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PERK/ATF4/CHOP信号通路在饱和脂肪酸诱导肝细胞脂毒性凋亡中的作用 被引量：6
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作者 曹洁 姚隆 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2017年第8期811-818,共8页
目的研究在饱和脂肪酸软脂酸钠诱导肝细胞脂毒性凋亡过程中,蛋白激酶R样内质网激酶(PKR-like ER kinase,PERK)/活化转录因子4(activating transcription factor 4,ATF4)/C/EBP同源蛋白(C/EBP-homologous protein,CHOP)信号通路的作用,... 目的研究在饱和脂肪酸软脂酸钠诱导肝细胞脂毒性凋亡过程中,蛋白激酶R样内质网激酶(PKR-like ER kinase,PERK)/活化转录因子4(activating transcription factor 4,ATF4)/C/EBP同源蛋白(C/EBP-homologous protein,CHOP)信号通路的作用,对参与饱和脂肪酸诱导肝细胞脂毒性凋亡的主要UPR信号通路进行探讨。方法MTT法筛选不同浓度(0、36、72、108、144、180μmol/L)软脂酸钠作用L02和HepG2细胞株的最佳浓度后,将细胞分为正常对照组和模型组(软脂酸钠108μmol/L),甘油三酯试剂盒检测细胞内甘油三酯含量,流式细胞术Annexin V-PE/7-AAD双染检测细胞凋亡率,Western blot法检测Bip、t-PERK、磷酸化PERK(p-PERK)、ATF4、CHOP蛋白的表达。将PERK shRNA转染L02和HepG2细胞沉默PERK基因,以Control shRNA作为对照,将细胞分为Control shRNA、Control shRNA+软脂酸钠、PERK shRNA、PERK shRNA+软脂酸钠组,Western blot法检测t-PERK、ATF4、CHOP蛋白的表达,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果软脂酸钠成功诱导建立肝细胞脂变模型。在体外实验中,软脂酸钠能够诱导肝细胞发生脂肪变性以及脂变肝细胞凋亡,细胞凋亡率随软脂酸钠诱导时间延长而增加,与对照组相比,模型组48 h细胞凋亡率明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。软脂酸钠诱导L02和HepG2细胞0、12、24、48 h,各时间点Bip、p-PERK、ATF4和CHOP蛋白的表达呈时间依赖性增加(P<0.05)。在使用和不使用软脂酸钠诱导下,PERK shRNA组细胞t-PERK蛋白表达水平显著低于Control shRNA组(P<0.05);软脂酸钠诱导下,与Control shRNA组相比,PERK shRNA组细胞ATF4和CHOP蛋白表达水平显著降低,细胞凋亡率也明显降低(P均<0.05)。结论饱和脂肪酸能够诱导脂变肝细胞凋亡,并且启动过度内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ER stress),激活PERK/ATF4/CHOP信号通路。阻断PERK通路能够在一定程度上抑制脂变肝细胞凋亡,提示ER stress UPR信号途径PERK/ATF4/CHOP参� 展开更多
关键词 非酒精性脂肪性肝病 内质网应激 脂毒性凋亡 软脂酸钠 蛋白激酶R样内质网激酶
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