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猪脂肪间充质干细胞的分离培养及其成脂分化 被引量：8
1
作者 张国华 屈长青 杨公社 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第5期934-941,共8页
脂肪间充质干细胞(Adipose mesenchymal stemcell,AMSCs)是一类来源于脂肪组织并具有多向分化潜能的干细胞。近年来的研究证明,脂肪组织具有取材方便和干细胞含量高的优势,有望在研究与应用领域成为骨髓干细胞的替代物。猪是一种比啮齿... 脂肪间充质干细胞(Adipose mesenchymal stemcell,AMSCs)是一类来源于脂肪组织并具有多向分化潜能的干细胞。近年来的研究证明,脂肪组织具有取材方便和干细胞含量高的优势,有望在研究与应用领域成为骨髓干细胞的替代物。猪是一种比啮齿类更接近人类的模式动物,具有较强的脂肪沉积能力。本研究探讨了猪脂肪间充质干细胞的体外分离纯化、培养扩增和向脂肪细胞诱导分化的条件。采用Ⅰ型胶原酶消化分离脂肪微管基质成分,传代培养扩增,流式细胞仪检测细胞表面标记。取第3-7代AMSCs,采用不同方法诱导AMSCs向脂肪细胞分化,光学显微镜下可观察到诱导后的细胞内有高折光性的小脂滴出现,油红O染色成阳性,不同诱导方法诱导率不同。被诱导细胞用RT-PCR可检测到脂肪细胞分化标志基因LPL和PPARγ的表达。结果表明可以从脂肪组织中分离培养出AMSCs,经传代后可提高其纯度。CD44、CD105表达呈阳性,CD14、CD34、S-100、HLA-DR呈阴性,在合适的诱导条件下,可向脂肪细胞分化。 展开更多
关键词 猪 脂肪间充质于细胞 脂肪细胞 分化
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体外培养的人脂肪间充质干细胞生物学特性的研究 被引量：22
2
作者 李春明 刘毅 《中国美容医学》 CAS 2007年第2期159-162,共4页
目的:了解体外培养的人脂肪间充质干细胞的生物学特性及其体外成脂和成骨的能力。方法:体外培养人脂肪间充质干细胞并传代计数,行成骨和成脂诱导,流式细胞仪检测其细胞增殖周期与表面分子。结果:人脂肪干细胞经过体外培养均一的阳性表达... 目的:了解体外培养的人脂肪间充质干细胞的生物学特性及其体外成脂和成骨的能力。方法:体外培养人脂肪间充质干细胞并传代计数,行成骨和成脂诱导,流式细胞仪检测其细胞增殖周期与表面分子。结果:人脂肪干细胞经过体外培养均一的阳性表达CD44、CD106,而CD49d、CD34、CD45和HLA-DR表达阴性。细胞周期分析表明:G0/G1、S和G2/M所占比例分别为79.1%、19.7%和1.3%。分离细胞在诱导体系下可以向成骨和成脂方向分化。结论:脂肪间充质干细胞具有特殊的生物学特点,体外能够向成骨和成脂方向分化。 展开更多
关键词 脂肪间充质干细胞 分化 脂肪细胞 成骨细胞
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脂肪间充质干细胞来源外泌体对脑缺血再灌注大鼠神经元凋亡及炎症因子影响 被引量：21
3
作者 郝海珍 郭铁 余丹 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第17期1656-1665,共10页
目的探讨脂肪间充质干细胞(adipose-derived mesenchymal stem cells,ADMSCs)来源外泌体对脑缺血再灌注大鼠神经元凋亡及炎症因子影响。方法取10只健康雄性8周龄SD大鼠附睾旁脂肪组织,提取ADMSCs进行细胞培养,取第3代ADMSCs分别在常氧(2... 目的探讨脂肪间充质干细胞(adipose-derived mesenchymal stem cells,ADMSCs)来源外泌体对脑缺血再灌注大鼠神经元凋亡及炎症因子影响。方法取10只健康雄性8周龄SD大鼠附睾旁脂肪组织,提取ADMSCs进行细胞培养,取第3代ADMSCs分别在常氧(21%)和低氧(1%)条件培养,24 h后取培养皿上清液,试剂盒提取法分离外泌体。60只健康雄性8周龄SD大鼠按随机数字表法等分为5组:假手术组、缺血再灌注组、PBS组、低氧外泌体组、常氧外泌体组(n=12),后4组采用Longa改良线栓法建立脑缺血再灌注模型,其中缺血再灌注组仅进行造模,不进行干预,PBS组经尾静脉注射PBS 2 mL,低氧外泌体组和常氧外泌体组分别同时给予等量低氧外泌体和常氧外泌体100μg。在大鼠脑缺血再灌注损伤后24 h,采用Longa法测定各组大鼠神经功能缺损评分,TTC染色测量脑梗死体积,TUNEL法检测神经元凋亡情况,HE染色观察组织病理学变化,免疫组化检测细胞色素C(CytC)和白细胞介素-1β(IL-1β)的表达。结果与PBS组相比,低氧外泌体组和常氧外泌体组病理学改变减轻,神经功能缺损评分、脑梗死体积百分比、细胞色素C和IL-1β的表达及神经元凋亡指数均明显降低(P<0.05),低氧外泌体组较常氧外泌体组降低更为明显(P<0.05)。结论 ADMSCs来源外泌体能减少脑缺血再灌注大鼠神经元凋亡和炎症因子IL-1β的表达,有神经保护作用,其机制可能是外泌体抑制了线粒体介导的细胞凋亡和IL-1β参与的炎症级联反应。 展开更多
