不同蛋白质源饲料中添加α-酮戊二酸对杂交鲟幼鱼肝脏谷氨酰胺含量、抗氧化能力及生长激素、胰岛素样生长因子-Ⅰ基因表达的影响 被引量：5

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作者 王连生 徐奇友 +1 位作者 陈迪 郑荣宁 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期3917-3924,共8页

本试验旨在研究不同蛋白质源饲料中添加α-酮戊二酸对杂交鲟(Acipenser schrenckii♀×Acipenser baeri)幼鱼肝脏谷氨酰胺(Gln)含量、抗氧化能力及生长激素(GH)、胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)基因表达的影响。分别以大豆浓缩蛋白和... 本试验旨在研究不同蛋白质源饲料中添加α-酮戊二酸对杂交鲟(Acipenser schrenckii♀×Acipenser baeri)幼鱼肝脏谷氨酰胺(Gln)含量、抗氧化能力及生长激素(GH)、胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)基因表达的影响。分别以大豆浓缩蛋白和大豆浓缩蛋白+鱼粉为蛋白质源,设2个α-酮戊二酸(AKG)添加量(0和1%),配制4种试验饲料。选取平均体重为(7.65±0.04)g的杂交鲟幼鱼500尾,随机分为4组,每组5个重复,每个重复25尾,养殖周期为8周。结果表明:饲料中添加1%AKG显著提高肝脏Gln含量和谷氨酰氨合成酶(GS)活性(P<0.05),对肝脏碱性磷酸酶(ALP)活性无显著影响(P>0.05)。蛋白质源对肝脏Gln含量、GS活性和ALP活性无显著影响(P>0.05),且蛋白质源和AKG添加量对肝脏Gln含量、GS活性和ALP活性无显著交互作用(P>0.05)。饲料中添加1%AKG显著降低肝脏丙二醛(MDA)含量,显著提高肝脏还原型谷胱甘肽(GSH)含量(P<0.05)。与大豆浓缩蛋白+鱼粉作为蛋白质源相比,大豆浓缩蛋白作为蛋白质源显著提高肝脏GSH含量(P<0.05)。蛋白质源和AKG添加量对肝脏超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性均无显著影响(P>0.05),且蛋白质源和AKG添加量对肝脏各抗氧化指标无显著交互作用(P>0.05)。饲料中添加1%AKG显著提高肝脏GH、IGF-Ⅰ基因的相对表达量(P<0.05)。与大豆浓缩蛋白+鱼粉作为蛋白质源相比,大豆浓缩蛋白作为蛋白质源显著提高肝脏IGF-Ⅰ和GH基因的相对表达量(P<0.05)。蛋白质源和AKG添加量对肝脏GH、IGF-Ⅰ基因的相对表达量无显著交互作用(P>0.05)。综上所述,杂交鲟幼鱼饲料中添加1%AKG可以通过提高肝脏中GS的活性进而提高Gln的含量,通过提高肝脏中GSH的含量进而降低MDA的含量,并可提高肝脏中生长相关基因GH、IGF-Ⅰ的表达。 展开更多

关键词 杂交鲟幼鱼 Α-酮戊二酸 谷氨酰胺 抗氧化 生长激素基因 胰岛素样生长因子-ⅰ基因

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翘嘴鲌胰岛素样生长因子-Ⅰ的克隆及序列分析 被引量：5

2

作者 刘士力 程顺 +5 位作者 蒋文枰 迟美丽 郑建波 贾永义 赵金良 顾志敏 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期272-281,共10页

为探讨胰岛素样生长因子-Ⅰ(Insulin like growth factor-Ⅰ,IGF-Ⅰ)对于翘嘴鲌(Culter alburnus)生长性状的影响,对其DNA序列进行了克隆。翘嘴鲌IGF-Ⅰ全长14567 bp,由5个外显子和4个内含子组成。其5个外显子长度分别为298、160、182... 为探讨胰岛素样生长因子-Ⅰ(Insulin like growth factor-Ⅰ,IGF-Ⅰ)对于翘嘴鲌(Culter alburnus)生长性状的影响,对其DNA序列进行了克隆。翘嘴鲌IGF-Ⅰ全长14567 bp,由5个外显子和4个内含子组成。其5个外显子长度分别为298、160、182、36和1360 bp。推测的阅读框为486 bp,编码由161个氨基酸组成的IGF-Ⅰ前体蛋白。前体肽由信号肽、成熟肽、E肽三部分组成,其中信号肽44个氨基酸,成熟肽70个氨基酸,E肽47个氨基酸。成熟肽由B、C、A、D四个区域组成,其中B结构域和A结构域的保守性最高,在这2个区域包含由6个半胱氨酸残基形成的3个二硫键。翘嘴鲌B区域还包含保守的IGF-Ⅰ受体识别序列(Phe B23-Tyr B24-Phe B25)。E肽的长度表明翘嘴鲌IGF-Ⅰ属Ea-2型。同源性分析表明翘嘴鲌与鲤科鱼类的IGF-Ⅰ编码氨基酸同源性较高,为94%—100%,但在聚类分析中翘嘴鲌并不是首先和鲌亚科的鱼类聚集在一起。Real-time qPCR组织特异性表达结果显示IGF-ⅠmRNA在肝脏组织中的表达量最高,脾、心脏、精巢、脑次之,肾、鳃、胃和卵巢中表达量较低。翘嘴鲌IGF-Ⅰ基因4个内含子长度分别为1170、9364、251和1746 bp。相对外显子来说,种间内含子变异较大,其中第三内含子变异最大。翘嘴鲌IGF-Ⅰ基因中包含6个微卫星,(GATG)5AATAT(ATAG)11位于第一内含子中,(CT)8、(TTA)5、(AC)13、(TG)12和(ATT)5位于第二内含子中。其中4个微卫星位点具有多态性,将它们在120尾同塘养殖的翘嘴鲌中进行基因型与生长性状的关联性分析,均未达到显著水平(P>0.05)。结果为进一步研究该基因的表达、功能及其转录调控特征奠定了分子基础。 展开更多

