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硫化氢与细胞的增殖和凋亡 被引量：15
1
作者 杨广东 王睿 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期133-140,共8页
硫化氢是内源性气体分子家族中的一员,是一种气体递质(gasotransmitter)。近年来,内源性硫化氢的产生及生理意义已经被认识,其代谢异常与许多疾病有关。本文综述了最近发现的硫化氢对细胞增殖和凋亡的调节作用,并重点概述硫化氢细胞效... 硫化氢是内源性气体分子家族中的一员,是一种气体递质(gasotransmitter)。近年来,内源性硫化氢的产生及生理意义已经被认识,其代谢异常与许多疾病有关。本文综述了最近发现的硫化氢对细胞增殖和凋亡的调节作用,并重点概述硫化氢细胞效应的分子机制,包括丝裂原活化蛋白激酶、细胞周期相关激酶、细胞死亡相关基因以及离子通道等的改变。对硫化氢调节细胞生长或死亡的深入了解将为新药设计及许多疾病的治疗提供新的思路。 展开更多
关键词 硫化氢 气体递质 胱硫醚γ-裂解酶 增殖 凋亡
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内源性硫化氢在糖尿病肾病大鼠肾组织中表达 被引量：8
2
作者 陈燊 黄雯 +2 位作者 张红 杨敏 张梅 《中国血液净化》 2010年第8期433-435,共3页
目的探讨内源性硫化氢(H_2S)在糖尿病肾病大鼠肾脏表达和作用。方法比较对照组、糖尿病肾病组(DN组)和外源性H_2S干预组(H_2S组)大鼠肾组织中H_2S合酶活性、胱硫醚-γ-裂解酶(cystathionine-γ-lyase,CSE)、胱硫醚-β-合成酶(cystathion... 目的探讨内源性硫化氢(H_2S)在糖尿病肾病大鼠肾脏表达和作用。方法比较对照组、糖尿病肾病组(DN组)和外源性H_2S干预组(H_2S组)大鼠肾组织中H_2S合酶活性、胱硫醚-γ-裂解酶(cystathionine-γ-lyase,CSE)、胱硫醚-β-合成酶(cystathionine-β-synthase,CBS)mRNA的含量以及肾脏病理改变。结果 DN组大鼠肾脏中H_2S生成减少、CSE mRNA含量降低(P<0.01);三组大鼠CBS mRNA差异无统计学意义(P>0.05),H_2S组大鼠肾脏病理改变较DN组大鼠减轻。结论 DN组大鼠肾脏内源性H_2S生成减少和CSE表达降低有关。给予外源性H_2S可减缓肾脏病变进展。 展开更多
关键词 硫化氢 糖尿病肾病 胱硫醚Β-合成酶 胱硫醚γ-裂解酶
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应激性认知障碍小鼠脑内同型半胱氨酸的代谢变化研究 被引量：6
3
作者 薛聪 谢方 +3 位作者 赵云 王雪 王世达 钱令嘉 《军事医学》 CAS 2021年第5期348-353,共6页
目的通过检测应激小鼠海马和前额叶皮质同型半胱氨酸(Hcy)及其代谢酶水平,了解应激对脑内Hcy代谢的影响,为应激性认知障碍的Hcy损伤机制补充新的证据。方法24只C57小鼠随机分为对照组和3周慢性束缚应激组,采用高压液相色谱分别检测血浆... 目的通过检测应激小鼠海马和前额叶皮质同型半胱氨酸(Hcy)及其代谢酶水平,了解应激对脑内Hcy代谢的影响,为应激性认知障碍的Hcy损伤机制补充新的证据。方法24只C57小鼠随机分为对照组和3周慢性束缚应激组,采用高压液相色谱分别检测血浆以及海马和前额叶皮质组织匀浆液中Hcy水平,采用皮质酮酶联免疫吸附(ELISA)试剂盒检测血清皮质酮浓度,采用实时荧光定量PCR(qPCR)和Western印迹检测海马和前额叶皮质4种Hcy代谢酶,即甲硫氨酸合酶(MS)、亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)、胱硫醚β-合成酶(CBS)和胱硫醚γ-裂解酶(CSE)的mRNA和蛋白水平。结果3周慢性束缚应激(CRS)导致小鼠出现认知障碍样行为学改变,应激组小鼠血浆、海马和前额叶皮质Hcy水平均明显升高,但脑组织内Hcy的升高幅度较血浆小。与对照组相比,应激组小鼠海马与前额叶皮质的Hcy甲基化途径代谢酶MS和转硫途径代谢酶CSE表达水平显著降低;此外,应激小鼠海马的另一Hcy转硫途径代谢关键酶CBS也出现明显表达下调。结论慢性应激时,脑内Hcy主要代谢酶表达显著降低,可能导致脑内Hcy异化代谢受阻,引起脑内Hcy蓄积并易化应激性认知功能障碍。 展开更多
关键词 慢性束缚应激 认知障碍 同型半胱氨酸 甲硫氨酸合酶 亚甲基四氢叶酸还原酶 胱硫醚Β-合成酶 胱硫醚γ-裂解酶
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双酶偶联法测定发酵液中L-高丝氨酸的含量 被引量：2
4
作者 赵金花 魏亮 +2 位作者 徐宁 马振平 刘君 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期239-245,共7页
