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少突胶质细胞瘤染色体1p/19q杂合性缺失与p53蛋白表达的相关性研究 被引量:10
1
作者 熊佶 刘颖 +4 位作者 李超 朱静静 叶诸榕 毛颖 汪寅 《中华病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期445-450,共6页
目的探讨少突胶质细胞瘤染色体10/19q杂合性缺失及p53蛋白的表达情况,与星形细胞起源的肿瘤进行比较研究并探讨其意义。方法选择2004—2005年间,经病理组织学诊断为不同类型和级别的胶质瘤合计191例,包括:WHO1I级少突胶质细胞瘤11... 目的探讨少突胶质细胞瘤染色体10/19q杂合性缺失及p53蛋白的表达情况,与星形细胞起源的肿瘤进行比较研究并探讨其意义。方法选择2004—2005年间,经病理组织学诊断为不同类型和级别的胶质瘤合计191例,包括:WHO1I级少突胶质细胞瘤116例,其中30例为新鲜组织;间变性少突胶质细胞瘤45例和不同级别星形细胞起源的肿瘤石蜡组织30例;采用PCR-微卫星技术检测染色体1p/19q杂合性缺失情况;采用免疫组织化学方法对184例胶质瘤石蜡切片p53蛋白表达情况进行半定量分析。结果86例WHOⅡ级少突胶质细胞瘤石蜡标本染色体1p缺失率为69.8%(60/86)、19q缺失率为64.0%(55/86)、1p/19q联合缺失率为57.0%(49/86);45例间变性少突胶质细胞瘤中,1P缺失率为71.1%(32/45)、19q缺失率为60.0%(27/45)、1p/19q联合缺失率为55.6%(25/45);两种级别间差异无统计学意义(P〉0.05)。30例WHOⅡ级少突胶质细胞瘤新鲜标本染色体1p缺失率为70.0%(21/30)、19q缺失率为63.3%(19/30)、1p/19q联合缺失率为60.0%(18/30),与石蜡标本的缺失率比较差异无统计学意义(P〉0.05)。30例星形细胞起源的肿瘤染色体对应三种缺失率分别为23.3%(7/30)、33.3%(10/30)及20.0%(6/30),与少突胶质细胞瘤差异有统计学意义(P〈0.05)。86例WHOⅡ级少突胶质细胞瘤中,仅7例有p53蛋白阳性表达(占8.1%);45例间变性少突胶质细胞瘤中,有14例呈阳性表达(31.1%),两者差异有统计学意义(P=0.007)。少突胶质细胞瘤053蛋白阳性表达明显低于星形细胞起源的肿瘤(P=0.001)。在间变性少突胶质细胞瘤中,染色体10/19q杂合性缺失与053蛋白阳性表达呈负相关(P〈0.05)。结论石蜡和新鲜组织均可用于染色体1p/19q杂合性缺失的检测。在 展开更多
关键词 少突神经胶质瘤 染色体 1对 染色体 19对 杂合子丢失 肿瘤 制蛋白质p53
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胆管癌染色体DNA拷贝数的变化研究
2
作者 刘付宝 李江涛 +6 位作者 薛建锋 刘颖斌 彭佳萍 徐伟珍 胡亮 关新元 彭淑牖 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2008年第6期616-620,共5页
目的探讨胆管癌全基因组DNA拷贝数的变化特征,寻找与胆管癌相关的癌基因和抑癌基因的染色体候选区域。方法采用比较基因组杂交方法分析18例胆管癌组织基因组的不平衡,即DNA拷贝数的扩增和丢失。结果胆管癌常见的染色体DNA扩增区域是8q、... 目的探讨胆管癌全基因组DNA拷贝数的变化特征,寻找与胆管癌相关的癌基因和抑癌基因的染色体候选区域。方法采用比较基因组杂交方法分析18例胆管癌组织基因组的不平衡,即DNA拷贝数的扩增和丢失。结果胆管癌常见的染色体DNA扩增区域是8q、20q、5p、17q;染色体DNA缺失区域为3p、18q、17p、8p、9p。结论胆管癌中存在多条染色体拷贝数的改变,3p、5p、8p、8q、9p、17p、17q、18q、20q等部位可能分别存在与胆管癌密切相关的癌基因和抑癌基因。 展开更多
关键词 胆管肿瘤/遗传学 核酸杂交 癌基因 基因 肿瘤
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新型肿瘤抑素对C6神经胶质瘤细胞抑制作用的影响 被引量:12
3
作者 任吉祥 刘爽 +1 位作者 孙洋 周庆伟 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第19期4705-4706,共2页