关键词 翘嘴鲌 胰岛素样生长因子-ⅰ基因 内含子 微卫星 序列分析

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IGF-I与IGFBP-1基因对京海黄鸡生长性状的遗传效应分析 被引量：11

3

作者 赵秀华 王金玉 +4 位作者 张跟喜 魏岳 顾玉萍 俞亚波 施会强 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期152-158,共7页

旨在对IGF-I和IGFBP-1基因部分SNPs与鸡生长性状进行关联分析。试验以京海黄鸡为材料,采用PCR-SSCP方法检测2个候选基因的单核苷酸多态性(SNPs),采用一般线性模型(GLM)分析基因型与生长性状的遗传效应。结果表明,IGF-I基因外显子3序列的... 旨在对IGF-I和IGFBP-1基因部分SNPs与鸡生长性状进行关联分析。试验以京海黄鸡为材料,采用PCR-SSCP方法检测2个候选基因的单核苷酸多态性(SNPs),采用一般线性模型(GLM)分析基因型与生长性状的遗传效应。结果表明,IGF-I基因外显子3序列的60bp处有A→G的点突变,在京海黄鸡中检测到AA、AB、BB 3种基因型,A等位基因频率为0.613,B等位基因的频率为0.387;IGFBP-1基因外显子2序列的21bp处有A→T的点突变,104bp处有T→C的突变,在京海黄鸡中检测到CC、CD和DD 3种基因型,C等位基因频率为0.558,D等位基因频率为0.442。IGF-I基因BB基因型个体4周龄体质量显著高于AA和AB型个体(P<0.05);IGFBP-1基因DD基因型个体8周龄体质量显著高于CC基因型个体(P<0.05),4、12和16周龄体质量差异极显著(P<0.01)。因此,推测这些SNPs对京海黄鸡生长性状具有一定的影响,应用于鸡育种过程中的标记辅助选择可以加快育种进程。 展开更多

关键词 京海黄鸡 胰岛素样生长因子-I基因 胰岛素样生长因子结合蛋白-1基因 遗传多态性 遗传效应

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应用寡核苷酸芯片技术检测IGF-Ⅱ基因SNP方法的建立及其在运动能力相关基因研究中的应用 被引量：8

4

作者 何子红 常芸 王升启 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期116-121,共6页

目的 :杰出运动能力受控于基因与环境的相互作用 ,由多基因控制。寡核苷酸芯片技术是近年出现的一类基因结构分析技术 ,此项技术出现使基因突变检测更加程序化和规模化。本研究选取与运动能力有关的胰岛素生长因子Ⅱ (IGF -Ⅱ )基因为... 目的 :杰出运动能力受控于基因与环境的相互作用 ,由多基因控制。寡核苷酸芯片技术是近年出现的一类基因结构分析技术 ,此项技术出现使基因突变检测更加程序化和规模化。本研究选取与运动能力有关的胰岛素生长因子Ⅱ (IGF -Ⅱ )基因为该方法学及其应用研究的突破点 ,尝试把DNA芯片技术引入体育科研。方法 :寡核苷酸芯片技术。结果 :(1)IGF -Ⅱ基因SNP的分析中 ,基因组DNA采用 1∶2 0的套式扩增 ,杂交液中加氯化四甲氨 ,杂交温度 4 2℃ ,杂交时间 6 0min效果最好 ;(2 )国家自行车队的 6名队员基因型相同。结果表明 :(1)PCR产物可以直接用于检测突变 ,不对称PCR产物杂交阳性点信号更强 ;(2 )由碱基组成计算的Tm值与其实际的Tm值有一定的差距 ,会影响杂交温度 ;(3)有效的DNA载波片的处理效果直接影响杂交结果 ,是芯片制备中关键环节之一 ;(4)IGF -Ⅱ是研究运动能力相关基因的一个很好的候选基因。 展开更多

关键词 寡核苷酸芯片 胰岛素样生长因子-Ⅱ基因 单核苷酸基因多态性 运动能力 基因研究

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大口黑鲈IGF-I基因内含子1、3和4序列多态性研究 被引量：10

5

作者 李小慧 白俊杰 +1 位作者 叶星 胡隐昌 《上海海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期8-13,共6页

