目的探讨胶质瘤细胞胶质细胞原性神经营养因子(GDNF)基因启动子Ⅰ区甲基化水平对其基因转录的影响。方法体外培养胶质瘤U251细胞,加入不同浓度5-氮杂胞苷(浓度分别为1、5、10和20μmol/L)干预,以加入PBS为对照。采用重亚硫酸盐测序法测...目的探讨胶质瘤细胞胶质细胞原性神经营养因子(GDNF)基因启动子Ⅰ区甲基化水平对其基因转录的影响。方法体外培养胶质瘤U251细胞,加入不同浓度5-氮杂胞苷(浓度分别为1、5、10和20μmol/L)干预,以加入PBS为对照。采用重亚硫酸盐测序法测定GDNF基因启动子Ⅰ区甲基化水平,RT-PCR检测GDNF m RNA的表达。结果与PBS组相比,1μmol/L 5-氮杂胞苷对GDNF基因启动子Ⅰ区甲基化水平无显著影响(P>0.05),5、10和20μmol/L 5-氮杂胞苷均显著降低其甲基化水平(P<0.05)。与PBS组相比,1μmol/L 5-氮杂胞苷对GDNF m RNA表达水平无显著影响(P>0.05),5μmol/L 5-氮杂胞苷显著增加其表达水平(P<0.05),但随着浓度进一步增加(10、20μmol/L),其表达水平逐渐降低。结论 5-氮杂胞苷对GDNF基因具有去甲基化作用;GDNF启动子Ⅰ区去甲基化能够增加GDNF基因的转录水平。展开更多
文摘目的探讨胶质瘤细胞胶质细胞原性神经营养因子(GDNF)基因启动子Ⅰ区甲基化水平对其基因转录的影响。方法体外培养胶质瘤U251细胞,加入不同浓度5-氮杂胞苷(浓度分别为1、5、10和20μmol/L)干预,以加入PBS为对照。采用重亚硫酸盐测序法测定GDNF基因启动子Ⅰ区甲基化水平,RT-PCR检测GDNF m RNA的表达。结果与PBS组相比,1μmol/L 5-氮杂胞苷对GDNF基因启动子Ⅰ区甲基化水平无显著影响(P>0.05),5、10和20μmol/L 5-氮杂胞苷均显著降低其甲基化水平(P<0.05)。与PBS组相比,1μmol/L 5-氮杂胞苷对GDNF m RNA表达水平无显著影响(P>0.05),5μmol/L 5-氮杂胞苷显著增加其表达水平(P<0.05),但随着浓度进一步增加(10、20μmol/L),其表达水平逐渐降低。结论 5-氮杂胞苷对GDNF基因具有去甲基化作用;GDNF启动子Ⅰ区去甲基化能够增加GDNF基因的转录水平。