L-高丝氨酸是一种重要的非蛋白质氨基酸,在食品、饲料、医药和化工等领域具有非常广泛的应用。近年来通过环境友好的微生物发酵法生产L-高丝氨酸受到广泛关注。在工业菌种迭代选育过程中存在大量的L-高丝氨酸发酵样品分析检测工作,但目... L-高丝氨酸是一种重要的非蛋白质氨基酸,在食品、饲料、医药和化工等领域具有非常广泛的应用。近年来通过环境友好的微生物发酵法生产L-高丝氨酸受到广泛关注。在工业菌种迭代选育过程中存在大量的L-高丝氨酸发酵样品分析检测工作,但目前关于L-高丝氨酸检测方法的报道仍然较少。该研究将胱硫醚γ-裂解酶和乳酸脱氢酶偶联催化,建立了一种简单快速的L-高丝氨酸检测方法。通过对检测体系中各组分进行系统优化,确定了反应体系中最佳试剂浓度为胱硫醚γ-裂解酶12 U/mL,乳酸脱氢酶50 U/mL,NADH 0.5 mmol/L,磷酸吡哆醛(pyridoxal phosphate,PLP)0.1 mmol/L,检测温度为40℃,pH为7.5。该方法检测灵敏,在L-高丝氨酸质量浓度为0.005~0.1 g/L时具有良好的线性关系,R 2达到0.9982,能够满足发酵液中L-高丝氨酸产量的测定,为L-高丝氨酸高产菌种的选育提供了重要技术支撑。 展开更多
关键词 L-高丝氨酸 发酵 胱硫醚γ-裂解酶 乳酸脱氢酶 NADH 高通量检测方法
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硫化氢在单侧输尿管梗阻大鼠肾小管间质纤维化中的水平变化及其干预影响 被引量：5
5
作者 赵德安 刘君 +1 位作者 黄倩 韩子明 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期903-908,共6页
目的本研究通过构建单侧输尿管梗阻(UUO)诱导肾小管间质纤维化(TIF)大鼠模型,观察硫化氢(H2S)在血浆中的水平变化及两种关键合成酶胱硫醚β-合酶(CBS)、胱硫醚γ-裂解酶(CSE)在梗阻肾中的表达,并探讨H2S在TIF中的作用。方法构建UUO致TI... 目的本研究通过构建单侧输尿管梗阻(UUO)诱导肾小管间质纤维化(TIF)大鼠模型,观察硫化氢(H2S)在血浆中的水平变化及两种关键合成酶胱硫醚β-合酶(CBS)、胱硫醚γ-裂解酶(CSE)在梗阻肾中的表达,并探讨H2S在TIF中的作用。方法构建UUO致TIF大鼠模型,96只Sprague Dawley大鼠随机分为假手术组、模型组、NaHS低剂量治疗组(低剂量组)和NaHS高剂量治疗组(高剂量组),每组24只。治疗组分别于术后立即腹腔注射NaHS 1.4μmol/kg和7μmol/kg,每日两次;假手术组和模型组同时腹腔注射等量生理盐水。各组分别于术后7 d、14 d及21 d随机处死8只大鼠,采用去蛋白法测定血浆H2S含量;梗阻肾组织行苏木精-伊红及Masson染色,观察肾脏病理学变化;免疫组化方法检测梗阻肾组织CBS、CSE蛋白表达;RT-PCR法检测梗阻肾组织CBS mRNA、CSE mRNA的表达。结果 UUO大鼠肾小管间质损伤程度与血浆H2S浓度呈负相关(r=-0.891,P<0.01);外源性给予NaHS能显著减轻肾小管间质损伤(P<0.01),上调肾组织CBS、CSE蛋白及其mRNA的表达和血浆H2S水平(P<0.01),肾小管间质纤维化程度明显减轻(P<0.01);低、高NaHS剂量组间血浆H2S水平、CBS、CSE蛋白及其mRNA表达比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 H2S参与UUO致肾小管间质纤维化的发展过程,而且CBS/H2S体系和CSE/H2S体系在TIF中发挥关键作用。外源性补充NaHS可以延缓TIF的进展。 展开更多
关键词 输尿管梗阻 肾小管间质纤维化 硫化氢 胱硫醚Β-合酶 胱硫醚γ-裂解酶 大鼠
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应用生物信息学数据挖掘探究胱硫醚β-合成酶和胱硫醚γ-裂解酶基因表达在肝癌不良预后中的预测价值
6
作者 刘子衿 马亚楠 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期1169-1175,共7页
目的探究肝癌和胱硫醚β-合成酶(cystathionineβ-synthase,CBS)基因及胱硫醚γ-裂解酶(cystathionine-γ-lyase,CTH)基因的关系。方法通过挖掘GEO(gene expression omnibus)与TCGA(the cancer genome atlas)数据库,对肝癌的临床特征与... 目的探究肝癌和胱硫醚β-合成酶(cystathionineβ-synthase,CBS)基因及胱硫醚γ-裂解酶(cystathionine-γ-lyase,CTH)基因的关系。方法通过挖掘GEO(gene expression omnibus)与TCGA(the cancer genome atlas)数据库,对肝癌的临床特征与CBS及CTH基因表达进行了相关性分析。并通过对肝癌细胞系进行免疫印迹验证。结果CBS及CTH在肿瘤中的表达较非肿瘤明显降低(P<0.05)。Cox回归结果显示CBS是肝细胞癌不良预后的独立危险因素(HR=0.65,P=0.02)。针对CBS基因对不同肿瘤分期进行单因素logistics回归分析,发现肝癌TNM分期II期比I期(P=0.01,OR=0.50)、III期比I期(P=0.03,OR=0.56)、T分期T2期比T1期(P<0.01,OR=0.43)、T3期比T1期(P=0.02,OR=0.54)CBS基因显著降低。肝癌TNM分期III期比I期(P=0.01,OR=0.50),Edmondson分期II期比I期(P=0.03,OR=0.48),III期比I期(P<0.01,OR=0.30),IV期比I期(P=0.03,OR=0.22)CTH基因表达显著降低。GSEA富集分析结果显示,与肝癌细胞CTH与CBS基因表达相关性最高的信号通路为细胞色素P450(FDR Q<0.01,FWER P<0.01)。免疫印迹结果显示,与人肝永生化细胞系HL-7702相比,HLE和Hep3B细胞等肝细胞癌细胞系中CTH下游蛋白CSE表达降低。结论肿瘤组织中的CBS及CTH基因表达低于正常组织。CBS基因是肝细胞癌不良预后的独立危险因素。与CBS及CTH基因关系最为密切的是信号通路为细胞色素P450通路。 展开更多