根据大口黑鲈IGF-I基因的cDNA序列设计引物,克隆IGF-I基因内含子核苷酸序列,采用PCR产物直接测序方法,在中国养殖群体和美国野生群体中筛选IGF-I基因内含子上的多态位点。应用RFLP、CRS-RFLP和SSCP技术建立多态位点的检测方法,同时比较... 根据大口黑鲈IGF-I基因的cDNA序列设计引物,克隆IGF-I基因内含子核苷酸序列,采用PCR产物直接测序方法,在中国养殖群体和美国野生群体中筛选IGF-I基因内含子上的多态位点。应用RFLP、CRS-RFLP和SSCP技术建立多态位点的检测方法,同时比较分析其中4个多态位点在两个群体中基因频率分布。结果表明:(1)IGF-I基因内含子1、3和4序列长分别为1 317 bp、712 bp和1 941 bp;(2)在3个内含子上共发现7个多态位点,其中在内含子1的208和1070位为G-A突变;内含子3的第40个碱基为一个"A"的插入-缺失突变,第307位为C-T突变,683位是G-A突变;内含子4上的696碱基处有一个20 bp的插入-缺失突变,在1 563位为G-A突变,表明大口黑鲈IGF-I基因序列上存在较多的SNPs;(3)内含子1上SNPG1070A的A等位基因能为Hind III限制性内切酶识别,采用RFLP技术分型。根据内含子1上SNP G208A侧翼序列,设计错配引物,使错配碱基和A等位基因共同形成TaqI酶切位点,建立CRS-RFLP检测方法。内含子4上SNP G1563A采用SSCP检测方法,同时对内含子4上的插入-缺失突变进行PAGE电泳分型。试验结果显示,RFLP、CRS-RFLP和SSCP三种SNP检测方法简单易行,适于在水产动物SNP标记研究中推广应用;(4)在中国养殖群体中,只有内含子1上的SNP G1070A具有多态性,其它3个多态位点只在美国野生群体中存在多态,证实中国养殖群体的遗传多样性相对较低。 展开更多

关键词 大口黑鲈 胰岛素样生长因子-I基因 内含子 多态性

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血浆mir-142-5p与冠状动脉粥样硬化程度的关系及其作用机制的研究 被引量：8

6

作者 徐瑞金 秦苗 +1 位作者 高俊杰 葛云洁 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期350-353,359,共5页

目的:探讨血浆mir-142-5p与冠状动脉粥样硬化程度的关系及其作用机制。方法:选择42例冠心病患者和45例健康志愿者,冠心病组均进行Gensini评分,抽取空腹静脉血后应用RT-PCR法检测血浆mir-142-5p水平;应用mir-142-5p minics和inhibitor对o... 目的:探讨血浆mir-142-5p与冠状动脉粥样硬化程度的关系及其作用机制。方法:选择42例冠心病患者和45例健康志愿者,冠心病组均进行Gensini评分,抽取空腹静脉血后应用RT-PCR法检测血浆mir-142-5p水平;应用mir-142-5p minics和inhibitor对ox-LDL处理的血管内皮细胞进行转染,Western blot法检测内皮细胞IGF-1R蛋白的表达情况,RT-PCR检测IGF-1R的相对表达量,硝酸盐还原酶法检测细胞培养上清液中NO的含量。结果:(1)冠心病组血浆mir-142-5p水平高于健康对照组(P<0. 05);(2)冠心病组血浆mir-142-5p水平和Gensini评分呈正相关(P<0. 01);(3)ox-LDL处理后内皮细胞IGF-1R的表达和NO的合成升高(P<0. 01); mir-142-5p inhibitor转染的内皮细胞IGF-1R表达上调(P<0. 01)、NO的合成升高(P<0. 05),而mir-142-5p minics转染的内皮细胞IGF-1R表达下调(P<0. 01)、NO的合成减少(P<0. 05)。结论:冠心病患者血浆mir-142-5p水平较健康人群升高,且其升高程度可反映冠脉病变程度; mir-142-5p通过靶定IGF-1R基因损伤血管内皮功能,可能具有促进动脉硬化进展的作用。 展开更多

关键词 mir-142-5p 冠状动脉粥样硬化 胰岛素样生长因子受体1基因 血管内皮细胞

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胰岛素样生长因子-1在原发性结直肠癌中表达的研究 被引量：6

7

作者 黄桂林 吴毅平 雷娜 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 2009年第9期693-697,共5页

目的通过在肝特异性胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor 1,IGF-1)基因缺失(LID)小鼠体内建立稳定的原发性结直肠癌模型,探讨IGF-1与小鼠原发性结直肠癌发生可能存在的关系。方法①建立结直肠癌模型:使用LID小鼠(实验组)和BA... 目的通过在肝特异性胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor 1,IGF-1)基因缺失(LID)小鼠体内建立稳定的原发性结直肠癌模型,探讨IGF-1与小鼠原发性结直肠癌发生可能存在的关系。方法①建立结直肠癌模型:使用LID小鼠(实验组)和BALB/c小鼠(对照组)。LID小鼠体循环中的IGF-1水平仅为BALB/c小鼠的25%,用化学致癌剂1,1二甲基肼(DMH)颈部皮下注射诱导原发性结直肠肿瘤。②应用免疫组织化学法(SP)对80只模型小鼠的结直肠癌组织及其癌旁组织标本进行IGF-1的抗原染色,将染色结果与小鼠的体质量及结直肠的致癌情况进行综合分析。结果①实验组和对照组小鼠的体质量在注药后与注药前比较体质量均减轻,注药后18及24周时与各组注药前相应时相比较差异有统计学意义(P<0.05)。②IGF-1免疫组化染色结果:IGF-1在结直肠癌中的表达部位是在癌细胞的核周胞浆中,呈弥散状分布。③IGF-1在实验组和对照组结直肠癌组织及癌旁组织中表达阳性者分别为6/7只、2/7只及13/16只、7/16只。2组结直肠癌组织中的IGF-1表达阳性者均高于癌旁组织(P<0.05)。实验组和对照组两组间癌组织和癌旁组织中的IGF-1的表达阳性情况差异均无统计学意义(P>0.05)。结论在致癌剂DMH诱导的结直肠癌模型中,IGF-1对结直肠癌的发生和发展起重要作用。 展开更多

