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大黄免煎颗粒通过miR-135a/FAM129A分子轴影响胰腺泡细胞损伤的作用机制 被引量：1
1
作者 程冰洁 郭霞 +2 位作者 戴雅琴 陈佩 李长雪 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2022年第21期5374-5379,共6页
目的探讨大黄免煎颗粒通过miR-135a/FAM129A分子轴对胰腺泡细胞损伤的作用机制。方法采用牛胆酸钠诱导大鼠胰腺泡细胞(AR42J细胞),构建胰腺泡细胞损伤模型。实验分为空白对照组(NC组)、模型组(Model组)、大黄免煎颗粒组(DHG组)、miR-135... 目的探讨大黄免煎颗粒通过miR-135a/FAM129A分子轴对胰腺泡细胞损伤的作用机制。方法采用牛胆酸钠诱导大鼠胰腺泡细胞(AR42J细胞),构建胰腺泡细胞损伤模型。实验分为空白对照组(NC组)、模型组(Model组)、大黄免煎颗粒组(DHG组)、miR-135a抑制物组(miR-135a inhibitor组)、过表达FAM129A组(pcDNA-FAM129A组)及miR-135a模拟物+过表达FAM129A组(miR-135a mimic+pcDNA-FAM129A组)。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测AR42J细胞及损伤模型中微小RNAs(miRNAs)的表达水平。双荧光素酶报告基因验证miR-135a和FAM129A的靶向关系。CCK-8检测各组细胞活力。膜联蛋白(Annexin)V-异硫氰酸荧光素(FITC)/碘化丙啶(PI)检测各组细胞凋亡水平。脂肪酶和淀粉酶试剂盒检测脂肪酶和淀粉酶活性。Western印迹检测各组细胞中FAM129A的表达水平。结果成功构建胰腺泡细胞损伤模型,且牛胆酸钠IC50为522.8μmol/L。miR-135a在胰腺泡细胞损伤模型中异常高表达,且大黄免煎颗粒能抑制其表达(P<0.05)。FAM129A是miR-135a的靶基因。大黄免煎颗粒通过抑制miR-135a表达上调FAM129A的表达水平,从而促进胰腺泡细胞损伤模型增殖并抑制其凋亡及脂肪酶和淀粉酶活性(P<0.05)。结论大黄免煎颗粒通过miR-135a/FAM129A分子轴促进胰腺泡细胞增殖并抑制其凋亡及脂肪酶和淀粉酶活性,从而保护胰腺泡细胞免受损伤。 展开更多
关键词 胰腺炎 大黄免煎颗粒 胰腺泡细胞损伤 miR-135a FAM129A
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MicroRNA-30a-5p靶向Beclin1抑制自噬减轻牛胆酸钠诱导的胰腺泡细胞损伤 被引量：1
2
作者 郑学松 胡善策 冯广才 《实用药物与临床》 CAS 2019年第7期684-692,共9页
目的探究微小型RNA-30a-5p(MicroRNA-30a-5p,miR-30a-5p)对胰腺泡细胞损伤的影响及作用机制.方法不同浓度牛胆酸钠诱导AR42J细胞损伤,取最佳用药浓度,建立胰腺泡损伤模型.细胞分为Control组、Model组、mimicmock组及miR-30a-5p mimic组... 目的探究微小型RNA-30a-5p(MicroRNA-30a-5p,miR-30a-5p)对胰腺泡细胞损伤的影响及作用机制.方法不同浓度牛胆酸钠诱导AR42J细胞损伤,取最佳用药浓度,建立胰腺泡损伤模型.细胞分为Control组、Model组、mimicmock组及miR-30a-5p mimic组,牛胆酸钠及miR-30a-5p mimic处理细胞后,RT-PCR检测miR-30a-5p mRNA水平,MTT检测细胞存活,Hoechst检测细胞凋亡,试剂盒检测脂肪酶及淀粉酶活性,ELISA检测多种炎症因子的浓度,免疫印记检测自噬相关蛋白及PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白的表达.生物信息预测miR-30a-5p和Beclin1的靶向关系,通过荧光素酶报告实验验证.pcDNA Beclin1(pc-Beclin1)及miR-30a-5p mimic转染经牛胆酸钠处理的AR42J细胞,检测细胞存活、凋亡、脂肪酶淀粉酶活性、自噬相关蛋白表达及炎症因子浓度.结果500μmol/L牛胆酸钠处理AR42J细胞.miR-30a-5p mimic可显著提高Model组AR42J细胞中miR-30a-5p的mRNA水平及细胞存活率,降低凋亡细胞百分比、脂肪酶淀粉酶活性及细胞培养上清中炎症因子的浓度.同时,miR-30a-5p mimic可显著降低Model组AR42J细胞中LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值及Beclin1表达,提高p62、p-P13K、p-Akt及p-mTOR表达.miR-30a-5p mimic显著降低Beclin1wt的荧光酶活性.pc-Beclin1显著上调Beclin1,提高LC3表达,并显著减弱miR-30a-5pmimic对AR42J细胞的促增殖抗凋亡作用及对炎症反应的抑制作用.结论miR-30a-5p通过靶向下调Beclin1,减轻牛胆酸钠诱导的胰腺泡细胞损伤. 展开更多
关键词 miR-30a-5p BECLIN1 胰腺泡细胞损伤 自噬
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