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普通小麦与簇毛麦原生质体的紫外线融合(英文) 被引量:4
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作者 周爱芬 陈秀玲 +1 位作者 夏光敏 陈惠民 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 2002年第4期305-310,共6页
从来源于普通小麦品种济南 1 77(Triticumaestivumcv .Jinan 1 77)悬浮细胞系的原生质体与来源于簇毛麦 (Haynaldiavillosa)胚性愈伤组织的原生质体融合获得体细胞杂种。供体簇毛麦原生质体在融合之前用紫外线照射 3 0s或 1min ,紫外线... 从来源于普通小麦品种济南 1 77(Triticumaestivumcv .Jinan 1 77)悬浮细胞系的原生质体与来源于簇毛麦 (Haynaldiavillosa)胚性愈伤组织的原生质体融合获得体细胞杂种。供体簇毛麦原生质体在融合之前用紫外线照射 3 0s或 1min ,紫外线剂量为 3 6 0 μW /cm2 。仅由紫外线照射 3 0s的组合获得再生愈伤组织克隆。细胞学、生物化学及PCR分析结果证实了再生克隆的杂种性质。用线粒体基因特异的探针进行的RFLP分析的结果表明 ,杂种中含有融合双亲的线粒体并且发生了重组。由杂种愈伤组织再生得到白化苗。讨论了紫外线对融合产物的影响。 展开更多
关键词 小麦 簇毛麦 紫外线 5S rdna间隔序列分析 dna
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AUF1在胞质DNA抑制细胞葡萄糖代谢中的作用研究 被引量:2
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作者 谢琳娜 卜静静 郑敏 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期54-61,共8页
目的:探讨AUF1在胞质DNA引起的细胞葡萄糖代谢应答中的作用及其机制。方法:(1)用核质分离技术分离细胞核与细胞质,并通过生物素-亲和素亲和层析技术分离细胞质中与胞质DNA(ISD)结合的蛋白质,然后通过"银染-质谱"和"复合... 目的:探讨AUF1在胞质DNA引起的细胞葡萄糖代谢应答中的作用及其机制。方法:(1)用核质分离技术分离细胞核与细胞质,并通过生物素-亲和素亲和层析技术分离细胞质中与胞质DNA(ISD)结合的蛋白质,然后通过"银染-质谱"和"复合物-质谱"技术鉴定出差异蛋白——AUF1。再利用体外结合实验验证AUF1与胞质DNA的相互作用。(2)在胞质DNA刺激后,通过ATP检测试剂盒和CCK8细胞氧还活力检测试剂,比较野生型细胞和基于CRISPR/Cas9技术的AUF1基因敲除细胞中葡萄糖代谢应答情况。(3)通过半定量PCR技术,在野生型、基因敲除AUF1、基因敲除后回补AUF1或空载体的四类细胞中检测葡萄糖转运蛋白GLUTs以及葡萄糖代谢相关酶的mRNA表达情况,筛选出与细胞糖代谢相关的AUF1下游效应分子——GLUT3。进而用实时荧光定量PCR进行验证。(4)通过半定量和荧光定量PCR分析胞质DNA刺激下GLUT3的mRNA变化情况,分析胞质DNA的刺激是否影响GLUT3的mRNA表达。结果:(1)两次质谱分析均发现AUF1能与ISD结合。体外结合实验也证实,不论是原核表达的GST-AUF1还是真核细胞表达的GFP-AUF1均能与单链和双链的ISD相结合。(2)基因敲除AUF1后的HEK293细胞在用胞质DNA刺激后,胞内的ATP水平和对CCK8的还原能力都明显高于野生型细胞。提示AUF1基因敲除细胞内的葡萄糖代谢不受胞质DNA刺激所抑制,说明AUF1很可能参与了胞质DNA对细胞糖代谢的调节。(3)半定量PCR技术检测发现在AUF1敲除的细胞中GLUT3的mRNA明显减少,而其他的GLUT家族成员和代谢酶则没有显著差异。实时荧光定量PCR证实上述现象,提示AUF1很可能通过稳定GLUT3的mRNA参与葡萄糖代谢的调节。(4)无论是单链还是双链ISD刺激后的细胞中,GLUT3的mRNA均减少,说明GLUT3可能是胞质DNA对糖代谢的调节过程中的一个下游效应分子。结论:AUF1能与胞质DNA结合,很可能通过调节下游GLUT3的mRNA稳定性� 展开更多
关键词 AUF1 dna 葡萄糖代谢 GLUT3
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环磷酸鸟苷-腺苷酸合成酶-干扰素基因刺激因子信号通路与非感染性炎性疾病的相关性研究进展 被引量:1
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作者 于华祥 芮海英 +4 位作者 韩子琦 李若川 刘路路 薛丽 陈玉国 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期661-667,共7页
作为胞质中的DNA感受器,环磷酸鸟苷-腺苷酸合成酶(cGAS)能够识别细胞质内的异常DNA,激活干扰素基因刺激因子(STING),影响机体的免疫反应。近年研究发现在非感染性炎性疾病中该通路可通过促进Ⅰ型干扰素和干扰素刺激基因的表达发挥作用... 作为胞质中的DNA感受器,环磷酸鸟苷-腺苷酸合成酶(cGAS)能够识别细胞质内的异常DNA,激活干扰素基因刺激因子(STING),影响机体的免疫反应。近年研究发现在非感染性炎性疾病中该通路可通过促进Ⅰ型干扰素和干扰素刺激基因的表达发挥作用。本文就cGAS-STING通路在多个系统的非感染性炎性疾病中的激活与调控及其对疾病的发生发展的影响进行综述,为其在非感染性炎性疾病相关的应用研究提供借鉴。 展开更多
关键词 环磷酸鸟苷-腺苷酸合成酶-干扰素基因刺激因子 dna cGAMP 炎症 非感染性疾病
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STING信号通路及其功能 被引量:6