关键词 胰岛素样生长因子-1 肝脏特异性胰岛素样生长因子-1基因缺失小鼠 结直肠癌 免疫组织化学法

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利用IGF-1基因敲除鼠乳腺癌模型研究IGF-1对血管生成的影响 被引量：4

8

作者 任玉萍 叶子荣 +4 位作者 唐泓波 张军 张珊 陈国庆 吴毅平 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 2008年第11期820-824,共5页

目的探讨在低血清胰岛素样生长因子-1(IGF-1)水平与正常IGF-1水平的小鼠乳腺癌模型中应用血管生长抑制剂人参皂甙(GS)Rg3后,IGF-1对血管生成的影响。方法应用7,12-二甲基苯蒽(DMBA)诱导肝脏特异性IGF-1基因敲除鼠(LID鼠)及对照鼠建立原... 目的探讨在低血清胰岛素样生长因子-1(IGF-1)水平与正常IGF-1水平的小鼠乳腺癌模型中应用血管生长抑制剂人参皂甙(GS)Rg3后,IGF-1对血管生成的影响。方法应用7,12-二甲基苯蒽(DMBA)诱导肝脏特异性IGF-1基因敲除鼠(LID鼠)及对照鼠建立原发乳腺癌模型,应用GSRg3进行干预治疗,利用免疫组化法检测乳腺癌组织中血管内皮生长因子(VEGF)和Ⅷ因子相关抗原(F8-RAg)表达水平,同时利用基因芯片技术检测小鼠乳腺癌及正常乳腺组织中相关基因的表达情况。结果LID鼠乳腺癌的发生率低于对照鼠(P<0.05);LID鼠乳腺癌组织中VEGF表达水平与微血管密度均低于对照组(P<0.05)。LID鼠乳腺癌组织中IGF-1、成纤维细胞生长因子(FGF)-1、肝细胞生长因子(HGF)和转化生长因子(TGF)-β1基因较对照组上调,成纤维细胞生长因子受体(FGFR)-2、血小板源性生长因子(PDGF)-A和PDGF-B基因较对照组下调;应用GSRg3后,LID鼠乳腺癌组织中VEGFa、表皮生长因子(EGF)、表皮生长因子受体(EGFR)、PDGF-A和FGFR-2基因较对照组上调,而IGF-1和TGF-β1基因较对照组下调。结论IGF-1促进小鼠乳腺癌的发生、发展,且与血管生长密切相关。血管生长抑制剂可能通过IGF-1及TGF-β1发挥抗肿瘤作用。 展开更多

关键词 胰岛素样生长因子-1基因敲除鼠 血管内皮生长因子 乳腺癌 人参皂甙 基因芯片

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投喂时间影响大菱鲆幼鱼的生长及类胰岛素样生长因子-Ⅰ基因的表达 被引量：4

9

作者 王艺超 郑珂珂 +1 位作者 徐后国 梁萌青 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期387-392,共6页

本试验旨在研究投喂时间对大菱鲆幼鱼生长和类胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)基因表达的影响。试验设3个组,分别于早上(06:00)、中午(12:00)、傍晚(18:00)3个不同的时间点投喂大菱鲆幼鱼[初始平均体重为(8.95±0.13)g],每个组3个重复... 本试验旨在研究投喂时间对大菱鲆幼鱼生长和类胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)基因表达的影响。试验设3个组,分别于早上(06:00)、中午(12:00)、傍晚(18:00)3个不同的时间点投喂大菱鲆幼鱼[初始平均体重为(8.95±0.13)g],每个组3个重复,每个重复25尾。养殖试验周期为45 d。结果表明:06:00投喂组大菱鲆幼鱼的增重率和特定生长率显著高于其他2组(P<0.05),3个投喂组间大菱鲆幼鱼的摄食率无显著差异(P>0.05),但06:00投喂组与12:00投喂组的饲料效率显著高于18:00投喂组(P<0.05);06:00投喂组大菱鲆幼鱼肝脏中IG F-ⅠmRNA相对表达量显著高于12:00和18:00投喂组(P<0.05),而投喂时间对大菱鲆幼鱼脑中IGF-ⅠmRNA相对表达量无显著影响(P>0.05)。综上,建议体重8 g左右的大菱鲆幼鱼的投喂时间为06:00。 展开更多

关键词 大菱鲆幼鱼 投喂时间 生长 类胰岛素样生长因子-ⅰ基因表达

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转染沉默IGF1R基因的肝癌细胞株增殖、迁移及侵袭能力观察 被引量：4

10

作者 别彩群 黄秋燕 +2 位作者 颜英 石珩 汤绍辉 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第11期1-4,共4页

