 脉冲凝胶电泳 分子分型 应用
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北京和广州地区四家医院不动杆菌碳青霉烯酶基因型研究 被引量:121
3
作者 王辉 孙宏莉 +5 位作者 廖康 陈冬梅 王清涛 王飞燕 陈民钧 朱元珏 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期636-641,共6页
目的调查北京、广州地区不动杆菌属对碳青霉烯类的耐药性,确定其耐药株产生的碳青霉烯酶的基因型。方法用WHONET5软件分析1999—2002年北京、广州两地不动杆菌的耐药性;从北京、广州4家医院收集对亚胺培南耐药且具有多重耐药性的不动杆... 目的调查北京、广州地区不动杆菌属对碳青霉烯类的耐药性,确定其耐药株产生的碳青霉烯酶的基因型。方法用WHONET5软件分析1999—2002年北京、广州两地不动杆菌的耐药性;从北京、广州4家医院收集对亚胺培南耐药且具有多重耐药性的不动杆菌39株;等电聚焦电泳测定酶的等电点;碱裂解法提取质粒;脉冲场凝胶电泳(PFGE)确定耐药株的亲缘关系;对TEM、SHV型基因及碳青霉烯酶基因OXA、IMP、VIM进行聚合酶链式反应(polymerasechainreaction,PCR)及序列分析。结果近4年北京协和医院分离的鲍曼不动杆菌对亚胺培南的耐药性在1.8%~8.5%之间。多重耐药(即3种以上的抗生素耐药)的菌株从1995年的5%升至2002年的67%,最常见的多重耐药模式为同时对头孢他啶、庆大霉素、哌拉西林/三唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦及环丙沙星耐药的菌株(占44%)。广州中山医科大学附属第一医院多重耐药株从1998年的20%升至2002年的57%,同时对上述4~5个药耐药的达35%。39株亚胺培南耐药株均不含质粒,接合试验证实亚胺培南的耐药基因不能转移。所有测定菌产多种β内酰胺酶:TEM1酶、高产AmpC酶、SHV型酶及pI为6.7,6.0的2个酶。PCR及序列分析证实35株菌产生OXA23型碳青霉烯酶(pI为6.7),有3株携带PER1型酶。PFGE发现在4家医院均有耐药株的克隆传播,并且常见于医院呼吸机相关肺炎及外科术后感染。结论北京、广州两地对亚胺培南耐药的不动杆菌,绝大多数产生OXA23型碳青霉烯酶,亚胺培南耐药株的增加主要由耐药克隆株播散所致。 展开更多
关键词 碳青霉烯酶 广州地区 基因型 北京 哌拉西林/三唑巴坦 头孢哌酮/舒巴坦 2002年 脉冲凝胶电泳 聚合酶链式反应 呼吸机相关肺炎 OXA-23型 亚胺培南 鲍曼不动杆菌 附属第一医院 中山医科大学 产AMPC酶 PER-1型 SHV型 序列分析
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MRSA呼吸系统医院感染的分子流行病学调查 被引量:76
4
作者 吴礼襄 萧正伦 黎毅敏 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 2004年第4期453-457,共5页
目的 对广州呼吸疾病研究所 2 0 0 1年 7月~ 2 0 0 3年 3月间 ,金黄色葡萄球菌引起的呼吸系统医院感染进行病原学监测。方法 收集临床分离菌株 ,应用脉冲场凝胶电泳的方法 (PFGE)进行分型 ,确定菌株亲缘关系 ,结合临床资料分析。结... 目的 对广州呼吸疾病研究所 2 0 0 1年 7月~ 2 0 0 3年 3月间 ,金黄色葡萄球菌引起的呼吸系统医院感染进行病原学监测。方法 收集临床分离菌株 ,应用脉冲场凝胶电泳的方法 (PFGE)进行分型 ,确定菌株亲缘关系 ,结合临床资料分析。结果 在各种呼吸道采集标本中共收集到 76株金黄色葡萄球菌 ,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA) 6 8株 ,占金黄色葡萄球菌检出率 89.4 7%,MRSA在我所病区中引起 5 9例医院感染 ,属于暴发形式发病的有 2 3例 ,属于聚集性发病的有 19例 ,散发病例 17例 ,PFGE分型表明 ,绝大多数MRSA属于同一型 (A型 )共有 6 0株 ,其中A1亚型 2 8株 ,A2亚型 14株 ,A3亚型 17株 ,A4亚型 1株。结论 MRSA引起的呼吸系统医院感染十分严重 ,并主要由少数菌株的传播引起 ,及时采取有效措施控制MRSA的流行和播散非常必要。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 甲氧西林耐药 暴发流行 医院感染 脉冲凝胶电泳 基因分型