关键词 脂肪间充质干细胞 外泌体 神经元凋亡 细胞色素C 白细胞介素-1Β 脑缺血再灌注损伤
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脂肪间充质干细胞对小鼠创面组织超氧化物歧化酶及血管内皮生长因子、表皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子表达的影响 被引量：15
4
作者 左楠 崔莉 王爽 《陕西医学杂志》 CAS 2022年第1期7-10,24,共5页
目的:探讨脂肪间充质干细胞(hASCs)对小鼠创面组织超氧化物歧化酶(SOD)及血清血管内皮生长因子(VEGF)、表皮生长因子(EGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的影响。方法:选取24只裸鼠建立创面损伤模型后分为三组,实验组给予基底膜基... 目的:探讨脂肪间充质干细胞(hASCs)对小鼠创面组织超氧化物歧化酶(SOD)及血清血管内皮生长因子(VEGF)、表皮生长因子(EGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的影响。方法:选取24只裸鼠建立创面损伤模型后分为三组,实验组给予基底膜基质(Matrigel)复合hASCs注射治疗,细胞组给予hASCs注射治疗,对照组给予磷酸液缓冲液(PBS)注射治疗,记录创面愈合情况。结果:所有裸鼠都造模成功,无动物因麻醉或手术而死亡。与对照组相比,实验组与细胞组术后7 d与14 d的创面愈合率、创面组织的SOD水平显著升高(均P<0.05),而丙二醛(MDA)水平显著降低(P<0.05)。与对照组相比,实验组与细胞组术后14 d的血清VEGF、EGF及bFGF表达水平显著升高(均P<0.05),且实验组与细胞组对比差异有统计学意义(均P<0.05)。MASSON染色结果为实验组创面完全愈合,表皮修复情况良好,可见部分炎性细胞浸润,呈复层上皮排列;细胞组已修复部分的表皮修复情况良好,表皮呈复层上皮排列,仍有部分创面未能愈合,肉芽组织生长良;对照组尚未愈合的创口周围可见有瘢痕组织增生,可见炎性细胞浸润较明显,仍有相当一部分创面尚未能愈合。结论:Matrigel复合hASCs在小鼠创面中的应用能促进细胞因子的分泌,抑制创面的氧化应激作用,从而促进创面愈合。 展开更多
关键词 脂肪间充质干细胞 创面愈合 超氧化物歧化酶 血管内皮生长因子 表皮生长因子 碱性成纤维细胞生长因子 小鼠
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脂肪间充质干细胞促进M1型巨噬细胞向M2型巨噬细胞转化 被引量：15
5
作者 尹学红 庞春燕 +2 位作者 白力 张颖 耿立霞 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期332-338,共7页
目的探索脂肪间充质干细胞(ADSC)对M1/M2型巨噬细胞的影响以及ADSC能否促使M1型巨噬细胞向M2型巨噬细胞转化。方法利用脂多糖(LPS)、γ干扰素(IFN-γ)刺激J774.1巨噬细胞24 h诱导为M1型巨噬细胞,利用白细胞介素4(IL-4)刺激J774.1巨噬细... 目的探索脂肪间充质干细胞(ADSC)对M1/M2型巨噬细胞的影响以及ADSC能否促使M1型巨噬细胞向M2型巨噬细胞转化。方法利用脂多糖(LPS)、γ干扰素(IFN-γ)刺激J774.1巨噬细胞24 h诱导为M1型巨噬细胞,利用白细胞介素4(IL-4)刺激J774.1巨噬细胞24 h诱导为M2型巨噬细胞;将M1/M2型巨噬细胞分别与ADSC共培养24 h后,收集巨噬细胞和上清液,用实时定量PCR和ELISA检测巨噬细胞IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、诱导型一氧化氮合酶(i NOS)、CC趋化因子配体2(CCL2)、CD86、精氨酸酶1(Arg1)、甘露糖受体/CD206(MR/CD206)、IL-10、炎症区分子1(found in inflammatory zone 1,FIZZ1)、几丁质酶3样分子3(chitinase 3-like 3,即Ym-1)的变化。结果 ADSC使M1型巨噬细胞分泌的IL-6、TNF-α、i NOS、CCL2、CD86明显减少,Arg1、CD206、IL-10明显增加,且上清液中IL-6和TNF-α含量明显减少,CD206明显增加;使M2型巨噬细胞分泌的IL-6、TNF-α、i NOS、CD86明显减少,Arg1、CD206、FIZZ-1、Ym-1、IL-10明显增加,且上清液中IL-6和TNF-α含量明显减少,CD206明显增加。结论 ADSC抑制M1型巨噬细胞的特异性基因的表达,促进M2型巨噬细胞特异性基因的表达,并使M1型巨噬细胞向M2型巨噬细胞转化。 展开更多