目的设计并筛选高效沉默胰岛素样生长因子1受体(IGF1R)基因的小干扰RNA(siRNA),构建其慢病毒表达载体,观察转染沉默IGF1R基因的肝癌细胞株增殖、迁移及侵袭能力。方法根据siRNA设计原则,参照IGF1R mRNA序列设计3对siRNA序列及1对阴性对... 目的设计并筛选高效沉默胰岛素样生长因子1受体(IGF1R)基因的小干扰RNA(siRNA),构建其慢病毒表达载体,观察转染沉默IGF1R基因的肝癌细胞株增殖、迁移及侵袭能力。方法根据siRNA设计原则,参照IGF1R mRNA序列设计3对siRNA序列及1对阴性对照序列,转染肝癌细胞株Huh7 24 h后采用实时荧光定量PCR检测IGF1R mRNA,筛选干扰效率最高的siRNA序列。构建该序列的慢病毒表达载体,转染293T细胞进行病毒包装。将包装好的慢病毒表达载体感染肝癌细胞株Huh7和Hep3B,筛选沉默IGF1R基因表达的稳定细胞株。将上述稳定细胞株扩大培养,观察细胞IGF1R mRNA表达变化及细胞增殖、迁移与侵袭能力变化。结果实时荧光定量PCR显示,IGF1R_002序列在100 nmol/L浓度时抑制效率最高,达78.6%。与未感染任何病毒的Huh7、Hep3B细胞,感染p LVX-shRNA2空载体的Huh7、Hep38细胞相比,感染携带IGF1R干扰序列慢病毒的Huh7、Hep3B细胞IGF1R mRNA表达水平显著下调,细胞增殖活性明显降低,细胞迁移和侵袭能力明显受到抑制(P均<0.01)。结论筛选出1对高效沉默IGF1R基因的siRNA序列,即IGF1R_002;该siRNA介导的IGF1R基因沉默可明显抑制肝癌细胞株Huh7和Hep3B增殖、迁移与侵袭。 展开更多

关键词 RNA干扰 人胰岛素样生长因子1受体基因 小干扰RNA 肝细胞癌

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阿尔茨海默病与衰老相关基因 被引量：2

11

作者 王晨静 李元建 胡长平 《国际病理科学与临床杂志》 CAS 2010年第2期176-180,共5页

阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是一种中枢神经系统的退行性疾病。大量研究证实,衰老基因、抗衰老基因、原癌基因可能与AD的发生、发展有关。

关键词 阿尔茨海默病 早老素 Sirt1基因 转化生长因子Β1基因 胰岛素样生长因子-1基因 seladin-1基因

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携人胰岛素样生长因子-1基因的成肌细胞移植后在体存活及产物表达的研究 被引量：1

12

作者 李宏云 陈世益 +3 位作者 陈疾忤 卫宏图 张鹏 李云霞 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期151-155,共5页

目的：观察并探讨携人胰岛素样生长因子-1（hIGF-1）基因的成肌细胞移植入雄性C3H小鼠体内后的存活、转归以及移植后hIGF-1基因的表达.方法：84只雄性C3H小鼠随机（20～30g,7～11w）分为A组（正常小鼠转基因细胞移植组）、B组（正常小... 目的：观察并探讨携人胰岛素样生长因子-1（hIGF-1）基因的成肌细胞移植入雄性C3H小鼠体内后的存活、转归以及移植后hIGF-1基因的表达.方法：84只雄性C3H小鼠随机（20～30g,7～11w）分为A组（正常小鼠转基因细胞移植组）、B组（正常小鼠空白成肌细胞移植组）、C组（受伤小鼠转基因细胞移植组）和D组（受伤小鼠空白成肌细胞移植组）,每组20只,另4只作正常对照.A、B两组分别于右侧腓肠肌中段注射转基因成肌细胞或空白成肌细胞;C、D两组以重力打击造成小鼠右侧腓肠肌中段钝挫伤,伤后第3天分别于致伤局部注射转基因成肌细胞或空白成肌细胞.注射细胞后第2、5、10、20、30天,各组随机抽取4只小鼠处死,取右侧腓肠肌中段检测,Br-dU免疫组化染色检测外源细胞在体内的存活情况;4组另行hIGF-1免疫组化染色及实时PCR检测外源转基因细胞在体内表达hIGF-1情况.结果：各组小鼠均有BrdU免疫组化阳性染色,A、C两组均有hIGF-1 mRNA表达及hIGF-1分泌,B、D两组未检测到hIGF-1 mRNA表达及hIGF-1分泌.结论：携hIGF-1基因的成肌细胞移植入正常及钝挫伤小鼠体内后,可存活一段时间,并能稳定地分泌hIGF-1因子. 展开更多

关键词 胰岛素样生长因子-1 成肌细胞 骨骼肌 损伤 修复 溴脱氧尿嘧啶核苷 携人胰岛素样生长因子-1基因

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miR-411a-3p抑制羊驼黑色素细胞黑色素的生成 被引量：2