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作者 陈巍 柯志意 黄卫人 《医学综述》 2017年第14期2705-2709,2714,共6页
固有免疫反应是宿主抵御外来病原微生物的第一道防线。宿主可以通过模式识别受体识别病原体相关的分子模式,进而起始抗病毒免疫反应。干扰素激活蛋白(STING)是固有免疫反应中一个重要分子,其在防御病毒及胞内细菌感染、介导Ⅰ型干扰素... 固有免疫反应是宿主抵御外来病原微生物的第一道防线。宿主可以通过模式识别受体识别病原体相关的分子模式,进而起始抗病毒免疫反应。干扰素激活蛋白(STING)是固有免疫反应中一个重要分子,其在防御病毒及胞内细菌感染、介导Ⅰ型干扰素产生过程中发挥重要功能。STING既可以直接识别环二核苷酸,也可以作为接头蛋白促进下游信号通路的转导;STING作为信号转导级联反应中的重要组成部分,既可以在病原体(病毒、细菌、寄生虫等)感染时发挥免疫防御作用,也可以在肿瘤发生时发挥抗肿瘤免疫反应。当STING信号通路过度激活时,也可能引起一系列的自身免疫性疾病。 展开更多
关键词 固有免疫 干扰素激活蛋白 dna识别
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cGAS-STING信号通路:类风湿关节炎的潜在治疗靶点
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作者 苏蓉慧 程丽云 +3 位作者 字晓宇 王会 李小峰 王彩虹 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期460-467,共8页
环磷酸鸟苷-腺苷酸合成酶-干扰素基因刺激因子(cyclic GMP-AMP synthase-stimulator of interferon gene,cGAS-STING)信号通路作为固有免疫系统的重要组成部分,是胞质DNA识别的主要途径,cGAS可由多种胞质双链DNA触发,成为连接自身免疫... 环磷酸鸟苷-腺苷酸合成酶-干扰素基因刺激因子(cyclic GMP-AMP synthase-stimulator of interferon gene,cGAS-STING)信号通路作为固有免疫系统的重要组成部分,是胞质DNA识别的主要途径,cGAS可由多种胞质双链DNA触发,成为连接自身免疫、无菌炎症反应和细胞衰老的重要桥梁。近年来,cGAS-STING通路在自身免疫性疾病中越来越受到关注。在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)中,中性粒细胞胞外陷阱(neutrophil extracellular traps,NETs)通过cGAS-STING通路引发Ⅰ型干扰素反应、加速抗瓜氨酸化蛋白抗体(anti-citrullinated peptide antibody,ACPA)产生;此外,cGAS-STING通路还通过促进成纤维细胞样滑膜细胞增殖活化、M1型巨噬细胞极化参与滑膜炎及骨破坏,参与RA的发生发展。抑制cGAS-STING通路或其下游信号通路可以减少RA的滑膜炎症,cGAS-STING通路可能是RA的潜在治疗靶点。 展开更多
关键词 cGAS-STING信号通路 类风湿关节炎 Ⅰ型干扰素 dna感受器
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胞质DNA受体及其对干扰素调控作用研究进展 被引量:3
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作者 郭若一 韩嫣 +1 位作者 胡洁 刘伟 《国际免疫学杂志》 CAS 2014年第6期479-484,共6页
机体对入侵抗原的识别是启动固有免疫的关键步骤.当哺乳动物细胞受到微生物病原体感染后,细胞即通过表达多种胞质DNA受体来识别感染信号并激活多种信号转导通路.有效的免疫反应通常需要通过各亚细胞结构中的多种受体对抗原依次检测.近年... 机体对入侵抗原的识别是启动固有免疫的关键步骤.当哺乳动物细胞受到微生物病原体感染后,细胞即通过表达多种胞质DNA受体来识别感染信号并激活多种信号转导通路.有效的免疫反应通常需要通过各亚细胞结构中的多种受体对抗原依次检测.近年来,国内外学者接连发现了STING、cGAS、DDX41、IFI16、LRRFIP1、DNA-PK、MRE11、DAI和AIM2等众多胞质DNA受体,并对其诱导干扰素产生的过程进行了研究.这将对更全面的认识固有免疫应答产生重要意义. 展开更多
关键词 dna受体 Ⅰ型干扰素 固有免疫
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STING信号通路的研究进展
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作者 庞晓燕 谭星 +1 位作者 郝秀静 李敏 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2022年第4期109-116,共8页
干扰素基因刺激因子(Stimulator of interferon gene,STING)作为固有免疫系统的关键性接头蛋白,在外源或内源DNA介导的免疫应答中发挥重要作用,广泛参与宿主体内的多种信号传导过程。概述了STING信号通路分子机制及其在抗病毒感染、自... 干扰素基因刺激因子(Stimulator of interferon gene,STING)作为固有免疫系统的关键性接头蛋白,在外源或内源DNA介导的免疫应答中发挥重要作用,广泛参与宿主体内的多种信号传导过程。概述了STING信号通路分子机制及其在抗病毒感染、自身免疫疾病、神经系统疾病和肿瘤中的作用,介绍了常见的STING激动剂和抑制剂,以期为STING的进一步研究提供参考。 展开更多
关键词 干扰素基因刺激因子 固有免疫 适应性免疫 dna识别 免疫机制
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