关键词 脂肪间充质干细胞 巨噬细胞极化 M1/M2型巨噬细胞 共培养
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小鼠脂肪间充质干细胞的分离培养及肠道归巢 被引量：14
6
作者 侯晓琳 郁卫东 +2 位作者 崔梅花 何湘君 梁君 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2015年第6期854-860,共7页
背景:脂肪来源间充质干细胞因其取材安全、创伤小、易纯化、增殖快等优点而备受关注。目的:建立一种有效、快速分离培养较高纯度小鼠脂肪间充质干细胞的方法,荧光标记后探索其是否可在体内向肠道归巢。方法:取小鼠腹股沟及附睾脂肪,用0... 背景:脂肪来源间充质干细胞因其取材安全、创伤小、易纯化、增殖快等优点而备受关注。目的:建立一种有效、快速分离培养较高纯度小鼠脂肪间充质干细胞的方法,荧光标记后探索其是否可在体内向肠道归巢。方法:取小鼠腹股沟及附睾脂肪,用0.1%Ⅰ型胶原酶消化得到单细胞,并与剩余未消化脂肪组织块一起接种,贴壁培养获得脂肪间充质干细胞,通过细胞形态、细胞表型、生长动力学、成骨成脂分化潜能4个方面进行鉴定,并将脂肪间充质干细胞用PKH67标记后经尾静脉注射移植到溃疡性结肠炎模型小鼠体内,观察其向肠道的归巢情况。结果与结论:脂肪间充质干细胞镜下呈梭形,快速增殖呈漩涡状排列,细胞高表达CD29、CD44、CD90,不表达CD45。成骨诱导碱性磷酸酶染色显示有黑色颗粒生成,茜素红S染色呈红色结节,成脂诱导油红O染色显示有大量脂滴。细胞生长曲线显示第3-5天为对数增长期,细胞生长活力良好。结肠冰冻切片在荧光显微镜下可见绿色荧光光点,并随时间推移有增加趋势。以上结果表明采用胶原酶消化加组织块贴壁法体外分离培养的脂肪间充质干细胞增殖快、纯度高,可向成骨成脂细胞分化,在体内可向结肠归巢并增殖。 展开更多
关键词 脂肪组织 间质干细胞 结肠炎 溃疡性 干细胞 脂肪干细胞 细胞归巢 脂肪间充质干细胞 小鼠 生物学特性 诱导分化 分离培养 溃疡性结肠炎
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淫羊藿甙干预脂肪间充质干细胞修复膝骨性关节炎的作用及相关机制研究 被引量：14
7
作者 余永林 吴家顺 +3 位作者 热合米丁·艾买提 周倩 刘华慧 管晓舫 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期301-306,共6页
目的:观察淫羊藿甙干预的脂肪间充质干细胞(AMSCs)治疗兔骨性关节炎的效果,并分析其可能的作用机制。方法:取30只新西兰大白兔建立右后肢骨性关节炎模型,造模成功后随机分为3组,每组10只。对照组右后肢膝关节腔内注射同种异体AMSCs进行... 目的:观察淫羊藿甙干预的脂肪间充质干细胞(AMSCs)治疗兔骨性关节炎的效果,并分析其可能的作用机制。方法:取30只新西兰大白兔建立右后肢骨性关节炎模型,造模成功后随机分为3组,每组10只。对照组右后肢膝关节腔内注射同种异体AMSCs进行移植治疗,实验组注射淫羊藿甙溶液干预的同种异体AMSCs进行移植治疗,空白组注射等量的生理盐水。ELISA法检测3组膝关节液内NO、IL-1与TNF-α等炎症因子水平;观察3组关节软骨组织病理改变;TUNEL染色观察关节软骨内软骨细胞凋亡;Western blot检测3组软骨组织内TLR4、MyD88、TRAF6与NF-κB p65蛋白表达。结果:空白组NO、IL-1与TNF-α浓度升高,关节软骨退变、降解,软骨细胞大量凋亡,软骨组织内TLR4、MyD88、TRAF6与NF-κB p65蛋白表达增加;与空白组相比,对照组NO、IL-1与TNF-α浓度降低,关节软骨退变、降解减轻,软骨细胞凋亡减少,软骨组织内TLR4、MyD88、TRAF6与NF-κB p65蛋白表达减少;与对照组相比,实验组NO、IL-1与TNF-α浓度降低,关节软骨退变、降解减轻,软骨细胞凋亡减少,软骨组织内TLR4、MyD88、TRAF6与NF-κB p65蛋白表达减少。结论:淫羊藿甙可降低关节腔内NO、IL-1与TNF-α等炎症因子水平,改善骨性关节炎的微环境,抑制关节软骨细胞凋亡,从而达到保护关节软骨的作用,该作用可能与调节TLR4/NF-κB信号通路有关。 展开更多
关键词 骨性关节炎 脂肪间充质干细胞 淫羊藿甙 细胞凋亡 炎症因子
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脂肪间充质干细胞来源外泌体对角质形成细胞增殖和迁移的影响与机制 被引量：12
8
作者 田新立 江波 颜洪 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第1期68-73,共6页