关键词 肝癌 生物信息学 数据挖掘 胱硫醚Β-合成酶 胱硫醚γ-裂解酶
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CBS和CSE在成年牦牛子宫中的表达及定位
7
作者 路娟 王萌 +3 位作者 潘阳阳 余四九 叶小琳 徐庚全 《中国兽医科学》 CSCD 北大核心 2023年第12期1593-1599,共7页
胱硫醚β-合成酶(cystathionine β-synthase,CBS)通过与胱硫醚γ-裂解酶(cystathionine γ-lyase,CSE)共同作用生成内源性硫化氢(H2S),参与硫氨基酸代谢来调控细胞的生长、增殖、凋亡等正常生理功能。为了解CBS和CSE在成年牦牛子宫中... 胱硫醚β-合成酶(cystathionine β-synthase,CBS)通过与胱硫醚γ-裂解酶(cystathionine γ-lyase,CSE)共同作用生成内源性硫化氢(H2S),参与硫氨基酸代谢来调控细胞的生长、增殖、凋亡等正常生理功能。为了解CBS和CSE在成年牦牛子宫中的作用,分别采集妊娠期、黄体期、卵泡期牦牛子宫组织样品,通过qRT-PCR、Western-blot和免疫组织化学等方法检测CBS和CSE基因及其蛋白的相对表达情况。结果显示,CBS mRNA在黄体期牦牛子宫组织中表达量显著高于妊娠期和卵泡期(P<0.05),且妊娠期的表达量显著高于卵泡期(P<0.05);CSE mRNA在妊娠期的表达量最高(P<0.05),黄体期和卵泡期的表达差异性不显著(P>0.05)。CBS蛋白在卵泡期的表达量最高(P<0.05),黄体期和妊娠期的表达差异量不显著(P>0.05);CSE蛋白在卵泡期牦牛子宫组织中表达量显著高于妊娠期和黄体期(P<0.05),且黄体期的表达量显著高于妊娠期(P<0.05)。免疫组织化学定位显示,牦牛子宫内膜组织中有硫化氢合成酶CBS和CSE的表达,并且CBS和CSE在子宫内膜上皮细胞、腺上皮细胞和子宫内膜基质细胞上表达均为阳性。上述结果表明,CBS和CSE在成年牦牛子宫组织中均有表达,且在不同生殖周期CBS和CSE蛋白及其mRNA在牦牛子宫组织中的表达量有明显的变化。 展开更多
关键词 牦牛 子宫 胱硫醚Β-合成酶 胱硫醚γ-裂解酶
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硫化氢在ob/ob小鼠皮肤创面愈合中的作用与调控机制 被引量：4
8
作者 赵蕙琛 柴家超 +5 位作者 郑杰 王媛妹 王园园 郭秀芝 管庆波 刘元涛 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期1167-1173,共7页
目的:观察硫化氢(H2S)对ob/ob小鼠皮肤创面愈合的影响并探讨其作用机制。方法:将ob/ob小鼠随机分为生理盐水组、胰岛素组和NaHS(H2S供体)组,C57BL/6小鼠作为对照组,构建小鼠背部皮肤创面模型。干预后检测各组H2S释放量;用Western blot... 目的:观察硫化氢(H2S)对ob/ob小鼠皮肤创面愈合的影响并探讨其作用机制。方法:将ob/ob小鼠随机分为生理盐水组、胰岛素组和NaHS(H2S供体)组,C57BL/6小鼠作为对照组,构建小鼠背部皮肤创面模型。干预后检测各组H2S释放量;用Western blot检测胱硫醚γ-裂解酶(CSE)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白的表达差异;用RT-qPCR检测CSE的mRNA表达变化;使用免疫组织化学法检测中性粒细胞及单核/巨噬细胞的浸润数量;使用ELISA检测肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-6的水平;用Masson染色检测胶原沉积情况。结果:ob/ob小鼠皮肤创面肉芽组织中H2S释放及CSE蛋白、mRNA的表达水平以及胶原沉积显著低于C57BL/6小鼠(P<0.05)。外源性H2S可加速ob/ob小鼠皮肤创面愈合(P<0.05),增加胶原沉积。ob/ob小鼠创面中性粒细胞及单核/巨噬细胞浸润数量,TNF-α、IL-6的水平及MMP-9蛋白表达水平显著增加(P<0.05),NaHS组显著降低。结论:H2S可显著改善糖尿病难愈性溃疡的愈合,作用机制可能与其抗炎作用有关。 展开更多
关键词 糖尿病 创面愈合 硫化氢 胱硫醚γ-裂解酶 抗炎作用
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硫化氢在肝脏脂代谢中的生物学功能 被引量：3