目的探讨新型肿瘤抑素对C6神经胶质瘤细胞增殖及Caspase-3蛋白表达的影响。方法采用CCK-8检测不同浓度的新的肿瘤抑素对C6神经胶质瘤细胞增殖并用Western印迹检测对Caspase-3蛋白的表达。结果新的肿瘤抑素作用C6胶质瘤24 h空白对照组与... 目的探讨新型肿瘤抑素对C6神经胶质瘤细胞增殖及Caspase-3蛋白表达的影响。方法采用CCK-8检测不同浓度的新的肿瘤抑素对C6神经胶质瘤细胞增殖并用Western印迹检测对Caspase-3蛋白的表达。结果新的肿瘤抑素作用C6胶质瘤24 h空白对照组与卡莫司汀组比较差异有显著性(P<0.05),与其他实验组比较差异均无统计学意义(P>0.05);48 h空白组与卡莫斯汀组、1 500、2 000μg/ml组比较有统计学差异(P<0.05);72 h时空白对照组与卡莫斯汀组、1 500、2 000μg/ml组比较有统计学差异(P<0.05)。空白对照组与卡莫司汀组、1 500、2 000μg/ml组比较Caspase-3蛋白表达有统计学差异(P<0.05)。结论新型肿瘤抑素可能通过调控Caspase-3蛋白表达抑制C6肿瘤细胞增殖。 展开更多
关键词 新的肿瘤 C6 神经胶质细胞瘤
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两个改造后的肿瘤抑素抗肿瘤活性肽活性研究 被引量:11
4
作者 王淑静 刘兴汉 +1 位作者 季宇彬 陈宁 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1152-1161,共10页
为了研究改造后的肿瘤抑素2个抗肿瘤活性肽的作用机制,明确其不同的抗肿瘤活性,采用基因工程技术原理,人工合成肿瘤抑素中185~203位氨基酸所对应的19肽和T7肽(74~98位氨基酸)基础上改造的21肽碱基序列,将其与融合蛋白表达载体pTYB2重... 为了研究改造后的肿瘤抑素2个抗肿瘤活性肽的作用机制,明确其不同的抗肿瘤活性,采用基因工程技术原理,人工合成肿瘤抑素中185~203位氨基酸所对应的19肽和T7肽(74~98位氨基酸)基础上改造的21肽碱基序列,将其与融合蛋白表达载体pTYB2重组后转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达,用几丁质亲和层析柱一步纯化,直接获得19肽和21肽,利用MTT法、细胞生长曲线、TUNEL法、流式细胞仪早期细胞凋亡检测和细胞周期检测,小鼠H22腹水型转移型肝癌实体瘤抑瘤实验并结合组织病理学切片,来研究19肽和21肽单独应用或联合应用对肿瘤细胞和内皮细胞生长和凋亡的影响以及对体内肿瘤的抑制情况.体内外实验表明:获得的19肽抗肿瘤活性以直接作用肿瘤细胞为主,也有抑制新生血管生成的作用.基因重组21肽抗肿瘤作用是通过抑制肿瘤组织新生血管生成实现的.19肽、21肽联合应用对肿瘤细胞、内皮细胞生长抑制和促凋亡作用明显增强,抗肿瘤活性大大提高.联合用药弥补了单独用药不足,产生协同抗肿瘤作用,可能会成为今后肿瘤治疗的一个主要方向. 展开更多
关键词 肿瘤 蛋白质表达 细胞增殖 细胞凋亡 肿瘤治疗
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人参皂苷Rg3联合肿瘤抑素19肽对肝癌HepG2细胞凋亡的影响及机制 被引量:10
5
作者 衣同辉 吴艳敏 +4 位作者 刘睿 张春晶 姚淑娟 师岩 李淑艳 《北京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期575-582,共8页
目的研究人参皂苷Rg3联合肿瘤抑素19肽对肝癌HepG2细胞凋亡的影响及作用机制。方法实验为两因素两水平2×2析因设计,因素A为人参皂苷Rg3,水平为0 mg/L和40 mg/L,因素B为肿瘤抑素19肽,水平为0 mg/L和200 mg/L。CCK-8试剂盒检测肝癌He... 目的研究人参皂苷Rg3联合肿瘤抑素19肽对肝癌HepG2细胞凋亡的影响及作用机制。方法实验为两因素两水平2×2析因设计,因素A为人参皂苷Rg3,水平为0 mg/L和40 mg/L,因素B为肿瘤抑素19肽,水平为0 mg/L和200 mg/L。CCK-8试剂盒检测肝癌HepG2细胞增殖情况;Hoechst33342染色检测细胞凋亡的形态学变化;流式细胞术检测HepG2细胞凋亡率。荧光探针JC-1检测细胞的膜电位改变。Western blot法检测细胞抑癌基因磷酸酶和张力蛋白同源蛋白(PTEN)、磷酸化的磷脂酰肌醇-3激酶(p-PI3K)和磷酸化的丝氨酸/苏氨酸激酶(p-Akt)蛋白的表达变化。