背景:皮肤烧烫伤是一类非常常见且致死和致残率极高的疾病,探索有效促进伤口愈合的方法意义重大。目的:探讨脂肪间充质干细胞来源外泌体是否对角质形成细胞增殖与迁移产生影响及其潜在机制。方法:采用胰酶消化法培养人角质形成细胞,并... 背景:皮肤烧烫伤是一类非常常见且致死和致残率极高的疾病,探索有效促进伤口愈合的方法意义重大。目的:探讨脂肪间充质干细胞来源外泌体是否对角质形成细胞增殖与迁移产生影响及其潜在机制。方法:采用胰酶消化法培养人角质形成细胞,并利用角质形成细胞特异标记蛋白Keratin14进行鉴定;超速离心法分离人脂肪间充质干细胞来源外泌体,并利用外泌体特异标记蛋白CD9、CD63和CD81进行鉴定;将纯化好的脂肪间充质干细胞来源外泌体,以不同质量浓度(0,10,20,50,100 mg/L)加入第3代角质形成细胞中,在处理的不同时间点(0,12,24,48 h)进行增殖和迁移相关指标检测。结果与结论:脂肪间充质干细胞来源外泌体促进角质形成细胞增殖和迁移,在质量浓度为50 mg/L和处理48 h时增殖最显著,脂肪间充质干细胞来源外泌体可能通过调控ERK、AKT和STAT3蛋白的磷酸化而促进角质形成细胞增殖与迁移。 展开更多
关键词 脂肪间充质干细胞 外泌体 角质形成细胞 细胞增殖 细胞迁移 干细胞 角蛋白细胞 脂肪组织 间质干细胞 外泌体 细胞增殖 细胞运动 组织工程
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脂肪间充质干细胞的成骨诱导分化 被引量：9
9
作者 鞠晓东 娄思权 +2 位作者 马庆军 张克 刘岩 《骨与关节损伤杂志》 2004年第6期390-392,共3页
目的　研究脂肪间充质干细胞 (MSCs)在特定培养条件下向成骨细胞分化 ,探讨其作为骨组织工程的种子细胞的可行性。方法　取 3周龄Lewis大鼠的腹股沟脂肪垫 ,消化法获得脂肪MSCs,用成骨诱导培养基诱导其向成骨细胞分化 ,组织化学染色、... 目的　研究脂肪间充质干细胞 (MSCs)在特定培养条件下向成骨细胞分化 ,探讨其作为骨组织工程的种子细胞的可行性。方法　取 3周龄Lewis大鼠的腹股沟脂肪垫 ,消化法获得脂肪MSCs,用成骨诱导培养基诱导其向成骨细胞分化 ,组织化学染色、免疫细胞化学染色和Westernblotting检测细胞分化的情况。结果　从成体大鼠脂肪组织中培养出脂肪MSCs,能大量稳定增殖传代。在地塞米松、抗坏血酸、β-甘油磷酸钠的诱导下 ,脂肪MSCs的ALP活性增高 ,VonKossa染色出现钙结节 ,OPN、BMP - 2免疫细胞化学染色阳性 ,Westernblotting检测到诱导后细胞OPN、BMP - 2的表达 ,且随诱导时间延长表达增强。结论　从脂肪组织中可获得具有多分化潜能的MSCs,并能在体外稳定增殖传代 ,经诱导后可分化为脂肪细胞和成骨细胞 。 展开更多
关键词 脂肪间充质干细胞 成骨细胞 MSCS 成骨分化 脂肪组织 免疫细胞
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经γ射线辐照后的脂肪间充质干细胞对大鼠薄型子宫内膜的治疗作用 被引量：13
10
作者 叶明侠 俞凌 +2 位作者 王淑芳 范文生 孟元光 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期575-580,共6页
目的直接进行脂肪间充质干细胞(ADSCs)移植治疗疾病,有可能因为干细胞的无限增殖能力导致治疗的风险性升高,尤其是有致瘤的风险。本实验将γ射线辐照后的ADSCs 移植入小鼠薄型子宫内膜模型,以提高治疗安全性。方法 ADSCs取材于雌性SD大... 目的直接进行脂肪间充质干细胞(ADSCs)移植治疗疾病,有可能因为干细胞的无限增殖能力导致治疗的风险性升高,尤其是有致瘤的风险。本实验将γ射线辐照后的ADSCs 移植入小鼠薄型子宫内膜模型,以提高治疗安全性。方法 ADSCs取材于雌性SD大鼠,应用流式细胞技术进行鉴定后,分别以0、5 和10 Gy 的γ射线辐照ADSCs。24 只薄型子宫内膜模型SD大鼠随机分为4 组,在造模6-8 h 后子宫内移植未经辐照的ADSCs(组Ⅰ)、经5 Gy辐照的ADSCs(组Ⅱ)、经10 Gy辐照的ADSCs(组Ⅲ),或仅子宫内注射PBS(组Ⅳ)。测量各组大鼠细胞移植后子宫内膜的厚度变化以观察治疗效果。结果 ADSCs经10 Gy的辐照后完全失去了增殖能力。组Ⅰ和组Ⅱ大鼠在细胞移植治疗后子宫内膜厚度比组Ⅳ有显著增加(P<0.01),但是组Ⅲ和组Ⅳ大鼠的子宫内膜厚度无显著差异。结论γ射线破坏了ADSCs的增殖能力,经10 Gy照射后,ADSCs完全失去了增殖能力并失去了治疗能力。经5 Gy照射后的ADSCs部分丧失了增殖能力,但仍有治疗效果,能够改善子宫内膜的厚度。 展开更多
关键词 薄型子宫内膜 脂肪间充质干细胞 Γ射线 不孕症
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人脂肪来源干细胞培养鉴定及其向内皮细胞分化能力的研究 被引量：10
