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实验性胰腺炎大鼠胰腺外分泌细胞的坏死与凋亡 被引量:2
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作者 张丽杰 刘人杰 +1 位作者 马鸿达 李恩鸿 《天津医科大学学报》 1996年第4期16-18,共3页
按Aho等的方法,给大鼠胆胰管内逆行注射牛磺胆酸钠,制成急性坏死性胰腺炎动物模型。采用HE染色及DNA末端标记法(TUNEL)观察了术后(注药后)不同时程胰腺外分泌细胞的病理组织学改变。发现牛磺胆酸钠可引起胰腺组织的... 按Aho等的方法,给大鼠胆胰管内逆行注射牛磺胆酸钠,制成急性坏死性胰腺炎动物模型。采用HE染色及DNA末端标记法(TUNEL)观察了术后(注药后)不同时程胰腺外分泌细胞的病理组织学改变。发现牛磺胆酸钠可引起胰腺组织的坏死及凋亡,前者出现较早并随术后时间延长而逐渐加重,且伴有明显的炎症反应;后者出现略迟,占较小部分。这表明,这种胰腺炎动物模型可引起胰腺外分泌细胞的坏死及凋亡。 展开更多
关键词 胰腺 胰腺分泌细胞 坏死 凋亡
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IL-37对脂多糖诱导AR42J细胞炎症反应及p38MAPK/NF-κB通路的影响 被引量:3
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作者 韩永艳 司金春 +3 位作者 杨林 赵国尧 刘慧丽 陈培莉 《广东医学》 CAS 2021年第8期920-923,共4页
目的探究白细胞介素-37(IL-37)对脂多糖(LPS)诱导AR42J细胞炎症反应的影响及可能的作用机制。方法体外培养AR42J细胞,将细胞分为空白组(细胞不进行任何处理)、阴性对照组(转染pcDNA3.1质粒)与IL-37过表达组(转染pcDNA3.1-IL-37重组载体)... 目的探究白细胞介素-37(IL-37)对脂多糖(LPS)诱导AR42J细胞炎症反应的影响及可能的作用机制。方法体外培养AR42J细胞,将细胞分为空白组(细胞不进行任何处理)、阴性对照组(转染pcDNA3.1质粒)与IL-37过表达组(转染pcDNA3.1-IL-37重组载体),转染后在培养液中添加10μg/mL LPS,诱导AR42J细胞炎症反应。CCK-8法检测细胞增殖活性;酶联免疫法检测细胞中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-6、IL-1β水平;酶动力学法检测淀粉酶分泌率;免疫印迹法检测细胞中p-p38MAPK、p38MAPK、核转录因子-κB(NF-κB)蛋白表达情况。结果与空白组与阴性对照组相比,IL-37过表达组AR42J细胞中IL-37蛋白表达量升高,AR42J细胞增殖率升高,TNF-α、IL-6、IL-1β水平降低,细胞淀粉酶分泌率降低,AR42J细胞核NF-κB蛋白表达降低,细胞质NF-κB蛋白表达升高(P<0.05)。结论IL-37能够抑制LPS诱导AR42J细胞炎症反应,上调细胞增殖活性,其机制可能与抑制p38MAPK/NF-κB通路活化有关。 展开更多
关键词 胰腺分泌细胞 细胞介素-37 脂多糖 有丝分裂原活化蛋白激酶 核因子
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生长抑素减轻小鼠胰岛移植过程中胰腺外分泌细胞对移植胰岛的损伤 被引量:2
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作者 韩小乐 糜亮亮 +2 位作者 周乐亮 张鹏 田磊 《中华器官移植杂志》 CAS CSCD 2015年第7期417-423,共7页