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甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌耐药性及分子流行病学调查 被引量:61
5
作者 孙宏莉 王辉 陈民钧 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期137-141,共5页
目的 了解甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌 (MRSA)的耐药性及分子流行病学特点。方法 采用纸片扩散法及琼脂稀释法检测 2 0 0 2年从北京协和医院住院患者分离的 1 6 5株MRSA的耐药性 ;采用脉冲场凝胶电泳 (PFGE)技术对其中重症监护病房 ... 目的 了解甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌 (MRSA)的耐药性及分子流行病学特点。方法 采用纸片扩散法及琼脂稀释法检测 2 0 0 2年从北京协和医院住院患者分离的 1 6 5株MRSA的耐药性 ;采用脉冲场凝胶电泳 (PFGE)技术对其中重症监护病房 (ICU)和呼吸重症监护病房 (RCU)分离的6 5株MRSA作同源性分析。结果  1 6 5株MRSA对万古霉素和替考拉宁的敏感率为 1 0 0 %,对庆大霉素的耐药率为 1 0 0 %;对左氧氟沙星、四环素、红霉素耐药率分别为 98.2 %、96 .3%、93.9%。对甲氧苄啶 磺胺甲唑和氯霉素敏感率分别为 95 .8%及 98.8%;ICU和RCU病房分离MRSA的PFGE图谱有 5种类型 (A~E型 ) ,以A型为主 (5 6株 ) ,A型又包括A1亚型 (5 5株 )和A2亚型 (1株 )。结论 医院获得性MRSA是多重耐药菌 ,在ICU和RCU病房发生了基因型为A1亚型的MRSA菌株暴发流行。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 甲氧西林耐药 分子流行病学调查 耐药性 重症监护病房(ICU) 呼吸重症监护病房 脉冲凝胶电泳 获得性MRSA 流行病学特点 北京协和医院 MRSA菌株 2002年 琼脂稀释法 纸片扩散法 同源性分析 左氧氟沙星 磺胺甲噁唑
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产碳青霉烯酶KPC-2肺炎克雷伯菌局部流行 被引量:61
6
作者 冯雅君 沈萍 +2 位作者 杜小幸 俞云松 李兰娟 《浙江医学》 CAS 2008年第9期923-925,930,共4页
目的了解我院对碳青霉烯类抗生素敏感性下降的肺炎克雷伯菌的耐药机制及其同源性分析。方法收集2006年3月~9月我院对碳青霉烯类抗生素敏感性下降的肺炎克雷伯菌共10株,采用Etest法测定细菌对各抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC);通过等电聚... 目的了解我院对碳青霉烯类抗生素敏感性下降的肺炎克雷伯菌的耐药机制及其同源性分析。方法收集2006年3月~9月我院对碳青霉烯类抗生素敏感性下降的肺炎克雷伯菌共10株,采用Etest法测定细菌对各抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC);通过等电聚焦电泳(IEF)检测所产生的β-内酰胺酶,并通过聚合酶链反应(PCR)及序列分析确定其基因型;接合试验和Southern杂交进行基因定位;采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)对这些菌株进行同源性分析。结果10株肺炎克雷伯菌均产KPC-2(pI6.7)、DHA-1(pI7.8)和SHV-28(pI7.6),其中3株同时产TEM-1广谱酶(pI5.4)。blaKPC-2位于60kb左右可接合性质粒上。10株菌株对β-内酰胺类抗生素呈多重耐药,但对多黏菌素,替加环素,复方SMZ敏感。PFGE证实为同一克隆株的传播。结论质粒介导的KPC-2造成肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素敏感性下降,并在我院短暂流行;携带KPC-2基因的临床菌株同时携带多种耐药基因。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 碳青霉烯酶 脉冲凝胶电泳
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肠球菌的耐药性及脉冲场凝胶电泳分型研究 被引量:56