13

作者 李佳晟 孙晓江 +6 位作者 胡帅鹏 姬凯元 刘博 刘学贤 杨姗姗 张俊珍 范瑞文 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期931-938,共8页

microRNA-411a-3p(miR-411a-3p)在不同毛色羊驼皮肤中差异表达,提示其可能在毛色形成中起调控作用。为证明miR-411a-3p在羊驼皮毛黑色素形成中的作用,本研究通过生物信息学预测及靶基因搜索,发现胰岛素样生长因子1受体(IGF1R)是miR-411a... microRNA-411a-3p(miR-411a-3p)在不同毛色羊驼皮肤中差异表达,提示其可能在毛色形成中起调控作用。为证明miR-411a-3p在羊驼皮毛黑色素形成中的作用,本研究通过生物信息学预测及靶基因搜索,发现胰岛素样生长因子1受体(IGF1R)是miR-411a-3p的靶基因,继而构建了含Igf1r mRNA 3'-UTR的荧光素酶报告基因载体。报告基因转染结合报告酶活性测定证明,Igf1r是miR-411a-3p的靶基因。原位杂交显示,miR-411a-3p主要在羊驼黑色素细胞胞质中表达,提示其可能在黑色素细胞中具有重要作用。qRT-PCR揭示,棕色和黑色羊驼皮肤中miR-411a-3p表达量明显低于白色羊驼。qRT-PCR联合蛋白质印迹分析显示,在羊驼黑色素细胞过表达miR-411a-3p,伴随Igf1r下调,小眼畸形相关转录因子(Mitf)依赖的毛色基因酪氨酸酶(Tyr)、酪氨酸酶相关蛋白-2(Tyrp2)及黑色素表达水平明显下调。上述结果提示,miR-411a-3p可通过靶向抑制Igf1r负调控羊驼黑色素黑色素合成。该结果将加深我们对羊驼毛色形成机制的认识。 展开更多

关键词 miR-411a-3p 胰岛素样生长因子1受体基因 小眼畸形相关转录因子基因 mitf活化的酪氨酸酶基因 黑色素细胞 黑色素

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银鲳(Pampus argenteus)胰岛素样生长因子-I基因的克隆和表达分析 被引量：2

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作者 朱晓芳 郭晓鸽 +3 位作者 张鼎元 杨佳喆 徐善良 王丹丽 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期1221-1232,共12页

胰岛素样生长因子-I(Insulin-like growth factor-I,IGF-I)是影响脊椎动物生长、发育及代谢的重要调控因子。本研究采用RT-PCR和RACE技术,克隆了银鲳(Pampus argenteus)肝脏IGF-IcDNA序列,应用半定量RT-PCR、Real-time q PCR和原位杂交... 胰岛素样生长因子-I(Insulin-like growth factor-I,IGF-I)是影响脊椎动物生长、发育及代谢的重要调控因子。本研究采用RT-PCR和RACE技术,克隆了银鲳(Pampus argenteus)肝脏IGF-IcDNA序列,应用半定量RT-PCR、Real-time q PCR和原位杂交的方法检测了IGF-I的组织表达特性、在肝脏中的生长表达特性和IGF-I基因在肝脏中的定位。序列分析表明,IGF-I cDNA序列全长836bp,其5′非编码区128bp、3′非编码区92bp,开放阅读框(open reading frame,ORF)605bp,由此推导IGF-I前体蛋白由201个氨基酸组成;前体肽由信号肽、成熟肽、E肽三部分组成,其中信号肽59个氨基酸,成熟肽68个氨基酸,E肽74个氨基酸;成熟肽由B、C、A、D四个区域组成,E肽分析表明,银鲳IGF-I属Ea-4型。同源性比较结果表明,银鲳与同目鲈形目鱼类的IGF-I编码序列同源性较高,为83.52%—91.40%;与哺乳类、鸟类和爬行类的同源性较低。半定量RT-PCR和Real-time q PCR组织特异性表达结果显示,IGF-I m RNA在肝脏组织中的表达量最高,显著高于其它组织,肾脏、心脏、肌肉、脑、鳃、小肠、卵巢次之,嗅球、脾脏和胃中表达较低;半定量RT-PCR和Real-time q PCR不同生长阶段表达结果显示,IGF-I m RNA在30—50g肝脏组织中表达量最高(P<0.05);IGF-I m RNA在肝脏中的原位杂交定位结果显示,在肝脏细胞中均有表达,阳性信号主要位于细胞质中,靠近细胞边缘处信号较强。 展开更多

关键词 银鲳 胰岛素样生长因子-I基因 荧光定量 原位杂交

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胰岛素样生长因子2受体基因3'非翻译区的单核苷酸多态性及其生物信息学分析 被引量：2

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作者 陈凤霞 张文文 +1 位作者 杨芳 管晓翔 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2014年第12期1262-1265,共4页

目的基因3'非翻译区(3'untranslated region,3'UTR)中miRNA结合区域的遗传突变能够影响基因的表达调控,文中利用生物信息学技术预测胰岛素样生长因子2受体(insulin-like growth factor 2 receptor,IGF2R)基因3'UTR的遗... 目的基因3'非翻译区(3'untranslated region,3'UTR)中miRNA结合区域的遗传突变能够影响基因的表达调控,文中利用生物信息学技术预测胰岛素样生长因子2受体(insulin-like growth factor 2 receptor,IGF2R)基因3'UTR的遗传突变,并检测其对基因表达的影响。方法运用多个在线数据库,获取IGF2R基因3'UTR中具有最小等位基因频率(minor allele frequency,MAF)的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs),计算其在不同人种中的频率分布及各SNPs之间的连锁不平衡,并预测与其相应结合的miRNA。最后,检测在淋巴母细胞系中不同变体基因型对IGF2R基因mRNA表达的影响。结果在IGF2R基因3'UTR的33个SNPs中,仅有5个SNPs(rs8191959、rs200237825、rs3832385、rs201568808、rs1050015)具有>0.05的MAF,其中只有rs1050015基因型突变对mRNA表达水平差异具有统计学意义(P=0.010)。结论IGF2R基因3'UTR的rs1050015突变能够促进其表达,可作为帮助预测癌症风险的遗传标志物及个体化治疗的潜在靶点。 展开更多