目的 观察与探讨生长抑素减轻小鼠胰岛移植过程中胰腺外分泌细胞对移植胰岛的损伤及其机制.方法 (1)体外实验:选取20只雄性BALB/C小鼠,采用随机数字表法分为生长抑素组和生理盐水组,每组10只.在获取胰岛手术麻醉前30 min,生长抑素组... 目的 观察与探讨生长抑素减轻小鼠胰岛移植过程中胰腺外分泌细胞对移植胰岛的损伤及其机制.方法 (1)体外实验:选取20只雄性BALB/C小鼠,采用随机数字表法分为生长抑素组和生理盐水组,每组10只.在获取胰岛手术麻醉前30 min,生长抑素组小鼠腹腔注射生长抑素10μg/g,生理盐水组注射等体积的生理盐水,然后分别收集两组小鼠的胰腺外分泌细胞及胰岛细胞,流式细胞仪检测两种细胞凋亡情况.(2)体内实验:获取小鼠胰岛及胰腺外分泌细胞,并对胰岛进行纯度及活性检测.应用链脲佐菌素建立小鼠糖尿病模型,然后进行胰岛移植,分别于小鼠左肾被膜上、下级同时移植胰岛250个及等体积的胰腺外分泌细胞.采用随机数字表法将成功建立胰岛移植模型的40只小鼠平均分为2组,实验组术后腹腔注射生长抑素,连续28 d,对照组术后注射等体积生理盐水,连续28 d.同时两组小鼠分别腹腔注射5乙炔基-2&#39;-脱氧尿苷(EDU)5 μg/g,连续28 d.术后连续监测小鼠血糖;术后第8天,两组小鼠均进行葡萄糖耐量实验(IPGTT);术后10和28 d两组各随机选取10只小鼠分别切除左肾,采用免疫组织化学法检测左肾包膜下抗淀粉酶抗体的表达,采用免疫荧光染色法检测移植胰岛β细胞增殖情况.结果 (1)流式细胞检测结果显示,生长抑素组小鼠胰腺外分泌细胞凋亡率明显高于对照组(P<0.05),两组间胰岛细胞凋亡率的差异无统计学意义(P>0.05);(2)获取的小鼠胰岛纯度及活性均高于95%.胰岛移植后,两组小鼠血糖均恢复正常,对照组较实验组血糖恢复正常时间延迟(P<0.05),对照组的血糖水平明显高于实验组;IPGTT实验结果显示移植物血糖调节功能正常;术后10d实验组和对照组移植物周围均可见抗淀粉酶抗体阳性颗粒,但实验组阳性颗粒数较对照组减少(P<0.05);免疫荧光检测显示,实验组� 展开更多
关键词 胰岛移植 生长抑素 胰腺分泌细胞 凋亡
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丁酸钠、激活素A和地塞米松诱导小鼠胚胎干细胞分化为胰腺外分泌细胞 被引量:1
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作者 任萌 闵军 +4 位作者 严励 商昌珍 曹君 李静宜 程桦 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期1585-1590,共6页
目的:探讨丁酸钠、激活素A(activinA)和地塞米松诱导小鼠胚胎干细胞(ES细胞)分化为胰腺外分泌细胞的可行性,并对诱导作用进行比较。方法:小鼠ES细胞悬浮培养为拟胚体后,以不同浓度的丁酸钠(1mmol/L,2mmol/L,3mmol/L)诱导分化,通过RT-PC... 目的:探讨丁酸钠、激活素A(activinA)和地塞米松诱导小鼠胚胎干细胞(ES细胞)分化为胰腺外分泌细胞的可行性,并对诱导作用进行比较。方法:小鼠ES细胞悬浮培养为拟胚体后,以不同浓度的丁酸钠(1mmol/L,2mmol/L,3mmol/L)诱导分化,通过RT-PCR检测不同时点胰腺特异性外分泌基因的表达水平,确定丁酸钠诱导ES细胞向胰腺外分泌细胞分化的最佳浓度和作用时间。进一步单独或联合应用丁酸钠、activinA、地塞米松诱导ES细胞分化,并通过细胞形态学变化、RT-PCR和免疫荧光检测观察不同诱导方案对胰腺外分泌基因和蛋白表达的影响,确定最佳诱导方案。结果:1mmol/L丁酸钠能明显促进胰腺外分泌基因amylase、chymot-rypsinogen、elastase1、elastase2和carboxypeptidase的表达,随着丁酸钠浓度的增加,丁酸钠的诱导作用逐渐减弱;1mmol/L丁酸钠诱导第3d后可检测到amylase、chymotrypsinogen、elastase1、elastase2和carboxypeptidase的表达,在第5d外分泌基因mRNA表达水平达到高峰,随后逐渐下降。与自发对照组相比,单独应用丁酸钠、activinA、地塞米松诱导ES细胞分化,均能提高amylase、chymotrypsinogen、elastase1、elastase2和carboxypeptidase的表达水平。但联合应用丁酸钠、activinA、地塞米松诱导后,ES细胞形态更为均一,上述胰腺外分泌基因的表达进一步增强;免疫荧光结果显示amylase表达为阳性。结论:低浓度的丁酸钠、activinA以及地塞米松均可以诱导小鼠ES细胞胰腺外分泌基因的表达,多种诱导因子的联合作用能明显提高胰腺外分泌细胞的诱导效率。 展开更多