9
作者 郭晓华 张迁 +4 位作者 李敏艳 梁琨 房宇 安焕平 成伟 《中国肝脏病杂志（电子版）》 CAS 2019年第1期17-22,共6页
肝脏是人体内最大的代谢器官,参与脂类、糖类和蛋白质等物质的合成与分解代谢。硫化氢(hydrogen sulfide,H_2S)是一种气体信号分子,参与调控多种病理生理过程。内源性H_2S主要由胱硫醚β-合成酶(cystathionineβ-synthase,CBS)、胱硫醚... 肝脏是人体内最大的代谢器官,参与脂类、糖类和蛋白质等物质的合成与分解代谢。硫化氢(hydrogen sulfide,H_2S)是一种气体信号分子,参与调控多种病理生理过程。内源性H_2S主要由胱硫醚β-合成酶(cystathionineβ-synthase,CBS)、胱硫醚γ-裂解酶(cystathionineγ-lyase,CTH)和3-巯基丙酮酸硫基转移酶(3-mercaptopyruvate sulfurtransferase,MST)催化合成,上述3种酶均存在于肝细胞中,通过催化产生的H_2S参与调控肝脏功能。近年来大量研究表明肝脏中H_2S的代谢影响脂蛋白合成,肝脏中H_2S代谢紊乱与脂肪肝和肝硬化的发生发展密切相关。本文主要对H_2S在肝脏脂代谢的生物学功能进行综述。 展开更多
关键词 硫化氢 肝脏 脂代谢 胱硫醚Β-合成酶 胱硫醚γ-裂解酶
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肿瘤坏死因子α诱导3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗的机制 被引量：2
10
作者 黄雌友 吴卫国 +2 位作者 王卓平 姚伟峰 王雯 《海南医学》 CAS 2015年第17期2510-2512,共3页
目的探讨内源性硫化氢(H2S)在肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗中的作用。方法 3T3-L1前脂肪细胞诱导分化成熟后,分别加入0、10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml TNF-α培养24 h,干预组在加入50 ng/ml TNF-α前30 mi... 目的探讨内源性硫化氢(H2S)在肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗中的作用。方法 3T3-L1前脂肪细胞诱导分化成熟后,分别加入0、10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml TNF-α培养24 h,干预组在加入50 ng/ml TNF-α前30 min分别加入胱硫醚γ-裂解酶(CSE)抑制剂炔丙基甘氨酸(PPG,10 mmol/L)和二辛可宁酸(BCA,2 mmol/L)。上述处理后各组细胞用胰岛素刺激。另设无TNF-α和胰岛素作用的对照组。用葡萄糖氧化酶法检测培养液中葡萄糖消耗,2-脱氧-[3H]-D-葡萄糖摄入法检测葡萄糖摄取,亚甲基蓝法测定检测细胞H2S含量。结果与对照组比较,3T3-L1脂肪细胞胰岛素刺激的葡萄糖消耗[(32.43±2.60)%vs(5.31±1.87)%,P<0.01]和摄取[(7.91±0.31)cpm vs(1.38±0.13)cpm,P<0.01]明显增加,10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml TNF-α作用后脂肪细胞葡萄糖消耗[(23.27±1.41)%、(14.73±3.76)%、(7.81±1.56)%vs(32.43±2.60)%,P<0.01)和摄取[(5.86±0.95)cpm、(2.60±0.35)cpm、(1.87±0.17)cpm vs(7.91±0.31)cpm,P<0.01)呈剂量依赖性减少;而H2S生成量呈浓度依赖性增加[(0.06±0.002)mmol/(g·protein)、(0.11±0.003)mmol/(g·protein)、(0.14±0.005)mmol/(g·protein)vs(0.17±0.001)mmol/(g·protein),P<0.01)]。PPG和BCA预处理分别使脂肪细胞对胰岛素刺激的葡萄糖消耗[(24.52±2.63)%、(27.84±1.82)%vs(14.73±3.76)%,P<0.01]和葡萄糖摄取[(7.22±0.27)cpm、(7.96±0.19)cpm vs(2.60±0.35)cpm,P<0.01]显著增加。结论内源性H2S在TNF-α诱导的脂肪细胞胰岛抵抗中发挥介导作用,抑制内源性CSE/H2S体系可能是治疗胰岛素抵抗的新靶点。 展开更多
关键词 胱硫醚γ-裂解酶 硫化氢 胰岛索抵抗 肿瘤坏死因子
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硫化氢对糖尿病大鼠ED的影响和机制研究 被引量：2
11
作者 毛玉山 叶小磊 +7 位作者 麦一峰 王少敏 洪中立 王黎明 赵廷启 王铁樵 吕迪 何文明 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期139-143,共5页