天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)活性测定试剂盒检测细胞Caspase-3和Caspase-9的活性。结果人参皂苷Rg3、肿瘤抑素19肽及联合用药对HepG2细胞的增殖均有抑制作用,且两者具有正协同效应;CCK-8测定人参皂苷Rg3的IC50为45.06 mg/L,肿瘤抑素19肽IC50为214.03 mg/L。Hoechst33342染色可见Rg3和19肽单用或合用时均出现细胞凋亡,并且联合用药细胞凋亡形态变化明显。流式细胞术检测细胞凋亡趋势与Hoechst33342染色结果一致,联合用药凋亡率最高。荧光探针JC-1检测表明单用或合用时细胞膜电位下降,产生绿色荧光,联合用药产生绿色荧光最为明显。联合用药更为显著上调PTEN蛋白表达,下调p-PI3K和p-Akt蛋白表达,显著增高Caspase-3和Caspase-9活性(P<0.001)。结论人参皂苷Rg3和肿瘤抑素19肽具有抑制肝癌HepG2细胞增殖,诱导其凋亡的作用,且两者具有正协同效应。其作用机制可能是通过PTEN/PI3K/Akt信号通路实现的。 展开更多
关键词 人参皂苷RG3 肿瘤素19肽 肝癌 凋亡 PTEN /PI3K /Akt信号通路
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肿瘤抑素抗血管活性相关肽的表达及活性研究 被引量:8
6
作者 付雪 王淑静 +1 位作者 林雪松 刘兴汉 《医学分子生物学杂志》 CAS CSCD 2005年第3期157-161,共5页
目的利用大肠杆菌表达系统表达肿瘤抑素抗血管活性相关肽-21肽,检测其生物学活性。方法人工合成21肽基因序列(肿瘤抑素75~95位氨基酸),克隆到表达载体pTYB2上,转化大肠杆菌BL-21(DE_3),酶切和测序鉴定后,用IPTG诱导表达融合蛋白。经几... 目的利用大肠杆菌表达系统表达肿瘤抑素抗血管活性相关肽-21肽,检测其生物学活性。方法人工合成21肽基因序列(肿瘤抑素75~95位氨基酸),克隆到表达载体pTYB2上,转化大肠杆菌BL-21(DE_3),酶切和测序鉴定后,用IPTG诱导表达融合蛋白。经几丁质亲和层析柱纯化21肽。通过MTT实验,细胞生长曲线测定,小鼠肝癌转移瘤模型的大体抑瘤实验及组织病理学切片研究其活性。结果获得的可溶性21肽对人脐静脉内皮细胞的生长具有抑制作用。小鼠肝癌转移瘤模型的大体抑瘤实验抑瘤率达42.86%。组织病理学切片结果可见H22小鼠肝癌细胞死亡,血管数量减少。结论经初步检测获得具有抗血管活性的21肽,为进一步研究肿瘤抑素的作用机制和肿瘤的临床治疗奠定了基础。 展开更多
关键词 肿瘤 蛋白表达 蛋白纯化 抗血管活性
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肿瘤抑素T_7肽及其衍生物T_7-NGR载体构建及表达 被引量:9
7
作者 贺欣 赵启仁 +1 位作者 宋娜玲 颜廷东 《生物医学工程与临床》 CAS 2008年第3期240-244,共5页
目的为了提高作用靶向性,将导向肽NGR与肿瘤抑素T_7肽的C端连接,获得T_7肽及其衍生物T_7-NGR的载体。方法通过PCR和合成基因序列方法分别构建了肿瘤抑素T_7肽及T_7-NGR的克隆载体pMD-T_7和pMD-T_7N,经酶切和测序鉴定后,将2种载体分别双... 目的为了提高作用靶向性,将导向肽NGR与肿瘤抑素T_7肽的C端连接,获得T_7肽及其衍生物T_7-NGR的载体。方法通过PCR和合成基因序列方法分别构建了肿瘤抑素T_7肽及T_7-NGR的克隆载体pMD-T_7和pMD-T_7N,经酶切和测序鉴定后,将2种载体分别双酶切,经低熔点琼脂糖凝胶电泳分离后,切下目的片段与酶切回收的质粒载体pET28a在低熔点琼脂糖中直接进行连接反应。阳性克隆经酶切和测序鉴定,转化感受态E.coliBL21(DE3),IPTG诱导表达。结果酶切和测序鉴定结果正确,分别成功构建表达载体pET-T_7和pET-T_7N,经IPTG诱导,完成了表达条件的优化。Tricine-SDS-PAGE凝胶电泳结果显示,当IPTG浓度为1mmol/L时,25℃诱导8h,分别获得了T_7肽和T_7-NGR的表达产物。结论已经成功构建T_7肽和T_7-NGR的表达载体,获得了表达产物,为下一步的小肽活性实验奠定了基础。 展开更多
关键词 肿瘤素T7肽 T7-NGR 导向肽 基因克隆表达
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肿瘤抑素抗肿瘤相关肽的克隆及生物活性 被引量:6
8
