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过表达ULK3介导GLi1对人膀胱癌细增殖、迁移、侵袭的影响及机制
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作者 郑旭 汪中琪 +5 位作者 孙甲乐 王金行 陈守峰 程琪 郭园园 刘贝贝 《中华解剖与临床杂志》 2023年第12期812-818,共7页
目的探讨过表达Un51样激酶3(ULK3)介导胶质瘤相关癌基因同源基因1(Gli1)对膀胱癌细胞增殖、迁移与侵袭的影响及其机制。方法培养人膀胱癌T24细胞分为对照组、ULK3过表达组(ULK3+组)、Gli1过表达组(Gli1+组)、ULK3和Gli1过表达组(ULK3+/G... 目的探讨过表达Un51样激酶3(ULK3)介导胶质瘤相关癌基因同源基因1(Gli1)对膀胱癌细胞增殖、迁移与侵袭的影响及其机制。方法培养人膀胱癌T24细胞分为对照组、ULK3过表达组(ULK3+组)、Gli1过表达组(Gli1+组)、ULK3和Gli1过表达组(ULK3+/Gli1+组)、ULK3过表达和Gli1敲低组(ULK3+/Gli1-组),分别使用阴性对照试剂、过表达ULK3质粒、过表达Gli1质粒、shRNA敲低Gli1质粒对相应各组进行细胞转染。收集转染后的各组细胞,采用细胞计数试剂盒(CCK)8检测细胞的增殖能力,划痕实验检测细胞运动能力,Transwell实验检测细胞的迁移、侵袭能力,Western blotting检测LC3A/B、P62蛋白表达情况,荧光蛋白标记技术检测自噬小体LC3B蛋白表达情况。结果(1)对照组、ULK3+组、Gli1+组、ULK3+/Gli1+组、ULK3+/Gli1-组细胞培养0 h时OD值差异无统计学意义(P=1.000),培养24、48、72 h时,ULK3+组、Gli1+组、ULK3+/Gli1+组、ULK3+/Gli1-组的OD值均大于对照组,差异均有统计学意义(F=60.98、56.53、112.70,P值均<0.001)。(2)对照组、Gli1+组、ULK3+组、ULK3+/Gli1+组、ULK3+/Gli1-组细胞迁移数分别为(292.3±28.5)、(376.7±8.1)、(365.7±8.1)、(505.7±22.4)、(301.3±26.7)个,细胞侵袭数分别为(127.7±10.0、(185.0±11.5)、(191.3±8.0)、(278.3±11.0)、(128.7±4.0)个,24 h细胞迁移率分别为8.8%±0.2%、18.8%±0.3%、18.8%±0.4%、24.6%±0.4%、13.8%±0.3%,48 h细胞迁移率分别为14.9%±0.3%、30.3%±2.1%、29.8%±1.6%、50.1%±3.7%、24.9%±1.7%。ULK3+组、Gli1+组、ULK3+/Gli1+组、ULK3+/Gli1-组细胞迁移、侵袭数目,以及24、48 h细胞迁移率均大于对照组,差异均有统计学意义(F=50.82、126.80、112.20、106.70,P值均<0.001)。(3)对照组、Gli1+组、ULK3+组、ULK3+/Gli1+组、ULK3+/Gli1-组细胞LC3A/B蛋白相对表达量分别是0.18±0.01、0.41±0.02、0.41±0.03、0.63±0.03、0.25±0.03,P62蛋白相对表达量分别为1.06±0.07、0.88±0.01、0.87±0.02、0.53±0.02、0.98±0.04;ULK3+组� 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 Un51样激酶3 胶质瘤相关癌基因同源基因1 自噬
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