目的:观察硫化氢(H2S)对糖尿病(DM)大鼠勃起功能障碍(ED)的影响。方法:将70只SD雄性大鼠分为2组,60只腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立DM大鼠模型,10只注射生理盐水为正常对照。阿朴吗啡诱导勃起后检测DM造模成功大鼠的勃起功能情况,将存在E... 目的:观察硫化氢(H2S)对糖尿病(DM)大鼠勃起功能障碍(ED)的影响。方法:将70只SD雄性大鼠分为2组,60只腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立DM大鼠模型,10只注射生理盐水为正常对照。阿朴吗啡诱导勃起后检测DM造模成功大鼠的勃起功能情况,将存在ED的36只大鼠随机分成3组:糖尿病对照组(DM组)、糖尿病+硫氢化钠组(DM+NaHS组)和糖尿病+西地那非组(DM+sildenafil组)。DM+NaHS组每天腹腔注射NaHS(50μmol/kg),DM+sildenafil组每天给予西地那非(5 mg/kg)灌胃,DM组每日腹腔注射生理盐水,注射体积为0.25 mL。持续饲养12周后,观察各组大鼠勃起功能情况,采集各组大鼠动脉血,测定血液中H2S含量及各组阴茎海绵体组织胱硫醚γ-裂解酶(cystathionineγ-lyase,CSE)活性及CSE表达水平。结果:STZ诱发的DM造模成功率为81.7%(49/60),DM大鼠发生ED的比例为73.5%(36/49),与DM组比,DM+NaHS组和DM+sidenafil组大鼠勃起功能良好,3个实验组大鼠勃起率分别为(33.3±5.5)%、(54.5±5.3)%和(63.6±9.1)%。与正常大鼠组比,各组DM大鼠阴茎海绵体中CSE活性与表达水平均有下降,其中DM+NaHS组大鼠的CSE活性及表达水平显著低于DM组(P<0.05)和DM+sildenafil组(P<0.05)。结论:STZ诱导的糖尿病大鼠中ED发生率较高,H2S对糖尿病合并ED大鼠勃起功能有一定的促进作用。外源性给予H2S可以反馈性抑制大鼠阴茎组织中CSE的活性和表达。 展开更多
关键词 硫化氢 糖尿病 勃起功能障碍 胱硫醚γ-裂解酶
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大鼠视神经挫伤致视网膜硫化氢合成酶表达变化 被引量：1
12
作者 曾铭伟 王涛 +3 位作者 费成平 邹彩霞 刘夷嫦 谷振勇 《法医学杂志》 CAS CSCD 2018年第6期635-639,共5页
目的探讨大鼠视神经挫伤后视网膜硫化氢合成酶胱硫醚γ-裂解酶(cystathionineγ-lyase,CSE)、胱硫醚β-合成酶(cystathionine β-synthase,CBS)和3-巯基丙酮酸硫基转移酶(3-mercaptopyruvate sulfur-transferase,3-MST)的表达变化。方... 目的探讨大鼠视神经挫伤后视网膜硫化氢合成酶胱硫醚γ-裂解酶(cystathionineγ-lyase,CSE)、胱硫醚β-合成酶(cystathionine β-synthase,CBS)和3-巯基丙酮酸硫基转移酶(3-mercaptopyruvate sulfur-transferase,3-MST)的表达变化。方法建立大鼠视神经挫伤模型。将大鼠分为正常对照组、视神经挫伤组和假手术组。观察大鼠视网膜的组织病理学变化,检测视网膜神经节细胞数量和视网膜内侧部分厚度。用实时荧光定量PCR技术检测CBS、CSE和3-MST的mRNA表达变化。结果正常对照组大鼠视网膜组织结构正常,假手术组仅有轻微变化。与假手术组比较,视神经挫伤后各组大鼠视网膜出现明显损伤,视网膜神经节细胞数量呈时间依赖性减少且视网膜内侧部分厚度呈进行性变薄。正常对照组大鼠视网膜存在CSE、CBS和3-MST mRNA的基础表达。与正常对照组比较,假手术组CSE、CBS和3-MST的mRNA表达无明显变化。与假手术组比较,CBS mRNA表达在视神经挫伤后3 d、7 d和14 d呈时间依赖性上调;CSEmRNA表达在伤后7 d达到峰值,14 d时有所下降;3-MST mRNA表达在视神经挫伤后3 d和7 d有上调的趋势,14 d时有明显上调。结论大鼠视神经挫伤后视网膜硫化氢合成酶CBS、CSE和3-MST表达上调,这可能引起视网膜局部内源性硫化氢生成增多并产生代偿性保护效应。 展开更多
关键词 法医病理学 视神经损伤 视网膜 硫化氢合成酶 胱硫醚γ-裂解酶 胱硫醚Β-合成酶 3-巯基丙酮酸硫基转移酶 大鼠
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胱硫醚γ-裂解酶产生的内源性硫化氢对脂多糖诱导大鼠肝细胞凋亡的调节作用
13
作者 李翠 陈锋 张永亮 《中国急救复苏与灾害医学杂志》 2013年第5期431-436,共6页