关键词 胰岛素样生长因子2受体基因 3'非翻译区 单核苷酸多态性 生物信息学

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胰岛素样生长因子-1基因在退变椎间盘中的表达及其对蛋白多糖、Ⅱ型胶原的影响 被引量：1

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作者 黄宗强 郑召民 +1 位作者 王卫东 刘宏建 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期237-240,共4页

目的观察人胰岛素样生长因子（hIGF）一1基因在退变椎间盘中的表达及对椎间盘蛋白多糖、Ⅱ型胶原的影响。方法制备新西兰大白兔腰椎间盘退变（IVDD）模型24只，随机分为Ad／CMV—hIGF－1、hIGF－1生长因子及磷酸盐缓冲液（PBS）组，每组... 目的观察人胰岛素样生长因子（hIGF）一1基因在退变椎间盘中的表达及对椎间盘蛋白多糖、Ⅱ型胶原的影响。方法制备新西兰大白兔腰椎间盘退变（IVDD）模型24只，随机分为Ad／CMV—hIGF－1、hIGF－1生长因子及磷酸盐缓冲液（PBS）组，每组8只。L4-5、k5-6椎间盘中分别注射第2代Ad／CMV—hIGF－1（8X10。PFU）、hIGF－1生长因子（100μg／L）、PBS25山。注射后1、2、4、8周，Western blot检测椎间盘中hIGF—I蛋白表达；半定量逆转录－聚合酶链反应（RT—PCR）检测蛋白多糖、Ⅱ型胶原mRNA的表达。结果hIGF-1蛋白带出现在7．6×10^3道尔顿。Ad／CMV—hIGF-1组hIGF-1蛋白表达持续达4周以上，hIGF-1组表达持续约2周；PBS注射组无hIGF－1蛋白表达。aggrecan电泳条带出现在200～300bp；在注射后1—4周，Ad／CMV—hIGF-1组内aggrecanmRNA相对表达量进行性增加，8周轻度下降，4个时期总的比较（F=8．51，P〈0．05）；注射后1～8周，hIGF-1注射组、PBS注射组aggrecanmRNA相对表达量进行性下降。三组中Ⅱ型胶原的相对表达量呈现aggrecanmRNA类似趋势。结论hIGF-1基因能够在退变椎间盘中的表达；对椎间盘蛋白多糖、Ⅱ型胶原的影响存在时效依赖性。 展开更多

关键词 椎间盘 退变 胰岛素样生长因子-1基因

原文传递

鹿科与牛科动物IGF-1基因序列比较及分子进化分析 被引量：1

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作者 宋兴超 徐超 +3 位作者 王雷 巴恒星 王桂武 杨福合 《家畜生态学报》 北大核心 2014年第3期14-18,共5页

以GenBank中已登录的梅花鹿(Cervus nippon)、马鹿(Cervus elaphus)、普通牛(Bos taurus)、水牛(Bubalus bubalis)、山羊(Capra hircus)和绵羊(Ovis aries)胰岛素样生长因子-1(IGF-1)基因mRNA序列为研究材料,通过DNAStar 7.0等生物信息... 以GenBank中已登录的梅花鹿(Cervus nippon)、马鹿(Cervus elaphus)、普通牛(Bos taurus)、水牛(Bubalus bubalis)、山羊(Capra hircus)和绵羊(Ovis aries)胰岛素样生长因子-1(IGF-1)基因mRNA序列为研究材料,通过DNAStar 7.0等生物信息学软件对6个物种的IGF-1基因进行序列比较及分子进化分析。结果表明:鹿科与牛科动物IGF-1基因编码区均为465bp,并且碱基组成表现为G>C>A>T,且G+C含量高于A+T;6个物种IGF-1基因密码子第1位富含A,密码子第2位4种碱基的分布相对均匀,密码子的第3位碱基C含量较高;编码区碱基序列中共检测到20个变异位点,包括10个单一变异和10个简约变异,鹿科和牛科动物IGF-1基因核苷酸和氨基酸序列的相似性均较高;(4)NJ和UPGMA两种方法构建的分子进化树均把6个物种聚为2个大类:鹿科和牛科,其中牛科又分支出牛亚科和羊亚科两类。 展开更多

关键词 鹿科 牛科 胰岛素样生长因子-1基因 序列比较 密码子

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Igf2基因差异性甲基化区域在二噁英致畸中的作用 被引量：1

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作者 王珺 赵彦艳 +4 位作者 刘洪 李英慧 李光宇 孙开来 郭磊 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期162-166,共5页