7
作者 张群智 周惠平 《中华医学检验杂志》 CSCD 1998年第2期73-75,共3页
目的研究临床分离的肠球菌对常用抗生素的耐药性及肠球菌与感染性疾病的关系。方法应用纸片扩散法检测从临床标本中分离的311株肠球菌的耐药性;脉冲场凝胶电泳(PFGE)对细菌分型;病例回顾性分析。结果肠球菌对临床常用的15... 目的研究临床分离的肠球菌对常用抗生素的耐药性及肠球菌与感染性疾病的关系。方法应用纸片扩散法检测从临床标本中分离的311株肠球菌的耐药性;脉冲场凝胶电泳(PFGE)对细菌分型;病例回顾性分析。结果肠球菌对临床常用的15种抗生素的耐药率以万古霉素最低;其次为氨苄西林/舒巴坦耐药率为17.4%;亚胺硫霉素耐药率为18.3%。粪肠球菌与屎肠球菌对抗生素的耐药率有明显差异。应用PFGE法将粪肠球菌分为A型及亚型、B型、C型及亚型、D型,屎肠球菌分为A、B、C型。结论肠球菌对临床常用的15种抗生素的敏感性以万古霉素最敏感。肠球菌引起的不同系统感染,以泌尿系统最常见。PFGE对肠球菌感染流行监测是一个有力的工具。 展开更多
关键词 肠球菌 耐药性 脉冲凝胶电泳 抗生素
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亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌同源性及碳青霉烯酶研究 被引量:47
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作者 杜小幸 张幸国 +3 位作者 周华 俞云松 陈亚岗 李兰娟 《中国感染与化疗杂志》 CAS 2006年第4期231-235,共5页
目的明确我院临床分离亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌的耐药性、同源性及碳青霉烯酶基因型。方法收集我院2003年8月-2004年12月分离的95株亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌。琼脂稀释法和E试验法测定15种抗菌药物的MIC值;脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析... 目的明确我院临床分离亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌的耐药性、同源性及碳青霉烯酶基因型。方法收集我院2003年8月-2004年12月分离的95株亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌。琼脂稀释法和E试验法测定15种抗菌药物的MIC值;脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株的同源性;PCR扩增及克隆测序分析碳青霉烯酶基因型;接合试验、质粒抽提及Southern杂交完成亚胺培南耐药基因定位。结果95株鲍曼不动杆菌对氨苄西林-舒巴坦、头孢哌酮-舒巴坦两个含舒巴坦制剂耐药率分别为67.9%、30.2%,对多黏菌素E耐药率最低,为17%,对其他抗菌药物的耐药率均在90%以上。95株鲍曼不动杆菌分离自10个临床科室,均产OXA-23碳青霉烯酶,PFGE分型共分为6型,以A、B型为主。碱裂解法反复抽提均未得到质粒,多次接合试验未成功。Southern杂交证实A、B克隆的oxa-23耐药基因位于细菌染色体约220 kb、200 kb大小的Apal酶切片段上。结论产OXA-23型碳青霉烯酶鲍曼不动杆菌已成为我院医院感染的重要病原菌,在我院多个科室播散,且以A、B克隆为主。oxa-23耐药基因位于染色体上。 展开更多
关键词 鲍曼不动杆菌 碳青霉烯酶 脉冲凝胶电泳
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呼吸机相关性肺炎感染途径分子流行病学研究 被引量:49
9
作者 郭伟 崔生辉 +2 位作者 李景云 马越 张杰 《国际呼吸杂志》 2011年第13期1010-1013,共4页