11
作者 杨坤芳 俞光荣 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1551-1552,共2页
2001年，Zuk等。证实从脂肪组织提取物（PLA）中存在一类间充质性质的成体干细胞——脂肪间充质干细胞或简称为脂肪干细胞（ADSCs），通过以外科切除或吸脂手术方式获得的人或鼠脂肪组织为研究对象，消化离心后简单处理脂肪组织，获得... 2001年，Zuk等。证实从脂肪组织提取物（PLA）中存在一类间充质性质的成体干细胞——脂肪间充质干细胞或简称为脂肪干细胞（ADSCs），通过以外科切除或吸脂手术方式获得的人或鼠脂肪组织为研究对象，消化离心后简单处理脂肪组织，获得一个显微镜下呈成纤维细胞形态的细胞群。 展开更多
关键词 脂肪来源干细胞 分化能力 内皮细胞 培养鉴定 脂肪间充质干细胞 脂肪组织 脂肪干细胞 成体干细胞
原文传递
人自体脂肪间充质干细胞治疗骨关节炎的临床研究 被引量：12
12
作者 韩健 殷振华 +7 位作者 李富航 张亚军 陈轲 王炜 董辉辉 刘一海 李永恒 汪玉良 《实用骨科杂志》 2017年第3期235-239,共5页
目的探讨人自体脂肪间充质干细胞(adipose derived stem cells,ADSCs)复合玻璃酸钠、富血小板血浆(platelet rich plasma,PRP)注射治疗膝关节骨关节炎的安全性和有效性。方法取人腹部脂肪组织,分离获取ADSCs,经体外培养获得足量的ADSCS... 目的探讨人自体脂肪间充质干细胞(adipose derived stem cells,ADSCs)复合玻璃酸钠、富血小板血浆(platelet rich plasma,PRP)注射治疗膝关节骨关节炎的安全性和有效性。方法取人腹部脂肪组织,分离获取ADSCs,经体外培养获得足量的ADSCS,并以流式细胞仪检测其表面标志物,分析成软骨细胞分化能力。选择咸阳市第一人民医院骨科中心门诊30例膝关节轻中度骨关节炎患者,关节腔内注射人ADSCs复合玻璃酸钠、富血小板血浆,评价观察干预前、后的患者是否有不良反应以及膝关节活动度的评分、疼痛视觉模拟评分(visual analogue scale,VAS)、核磁共振下膝关节面。结果人腹部脂肪组织分离出来的ADSCs均阳性表达CD105、CD29,阴性表达CD45、CD34,体外具有良好的成骨、成脂、成软骨能力;临床治疗干预后患者无不良反应,膝疼痛减轻,关节活动度较前增大,核磁共振可见关节面斑片状影较治疗前显著减少,低信号区显著减少,未见明显关节腔积液,关节面厚度增加。结论关节腔注射ADSCs复合玻璃酸钠、富血小板血浆治疗骨关节炎能有效改善患者膝关节活动度,减少疼痛,提高生活质量,通过核磁共振发现关节面厚度增加,延缓关节退化。 展开更多
关键词 脂肪间充质干细胞 软骨细胞
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脂肪干细胞复合多孔丝素材料修复兔尿道缺损 被引量：10
13
作者 张亚 周云 +3 位作者 贾立山 苗小芬 严向明 张婷 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期199-201,F0003,共4页
目的探索脂肪间充质干细胞(ADMSCs)复合多孔丝素膜(PSFS)对尿道缺损的修复效果。方法建立雄性新西兰大白兔尿道缺损模型后分为3组,每组13只。A组用PSFS修补,B组用BrdU标记ADMSCs复合PSFS修补,C组为尿道缺损对照。手术前后行尿道造影。术... 目的探索脂肪间充质干细胞(ADMSCs)复合多孔丝素膜(PSFS)对尿道缺损的修复效果。方法建立雄性新西兰大白兔尿道缺损模型后分为3组,每组13只。A组用PSFS修补,B组用BrdU标记ADMSCs复合PSFS修补,C组为尿道缺损对照。手术前后行尿道造影。术后2、4、6周取修复段尿道行组织学检查,免疫组织化学染色检测BrdU标记ADMSCs、广谱角蛋白阳性细胞及巨噬细胞情况。结果术后C组尿道狭窄和尿屡的并发症总发生率为76.92%,高于A组的23.07%和B组的15.38%(P<0.05)。组织学观察C组的血管、上皮细胞层、平滑肌重建少;A、B组重建量多、B组多于A组。BrdU标记ADMSCs在3时间点缺损区丝素膜中散在可见;广谱角蛋白染色C组缺乏尿道上皮的复层柱状上皮形态,无乳突状黏膜存在;A、B组与正常尿道黏膜相似,有较多乳突状结构;术后4周巨噬细胞表达B组比A组少[(11.66±1.58)/HP vs.(13.88±2.08)/HP](P<0.05)。结论ADMSCs复合PSFS具有促进尿道缺损修复的作用。 展开更多
关键词 脂肪间充质干细胞 丝素 尿道缺损
原文传递
淫羊藿苷促进间充质干细胞成骨分化:为治疗骨缺损提供一个良好的方向 被引量：9
14
作者 陈震东 高辉 徐房添 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2016年第50期7594-7600,共7页
