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游离脂肪酸与全膝关节置换后隐性失血的相关性 被引量:2
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作者 王绍刚 陶忠亮 +1 位作者 汪胜 唐佶颖 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2016年第26期3830-3836,共7页
背景:人工全膝关节置换后隐性失血是临床关注的焦点,关于隐性失血的病因有很多假说,然而没有一种能够合理的解释其作用机制。目的:分析游离脂肪酸与全膝关节置换后隐性失血的关系,探讨全膝关节置换后隐性失血的病因机制。方法:收集42例... 背景:人工全膝关节置换后隐性失血是临床关注的焦点,关于隐性失血的病因有很多假说,然而没有一种能够合理的解释其作用机制。目的:分析游离脂肪酸与全膝关节置换后隐性失血的关系,探讨全膝关节置换后隐性失血的病因机制。方法:收集42例骨关节炎行初次单侧全膝关节置换患者的临床资料,记录置换术中及置换后显性失血量,分别收集患者置换前以及置换后24,48,72,96 h的血液样本,检测血液中血红蛋白、红细胞计数、红细胞压积和游离脂肪酸的变化趋势,应用Gross方程得出隐性失血量;同时对血液样本行涂片染色,在显微镜下观察红细胞形态变化。结果与结论:1血红蛋白和红细胞计数在置换后24,48 h明显下降,与置换前相比差异有显著性意义(P<0.01);2游离脂肪酸含量在置换后24 h内明显升高,在72,96 h后逐步降低恢复至置换前水平,同时在置换后24,48 h发生了显著的隐性失血,与游离脂肪酸含量呈正相关;3显微镜下可以观察到大量异型性红细胞在置换后24,48 h主要表现为细胞皱缩及破坏,在置换后96 h红细胞形态无明显异常;4结果提示,游离脂肪酸水平与全膝关节置换后隐性失血密切相关,置换术中应积极控制通过髓腔高压进入血液循环的脂肪颗粒,从而减少围置换期总失血量。 展开更多
关键词 关节成形术 置换 血红蛋白类 失血 手术 组织工程 骨科植入物 人工假体 游离脂肪 全膝关节置换 隐性失血 总失血量 活性氧 红细胞形态 血红蛋白 过氧化氢 氧化应激 脂肪小滴
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脂肪储存小滴蛋白5基因真核表达载体的构建及亚细胞定位 被引量:2
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作者 刘芳 张利军 +5 位作者 叶菁 张丽英 李烦繁 李航 谷雨 李青 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期438-439,443,共3页
目的:构建pCMV5-HA与脂肪储存小滴蛋白5(LS-DP5)的融合基因真核表达载体,观察其在非洲绿猴肾成纤维细胞COS7中的表达,通过免疫荧光技术确定LSDP5的亚细胞定位。方法:采用NdeI和BamHI酶切pCMV5-HA质粒,用BglII和NdeI酶切pMD18-LSDP5质粒... 目的:构建pCMV5-HA与脂肪储存小滴蛋白5(LS-DP5)的融合基因真核表达载体,观察其在非洲绿猴肾成纤维细胞COS7中的表达,通过免疫荧光技术确定LSDP5的亚细胞定位。方法:采用NdeI和BamHI酶切pCMV5-HA质粒,用BglII和NdeI酶切pMD18-LSDP5质粒,克隆到pCMV5-HA载体,测序鉴定后,通过脂质体法转染COS7细胞,通过免疫荧光技术观察其在COS7细胞中的表达,并利用荧光染料Bodipy493/503定位脂滴,探讨LSDP5与脂滴之间的关系。结果:酶切及DNA测序证实重组质粒pCMV5-HA-LSDP5构建成功。荧光显微镜观察显示,pCMV5-HA-LSDP5融合蛋白定位于细胞质内,并定位于脂滴表面。结论:成功构建了重组质粒pCMV5-HA-LSDP5;融合蛋白分布于细胞质并与脂滴存在共定位关系。 展开更多
关键词 脂肪储存小滴蛋白5 融合蛋白 pCMV5-HA COS7细胞 亚细胞定位
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脂肪储存小滴蛋白5基因的克隆与原核表达 被引量:1
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作者 刘芳 李青 +5 位作者 叶菁 张静 张丽英 李烦繁 李航 谷雨 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期306-308,共3页
目的:克隆脂肪储存小滴蛋白5(LSDP5)基因,并在大肠杆菌中表达。方法:利用PCR技术从小鼠肝脏cDNA中扩增LSDP5基因,并将其克隆到pMD18-T载体中,进行测序。同时,通过疏水性和二级结构分析,将LSDP5的片段克隆到原核表达载体pEGX-4T-1,构建GS... 目的:克隆脂肪储存小滴蛋白5(LSDP5)基因,并在大肠杆菌中表达。方法:利用PCR技术从小鼠肝脏cDNA中扩增LSDP5基因,并将其克隆到pMD18-T载体中,进行测序。同时,通过疏水性和二级结构分析,将LSDP5的片段克隆到原核表达载体pEGX-4T-1,构建GST融合表达质粒pEGX-LSDP5,在大肠杆菌BL21中进行表达。结果:成功地克隆了LSDP5基因,DNA测序证实,与GenBank公布的序列一致。含LSDP5片段的pGEX-LSDP5基因表达质粒在大肠杆菌经IPTG诱导后,能够表达相对分子质量(Mr)40000的融合蛋白。结论:获得了LSDP5全长基因,成功构建了原核表达质粒pEGX-LSDP5,并在大肠杆菌中得到表达,为其相关研究奠定了一定的基础。 展开更多
关键词 脂肪储存小滴蛋白5 克隆 原核表达
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