目的用分子流行病学方法研究呼吸机相关性肺炎(vcntilator associated pneumonia ,VAP)各种感染途径在其发病机制中的作用。方法采集ICU置入人工气道行机械通气的患者下呼吸道标本、口咽分泌物、气囊上滞留物、胃液、呼吸机机管路标... 目的用分子流行病学方法研究呼吸机相关性肺炎(vcntilator associated pneumonia ,VAP)各种感染途径在其发病机制中的作用。方法采集ICU置入人工气道行机械通气的患者下呼吸道标本、口咽分泌物、气囊上滞留物、胃液、呼吸机机管路标本、空气标书。从护理人员手上采集标本进行细菌培养和表型分析:再通过脉冲场凝胶电泳(pulse field gel electrophoresis,PFGE)办法分析所分离菌株是否具有同源性。结果48例患者中22例发生VAP,其下呼吸道标本细菌培养17例阳性,以G-性菌为主,其中铜绿假单胞菌居首位。且为多重耐药菌;对9例患者来源菌株行PFGE分析.6例气囊上滞留物分离菌株与相应下呼吸道分离菌株为同一PFGE型,5例胃液分离菌株与相应下呼吸道分离菌株为H—PFGE型,3例呼吸机管路样品分离菌株与相应下呼吸道分离菌株为同一PFGE型.2例口咽部分泌物分离菌株与相应下呼吸道分离菌株为同-PFGE型。结论VAP患者下呼吸道病原体与气囊上滞留物、胃液分离菌有很高的同源性.在感染源的防治上应列为重中之重。 展开更多
关键词 呼吸机 肺炎 分子流行病学 脉冲凝胶电泳 同源性分析
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肺炎克雷伯菌介导碳青霉烯类耐药的基因型检测 被引量:35
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作者 蒯守刚 邵海枫 +4 位作者 王卫萍 史利宁 张小卫 范明 黄梅 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期358-361,共4页
目的对临床分离的碳青霉烯类抗生素耐药的肺炎克雷伯菌进行耐药基因型分析。方法采用琼脂稀释法检测菌株最低抑菌浓度(MIC),用聚合酶链反应(PCR)、DNA测序、脉冲场琼脂糖凝胶电泳(PFGE)、等电点聚焦电泳(IEF)和质粒分子杂交等... 目的对临床分离的碳青霉烯类抗生素耐药的肺炎克雷伯菌进行耐药基因型分析。方法采用琼脂稀释法检测菌株最低抑菌浓度(MIC),用聚合酶链反应(PCR)、DNA测序、脉冲场琼脂糖凝胶电泳(PFGE)、等电点聚焦电泳(IEF)和质粒分子杂交等技术对实验菌株进行基因组DNA同源性、介导耐药的基因型、耐药酶pI和耐药基因携带状态等研究。结果12株肺炎克雷伯菌的亚胺培南和美罗培南MIC值分别为16~64μg/Inl和8—256μg/ml;对其他被测的β-内酰胺类和喹诺酮类药物广泛耐药,氨基糖苷类耐药型不定。12株菌均扩增出编码碳青霉烯类抗生素耐药的blaKPC-2。和编码β-内酰胺酶的blas SHV基因;部分菌株扩增出blaTEM或/和blaCTX-M基因。IEF和分子杂交揭示KPC-2的等电点为6.8,编码基因被携带在一个约56kb大小的质粒上;PFGE结果显示12株细菌可分为2个克隆型。结论产KPC-2型碳青霉烯酶是本院肺炎克雷伯菌耐碳青霉烯类药物的主要原因,垂直传播以及通过质粒传递耐药基因可能是其在本医院流行的主要方式。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 肺炎克雷伯菌耐碳青霉烯酶(KPC) 质粒 脉冲凝胶电泳
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脉冲场凝胶电泳分型技术在追溯O139霍乱传染来源中的应用 被引量:35
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作者 刘红露 张京云 +5 位作者 冯泽惠 李伟 崔志刚 章丽娟 祝小平 阚飙 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期102-106,共5页
目的分析四川省2004年7起因聚餐暴发霍乱疫情的分离菌株之间,及其与常规监测中从外环境、水产品中分离的霍乱弧菌之间的分子分型特征和遗传相关性,查找霍乱传染来源。方法利用聚合酶链反应检测霍乱毒力基因(ctxAB),用脉冲场凝胶电泳(PF... 目的分析四川省2004年7起因聚餐暴发霍乱疫情的分离菌株之间,及其与常规监测中从外环境、水产品中分离的霍乱弧菌之间的分子分型特征和遗传相关性,查找霍乱传染来源。方法利用聚合酶链反应检测霍乱毒力基因(ctxAB),用脉冲场凝胶电泳(PFGE)对菌株进行分子分型,所得结果以BioNumerics V4.0软件UPGMA方法进行聚类分析。结果所试72株O139群霍乱弧菌中所有4株从河水分离的菌株ctxAB阴性,其余均具有ctxAB,为产毒株。对其中的67株菌以NotⅠ酶切后PFGE可分为16个型别。从甲鱼分离的O139群霍乱弧菌与同期流行的O139群霍乱弧菌优势PFGE型别一致,并且也为产毒株。7起暴发中分离的菌株型别各不相同。结论2004年四川省O139霍乱暴发感染来源复杂,提示并非因为菌株在该地持续存在而引起,但甲鱼可能是2004年度霍乱聚餐暴发的主要传染来源之一。 展开更多