背景:近年来研究表明,淫羊藿苷能够促进间充质干细胞成骨分化,是一种良好的骨性诱导因子,给骨缺损的治疗提供了新的希望。目的:综述近年来淫羊藿苷对骨组织代谢的药理作用及对间充质干细胞成骨分化影响的研究成果。方法:由第一作者用中... 背景:近年来研究表明,淫羊藿苷能够促进间充质干细胞成骨分化,是一种良好的骨性诱导因子,给骨缺损的治疗提供了新的希望。目的:综述近年来淫羊藿苷对骨组织代谢的药理作用及对间充质干细胞成骨分化影响的研究成果。方法:由第一作者用中国知网数据库和PubMed数据库,检索词分别为"淫羊藿苷;干细胞;成骨"和"icariin,stem cell,osteogenesis",语言分别设定为中文和英文。纳入与"淫羊藿苷、干细胞、成骨"相关的研究。共检索到754篇文章,按纳入和排除标准文献进行筛选,共纳入41篇文章进行综述分析。结果与结论:淫羊藿苷是中国传统中药淫羊藿的主要成分,能够促进骨髓间充质干细胞成骨分化,是一种良好的骨性营养因子。近年来研究表明,淫羊藿苷亦可促进脂肪、脐带以及牙周膜等组织来源的间充质干细胞成骨分化,但是这类研究尚少。目前各间充质干细胞成骨实验效果欠佳,良好的骨性营养因子促进间充质干细胞体内成骨是一种较好的解决方法。因此,淫羊藿苷促进间充质干细胞成骨将可能为治疗骨缺损提供一个良好的方向。 展开更多
关键词 干细胞 分化 淫羊藿苷 药理作用 骨缺损 骨髓间充质干细胞 脂肪间充质干细胞 脐带间充质干细胞 牙周膜干细胞 成骨分化 分子机制 国家自然科学基金
全文增补中
脂肪间充质干细胞移植对大鼠心肌缺血再灌注后炎症反应及心脏功能的影响 被引量：11
15
作者 张泽宇 苗迎春 +2 位作者 张威 陈艳明 陈光辉 《解放军医学院学报》 CAS 2016年第4期381-385,共5页
目的观察脂肪间充质干细胞（adipose-derived mesenchymal stem cells,ADSCs）移植对心肌缺血再灌注后炎症反应及心脏功能的影响。方法 5只SD大鼠（57 d）体外分离、培养、鉴定ADSCs。60只SD大鼠（250 g左右）随机分为假手术组（n=20）... 目的观察脂肪间充质干细胞（adipose-derived mesenchymal stem cells,ADSCs）移植对心肌缺血再灌注后炎症反应及心脏功能的影响。方法 5只SD大鼠（57 d）体外分离、培养、鉴定ADSCs。60只SD大鼠（250 g左右）随机分为假手术组（n=20）、模型对照组（n=20）和ADSCs治疗组（n=20）,采用40 min短暂结扎冠状动脉前降支建立心肌缺血再灌注模型。48h后TTC-偶氮蓝染色观察梗死面积,HE染色观察炎症反应,流式细胞学分析免疫细胞比例;28 d后心脏超声检测左心室短轴缩短率（fraction shortening,FS）、射血分数（ejection fraction,EF）,血流动力学检测左心室收缩压、左心室舒张末压和最大变化率（＋dp/dtmax）、最小变化率（-dp/dtmin）。结果细胞移植48 h后,与模型对照组相比,ADSCs治疗组心梗区面积和心梗区与危险区的比值显著减小（14.372%±3.482%vs 8.364%±3.47%,33.482%±4.261%vs 16.384%±4.238%,P〈0.05）,炎症反应减轻,白细胞数和中性粒细胞比例显著减少（64.25%±2.228%vs 54.65%±1.613%,16.325%±1.506%vs 6.695%±0.671%,P〈0.05）,而巨噬细胞比例及M2型巨噬细胞所占比例明显上升（10.525%±0.896%vs 18.5%±0.589%,32.4%±2.407%vs 50%±3.822%,P〈0.05）;细胞移植48 h后,与模型对照组相比,ADSCs治疗组FS、EF、＋dp/dtmax、-dp/dtmin显著升高（29.617±3.462 vs 40.175±2.447,62.683%±5.392%vs 76.760%±2.709%,1 419.759±228.753 vs 3 458.153±592.408,1 417.008±296.541 vs 3 047.759±763.195,P〈0.05）。结论 ADSCs移植可减轻大鼠心肌缺血再灌注后炎症反应,减小心梗面积,延缓心室重构,改善心脏功能。 展开更多
关键词 脂肪间充质干细胞 心肌缺血 再灌注损伤 大鼠
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壳聚糖藻酸盐支架与脂肪间充质干细胞复合构建的组织工程脊髓修复急性脊髓损伤 被引量：11
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作者 郑华斌 罗琳 陈路 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2017年第26期4199-4204,共6页