作者 王淑静 刘岩 +3 位作者 林雪松 付雪 徐建永 刘兴汉 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期322-328,共7页
为得到肿瘤抑素中具有直接抗肿瘤活性肽并检测其生物学活性,人工合成肿瘤抑素中185~2 0 3位氨基酸(19肽)所对应的核苷酸序列,将其连接到融合蛋白表达载体pTYB2中,酶切和测序鉴定后,转化到大肠杆菌BL 2 1(DE3)中诱导表达.表达的融合蛋... 为得到肿瘤抑素中具有直接抗肿瘤活性肽并检测其生物学活性,人工合成肿瘤抑素中185~2 0 3位氨基酸(19肽)所对应的核苷酸序列,将其连接到融合蛋白表达载体pTYB2中,酶切和测序鉴定后,转化到大肠杆菌BL 2 1(DE3)中诱导表达.表达的融合蛋白经几丁质亲和层析、二硫苏糖醇(DTT)的柱内还原,直接获得可溶性19肽.利用MTT法,细胞生长曲线,小鼠H2 2腹水型转移型肝癌实体瘤模型抑瘤实验并结合组织病理学切片,研究19肽的生物学活性.获得的19肽对B16小鼠黑色素瘤细胞、人SMMC 772 1肝癌细胞、人脐静脉内皮细胞的生长均具有抑制作用.小鼠H2 2腹水型肝癌抑瘤率达4 8 4 6 % .病理学切片显示,19肽可促使小鼠肿瘤组织坏死,血管数量减少.19肽具有较强的直接抗肿瘤活性,有可能成为肿瘤治疗的一种新的有前景的药物. 展开更多
关键词 肿瘤 蛋白质表达 蛋白质纯化 肿瘤治疗
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肿瘤抑素抗肿瘤相关肽对肝癌细胞增殖和凋亡的影响 被引量:7
9
作者 王淑静 刘兴汉 +1 位作者 季宇彬 陈宁 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期68-73,共6页
肿瘤抑素抗肿瘤相关肽-19肽是由肿瘤抑素185~203住氨基酸组成,具有直接抑制黑色素瘤细胞生长作用,但其对肝癌细胞增殖和凋亡是否有影响,对肝癌是否具有治疗作用还需进一步研究。本研究中采用基因工程技术将合成19肽基因与载体pTYB2重... 肿瘤抑素抗肿瘤相关肽-19肽是由肿瘤抑素185~203住氨基酸组成,具有直接抑制黑色素瘤细胞生长作用,但其对肝癌细胞增殖和凋亡是否有影响,对肝癌是否具有治疗作用还需进一步研究。本研究中采用基因工程技术将合成19肽基因与载体pTYB2重组后进行蛋白表达、纯化获得19肽。通过MTT法、生长曲线观察19肽对人肝癌细胞生长抑制作用;TUNEL标记法、流式细胞仪细胞周期检测法、透射电镜观察19肽对肝癌细胞凋亡的影响:小鼠H22腹水型转移型肝癌实体瘤抑瘤实验证明其体内的抑瘤作用。MTT实验和生长曲线实验表明随着19肽浓度的增加肝癌细胞的存活率下降。在相同19肽浓度下,随着作用时间延长存活细胞逐渐减少。电镜观察治疗组细胞出现明显凋亡,流式细胞仪可检测到前G1峰,TUNEL标记法也证实治疗组可见明显的凋亡细胞,体内19肽作用的小鼠H22腹水型转移型肝癌的抑瘤率达48.46%。可见,肿瘤抑素19肽可抑制肝癌细胞生长,促进肝癌细胞凋亡,对肝癌具有一定的治疗作用。 展开更多
关键词 肿瘤 细胞增殖 细胞凋亡 肿瘤治疗
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肿瘤抑素:一种内源性的肿瘤血管生成抑制因子 被引量:6
10
作者 黄煌 黄英 易成 《华西医学》 CAS 2007年第4期941-942,共2页
关键词 肿瘤 氨基酸 肿瘤血管 血管生成制因子 整合素 肿瘤生长 氨基羧酸 血管生成制剂 内源性
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川芎嗪联合顺铂对肺癌中血管内皮生长因子和肿瘤抑素表达的影响 被引量:7
11
作者 林卫佳 张秀珑 +2 位作者 张志华 冯平 汤建华 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期847-850,共4页