关键词 霍乱 脉冲凝胶电泳 分子分型
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深圳市腹泻人群致泻性大肠埃希菌流行及病原特征研究 被引量:33
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作者 李迎慧 邱亚群 +7 位作者 冼慧霞 石晓路 林一曼 陈琼城 江敏 姜伊祥 胡璐璐 扈庆华 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期115-118,共4页
目的了解深圳地区腹泻患者中致泻性大肠埃希菌(DEC)的流行状况及病原特征。方法对2014年深圳市4家哨点医院门诊急性腹泻患者粪便标本进行DEC的分离、分子鉴定、血清分群及PFGE分型。结果1823份粪便标本中分离到74株DEC,阳性分离率为4... 目的了解深圳地区腹泻患者中致泻性大肠埃希菌(DEC)的流行状况及病原特征。方法对2014年深圳市4家哨点医院门诊急性腹泻患者粪便标本进行DEC的分离、分子鉴定、血清分群及PFGE分型。结果1823份粪便标本中分离到74株DEC,阳性分离率为4.06%;感染病例年龄分布以〈3岁的婴幼儿及20~39岁中青年为主,病例集中在5—9月夏秋季。以肠产毒性大肠埃希菌(ETEC)和肠致病性大肠埃希菌(EPEC)为主,分别占45.9%和31.1%。ETEC以0159最多,2株及以上PFGE带型一致的菌株有5簇;其他型别DEC血清型和PFGE带型均较分散。结论2014年深圳地区腹泻病患者DEC的感染类型以ETEC和EPEC为主,存在年龄及季节分布特征,菌株的血清型及PFGE分子带型较分散,应警惕ETEC的暴发风险。 展开更多
关键词 致泻性大肠埃希菌 毒力基因 脉冲凝胶电泳
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两起肠炎沙门菌所致食物中毒的病原学研究及溯源分析 被引量:33
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作者 王炳发 曹春远 +4 位作者 陈前进 林英华 廖琳虹 何春荣 李美华 《中国食品卫生杂志》 2016年第1期32-36,共5页
目的探讨两起同地区连续发生的肠炎沙门菌食物中毒分离株之间的分子流行病学关系。方法参照GB 4789.4—2010《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》方法进行病原分离培养,对检出菌株进行表型鉴定;用VITEK-ⅡCompact全自动微... 目的探讨两起同地区连续发生的肠炎沙门菌食物中毒分离株之间的分子流行病学关系。方法参照GB 4789.4—2010《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》方法进行病原分离培养,对检出菌株进行表型鉴定;用VITEK-ⅡCompact全自动微生物分析系统检测菌株抗生素敏感性;采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术对检出菌株进行分子分型和流行病学特征分析。结果共检出23株肠炎沙门菌,其中从25份患者肛拭样本中检出17株,8份从业人员肛拭样本中检出2株,8份留样食物中检出3株,厨具涂抹样本中检出1株。23株肠炎沙门菌血清抗原式均相同(9∶g,m∶-);生物学性状和药敏试验结果基本一致;PFGE图谱带型完全一致(相似度为100%),且与当地散发病例PFGE图谱带型相似。结论综合流行病学调查、病原学检测和分子分型结果,证实这两起食物中毒是由同一来源的肠炎沙门菌污染所引起。 展开更多
关键词 肠炎沙门菌 食源性疾病 脉冲凝胶电泳 耐药性 食源性致病菌 食物中毒 分子分型 溯源
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耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的耐药机制与分子流行病学特征 被引量:32
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作者 张志军 鹿麟 +3 位作者 牛法霞 赵珂 姜梅杰 赵书平 《中国感染控制杂志》 CAS 北大核心 2018年第9期759-763,共5页