背景:组织工程化脊髓为脊髓损伤的修复带来了新的治疗思路。目的:探讨壳聚糖藻酸盐支架与脂肪间充质干细胞复合的组织工程脊髓修复大鼠急性脊髓损伤的效果。方法:取48只SD大鼠,建立脊髓半横断模型,随机分4组干预,模型组直接缝合硬膜,细... 背景:组织工程化脊髓为脊髓损伤的修复带来了新的治疗思路。目的:探讨壳聚糖藻酸盐支架与脂肪间充质干细胞复合的组织工程脊髓修复大鼠急性脊髓损伤的效果。方法:取48只SD大鼠,建立脊髓半横断模型,随机分4组干预,模型组直接缝合硬膜,细胞组在脊髓断端周边移植脂肪间充质干细胞,支架组在脊髓损伤区植入壳聚糖藻酸盐支架,实验组在脊髓损伤区植入组织工程脊髓(壳聚糖藻酸盐支架与CM-Dil标记脂肪间充质干细胞复合物)。移植后1,3,7周,评估大鼠后肢运动功能;移植后7周取脊髓标本,进行免疫荧光染色和苏木精-伊红染色。结果与结论:(1)后肢运动功能:移植后3,7周,实验组后肢运动功能强于模型组、细胞组及支架组(P<0.05),细胞组、支架组后肢运动功能强于模型组(P<0.05);(2)免疫荧光染色:模型组无神经丝蛋白200、神经元特异性烯醇化酶、胶原纤维酸性蛋白阳性细胞;支架组可见神经元特异性烯醇化酶阳性细胞、胶原纤维酸性蛋白阳性细胞及少量神经丝蛋白200阳性细胞;细胞组未见神经丝蛋白200、神经元特异性烯醇化酶阳性细胞,可见大量的胶原纤维酸性蛋白阳性细胞;实验组见大量神经元特异性烯醇化酶阳性细胞,少量CM-Dil标记的脂肪间充质干细胞、较多的胶原纤维酸性蛋白阳性细胞及神经丝蛋白200阳性细胞;(3)苏木精-伊红染色:模型组有大量成纤维细胞和炎性细胞浸润,有较大的脊髓空洞;支架组无脊髓空洞,脊髓和支架材料之间连接紧密;细胞组有脊髓空洞;实验组无脊髓空洞,脊髓损伤区有各种形态细胞形成;(4)结果表明:壳聚糖藻酸盐支架与脂肪间充质干细胞复合的组织工程脊髓,可促进急性脊髓损伤的修复。 展开更多
关键词 生物材料 材料相容性 壳聚糖 藻酸盐 脂肪间充质干细胞 组织工程 大鼠 脊髓损伤
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比较两种不同来源间充质干细胞的生物学特性及多向分化潜能 被引量：10
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作者 彭运 陈凤 +2 位作者 黄华鑫 李彦洁 彭凌 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2020年第4期566-572,共7页
该文旨在比较人脂肪间充质干细胞(hADSCs)和脐带间充质干细胞(hUMSCs)的生物学特性,并鉴定其多向分化潜能。体外扩增培养hADSCs和hUMSCs,绘制细胞生长曲线并计算群体倍增时间,通过细胞集落实验比较两种细胞的增殖能力,流式细胞仪和RT-PC... 该文旨在比较人脂肪间充质干细胞(hADSCs)和脐带间充质干细胞(hUMSCs)的生物学特性,并鉴定其多向分化潜能。体外扩增培养hADSCs和hUMSCs,绘制细胞生长曲线并计算群体倍增时间,通过细胞集落实验比较两种细胞的增殖能力,流式细胞仪和RT-PCR方法分别检测细胞表面抗原和多能性相关基因的表达,采用成脂、成骨诱导分化试剂盒比较两种细胞的分化潜能。hADSCs和hUMSCs表达CD34、CD44、CD45、CD105的比例分别为2.7%vs 6.2%、92.3%vs 93.4%、1.3%vs 3.1%、99.4%vs 98.0%,均表达Oct4和Nanog基因;生长曲线均呈"S"型,两种细胞的群体倍增时间差异不显著(P>0.05);随着代数的增加,两种细胞的增殖能力均变弱,但P7的hADSCs的增殖能力要显著优于hUMSCs(P<0.05);经油红O、茜素红染色及RT-PCR和细胞免疫荧光方法检测特异基因的表达,表明两种细胞均具备成脂、成骨分化的能力,hADSCs的成脂能力优于hUMSCs,但两种间充质干细胞的成骨分化能力没有显著性差异。hADSCs和hUMSCs具有相似的生物学特性,但hADSCs可能具备更强的增殖能力和成脂分化潜能。 展开更多
关键词 脂肪间充质干细胞 脐带间充质干细胞 生物学特性 多向分化潜能
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脂肪间充质干细胞条件培养液联合富血小板纤维蛋白修复小鼠皮肤损伤 被引量：10
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作者 黄敏 颜洪 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第1期18-23,共6页