目的探讨川芎嗪联合顺铂对Lewis肺癌的抑制作用及机制。方法建立小鼠移植瘤模型,随机分为4组:空白组(0.9%氯化钠,0.2 m L)、顺铂组(2mg·kg-1,0.2 m L)、川芎嗪组(100 mg·kg-1,0.2 m L)、联合组(川芎嗪联合顺铂,剂量同上,0.2 m... 目的探讨川芎嗪联合顺铂对Lewis肺癌的抑制作用及机制。方法建立小鼠移植瘤模型,随机分为4组:空白组(0.9%氯化钠,0.2 m L)、顺铂组(2mg·kg-1,0.2 m L)、川芎嗪组(100 mg·kg-1,0.2 m L)、联合组(川芎嗪联合顺铂,剂量同上,0.2 m L),10只/组,连续给药14 d;计算肿瘤重量及抑瘤率;电镜观察肿瘤细胞及血管结构;用免疫组化和蛋白印迹法检测血管内皮生长因子(VEGF)、肿瘤抑素表达情况。结果空白组,肿瘤生长最快,联合组最慢。联合组,抑瘤率(59.81%)明显高于其他3组。联合组,VEGF的表达显著低于其他3组(P<0.01),肿瘤抑素表达显著高于其他3组(P<0.01)。VEGF与肿瘤抑素的表达呈负相关性(P<0.05)。结论川芎嗪可抑制肺癌生长,与顺铂联用有协同作用;其作用机制可能与抑制VEGF、促进肿瘤抑素表达有关。 展开更多
关键词 川芎嗪 顺铂 肺癌 血管内皮生长因子 肿瘤
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肿瘤抑素活性肽段及其衍生物研究新进展 被引量:7
12
作者 贺欣 赵启仁 宋娜玲 《药学服务与研究》 CAS CSCD 2007年第5期335-338,共4页
肿瘤抑素(tumstatin)是继内皮抑素(endostatin)和血管生成抑素(angiostatin)发现以来,来源于人血管基膜Ⅳ型胶原蛋白的极具潜力的肿瘤抑制因子。它强大的抗肿瘤新生血管生成、诱导肿瘤细胞和内皮细胞凋亡等生物活性,使其成为近年来的研... 肿瘤抑素(tumstatin)是继内皮抑素(endostatin)和血管生成抑素(angiostatin)发现以来,来源于人血管基膜Ⅳ型胶原蛋白的极具潜力的肿瘤抑制因子。它强大的抗肿瘤新生血管生成、诱导肿瘤细胞和内皮细胞凋亡等生物活性,使其成为近年来的研究热点。本文详细介绍了肿瘤抑素活性肽段及其衍生物的研究进展。对Tum-5、T7肽和19肽以及这些活性肽段连接NGR导向肽或人源性IgG3铰链区等肽段后形成的衍生物作了较详细的介绍。肿瘤抑素的活性肽段及其衍生物,以高选择性、高活性、低毒性等优点正成为抗肿瘤药物研究的新希望。 展开更多
关键词 肿瘤 衍生物 综述 内皮细胞 血管生成制剂
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肿瘤抑素相关肽T42肽的纯化及抗肝癌细胞Hepg2活性的测定 被引量:6
13
作者 苏晓杰 武凤君 +1 位作者 袁丽杰 林雪松 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期86-89,I0002,共5页
目的:利用已成功构建的肿瘤抑素相关活性肽T42肽高效表达基因工程重组菌pTYB2-T42,提取纯化T42肽,检测其抗肿瘤活性,为研究T42肽抗肿瘤作用机制及新型抗肿瘤药物研发提供实验基础。方法:将pTYB2-T42大肠杆菌进行培养,IPTG诱导其产生融... 目的:利用已成功构建的肿瘤抑素相关活性肽T42肽高效表达基因工程重组菌pTYB2-T42,提取纯化T42肽,检测其抗肿瘤活性,为研究T42肽抗肿瘤作用机制及新型抗肿瘤药物研发提供实验基础。方法:将pTYB2-T42大肠杆菌进行培养,IPTG诱导其产生融合蛋白,经几丁质柱亲和层析得到目的蛋白,葡聚糖凝胶G15去除DTT干扰,TricineSDS-PAGE鉴定T42肽,紫外分光光度法检测其浓度。MTT检测T42肽对细胞的生长增殖抑制作用,AO/EB荧光染色检测细胞凋亡形态学变化。结果:提取的T42肽其相对分子质量在5000左右,与理论值4600一致。MTT实验结果显示:T42肽作用下Hepg2细胞生长增殖受到抑制,且随着T42肽浓度的增加,Hepg2细胞存活率逐渐下降,其半数抑制浓度(IC50)为30mmol.L-1;AO/EB荧光染色结果表明:经过30mmol.L-1T42肽作用24h后的Hepg2细胞表现出细胞皱缩呈圆形或卵圆形,核皱缩变形且胞膜受损等一系列细胞凋亡特征性的形态变化。结论:T42肽具有显著的抗肿瘤细胞活性,可明显抑制人肝癌细胞Hepg2的生长增殖,并促进其凋亡。 展开更多
关键词 肿瘤 亲和层析 肿瘤活性 半数制浓度
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小分子肽-肿瘤抑素19肽纯化及抗肿瘤活性研究 被引量:5
14
作者 袁丽杰 赵恒宇 苏晓杰 《现代生物医学进展》 CAS 2007年第5期674-676,共3页