关键词 胚胎干细胞 丁酸钠 地塞米松 胰腺分泌细胞 细胞分化
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α-1抗胰蛋白酶减轻小鼠胰腺外分泌细胞对移植胰岛的损伤 被引量:1
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作者 韩小乐 黎沙 +3 位作者 夏小林 糜亮亮 周乐亮 田磊 《中华器官移植杂志》 CAS CSCD 2015年第2期102-107,共6页
目的探讨α-1抗胰蛋白酶(A1AT)减轻胰腺外分泌细胞对移植胰岛的损伤及促进胰岛口细胞增殖。方法(1)体外实验:选10只BALB/c小鼠,挑取所有的胰岛并收集胰腺外分泌细胞。纯化胰岛组(n=6),每孔100个胰岛,常规培养;实验组(n=6... 目的探讨α-1抗胰蛋白酶(A1AT)减轻胰腺外分泌细胞对移植胰岛的损伤及促进胰岛口细胞增殖。方法(1)体外实验:选10只BALB/c小鼠,挑取所有的胰岛并收集胰腺外分泌细胞。纯化胰岛组(n=6),每孔100个胰岛,常规培养;实验组(n=6),每孔100个胰岛和等体积外分泌细胞同时培养,并加入A1AT(0.5mg/m1);对照组(n=6),每孔100个胰岛和等体积外分泌细胞同时培养。48h后,收集各孔上清液,分别检测胰岛素含量及胰蛋白酶浓度;然后分别换低糖、高糖RPMI-1640培养液,行胰岛素释放实验。(2)体内实验:链脲佐菌素腹腔注射诱导BALB/c小鼠成为糖尿病小鼠。实验组(n=10)和对照组(n=10)分别于小鼠左肾被膜上下级同时移植胰岛细胞250个和等体积的胰腺外分泌细胞,术后实验组按腹腔注射A1AT83mg/kg(28d),对照组注射等量生理盐水(28d),同时两组小鼠分别按0.5btg/g腹腔注射EDU(28d)。1个月后切除左肾,免疫组织化学染色法检测左肾包膜下抗淀粉酶抗体的表达,免疫荧光染色法检测移植胰岛B细胞增殖情况,并继续检测血糖。结果(1)纯化胰岛组胰岛素含量为(1.53±0.33)μg/孔,实验组为(1.26±0.13)μg/孔,对照组为(0.82±0.24)μg/孔,各组间的差异均有统计学意义(P〈0.01)。纯化胰岛组胰蛋白酶浓度为(1.05±0.22)ng/ml,实验组为(2.42±0.44)ng/ml,对照组为(5.73±1.12)ng/ml,各组间的差异均有统计学意义(P〈0.01)。纯化胰岛组胰岛素刺激指数为4.11±1.45,实验组为2.53±1.52,对照组为1.32±1.12,各组间的差异均有统计学意义(P〈0.01)。(2)胰岛移植后,实验组和对照组血糖均降至正常,对照组较实验组血糖恢复正常时间延迟,组间差异有统计学意义(P〈0.05)。切除两组小鼠左肾3 展开更多
关键词 胰岛移植 胰腺分泌细胞 胰蛋白酶
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奥曲肽对缺氧环境下大鼠胰腺外分泌细胞增殖、氧耗及HIF-1α、VEGF表达的影响
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作者 刘森峰 冯樾 +3 位作者 王圣禹 冯逸飞 莫庆辉 田磊 《广西医科大学学报》 CAS 2021年第5期887-892,共6页