目的探讨内源性胱硫醚γ-裂解酶（CSE）/硫化氢（H2S）体系在脂多糖（LPS）诱导的肝细胞凋亡中的调节作用。方法培养大鼠正常肝细胞系BRL。实验随机分组为溶剂对照组、siRNA阴性对照组、CSEsiRNA组、LPS组、CSEsiRNA＋LPS组。设立时间点... 目的探讨内源性胱硫醚γ-裂解酶（CSE）/硫化氢（H2S）体系在脂多糖（LPS）诱导的肝细胞凋亡中的调节作用。方法培养大鼠正常肝细胞系BRL。实验随机分组为溶剂对照组、siRNA阴性对照组、CSEsiRNA组、LPS组、CSEsiRNA＋LPS组。设立时间点为0h、4h、12h、24h；每组4个平行样。通过LPS孵育大鼠肝细胞系BRL不同时间，造成细胞损伤模型，以培养液上清中LDH活性反映细胞损伤程度。通过RT—PCR与Westernblot检测CSE基因、蛋白表达，用去蛋白法检测H2S生成情况；应用RNAi干扰技术，成功转染CSEsiRNA于肝细胞中，降低LPS引起的内源性H2S生成增多。通过荧光染色法检测BRL细胞线粒体膜电位（MMP）变化，通过Westernblot检测胞浆细胞色素c蛋白表达变化，应用流式细胞术检测BRL细胞凋亡率变化情况。结果LPS可显著提高CSE基因、蛋白的表达，并使H2S生成增多。同时也可使MMP降低并导致细胞凋亡率的增加。通过RNAi干扰技术，成功转染CSEsiRNA于肝细胞系BRL中，降低LPS引起的内源性H2S生成增多。与LPS单独作用BRL细胞相比，LPS作用转染后BRL细胞可导致MMP在短时间点降低，而在长时间点出现逐渐增加趋势；相应的细胞凋亡率则出现相反的趋势。结论在LPS诱导的细胞凋亡过程中，内源性CSE／H2S体系表现为早期抑制凋亡，晚期促进凋亡的特点。 展开更多
关键词 胱硫醚γ-裂解酶 硫化氢 凋亡 脂多糖 BRL细胞
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硫化氢——具有临床应用潜力的气体信号分子
14
作者 程翅 喻田 《国际麻醉学与复苏杂志》 CAS 2011年第1期64-66,共3页
背景硫化氢（hydrogen sulphide，H2s）是人们发现的第3个内源性气体信号转导分子，参与了许多疾病的发生发展过程，并且发现H2S相关药物对于某些疾病治疗取得了较为满意的结果。目的总结H2s在中枢神经系统、心血管系统等的作用以及相... 背景硫化氢（hydrogen sulphide，H2s）是人们发现的第3个内源性气体信号转导分子，参与了许多疾病的发生发展过程，并且发现H2S相关药物对于某些疾病治疗取得了较为满意的结果。目的总结H2s在中枢神经系统、心血管系统等的作用以及相关机制。内容从中枢神经系统、心血管系统、呼吸系统、消化系统、炎症反应以及其他作用等方面综述近几年来对H2S研究的最新进展，发现H2s可能成为探求病因的一个新方向以及研发相关药物的可能性。趋向随着对H2s认识的加深，H2s相关药物有望成为一种临床用药。 展开更多
关键词 硫化氢 气体信号分子 DL-炔丙基甘氨酸 胱硫醚γ-裂解酶
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嗜热四膜虫胱硫醚γ-裂解酶Cgl1的表达、定位及功能分析
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作者 韩挺 许静 王伟 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期286-295,共10页
含硫氨基酸在不同的生物体中具有重要调节功能,转硫途径相关酶促进半胱氨酸的生成和硫化氢产生。本研究从嗜热四膜虫中鉴定一种胱硫醚γ-裂解酶(cystathionineγ-lyase 1,CGL1,TTHERM_00052400)基因。CGL1在营养生长期高水平表达,而在... 含硫氨基酸在不同的生物体中具有重要调节功能,转硫途径相关酶促进半胱氨酸的生成和硫化氢产生。本研究从嗜热四膜虫中鉴定一种胱硫醚γ-裂解酶(cystathionineγ-lyase 1,CGL1,TTHERM_00052400)基因。CGL1在营养生长期高水平表达,而在饥饿阶段和有性生殖期,维持在较低的表达水平。通过密码子优化,人工合成CGL1基因,构建重组表达质粒pGEX-CGL1,转化大肠杆菌BL21(DE3)。E.coli/pGEX-CGL1表达重组蛋白质GST-Cgl1,并通过亲和层析获得纯化。GST-Cgl1裂解胱硫醚产生半胱氨酸,也具有裂解半胱氨酸和同型半胱氨酸产生H_2S的活性。进一步构建重组质粒pNEO4-3HA-CGL1和pSMC1hpNEO-CGL1,转化四膜虫细胞,获得带有HA标签和干扰CGL1的突变体细胞株。免疫荧光定位表明,HA-Cgl1生长期定位在亲本大核,饥饿期定位在细胞质,有性生殖前期定位在亲本大核,而在后期定位在胞质中。CGL1干扰的突变体细胞株在有性生殖过程中不能形成合子核,发育中的小核异常降解,产生仅有大核的异常单细胞。结果表明,嗜热四膜虫含有进化中保守的胱硫醚γ-裂解酶Cgl1。Cgl1具有产生和裂解半胱氨酸的活性。Cgl1定位在细胞质和细胞核中,参与了有性生殖过程细胞核的发育。 展开更多
关键词 嗜热四膜虫 胱硫醚γ-裂解酶 活性分析 细胞定位
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胱硫醚γ-裂解酶抑制剂逆转TNF-α引起的脂肪细胞胰岛素抵抗研究
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作者 吴卫国 姚伟峰 +2 位作者 黄雌友 王卓平 王雯 《现代中西医结合杂志》 CAS 2015年第20期2182-2184,共3页