目的:利用已构建好的肿瘤抑素抗肿瘤活性肽-19肽高效表达基因重组菌纯化19肽,并进行抗肿瘤活性检测。方法:经几丁质亲和层析柱纯化出19肽,SDS-PAGE聚丙烯酰胺电泳后用Bradford法测其浓度,进行体内活性检测。结果:19肽可促进H22小鼠肝癌... 目的:利用已构建好的肿瘤抑素抗肿瘤活性肽-19肽高效表达基因重组菌纯化19肽,并进行抗肿瘤活性检测。方法:经几丁质亲和层析柱纯化出19肽,SDS-PAGE聚丙烯酰胺电泳后用Bradford法测其浓度,进行体内活性检测。结果:19肽可促进H22小鼠肝癌细胞死亡,血管数量减少,抑瘤率达48.46%。结论:得到了具有抗肿瘤活性的肿瘤抑素相关肽—19肽,为肿瘤抑素的作用机制研究和肿瘤的临床治疗奠定了基础。 展开更多
关键词 肿瘤 蛋白纯化 肿瘤活性 肿瘤治疗
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外周血VEGF与Tumstatin检测在非小细胞肺癌进展中的应用价值 被引量:6
15
作者 张波克 罗以勤 +4 位作者 姚丽娟 董行 赵亮 陈婺 李恒 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2013年第6期639-643,共5页
目的探讨外周血肿瘤抑素(Tumstatin)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)检测在非小细胞肺癌进展中的临床应用价值。方法使用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测24例为非小细胞肺癌患者及24例健康体检者的血小板与血清Tumstatin、VEGF的水平。运用... 目的探讨外周血肿瘤抑素(Tumstatin)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)检测在非小细胞肺癌进展中的临床应用价值。方法使用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测24例为非小细胞肺癌患者及24例健康体检者的血小板与血清Tumstatin、VEGF的水平。运用免疫组化法检测24例肺癌石蜡切片中微血管密度(MVD)的表达。结果血小板、血清Tumstatin水平在肺癌恶性进展中降低,血小板、血清VEGF水平以及肺癌组织中MVD在肺癌恶性进展中升高;血小板、血清Tumstatin在肺癌淋巴结转移组与肺癌病灶有坏死组中的水平分别低于肺癌无淋巴结转移组、肺癌病灶无坏死组(P<0.05),而血小板、血清VEGF在肺癌淋巴结转移组与肺癌病灶有坏死组中的水平分别高于肺癌无淋巴结转移组与肺癌病灶无坏死组(P<0.05);MVD计数在肺癌有淋巴结转移组中的水平高于肺癌无淋巴结转移组(P<0.05),但在肺癌病灶有坏死组与肺癌病灶无坏死组间差异无统计学意义。结论外周血Tumstatin与VEGF之间的平衡关系对肺癌的血管生成可能起重要的调节作用;外周血血管形成调节因子的水平与肿瘤组织MVD密切相关,对非小细胞肺癌的病情进展起到很好的监测作用。 展开更多
关键词 血管内皮细胞生长因子 肿瘤 非小细胞肺癌 微血管密度
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RGD修饰的肿瘤抑素19肽的合成与鉴定及其对肝癌SK-Hep-1细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用
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作者 王顺 于佳琪 +6 位作者 胡月 赵正林 牛淑冬 贾迪 杨超 衣同辉 李淑艳 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期849-856,共8页
目的:探讨精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)修饰对肿瘤抑素19肽(T-19)抗肝癌活性的影响,比较分析T-19及RGD修饰的T-19(RGD-T-19)对肝癌SK-Hep-1细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。方法:用Fmoc固相法合成T-19及RGD-T-19,用高效液相色谱仪和质... 目的:探讨精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)修饰对肿瘤抑素19肽(T-19)抗肝癌活性的影响,比较分析T-19及RGD修饰的T-19(RGD-T-19)对肝癌SK-Hep-1细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。方法:用Fmoc固相法合成T-19及RGD-T-19,用高效液相色谱仪和质谱进行分离、鉴定。