目的:探究奥曲肽(Oct)在胰岛移植早期缺氧环境下对胰腺外分泌细胞AR42J的影响及可能机制。方法:将胰岛β细胞Min6分为常氧培养组和缺氧培养组,CCK-8法检测Min6细胞在常氧、缺氧环境中的增殖活性以确定培养时间。AR42J细胞分为常氧阴性... 目的:探究奥曲肽(Oct)在胰岛移植早期缺氧环境下对胰腺外分泌细胞AR42J的影响及可能机制。方法:将胰岛β细胞Min6分为常氧培养组和缺氧培养组,CCK-8法检测Min6细胞在常氧、缺氧环境中的增殖活性以确定培养时间。AR42J细胞分为常氧阴性对照组、常氧+Oct组、缺氧阴性对照组、缺氧+Oct组,将Oct稀释为不同浓度(10-6 mol/L、10-7 mol/L、10-8 mol/L、10-9 mol/L、10-10 mol/L)处理细胞。CCK-8法检测常氧、缺氧条件下Oct对AR42J增殖活性的影响,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测AR42J细胞培养上清液中血管内皮生长因子(VEGF)含量,磷氧探针检测细胞耗氧量,Western blotting法检测缺氧诱导因子(HIF-1α)蛋白表达。结果:Min6细胞在培养9 h后增殖活性达到最佳。与缺氧阴性对照组比较,缺氧+Oct组在作用3 h、6 h、9 h细胞活力上升(P<0.05)。与缺氧阴性对照组比较,除10-10 mol/L Oct组细胞HIF-1α表达无明显差异(P>0.05)外,其他各浓度Oct组HIF-1α蛋白表达量显著下降(均P<0.05)。与常氧阴性对照组比较,各浓度Oct组HIF-1α蛋白表达量均显著降低(均P<0.05)。与缺氧阴性对照组比较,缺氧+Oct组细胞上清VEGF含量和耗氧量降低(均P<0.05)。与常氧阴性对照组比较,各加药组HIF-1α表达降低(P<0.05),而VEGF含量、细胞耗氧量无明显差异(P>0.05)。结论:Oct提高缺氧环境下胰腺外分泌细胞活力,抑制HIF-1α与VEGF,降低细胞耗氧量,这可能是Oct对胰岛移植后缺氧环境中的胰岛细胞起到保护作用的机制之一。 展开更多
关键词 奥曲肽 胰腺分泌细胞 增殖 VEGF HIF-1α
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糖尿病小鼠左肾被膜下胰岛细胞与胰腺外分泌细胞共同移植动物模型的建立
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作者 韩小乐 田磊 +1 位作者 夏小林 糜亮亮 《广西医科大学学报》 CAS 2014年第5期723-726,共4页
目的:建立糖尿病小鼠左肾被膜下同种异体胰岛细胞与胰腺外分泌细胞共同移植动物模型及探讨胰腺外分泌细胞对胰岛移植物的损伤作用.方法:(1)体内实验:采用胆总管内逆行灌注胶原酶联合淋巴细胞分离液的方法来分离纯化胰岛,人工挑取... 目的:建立糖尿病小鼠左肾被膜下同种异体胰岛细胞与胰腺外分泌细胞共同移植动物模型及探讨胰腺外分泌细胞对胰岛移植物的损伤作用.方法:(1)体内实验:采用胆总管内逆行灌注胶原酶联合淋巴细胞分离液的方法来分离纯化胰岛,人工挑取胰岛细胞并收集胰腺外分泌细胞.链脲佐菌素腹腔注射诱导BALB/C小鼠成为糖尿病小鼠.单纯移植组(n=10)每只小鼠于左肾被膜上极移植胰岛细胞250个,共同移植组(n =10)每只小鼠于左肾被膜上下极同时移植胰岛细胞250个和等体积的胰腺外分泌细胞,持续观测血糖及生命体征变化,1个月后切除左肾并继续检测血糖.(2)体外实验:利用双硫腙对胰岛进行特异性染色来计算胰岛产量及纯度,利用台盼蓝染色鉴定胰岛细胞的活性,以及用葡萄糖刺激胰岛素释放实验来检测胰岛功能.结果:(1)胰岛移植后,单纯移植组及共同移植组血糖均逐步降至正常,共同移植组较单纯移植组血糖恢复正常时间延迟,移植术后第2,3,4,5天,单纯移植组受鼠血糖低于共同移植组,差异有统计学意义(P<0.05).切除两组受鼠左肾3d后,两组受鼠血糖均>21 mmol/L.(2)每只小鼠可获得150~200个高质量胰岛,纯度及活性均高于90%,葡萄糖刺激后胰岛素释放量明显增加(SI=2.90).结论:(1)成功建立糖尿病小鼠左肾被膜下同种异体胰岛细胞与胰腺外分泌细胞共同移植动物模型.(2)胰腺外分泌细胞与胰岛细胞同时移植会延迟植入胰岛功能恢复正常的时间. 展开更多
关键词 胰岛细胞 胰腺分泌细胞 糖尿病 共同移植
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