目的了解耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)的碳青霉烯酶基因携带情况及分子流行病学特点,为医院感染控制和临床治疗提供实验室依据。方法收集山东省泰安市中心医院2014年1—11月临床分离的CRKP 13株,采用Walk Away 96 PLUS型全自动细菌... 目的了解耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)的碳青霉烯酶基因携带情况及分子流行病学特点,为医院感染控制和临床治疗提供实验室依据。方法收集山东省泰安市中心医院2014年1—11月临床分离的CRKP 13株,采用Walk Away 96 PLUS型全自动细菌分析仪进行细菌鉴定和药敏试验;改良Hodge试验及EDTA协同试验进行碳青霉烯酶表型的确认;采用多聚酶链反应(PCR)方法扩增相关碳青霉烯类耐药基因(bla KPC、bla IMP、bla VIM、bla GIM及bla NDM-1)并测序;采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)和多位点序列分型(MLST)调查菌株的克隆相关性并进行流行病学比较。结果 13株CRKP主要来源于痰(7株,53.85%)及尿(4株,30.77%),对复方磺胺甲口恶唑、四环素的耐药率较低(均<40%),对其他抗菌药物(除阿米卡星)的耐药率均>70%,对碳青霉烯类药物的耐药率均为100%;13株细菌改良Hodge试验均为阳性,5株细菌EDTA协同试验阳性;经PCR测序确认,碳青霉烯酶基因中,bla KPC基因最常见(13/13),其次为bla NDM-1基因(5/13),未发现其基因bla IMP、bla VIM和bla GIM;PFGE聚类结果显示,13株肺炎克雷伯菌被分为5型,主要为C型(9/13),且均属于ST11,其他分别为ST37、ST626、ST628和ST668型。结论碳青霉烯酶基因bla KPC与bla NDM-1是引起该院肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素耐药的主要原因,ST11是主要的克隆类型,医院需尽快强化医院感染预防控制措施。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 分子流行病学 耐药机制 碳青霉烯酶 脉冲凝胶电泳 多位点序列分型 同源性
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北京市食源性金黄色葡萄球菌耐药及分子分型研究 被引量:31
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作者 王迪 张晓嫒 +2 位作者 陈倩 陆峥 王丽丽 《中国食品卫生杂志》 北大核心 2014年第5期428-434,共7页
目的分析北京市食源性金黄色葡萄球菌对常用抗生素的耐药情况及其分子分型特征,预防和控制由该菌引起的食源性疾病,为临床合理用药提供依据。方法收集2010—2012年北京地区食源性致病菌监测网分离到的金黄色葡萄球菌187株,采用微量肉汤... 目的分析北京市食源性金黄色葡萄球菌对常用抗生素的耐药情况及其分子分型特征,预防和控制由该菌引起的食源性疾病,为临床合理用药提供依据。方法收集2010—2012年北京地区食源性致病菌监测网分离到的金黄色葡萄球菌187株,采用微量肉汤稀释法检测金黄色葡萄球菌对8种常用抗生素的敏感性。采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行分子分型。结果 116株金黄色葡萄球菌表现出对抗生素耐药,耐药率为62.03%,对抗生素的耐药率为红霉素(ERY)45.45%、苯唑西林(OXA)27.81%、克林霉素(CLI)20.86%、四环素(TET)13.90%、氯霉素(CHL)11.76%、环丙沙星(CIP)6.42%、甲氧苄啶/磺胺甲恶唑(TPM/SMZ)5.88%。其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)52株、对甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(MSSA)135株。分离到的MRSA中34株菌表现出多重耐药。全部菌株共分为129种PFGE带型,优势带型不明显。结论食源性金黄色葡萄球菌的耐药和多重耐药普遍存在,PFGE带型分布分散与耐药谱的关联性较差。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 耐药 微量肉汤稀释法 脉冲凝胶电泳 食源性致病菌 分子分型