常规培养SK-Hep-1细胞,用0、50、100、150、200、250 mg/mL的T-19及RGD-T-19分别处理细胞,分为0mg/mL(对照)组、50 mg/mL组、100 mg/mL组、150 mg/mL组、200 mg/mL组、250 mg/mL组。CCK-8法、克隆形成实验、划痕愈合实验和Tanswell小室实验、WB法和qPCR法分别检测SK-Hep-1细胞的增殖、迁移、侵袭能力,以及环氧合酶-2(COX-2)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9、组织基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)、TIMP-2蛋白和MMP-1、MMP-2 mRNA的表达。结果:经质谱鉴定,用Fmoc固相法合成的T-19及RGD-T-19纯度高。T-19和RGD-T-19均能显著抑制SK-Hep-1细胞的增殖、迁移、侵袭能力,抑制COX-2蛋白、MMP-2和MMP-9蛋白及mRNA的表达、促进TIMP-1、TIMP-2蛋白的表达(P<0.05,P<0.01,P<0.001),RGD-T-19的抑制或促进效应均明显强于T-19(均P<0.05)。结论:利用Fmoc固相法合成了纯度高、活性好的T-19及RGD-T-19,两种肽均能抑制SK-Hep-1细胞增殖、侵袭和迁移能力,RGD-T-19作用明显强于T-19。 展开更多
关键词 肿瘤 RGD序列 肝癌 SK-Hep-1细胞 增殖 侵袭 迁移 肝癌
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人工蛋白XXA促进人源肿瘤抑素Tumstatin可溶性表达
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作者 敖龙 朱玲玉 +7 位作者 庞欣 辛瑜 郭忠鹏 朱瑞 李默影 顾正华 郭自涛 张梁 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期1-8,共8页
为实现人源肿瘤抑素Tumstatin在大肠杆菌中的可溶性表达,构建了5种不同促溶性融合标签与tumstatin基因融合表达的重组大肠杆菌BL21(DE3),利用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导重组菌进行摇瓶发... 为实现人源肿瘤抑素Tumstatin在大肠杆菌中的可溶性表达,构建了5种不同促溶性融合标签与tumstatin基因融合表达的重组大肠杆菌BL21(DE3),利用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导重组菌进行摇瓶发酵,利用SDS-PAGE和Western-Blot分析并筛选出能可溶性表达Tumstatin蛋白的重组菌。构建的重组菌中BL21/pGEX-6p-1-Tum(含谷胱甘肽巯基转移酶标签—GST标签)、BL21/pET28a-MBP-Tum(含麦芽糖结合蛋白标签—MBP标签)、BL21/pET28a-Tum(无标签)都是以包涵体的形式表达融合蛋白Tumstatin,只有重组菌BL21/pET28a-XXA-Tum(含抗冻蛋白的反向蛋白—XXA标签)能以可溶性的形式表达融合蛋白且目的蛋白占菌体总蛋白45%以上。利用亲和层析对目的蛋白进行纯化并进行Western-Blot分析,得到分子质量为50.9 kDa的目的条带,与理论分子质量一致。进一步对重组菌BL21/pET28a-XXA-Tum的诱导剂添加浓度、诱导剂添加时间、诱导温度、诱导时间诱导条件进行优化。最终选择Tumstatin融合蛋白诱导条件为:诱导剂浓度0.1 mmol/L、2 h添加诱导剂、诱导温度16℃、诱导时间36 h。人源肿瘤抑素在大肠杆菌中可溶性表达为大量制备可溶性人源肿瘤抑素奠定了基础,可为功能性多肽在大肠杆菌中的可溶性表达提供借鉴。 展开更多
关键词 人源肿瘤 大肠杆菌 可溶性表达 融合标签 抗冻蛋白的反向蛋白
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肿瘤抑素的研究进展 被引量:4
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作者 王淑静 刘兴汉 《生命的化学》 CAS CSCD 2004年第2期128-130,共3页