目的观察胱硫醚γ-裂解酶(CSE)抑制剂对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的脂肪细胞胰岛素抵抗的影响。方法用TNF-α培养3T3-L1脂肪细胞,建立胰岛素抵抗脂肪细胞模型。经或未经CSE抑制剂炔丙基甘氨酸(PPG)和二辛可宁酸(BCA)预处理的脂肪细胞... 目的观察胱硫醚γ-裂解酶(CSE)抑制剂对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的脂肪细胞胰岛素抵抗的影响。方法用TNF-α培养3T3-L1脂肪细胞,建立胰岛素抵抗脂肪细胞模型。经或未经CSE抑制剂炔丙基甘氨酸(PPG)和二辛可宁酸(BCA)预处理的脂肪细胞与TNF-α作用24 h后,观察脂肪细胞胰岛素刺激的葡萄糖消耗和摄取及硫化氢(H2S)含量的变化。结果 TNF-α可增加内源性H2S生成并减少3T3-L1脂肪细胞胰岛素刺激的葡萄糖消耗和摄取。BCA和PPG预处理可逆转TNF-α导致的脂肪细胞胰岛素抵抗。结论内源性CSE/H2S系统在胰岛抵抗的发生发展中发挥着重要作用,可能是治疗胰岛素抵抗的一个新方向。 展开更多
关键词 胱硫醚γ-裂解酶抑制剂 硫化氢 胰岛素抵抗 肿瘤坏死因子
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敏感硫电极法在测定心血管组织细胞及血浆胱硫醚-γ-裂解酶/硫化氢的应用 被引量：85
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作者 耿彬 杜军保 唐朝枢北京大学第一医院心血管研究所 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期545-548,共4页
目的:建立测定微量硫化氢(Hydrogensulfide,H2S)的敏感硫电极法。方法:根据硫化氢的理化特性,应用化学反应将溶液中物理溶解和化学形式存在的硫化氢转变成硫离子(S2-),应用敏感硫电极检测微量S2-,换算出溶液中H2S,构建了敏感硫电极检测... 目的:建立测定微量硫化氢(Hydrogensulfide,H2S)的敏感硫电极法。方法:根据硫化氢的理化特性,应用化学反应将溶液中物理溶解和化学形式存在的硫化氢转变成硫离子(S2-),应用敏感硫电极检测微量S2-,换算出溶液中H2S,构建了敏感硫电极检测H2S的方法。并检测了大鼠及人血浆中H2S的浓度、大鼠心血管组织中内源性H2S的含量以及大鼠心血管组织和细胞胱硫醚γ裂解酶(cystathionineγlyase,CSE)的活性。结果:敏感硫电极检测1～80μmol/L的S2-有较好的指数相关关系,应用该方法检测到雄性和雌性大鼠血浆H2S的浓度分别为(40±4)和(41±5)μmol/L,差异无统计学意义,人类男性和女性静脉血血浆H2S浓度分别为(33±4)μmol/L和(35±5)μmol/L,差异无统计学意义。雌、雄大鼠主动脉组织H2S的含量分别为每毫克蛋白(24±6)和(25±5)nmol,心肌组织含量分别为每毫克蛋白(19±4)和(19±6)nmol,差异无统计学意义。采用敏感硫电极法测量主动脉组织CSE活性与传统方法测量结果差异无统计学意义,但可精确测量出血管平滑肌细胞CSE的活性。结论:敏感硫电极法可以应用于CSE/H2S信号通路的检测。 展开更多
关键词 电极 胱硫醚γ裂解酶 硫化氢
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内源性硫化氢参与缺血后处理减轻离体大鼠心脏缺血/再灌注损伤 被引量：30
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作者 徐钢 季永 +1 位作者 汪莉 曾因明 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期910-914,共5页
目的探讨内源性硫化氢是否参与缺血后处理减轻大鼠心肌缺血/再灌注损伤。方法Sprague Dawley(SD)大鼠离体心脏Langendorff灌流,平衡20min,全心缺血30min,复氧灌注60min,在复灌即刻给与短暂停灌15s/复灌15 s循环4次造成心肌缺血后处理模... 目的探讨内源性硫化氢是否参与缺血后处理减轻大鼠心肌缺血/再灌注损伤。方法Sprague Dawley(SD)大鼠离体心脏Langendorff灌流,平衡20min,全心缺血30min,复氧灌注60min,在复灌即刻给与短暂停灌15s/复灌15 s循环4次造成心肌缺血后处理模型。预先给予胱硫醚-γ-裂解酶(cystanthionine-γ-lysase,CSE)抑制剂炔丙基甘氨酸(L-propargylglycine,PAG),以及给予PAG后加用外源性硫化氢供体NaHS后处理,观察它们对缺血后处理的影响。记录心率(HR)、左室发展压(LVDP)、冠脉流出量(CF);检测灌流液中乳酸脱氢酶(LDH)活性、心肌组织CSE活性、硫化氢的含量以及心肌梗死面积。结果缺血/再灌注组LVDP下降、冠脉灌流液中LDH活性明显增加、心肌梗死面积增加(vsControl组,P<0.05)。缺血后处理组LVDP升高、冠脉灌流液中LDH活性下降、心肌梗死面积缩小(vsIR组,P<0.05)。PAG加缺血后处理组心肌CSE活性及H2S生成下降、并且逆转了缺血后处理的作用,而外源性硫化氢供体NaHS后处理组H2S生成回升、LVDP升高、心肌梗死面积缩小(vsIR组,P<0.05)。结论内源性硫化氢参与大鼠心肌缺血后处理减轻缺血/再灌注损伤。 展开更多
关键词 硫化氢 缺血/再灌注损伤 缺血后处理 胱硫醚-γ-裂解酶