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肠杆菌科细菌产碳青霉烯酶的主要类型和流行病学分析 被引量:31
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作者 张芳芳 王晓丽 +2 位作者 瞿洪平 倪语星 孙景勇 《中国感染与化疗杂志》 CAS 北大核心 2014年第6期521-525,共5页
目的了解对碳青霉烯类抗生素耐药的肠杆菌科细菌(CRE)中碳青霉烯酶的主要类型及流行情况。方法收集上海瑞金医院2011年5月至2013年6月对亚胺培南或美罗培南药敏纸片抑菌圈直径≤22 mm的CRE共114株,采用PCR方法扩增常见的碳青霉烯酶基因(... 目的了解对碳青霉烯类抗生素耐药的肠杆菌科细菌(CRE)中碳青霉烯酶的主要类型及流行情况。方法收集上海瑞金医院2011年5月至2013年6月对亚胺培南或美罗培南药敏纸片抑菌圈直径≤22 mm的CRE共114株,采用PCR方法扩增常见的碳青霉烯酶基因(blaKPC、blaIMP、blaOXA-48、blaVIM、blaNDM)并对PCR扩增产物进行测序;所有菌株均进行了质粒接合试验;采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)对KPC-2检测阳性的肺炎克雷伯菌进行同源性分析。结果 114株CRE以肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌和肠杆菌属细菌为主,其中98株产碳青霉烯酶,以KPC-2酶为主要类型(78/98)、其次为IMP-4酶(15/98),IMP-8酶(2/98),1株肺炎克雷伯菌同时携带有blaKPC-2和blaIMP-4基因,还发现4株产NDM-1酶的菌株,未见OXA-48酶及VIM酶阳性菌株。21株(21.4%,21/98)CRE菌株转移接合试验成功。PFGE结果显示49株blaKPC-2阳性肺炎克雷伯菌共分为12个型,其中34株属于同一谱型(type A)。CRE菌株主要分离自ICU,共39株,其次为普外科14株,血液科11株,呼吸科9株,其余科室共41株。结论本次分离的肠杆菌科细菌所产碳青霉烯酶的基因型以blaKPC-2为主,其次为blaIMP-4,并发现4株blaNDM-1阳性CRE菌株,产KPC-2酶的肺炎克雷伯菌在外科ICU、呼吸科及胸外科等科室间存在克隆株的流行传播,应采取及时有效的防控措施。 展开更多
关键词 肠杆菌科 碳青霉烯酶 质粒接合试验 脉冲凝胶电泳
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脉冲场凝胶电泳技术简介及其在细菌分子分型中的应用 被引量:29
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作者 叶蕊 石丽媛 +1 位作者 王鹏 宋志忠 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS CSCD 2013年第2期182-185,共4页
目前可用于细菌分子分型的方法较多,脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术以其重复性好、分辨力强的优势被作为细菌分子分型的"金标准"广泛应用;利用PFGE技术对细菌进行分型并分析细菌间分型结果的差异,可以有效地对疾病进行监测,追溯疾... 目前可用于细菌分子分型的方法较多,脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术以其重复性好、分辨力强的优势被作为细菌分子分型的"金标准"广泛应用;利用PFGE技术对细菌进行分型并分析细菌间分型结果的差异,可以有效地对疾病进行监测,追溯疾病的感染来源,明确感染途径,追溯其遗传特征,为细菌性疾病的预防与控制提供分子生物学证据。 展开更多
关键词 脉冲凝胶电泳 细菌 分子分型 应用
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鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶基因型及分子流行病学研究 被引量:28
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作者 裘莉佩 潘登 +3 位作者 徐炜烽 周华 魏泽庆 俞云松 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期381-384,共4页