近年来 ,人们发现作为肺 -肾出血综合征 (Goodpasture)的抗原tumstatin(肿瘤抑素 )具有新的特性 ,即可有效地抑制人内皮细胞的增生 ,引起内皮细胞凋亡 ,抑制新生血管的生成 ,达到抗肿瘤生长的目的。另外 ,它还具有其他内源性抑制因子所... 近年来 ,人们发现作为肺 -肾出血综合征 (Goodpasture)的抗原tumstatin(肿瘤抑素 )具有新的特性 ,即可有效地抑制人内皮细胞的增生 ,引起内皮细胞凋亡 ,抑制新生血管的生成 ,达到抗肿瘤生长的目的。另外 ,它还具有其他内源性抑制因子所没有的直接作用于肿瘤细胞 ,引起肿瘤细胞凋亡的特性。因此 ,肿瘤抑素对于肿瘤的治疗将具有更大的研究和治疗价值。 展开更多
关键词 肿瘤 肿瘤 治疗 人内皮细胞 增生 凋亡 生物学功能
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微小RNA-21和肿瘤抑素在膀胱癌中的表达及其相关性的研究 被引量:5
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作者 李然伟 任明 +3 位作者 刘禄成 温都苏 李志 郭航 《中国实验诊断学》 北大核心 2010年第10期1597-1599,共3页
目的探讨膀胱癌中微小RNA-21和肿瘤抑素表达与临床病理特征之间的关系。方法采用SABC法对98例膀胱癌患者分别进行微小RNA-21和肿瘤抑素的免疫组化染色,其与肿瘤临床分期和细胞分级间的关系及微小RNA-21和肿瘤抑素在瘤细胞中的共表达情... 目的探讨膀胱癌中微小RNA-21和肿瘤抑素表达与临床病理特征之间的关系。方法采用SABC法对98例膀胱癌患者分别进行微小RNA-21和肿瘤抑素的免疫组化染色,其与肿瘤临床分期和细胞分级间的关系及微小RNA-21和肿瘤抑素在瘤细胞中的共表达情况。结果膀胱癌患者中微小RNA-21和肿瘤抑素的阳性表达率分别是69.4%和43.9%。与浅表性和分化较好的膀胱癌相比,侵袭性和分化差的癌细胞中微小RNA-21表达上调明显,而肿瘤抑素表达则显著下调,组间比较(P<0.01),差异有统计学意义。有68例患者存在微小RNA-21和肿瘤抑素共表达,两者之间呈负相关(P<0.05),差异也具有统计学意义。结论微小RNA-21和肿瘤抑素共表达失调可能促进膀胱癌的发生发展,抑制微小RNA-21表达,上调肿瘤抑素水平有希望成为有效治疗膀胱癌的一种新方法 。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 微小RNA-21 肿瘤
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肿瘤抑素影响婴幼儿血管瘤内皮细胞增殖与凋亡的相关机制 被引量:5
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作者 周晓波 赵成鹏 +3 位作者 王鎏 张朋 唐旭 段永福 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第28期17-21,共5页
目的观察肿瘤抑素对婴幼儿血管瘤内皮细胞增殖及凋亡的影响,并对相关机制进行初步探讨。方法采用0、5、10、20和40μg/ml的肿瘤抑素及40μg/ml的肿瘤抑素处理婴幼儿血管瘤内皮细胞0、12、24和48 h,采用MTT方法及流式细胞术检测婴幼儿血... 目的观察肿瘤抑素对婴幼儿血管瘤内皮细胞增殖及凋亡的影响,并对相关机制进行初步探讨。方法采用0、5、10、20和40μg/ml的肿瘤抑素及40μg/ml的肿瘤抑素处理婴幼儿血管瘤内皮细胞0、12、24和48 h,采用MTT方法及流式细胞术检测婴幼儿血管瘤内皮细胞的增殖及凋亡情况。采用Western blot方法检测婴幼儿血管瘤内皮细胞中AMPK和m TOR的磷酸化水平。结果同0μg/ml肿瘤抑素处理组相比,5、10、20和40μg/ml的肿瘤抑素均可显著抑制婴幼儿血管瘤内皮细胞的增殖能力,并促进婴幼儿血管瘤内皮细胞的凋亡(P<0.05),且这种作用具有计量依赖性。同0 h处理组相比,40μg/ml的肿瘤抑素处理婴幼儿血管瘤内皮细胞2、24和48 h均可显著抑制婴幼儿血管瘤内皮细胞的增殖能力,并促进婴幼儿血管瘤内皮细胞的凋亡(P<0.05),且这种作用具有时间依赖性。同对照相比,肿瘤抑素可上调婴幼儿血管瘤内皮细胞中AMPK的磷酸化水平,下调m TOR的磷酸化水平。结论肿瘤抑素可通过激活AMPK通路,进而抑制m TOR通路,从而抑制婴幼儿血管瘤内皮细胞的增殖能力,并促进婴幼儿血管瘤内皮细胞的凋亡。 展开更多
关键词 肿瘤 婴幼儿血管瘤 内皮细胞 增殖 凋亡
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