背景:富血小板纤维蛋白可促进软组织愈合,间充质干细胞分泌的可溶性因子具有促进皮肤再生的作用,两者联合应用促进皮肤损伤修复尚未见报道。目的:探讨脂肪间充质干细胞条件培养液联合富血小板纤维蛋白对小鼠皮肤创伤愈合的影响。方法:制... 背景:富血小板纤维蛋白可促进软组织愈合,间充质干细胞分泌的可溶性因子具有促进皮肤再生的作用,两者联合应用促进皮肤损伤修复尚未见报道。目的:探讨脂肪间充质干细胞条件培养液联合富血小板纤维蛋白对小鼠皮肤创伤愈合的影响。方法:制作C57/BL6小鼠(西南医科大学实验动物中心提供)全层皮肤损伤模型,随机分为4组,每组10只。自造模后即开始治疗,各组分别涂抹脂肪间充质干细胞专用培养基、脂肪间充质干细胞条件培养液、富血小板纤维蛋白、脂肪间充质干细胞条件培养液+富血小板纤维蛋白,3次/d,连续7d。在治疗后的1,3,7,10 d测量创面大小并计算治疗后3,7 d的创面愈合率;治疗后第14天进行创面愈合的组织学分析。结果与结论:(1)与脂肪间充质干细胞专用培养基组相比,其他3组创面愈合时间缩短;(2)治疗后3,7 d,脂肪间充质干细胞条件培养液+富血小板纤维蛋白组的创面愈合率高于其他3组,脂肪间充质干细胞条件培养液组和富血小板纤维蛋白组的创面愈合率高于脂肪间充质干细胞专用培养基组,差异有显著性意义(P <0.05);(3)组织学分析显示,脂肪间充质干细胞条件培养液+富血小板纤维蛋白组小鼠创面白细胞及成纤维细胞聚集、血管新生、肉芽组织重塑、上皮化均比其他3组明显,伤口愈合效果最好;(4)结果表明,脂肪间充质干细胞条件培养液与富血小板纤维蛋白联合应用能有效促进小鼠皮肤损伤的修复,效果优于单独应用脂肪间充质干细胞条件培养液或富血小板纤维蛋白。 展开更多
关键词 皮肤损伤 脂肪间充质干细胞 条件培养液 富血小板纤维蛋白 创面愈合 小鼠 干细胞 皮肤 创伤和损伤 脂肪组织 间质干细胞 培养基 条件性 富血小板血浆 组织工程
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茜素红半定量测定细胞基质钙含量的实验研究 被引量：10
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作者 李宇琳 周恒 +1 位作者 刘广鹏 崔磊 《组织工程与重建外科杂志》 2008年第2期61-64,共4页
目的使用茜素红检测的方法,对细胞在成骨诱导和未诱导状态下,细胞基质中钙盐沉积情况进行半定量分析,研究细胞基质中钙盐沉积情况变化趋势规律,为临床实践提供理论参考。方法对4例正常人骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem ... 目的使用茜素红检测的方法,对细胞在成骨诱导和未诱导状态下,细胞基质中钙盐沉积情况进行半定量分析,研究细胞基质中钙盐沉积情况变化趋势规律,为临床实践提供理论参考。方法对4例正常人骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)及4例正常人脂肪间充质干细胞(Adipose-derived mesenchymal stem cells,ASCs),使用茜素红半定量法检测成骨诱导及未诱导细胞基质中钙盐沉积情况进行半定量分析,研究细胞基质中钙盐沉积情况变化趋势规律。结果对于相同代次的间充质干细胞,未诱导组的钙盐沉积情况,在7d后没有显著的改变;而诱导组钙盐的沉积在10～14d明显增多。实验结果同时显示,同一样本的间充质干细胞,随着代次增加,未诱导组钙盐的沉积时间延后,且沉积量逐渐减少。诱导组钙盐的沉积情况,7d时没有显著的改变;14d时,随代次增加,钙盐沉积量逐渐减少。结论体外成骨诱导的第3～4代的间充质干细胞在第10～14天已经具有较强的成骨活性,可能比较适宜体内回植。本实验为组织工程骨的体外构建时间提供了理论依据。 展开更多
关键词 茜素红 细胞基质 钙离子 骨髓基质干细胞 脂肪间充质干细胞 种子细胞
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脂肪间充质干细胞的生物学特性及潜在临床应用 被引量：10
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作者 魏兆明 江文胜 +1 位作者 高艺 张娟娟 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2019年第1期116-120,共5页
脂肪间充质干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)是来源于脂肪组织的多能干细胞。具有自我更新和多向分化能力,且可塑性强、免疫原性低、可旁分泌多种生物活性因子,同时致畸致瘤风险也比较低,在适宜诱导条件下可以分化为成骨细胞... 脂肪间充质干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)是来源于脂肪组织的多能干细胞。具有自我更新和多向分化能力,且可塑性强、免疫原性低、可旁分泌多种生物活性因子,同时致畸致瘤风险也比较低,在适宜诱导条件下可以分化为成骨细胞、脂肪细胞、软骨细胞等。ADSCs已经广泛用于骨及软骨组织的修复,皮肤损伤的修复、糖尿病和免疫调节等疾病治疗。本文就ADSCs的生物学特性及临床应用进展作一综述。 展开更多
关键词 脂肪间充质干细胞 生物学特性 临床应用
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