目的研究宁波地区3家综合性医院临床分离亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌的耐药性、同源性及碳青霉烯酶基因型。方法收集宁波市李惠利医院、宁波市第一人民医院、宁波市第二人民医院碳青霉烯类抗生素耐药鲍曼不动杆菌28株。琼脂稀释法和E-tes... 目的研究宁波地区3家综合性医院临床分离亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌的耐药性、同源性及碳青霉烯酶基因型。方法收集宁波市李惠利医院、宁波市第一人民医院、宁波市第二人民医院碳青霉烯类抗生素耐药鲍曼不动杆菌28株。琼脂稀释法和E-test法测定14种抗菌药物的最小抑菌浓度值;脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株同源性;PCR及克隆测序分析碳青霉烯酶基因型。结果28株鲍曼不动杆菌对多粘菌素E耐药率最低为4.7%,头孢哌酮/舒巴坦为87%,其余抗菌药物耐药率均高于90%耐药。PFGE分型共分为4型,以A、B两型为主。28株鲍曼不动杆菌中均产OXA-23碳青霉烯酶基因,未检测到VIM、IMP型金属酶基因。结论宁波地区碳青霉烯抗生素耐药鲍曼不动杆菌均产OXA-23型碳青霉烯酶,3家医院均有克隆播散流行。 展开更多
关键词 鲍曼不动杆菌 脉冲凝胶电泳 流行病学 分子
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广西罗非鱼链球菌病流行菌株PCR鉴定和PFGE基因型分析 被引量:27
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作者 李莉萍 王瑞 +7 位作者 黄婷 黄维义 梁万文 李健 黄彦 雷爱莹 甘西 陈明 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期927-935,共9页
为获知近年广西罗非鱼链球菌病流行菌种及其基因型变化信息,采用特异PCR方法对2006—2012年从广西发病罗非鱼分离获得的77株临床菌株进行鉴定,并通过脉冲电场凝胶电泳(PFGE)对2006—2011年分离获得的37株流行菌株进行基因型分析。结果显... 为获知近年广西罗非鱼链球菌病流行菌种及其基因型变化信息,采用特异PCR方法对2006—2012年从广西发病罗非鱼分离获得的77株临床菌株进行鉴定,并通过脉冲电场凝胶电泳(PFGE)对2006—2011年分离获得的37株流行菌株进行基因型分析。结果显示,其中20株鉴定为海豚链球菌其余57株鉴定为无乳链球菌。2006—2007年获得的19株流行菌株中有18株为海豚链球菌(94.7%),仅1株无乳链球菌;2009—2012年分离的58株流行菌株中56株为无乳链球菌(96.6%),仅2株海豚链球菌。PFGE图谱聚类显示,海豚和无乳链球菌分别聚类为两个大分支,20株海豚链球菌共产生4种PFGE带型,带型相似度为83.9%~100%;17株无乳链球菌共产生5种PFGE带型,带型相似度为47.4%~100%。研究表明,广西罗非鱼链球菌病流行菌种已从过去(2008年前)以海豚链球菌为主转变为现在(2009—2012年)以无乳链球菌为主;流行菌株PFGE基因型存在多样性。 展开更多
关键词 罗非鱼 无乳链球菌 海豚链球菌 脉冲凝胶电泳 基因型
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绿脓假单胞菌脉冲场凝胶电泳分型及耐药性研究 被引量:25
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作者 胡云建 陈戈林 +5 位作者 福地邦彦 和久田梨香 高木康 五味邦英 张秀珍 杨振华 《中华医学检验杂志》 CSCD 1998年第6期342-344,共3页
目的探讨绿脓假单胞菌的分型,及其耐药性。方法使用脉冲场凝胶电泳技术对绿脓假单胞菌进行基因型分型,结合血清学试验和药物敏感试验进行分析。结果192株绿脓假单胞菌中16株为多耐药株,对11种抗生素中8种以上耐药;对多种抗... 目的探讨绿脓假单胞菌的分型,及其耐药性。方法使用脉冲场凝胶电泳技术对绿脓假单胞菌进行基因型分型,结合血清学试验和药物敏感试验进行分析。结果192株绿脓假单胞菌中16株为多耐药株,对11种抗生素中8种以上耐药;对多种抗生素耐药株无特定的血清型。脉冲场凝胶电泳分出18个基因型;基因型带不同,相应的细菌对磷霉素或喹诺酮类抗生素的最低抑菌浓度亦不同。结论脉冲场凝胶电泳分出的基因型有可能与细菌耐药基因有关。 展开更多
关键词 绿脓假单胞菌 耐药性 脉冲凝胶电泳
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