目的研究2，3，7，8-四氯二苯并-对-二噁英（2，3，7，8-tetraehlorodibenzo-p-dioxin，TCDD）对胎鼠生长发育的影响，探讨TCDD致畸与胰岛素样生长因子2（insulin-like growth factor 2，Igf2）基因的表达和差异性甲基化区域（different... 目的研究2，3，7，8-四氯二苯并-对-二噁英（2，3，7，8-tetraehlorodibenzo-p-dioxin，TCDD）对胎鼠生长发育的影响，探讨TCDD致畸与胰岛素样生长因子2（insulin-like growth factor 2，Igf2）基因的表达和差异性甲基化区域（differentially methylated regions，DMRs）甲基化状态的关系。方法经灌胃给予孕10d大鼠10μg／kg TCDD，孕20天剖宫取胎，比较实验组和对照组孕鼠妊娠结局，测量两组活胎的顶臀长、体重和胎盘重；用实时定量．逆转录PCR检测孕20天胎鼠肝脏组织五妒基因mRNA的表达；用蛋白印迹方法检测蛋白的表达水平；用甲基化限制酶HpaⅡ酶切PCR法（Hpa Ⅱ-PCR assay）检测两组胎鼠肝脏Igf2基因DMRI的甲基化程度，用亚硫酸氢盐测序方法检测Igf2基因DMR2的甲基化程度。结果对照组胎鼠均正常；实验组出现死胎及吸收胎，发生率为12．2％，畸形胎发生率为11．6％，活胎顶臀长、体重及胎盘重均明显低于对照组；对两组胎鼠肝脏组织Igf2基因表达的检测结果显示，实验组Igf2 mRNA表达的相对量为0．77±0．11，对照组为0．27±0．15，两者差异有统计学意义（P〈0．01）；同时实验组肝脏组织匙蛇蛋白的表达量也明显高于对照组；两组胎鼠肝脏够基因DMRI的甲基化程度无差异，DMR2甲基化程度实验组明显低于对照组。结论孕期暴露于TCDD可导致大鼠发生死胎、吸收胎、畸形胎和胎儿宫内发育迟缓，TCDD所致胎鼠发育异常可能与胎鼠肝脏组织五妒基因DMR2甲基化程度降低引起的Igf2高表达有关。 展开更多

关键词 2 3 7 8-四氯二苯并-对-二噁英 发育异常 胰岛素样生长因子-2基因 甲基化 表达

原文传递

人胰岛素样生长因子-1基因的克隆、表达及生物活性分析 被引量：1

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作者 祁雅慧 王雅梅 +4 位作者 孙丽翠 司杨 闫豫东 张静宜 邴国英 《首都医科大学学报》 CAS 2004年第2期154-158,共5页

采用RT PCR方法 ,从人扁桃体组织中扩增得到人胰岛素样生长因子 1 (IGF 1 )cDNA ,利用基因重组技术将该基因片段重组于pcDNA3 .1 ( +)真核表达载体上 ,成功构建了 pcDNA/I重组表达载体。应用脂质体介导的基因转移技术将重组质粒体外转... 采用RT PCR方法 ,从人扁桃体组织中扩增得到人胰岛素样生长因子 1 (IGF 1 )cDNA ,利用基因重组技术将该基因片段重组于pcDNA3 .1 ( +)真核表达载体上 ,成功构建了 pcDNA/I重组表达载体。应用脂质体介导的基因转移技术将重组质粒体外转染至人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)。MTT法检测结果表明 :重组质粒转染能明显促进内皮细胞的分裂增生。将重组质粒通过脂质体介导 ,体外转染至人肾细胞 2 93细胞系进行表达 ,经G41 8筛选获得稳定表达的重组质粒细胞克隆 ,表达产物经鸡胚绒毛尿囊膜试验表明有促血管生成活性。此结果为研究IGF 1对血管内皮细胞作用的分子机制 ,以及利用IGF 1基因治疗肢体及冠状动脉缺血性疾病等的研究奠定了实验基础。 展开更多

关键词 人胰岛素样生长因子-1基因 克隆 表达 生物活性

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人胰岛素样生长因子-1基因克隆及其真核表达载体的构建

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作者 牛嗣云 岳凤鸣 +2 位作者 陈志宏 高维娟 高福禄 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期646-648,共3页

目的:从胎儿肝组织中克隆人胰岛素样生长因子-1(IGF-1)基因,并构建真核表达载体pCI-neo/hIGF-1。方法:提取胎儿肝总RNA,RT-PCR法扩增IGF-1 cDNA片段,重组于pUCM-T载体,测序正确后构建表达载体。结果:扩增得到710bp带有Kozak序列的IGF-1 ... 目的:从胎儿肝组织中克隆人胰岛素样生长因子-1(IGF-1)基因,并构建真核表达载体pCI-neo/hIGF-1。方法:提取胎儿肝总RNA,RT-PCR法扩增IGF-1 cDNA片段,重组于pUCM-T载体,测序正确后构建表达载体。结果:扩增得到710bp带有Kozak序列的IGF-1 cDNA片段,成功构建了真核表达载体pCI-neo/hIGF-1。结论:通过RT-PCR的方法克隆了人IGF-1 cDNA,并成功构建了真核表达载体pCI-neo/hIGF-1,为IGF-1基因治疗糖尿病创造了条件。 展开更多

关键词 胰岛素样生长因子-1基因 克隆 真核表达载体

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