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硫化氢对离体大鼠心脏缺血/再灌注损伤的影响及机制初探 被引量：24
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作者 王晓燕 曾翔俊 +7 位作者 郑少鹏 马立权 邱笑违 芦玲巧 王红霞 张立克 唐朝枢 郝刚 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1447-1451,共5页
目的观察内源性CSE/H2S通路的改变以及给予H2S供体对缺血/再灌注心脏的影响,探讨该通路与心脏缺血/再灌注损伤的关系及作用机制。方法采用Langendorff离体灌流装置、通过停灌30min/复灌30min方式造成Wistar大鼠心肌缺血/再灌注损伤模型... 目的观察内源性CSE/H2S通路的改变以及给予H2S供体对缺血/再灌注心脏的影响,探讨该通路与心脏缺血/再灌注损伤的关系及作用机制。方法采用Langendorff离体灌流装置、通过停灌30min/复灌30min方式造成Wistar大鼠心肌缺血/再灌注损伤模型;采用外源性NaHS(40μmol.L-1)分别在停灌30min前(SIR)与停灌30min后处理(IRS)对缺血/再灌注心脏的影响。记录心脏收缩期左心室内压上升的最大变化速率(+dp/dtmax)、舒张期左心室内压下降的最大变化速率(-dp/dtmax)及左室内压差(LVP=左室收缩压-左室舒张压)。采用比色法检测灌流液中乳酸脱氢酶(LDH)、心肌MDA及SOD;采用比色法检测心肌胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)活性;采用RT-PCR方法测定心肌组织CSEmRNA表达。结果与缺血/再灌注组(I/R)30min相比,SIR组及IRS组±dp/dtmax、LVP均增高,LDH降低;I/R组MDA水平高于对照组(CON)、SIR组及IRS组(P<0.05,P<0.01);IR组SOD活性低于SIR组及IRS组(P<0.05),但与CON组差别无显著性;I/R组大鼠心肌CSE活性低于CON组(P<0.05);而大鼠心肌CSEmRNA的表达与CON组差异无显著性。结论在缺血前后给予外源性NaHS均可改善因再灌注损伤引起的心肌收缩及舒张功能障碍;其作用机制可能是通过提高心肌SOD活性,增加氧自由基清除而拮抗缺血/再灌注引起的心功能及细胞膜损伤;心肌缺血/再灌注时内源性CSE活性抑制可能与心功能障碍及细胞损伤有关。 展开更多
关键词 硫化氢 缺血/再灌注损伤 大鼠 胱硫醚-γ-裂解酶
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硫化氢对肢体缺血再灌注所致大鼠急性肺损伤的作用及机制 被引量：16
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作者 黄新莉 仲维佳 +2 位作者 刘清和 田庆显 周君琳 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期9-13,共5页
目的:探讨内、外源性硫化氢(H2S)在肢体缺血再灌注(IR)所致大鼠急性肺损伤(ALI)中的作用并初探其机制。方法:应用双大腿根部止血带复制大鼠双后肢缺血及再灌注后肺损伤模型。将120只SD大鼠随机分为对照组(control)、IR组、NaHS+IR组和抑... 目的:探讨内、外源性硫化氢(H2S)在肢体缺血再灌注(IR)所致大鼠急性肺损伤(ALI)中的作用并初探其机制。方法:应用双大腿根部止血带复制大鼠双后肢缺血及再灌注后肺损伤模型。将120只SD大鼠随机分为对照组(control)、IR组、NaHS+IR组和抑制H2S生成的炔丙基甘氨酸(PPG)+IR组。肢体缺血再灌注后4 h处死动物,测定肺系数;光镜下观察肺组织形态学改变;化学法检测血浆H2S、NO、CO含量,肺组织丙二醛(MDA)含量、胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和血红素加氧酶(HO)活性以及支气管肺泡灌洗液(BALF)中中性粒细胞(PMN)数目和蛋白含量变化,并对血浆H2S含量与上述指标进行相关性分析。结果:大鼠肢体IR可引起肺组织明显的形态学改变、肺系数和肺组织MDA含量增加、BALF中PMN数目和蛋白含量增加、血浆H2S含量和肺组织CSE活性下降、肺组织iNOS活性和HO活性及血浆中NO含量和CO含量增加。预先给予NaHS可显著减轻IR所致上述指标的改变;而预先给予PPG可加重IR所致肺损伤,使BALF中PMN数目和蛋白含量、血浆NO含量和肺组织iNOS活性进一步增加,但对血浆CO含量和肺组织HO活性无明显影响。H2S含量与CSE活性、血浆CO含量、肺组织HO活性呈正相关(均P<0.01);与其它指标呈负相关(均P<0.01)。结论:H2S/CSE体系的下调参与介导了大鼠肢体IR所致大鼠ALI的发生,内、外源性H2S具有抗肢体IR所致ALI的作用,该作用可能与其抗氧化效应、减轻PMN所致肺部过度炎症反应以及下调NO/iNOS体系、上调CO/HO体系有一定关系。 展开更多
关键词 硫化氢 急性肺损伤 一氧化氮 一氧化碳 胱硫醚γ裂解酶
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